UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD FARMACIA Y BIOQUMICA

ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUMICA

PROYECTO DE INVESTIGACIN
EFECTO DEL DEFLAZACORT Y DEXAMETASONA SOBRE LA GLUCEMIA
EN Rattus norvegicus var. albinus

AUTORES:

Acua Sifuentes, Jhasmin

Alva Bazn, Daphnee Karina
Alva Salas, Ruth Karina
Anticona Salazar, Enrique Junior
Arangur Camacho, Danitza
Ascate Pasos, Manuel Eduardo
Arribasplata Chamorro, Erika
Asuncin Alvarez, Daniel

ASESORA:
Q.F. Silva Correa, Carmen Rosa

TRUJILLO PER
2017
 I. GENERALIDADES

1. TTULO:
EFECTO DEL DEFLAZACORT Y DEXAMETASONA SOBRE LA
GLUCEMIA EN Rattus norvegicus var. albinus

2. PERSONAL INVESTIGADOR:

2.1. Autores

2.1.1. ACUA SIFUENTES, KATIA JHASMIN

Estudiante del IX ciclo de la Facultad de Farmacia y Bioqumica de la

Universidad Nacional de Trujillo

Cdigo: 1051101813

2.1.2. ALVA BAZN, DAPHNEE KARINA

Estudiante del IX Ciclo de la Facultad de Farmacia y Bioqumica de la

Universidad Nacional de Trujillo.

Cdigo: 1511103013

2.1.3. ALVA SALAS RUTH KARINA

Estudiante del IX Ciclo de la Facultad de Farmacia y Bioqumica de la

Universidad Nacional de Trujillo.

Cdigo: 1051102413

2.1.4. ANTICONA SALAZAR, ENRIQUE JUNIOR

Estudiante del IX Ciclo de la Facultad de Farmacia y Bioqumica de la Universidad

Nacional de Trujillo.

Cdigo: 1011101813
 2.1.5. ARANGUR, CAMACHO DANITZA

Estudiante del IX Ciclo de la Facultad de Farmacia y Bioqumica de la

Universidad Nacional de Trujillo.

Cdigo: 1011100713

2.1.6. ARRIBASPLATA CHAMORRO ERIKA

Estudiante del IX Ciclo de la Facultad de Farmacia y Bioqumica de la

Universidad Nacional de Trujillo.

Cdigo:

2.1.7. ASCATE PASOS, MANUEL EDUARDO

Estudiante del IX Ciclo de la Facultad de Farmacia y Bioqumica de la

Universidad Nacional de Trujillo.

Cdigo: 1511100713

2.1.8. ASUNCIN ALVAREZ, DANIEL

Estudiante del IX Ciclo de la Facultad de Farmacia y Bioqumica de la

Universidad Nacional de Trujillo.

Cdigo: 1051101913

2.2. ASESORA:

2.2.1 Q.F. SILVA CORREA, CARMEN ROSA

Cdigo: 5954

Departamento acadmico: Farmacologa

Facultad: Farmacia y Bioqumica

Universidad: Universidad Nacional de Trujillo

3. TIPO DE INVESTIGACIN:

3.1. DE ACUERDO A LA ORIENTACIN

Aplicada

3.2. DE ACUERDO A LA TCNICA DE CONTRASTACIN

Experimental

4. RGIMEN DE INVESTIGACIN

Libre

5. INSTITUCIN A LA QUE PERTENECE EL PROYECTO:

Universidad Nacional de Trujillo.

Facultad de Farmacia y Bioqumica.

Departamento de Farmacologa.

Seccin: Toxicologa

6. LOCALIDAD E INSTITUCION DONDE SE EJECUTA EL PROYECTO

6.1. LOCALIDAD

Trujillo - La Libertad

6.2. INSTITUCION

Universidad Nacional de Trujillo.

Facultad de Farmacia y Bioqumica.

Departamento de Farmacologa.
7. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES DE LA INVESTIGACION:

ETAPAS SEMANAS
Recoleccin de datos 1 semana
Anlisis de resultados 4 semanas
Redaccin del informe 1 semana
TOTAL 6 semanas

8. HORAS SEMANALES DEDICADAS AL PROYECTO

Tiempo de duracin: 6 semanas

9. RECURSOS DISPONIBLES

9.1. Personal Investigador

9.1.1. Autores

Acua Sifuentes, Jhasmin

Alva Bazn, Daphnee Karina

Alva Salas, Ruth Karina

Anticona Salazar, Enrique Junior

Arangur Camacho, Danitza

Ascate Pasos, Manuel Eduardo

Arribasplata Chamorro, Erika

Asuncin Alvarez, Daniel

9.1.2. Asesora:

QF. Silva Correa, Carmen Rosa

9.2. MATERIAL Y EQUIPO

9.2.1. MATERIAL BIOLGICO

Rattus norvegicus var. albinus (12 especmenes) hembras y machos

con un peso promedio de 250 a 300 g.

