Sie sind auf Seite 1von 3

Abordagem molecular no desenvolvimento

de frmacos anti-tumorais
ANDRESSA BERNARDI1
MARIA CAROLINE JACQUES-SILVA2
GUIDO LENZ 3
1. Graduanda do Curso de Farmcia da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS),
bolsista de Iniciao Cientfica.
2. Farmacutica-bioqumica e doutoranda em Cincias Biolgicas Bioqumica/ UFRGS.
3. Professor Adjunto do Departamento de Biofsica.
Departamento de Bioqumica, Rua Ramiro Barcelos, 2600, Anexo, Laboratrio 37, ICBS, UFRGS.
90035-003, Porto Alegre, RS. e-mail: andressabernardi@yahoo.com.br

INTRODUO ladoras positivas e negativas (Karp & Broder, 1995). As foras


positivas envolvem fatores de crescimento, que estimulam a clula
As principais caractersticas das clulas neoplsicas que a entrar no ciclo, alm de uma srie de ciclinas e de quinases ciclina-
as distinguem das clulas normais so a proliferao descontrola- dependentes (cdks).
da, indiferenciao e perda da funo, poder de invaso e de gerar As ciclinas se ligam s cdks, ativando-as, e essas promo-
metstases. Uma das principais dificuldades no uso da vem ativao de substratos que desencadearo a liberao de fato-
quimioterapia no cncer que o tumor geralmente se encontra bem res de transcrio e conseqente ativao de genes e sntese protica.
avanado por ocasio do diagnstico (Rang et al, 2001). Os agen- A ao das ciclinas/cdks modulada pelas foras reguladoras nega-
tes antineoplsicos atualmente utilizados, em particular os que tivas, que so protenas que se ligam s cdks e inibem sua ao.
so citotxicos, afetam, em sua maioria, apenas uma das caracte- Essas protenas so induzidas por vrios genes, como, por exem-
rsticas das clulas cancerosas, o processo de diviso celular, sen- plo, o gene p53 e o gene do retinoblastoma (Rb). Se houver algum
do, portanto, apenas antiproliferativos. Esses frmacos no exer- tipo de leso no DNA, esses genes funcionam como inibidores,
cem nenhum efeito inibitrio especfico sobre o poder invasivo, a que interrompem o ciclo celular nos pontos de controle que ele
perda da diferenciao ou o poder metasttico. Alm disso, como possui, permitindo, ento, o reparo do DNA. Se o reparo falhar,
seu efeito principal exercido sobre a diviso celular, eles iro inicia-se o processo de apoptose. Nas clulas cancerosas, pode
afetar todos os tecidos normais que se dividem rapidamente, pro- ocorrer perda do controle do ciclo celular em conseqncia de:
duzindo ento, em maior ou menor grau, os conhecidos efeitos Anormalidade na funo dos fatores de crescimento e/ou
colaterais de uma quimioterapia. Ressalta-se ainda que os prpri- Funo anormal da ciclina/cdk e/ou
os agentes antineoplsicos podem tambm, em certas circunstn- Sntese anormal de DNA em decorrncia da atividade
cias, serem carcinognicos. de oncogenes e/ou
Considerando a necessidade de novas abordagens para o Diminuio anormal das foras reguladoras negativas,
tratamento do cncer, estudos bioqumicos dos mecanismos de devido ocorrncia de mutaes dos genes supressores
transduo de sinal celular possibilitaram um melhor entendimen- tumorais.
to da biologia da clula neoplsica. Dessa forma, novos mecanis-
mos de ao esto sendo explorados no desenvolvimento de no- PRINCIPAIS ALVOS MOLECULARES E MECANISMOS
vos medicamentos no combate ao cncer. O presente trabalho pro- DE AO DOS NOVOS MEDICAMENTOS
pe-se a apresentar uma reviso da abordagem molecular no de-
senvolvimento desses novos frmacos. Diversas abordagens moleculares esto em fase de investi-
gao. H atualmente 209 novas drogas sendo investigadas, inclu-
BIOLOGIA DAS CLULAS CANCEROSAS: sive em Fase de estudo III. A maioria delas, baseadas nos progres-
ASPECTOS GERAIS sos realizados no conhecimento da biologia da clula cancerosa, se
refere ao uso de alvos seletivos para atuao dos agentes anti-
O desenvolvimento do cncer um processo complexo em tumorais. Subdividem-se em oito grandes grupos, de acordo com o
estgios mltiplos, envolvendo geralmente mais de uma alterao mecanismo de ao proposto. Na seqncia e na tabela I tm-se
gentica e, tambm, muitos outros fatores que, ocorrendo ou no esses grupos com alguns de seus representantes.
de forma simultnea, podem resultar numa neoplasia.
Importantes processos celulares, como crescimento, dife- ==> Drogas que visam alterao da expresso
renciao, motilidade e apoptose (morte celular programada) so gnica / Terapia Gnica:
regulados por sinais provenientes de outras clulas e da matriz
extracelular ou por fatores de crescimento e citocinas (Dirks & A utilizao de oligonucleotdeos anti-sentido (ONs,
Rutka, 1997). As clulas podem se dividir em resposta a fatores de antisense oligonucleotides) permite o bloqueio da expresso de
crescimento que atuam sobre RTKs (receptores de superfcie um oncogene. Os ONs so pequenos segmentos sintticos de DNA
tirosino-quinases), que, por sua vez, deflagram eventos intracelulares de filamento nico, que so complementares a uma poro do
que resultam na produo dos transdutores do ciclo celular, que mRNA e que podem ligar-se sua seqncia correspondente no
levam sntese de DNA e, conseqentemente, diviso celular. mRNA. A conseqente poro de filamento duplo (um hbrido de
Um defeito em qualquer uma dessas etapas (por ativao mRNA e ON DNA ) impede a traduo do mRNA e, assim,
de oncogenes ou inativao de genes supressores tumorais) pode bloqueia a expresso do oncogene particular. ONs, que tm por
resultar em proliferao descontrolada, j que a progresso, atra- alvos o gene Bcl-2 (um tipo de gene antiapopttico ), tm sido
vs do ciclo celular, depende do equilbrio entre vrias foras regu- objetos de estudos clnicos.

Infarma, v.15, n 9-10, (Set/Out 2003) 61


A tecnologia mais recente e promissora, em termos de intracelular, causando alterao no ciclo celular, inibio da apoptose
supresso gnica, o RNAi (RNA interference). RNA dupla fita e aumento da proliferao celular. Uma vez identificada a principal
so processados por enzimas intracelulares, produzindo fragmen- mutao responsvel pela enfermidade, as pesquisas levaram ao
tos de 21 a 23 pares de base, com 19 bases pareadas. Estes peque- desenvolvimento da droga mesilato de imatinib (STI 571), que
nos fragmentos de RNA levam a degradao do RNA mensageiro atua diretamente na protena mutada BCR-ABL e previne a
que possui a seqncia correspondente s 19 bases. Este mecanis- fosforilao de substratos envolvidos na regulao do ciclo celular.
mo especfico ao nvel de apenas um nucleotdeo. O imatinib agora considerado padro ouro para o tratamento de
Desta forma, possvel bloquear a expresso de um paciente com LMC que no possuem um doador compatvel de
oncogene que sofreu mutao, sem, contudo, atingir a expresso medula ou que no so candidatos a transplante (Peggs e
do proto-oncogene, como foi mostrado para o oncogene Ras Mackinnon, 2003).
(Brummelkamp et al., 2003), abrindo a possibilidade para um tra- A este grupo pertencem, tambm, os inibidores de Ras
tamento totalmente ausente de efeitos colaterais. importante (protena de ligao de guanina-nucleotdios com atividade de
mencionar, no entanto, que este tipo de tratamento exigiria um GTPase) e vias por ela ativada. Esses inibidores bloqueiam a capa-
conhecimento bastante especfico das alteraes genticas de cada cidade que tem os genes ras mutantes de se tornarem clulas malig-
paciente acometido de cncer, mas a simplificao dos mtodos de nas. Nas clulas normais, a protena Ras, uma vez sintetizada,
seqenciamento est abrindo esta possibilidade para um futuro migra para a membrana celular, qual se fixa por uma espcie de
no muito distante. gancho molecular (um grupo farnesil). Este grupo adicionado
H, tambm, estudos clnicos (Fase III) em cncer de cabe- protena pela enzima farnesiltrasferase. Recentemente, foram pro-
a e pescoo, envolvendo a injeo, no tumor, de vetores adenovirais duzidos compostos que inibem esta enzima, como o RI 15777. Foi
recombinantes contendo o gene p53 humano, bem como estudos demonstrado, por testes in vitro e in vivo ( Fase Clnica III), que
clnicos de glioblastomas (tumores cerebrais de elevada malignida- esse composto reverte a transformao maligna em clulas cance-
de) envolvendo vetores de herpes-vrus para que esses transpor- rosas que contm o oncogene ras, restaurando os padres normais
tem um gene para ativar uma pr-droga. de crescimento, sem interferir na diviso celular das clulas nor-
mais ( Nygren et al, 2003 ).
Abordagens promissoras da terapia gnica para o cncer
==> Inibidores da invaso do tumor e metstases:
restaurar mecanismos protetores como p53;
inativar a expresso de oncogenes; Recentemente, muita ateno tem sido direcionada pos-
fornecer um gene para clulas malignas, tornando-as sibilidade de se impedir que a clula tumoral seja capaz de induzir
sensveis s drogas; degradao da matriz extracelular e invadir o estroma, ocasionando
fornecer um gene s clulas hospedeiras sadias para metstases. O uso de mecanismos de inibio de disseminao
proteg-las da quimioterapia; dessas clulas tem sido bem-sucedido. As enzimas chamadas
marcar clulas cancerosas com genes para torn-las imu- metaloproteinases, que so uma famlia de endopeptidases, esto
nognicas. envolvidas, tanto na invaso, quanto nas metstases dos cnceres,
por terem a capacidade de degradar os componentes da matriz
Tabela II: Terapia Gnica e Cncer / Fonte: Rang et al, 2001
extracelular. Agentes que inibem essas enzimas, como, por exem-
plo, o marimastat, j se encontram em estudos clnicos de Fase III.
==> Inibidores da Transduo de Sinal:
==> Inibidores de Angiognese:
Incluem-se, nesta categoria, os inibidores da ligao dos
fatores de crescimento ao receptor. Quando fatores de crescimen- A angiognese (crescimento de vasos sanguneos para a
to, como por exemplo EGF (fator de crescimento epidermal), se irrigao do tumor) necessria para nutrio e conseqente pro-
ligam s protenas de membrana chamadas de Her-2, essas se gresso do tumor. H vrios reguladores endgenos (positivos e
dimerizam e enviam ao ncleo sinais pr-mitticos. Esse mecanis- negativos) que controlam a angiognese, como a angiogenina e o
mo ocorre em clulas normais, mas uma diferena das clulas nor- fator de crescimento endotelial vascular. Os inibidores da
mais para as clulas malignas que, na superfcie das clulas angiognese atuam nesses reguladores endgenos, a fim de impedir
tumorais, a protena est presente em quantidades to grandes, a irrigao do tumor, mas os mecanismos exatos so ainda contro-
que as molculas, mesmo sem fatores de crescimento, se unem em versos. Inclui-se, nesta categoria, a talidomida, medicamento usa-
dmeros, de modo que a mitose ocorre constantemente. do, no passado, para enjos, durante a gravidez (uso abolido devi-
O ZD 1839 uma nova molcula em estudo que tem por do a teratognese causada), mas que, por mostrar atividade
mecanismo de ao impedir que as clulas formem dmeros. Dessa antiangiognica, tem sido usada em estudos clnicos, nos Estados
forma, as clulas tumorais se dividem menos (Tzahar et al, 1998). Unidos e Europa, no tratamento de diferentes tipos de tumores,
Est sendo empregada, em casos de cncer de mama metasttico em combinao com outros agentes (Raje & Anderson, 2002).
(Fase Clnica III). Baseado nesse mesmo raciocnio, h outros
inibidores de RTKs, sendo testados com a finalidade de interferir ==> Agentes Diferenciadores:
nos mecanismos de transduo de sinal envolvidos na proliferao
celular (Nygren et al, 2003). Sabe-se que um dos processos que resultam na malignida-
A leucemia mielide crnica (LMC) uma doena em que de das clulas a perda do processo de diferenciao. Estudos com
a principal caracterstica das clulas possuir uma translocao o objetivo de induzir a diferenciao e tornar as clulas normais
recproca t(9;22) que gera um novo gene, fruto da fuso de dois utilizam anlogos da vitamina D3 e agonistas do receptor do cido
genes: BCR-ABL no cromossomo derivado 22q- (cromossomo retinico, mas as vias pelas quais esses compostos induzem a
Philadelphia) e ABL-BCR no cromossomo 9q+. O produto do diferenciao ainda no esto bem descritas.
gene abl uma protena tirosina-quinase, que capaz de se auto-
ativar, quando dimerizada. ==> Inibidores Imunognicos:
A protena fusionada BCR-ABL leva a auto-ativao da
ABL, que desregula as vias normais de transduo de sinal Anticorpos monoclonais (Mabs) so molculas versteis

62 Infarma, v.15, n 9-10, (Set/Out 2003)


com potencial teraputico e aplicaes em vrias enfermidades A conjugao de drogas citotxicas a anticorpos
humanas, incluindo o cncer (Carter et al, 2001). Esto sendo (imunoconjugados) uma alternativa muito promissora na terapia
utilizados Mabs para fatores de crescimento, citocinas e outras do cncer. Outra alternativa o acoplamento de um anticorpo a
molculas ou receptores que controlam o crescimento e outras uma enzima capaz de converter uma droga no-txica em um
funes da clula tumoral e, tambm, Mabs anti-idiotpicos como metablito de elevada toxicidade. Os anticorpos so direcionados
vacinas para gerar uma resposta imune. Ressalta-se que algumas a antgenos especficos do tumor, de modo que a droga conduzida
vacinas geraram resultados negativos, mas que sua eficincia tem e concentra-se, no tumor, no afetando os tecidos normais das
sido observada, principalmente quando administrada como proximidades.
adjuvante, observado em cncer colo-retal em estudo de Fase Cl-
nica III (Nygren et al, 2003). CONSIDERAES FINAIS
==> Reversores de resistncia induzida por drogas:
Embora a terapia atual para o cncer dependa principal-
mente do uso de cirurgia, irradiao e quimioterapia, a evoluo na
Desde o surgimento do emprego da quimioterapia para o
compreenso da biologia da transformao maligna e das diferen-
cncer (1940), foram identificados muitos de caminhos pelos quais
as no controle da proliferao da clula normal e cancerosa pro-
as clulas cancerosas escapam do agente qumico. No momento
porcionaram a descoberta de novos alvos possveis para o trata-
em que as clulas desenvolvem resistncia a uma droga, elas po-
mento do cncer. improvvel que novas terapias venham a subs-
dem tambm desenvolver resistncia cruzada a outras drogas,
tituir totalmente as drogas existentes, uma vez que estas drogas
quimica e mecanicisticamente no relacionadas, em um fenmeno
conhecido como resistncia multi-droga (MDR). tornaram-se mais eficazes e suas toxicidades, mais tratveis e pre-
Muitas formas de MDR resultam da expresso de bombas visveis, nos ltimos anos. No entanto, uma combinao de drogas
de fluxo ATP-dependente com ao sobre diferentes substratos existentes, novas abordagens e a obteno de um perfil molecular/
(Nygren et al , 2003). Muitos estudos mostram o envolvimento da gentico de cada tumor faria com que todo o paciente tivesse um
PgP, uma P-glicoprotena, nessa resistncia. A estratgia a utili- tratamento individualizado e especfico para o seu caso, aumen-
zao de drogas que inibem essa protena transportadora, como tando a eficcia do tratamento e diminuindo a incidncia de efeitos
verapamil e ciclosporina A . colaterais.

==> Novas drogas citotxicas e indutores de apoptose: REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

Muitas drogas citotxicas exercem seu efeito por induo 1. BUOLAMWINI, K. J. Novel anticancer drug discovery. Curr.
de apoptose, porm muitas clulas adquirem resistncia a essas Op. Chem. Biol. v. 3, p. 500-509, 1999.
drogas por modificaes em elementos chaves da sinalizao 2. BRUMMELKAMP, T.R., BERNARDS, R., AGAMI, R., Stable
apopttica. suppression of tumorigenicity by virus-mediated RNA interfe-
rence. Cancer Cell, 2, 243-247, 2003.
Tabela I: Tabela Geral com alguns representantes de 3. CARTER, P., Improving the efficacy of antibody-based cancer
cada grupo dos novos frmacos anti-tumorais. therapies. Nature Rev. Cancer, v. 20, p. 118-129, 2001.
4. DIRKS, P. B. e RUTKA, J. T. Current concepts in neuro-oncolo-
gy: the cell cycle- a review. Neurosurgery, v. 40, p 1000-1013,
1997.
5. DRUKER, J. B. and LYDON, B. N. Lessons learned from the
development of an Abl tyrosine kinase inibitor for chronic mye-
logenous leukemia. J. Clin. Inv. v.205, n 1, january 2000.
6. ELZAYFD, A. Y., SAUSVILLE, A. E., Selected Novel Antican-
cer Treatments Targeting Cell Signaling Proteins. Oncologist, v.
6, p. 517-537, 2001.
7. GOODMAN & GILMAN. As Bases Farmacolgicas da Tera-
putica. 9.ed. Rio de Janeiro: Mc Graw Hill, 1996.
8. KARP, J. E., BRODER, S., Molecular foundations of cancer: new
targets for intervention. Nature, v.1, p. 309-319, 1995.
9. NYGREN, P. & LARSSON, R., Overview of the clinical efficacy
of investigational anticancer drugs. J. Int. Medic. v.253, p. 46-
75, 2003.
10. PEGGS, G. e MACKINNON, S. Imatinib mesylate the new gold
standard for treatment of chronic myeloid leukemia. .N. Engl. J.
Med., v. 348, p. 1048-1050, 2003.
11. RAJE, N. e ANDERSON, K. C. Thalidomide and immunomodu-
latory drugs as cancer therapy. Curr. Opin. Oncol. v. 14, p. 635-
640, 2002.
12. RANG, H. P. e DALE, M. M., Farmacologia , Guanabara Koo-
gan, 4ed., 2001.
13. SHONO, T.; TOFILON, J.; BRUNER, M.; OWOLABI, O.; LANG,
F. Cyclooxigenase-2 expression in human gliomas: prognostic
significance and molecular correlations. Cancer Res. v. 61, p.
4375-4381, 2001.
14. TZAHAR, E., YARDEN, Y., The Erb/HER2 oncogenic receptor
of adenocarcinomas: from orphanhood to multiple stromal li-
gands. Biochim Biophys Acta, 1377: M25-M37, 1998.

Infarma, v.15, n 9-10, (Set/Out 2003) 63