9.2.2. FRMACO

Dexametazona tab. 20 mg

Deflazacort tab. 6 mg

9.2.3. MATERIAL Y EQUIPO DE LABORATORIO

9.2.3.1. MATERIALES

Mortero de porcelana

Pipetas de 1 mL y 5 mL

Probeta de 100 mL

Tubos de ensayo pirex

Vasos de precipitacin de 10 mL y 50 mL

Filtros de membrana de 0.22 mm.

9.2.3.2. EQUIPOS

Balanza de triple brazo de precisin 0.1 g OHAUS

Balanza analtica Balanza analtica 0.0001 g OHAUS

Bao Maria elctrico MEMMERT

Glucmetro Accu-Chek Active de laboratorios Roche

Tiras reactivas de Accu-Chek Active

10. RECURSOS NO DISPONIBLES Y PRESUPUESTO

Segn el clasificador de gastos del presupuesto del sector pblico del 2016

CDIGO RUBRO CANTIDAD COSTO POR COSTO TOTAL

UNIDAD (S/.) (S/.)

2.3 BIENES Y SERVICIOS

2.3.11.1 ALIMENTOS Y BEBIDAS

2.3.11.12 ALIMENTOS Y BEBIDAS PARA CONSUMO ANIMAL

Alimento 2 kg 1,50 3.00

para ratas

2.3.12 VESTUARIOS Y TEXTILES

2.3.12.11 VESTUARIO, ACCESORIOS Y PRENDAS DIVERSAS

Guardapolvo 08 unidades 25,00 200,00

Mascarillas 01 cajas 20.00 20.00

N25

Guantes 01 cajas 20.00 20.00

Descartables
N 6

Lentes de 08 unidades 7.00 56.00

proteccin de
laboratorio.

2.3.15 MATERIALES Y TILES

2.3.15.12 PAPELERA EN GENERAL, TILES Y MATERIALES DE

OFICINA

Papel bond 500 unidades 0,015 7,50

A4 de 80 g.

Borrador 03 unidades 1,00 3,00

 Lapiceros 08 unidades 0,50 4,00
Faber-Castell

Lpiz 03 unidades 3,50 10,50

corrector

Flder manila 12 unidades 0,50 6,00

con fster

Lpices 08 unidades 0,50 4,00

Fber-Castell

Cuaderno de 03 unidades 2.00 6.00

notas Justus x
100 hojas A4

2.3.15.3 ASEO, LIMPIEZA Y COCINA

Franela 30 cm 1,00 1,00

Jabn 05 unidades 1,50 7,50

Detergente 01 Kg. 8,00 8,00

Escobilla 01 unidad 3.00 3.00

para lavar
material
volumtrico

Toalla para 08 unidades 5.00 40.00

manos
Papel 05 unidades 0.50 2.50
higinico

Papel toalla 05 unidades 1.50 7.50

2.3.18.1 PRODUCTOS FARMACUTICOS

2.3.18.12 MEDICAMENTOS
 Deflaxacort 120 3.50 420.00
tab. 6mg unidades

Dexametazona 60 unidades 0.70 42.00

20 mg

2.3.18.2 MATERIAL,INSUMOS,INSTRUMENTAL Y ACCESORIOS

MEDICOS,QUIRURGICOS, ODONTOLOGICOS Y DE
LABORATORIO

Algodn 100 g 1.00 1.00

Glucometro 1 unidad 150.00 150.00

Accu-Check
Active
(Laboratorios
Roche)

Cintas 1 caja 90.00 90.00

glucomtricas

2.3.110 SUMINISTROS PARA USO AGROPECUARIO, FORESTAL Y

VETERINARIO

2.3.110.11 SUMINISTROS DE USO ZOOTCNICO

Jaulas 5 unidades 20,00 100,00

metlicas

16.00

Bebederos 02 unidades 8.00

Sondas 12 unidades 2.50 25.00

nasogstricas

N6 Medex

2.3.110.12 MATERIAL BIOLOGICO

 12
Especmenes
Rattus (6 Machos y 15,00 180,00
norvegicus 6 Hembras)
var. Albinus (270-300 g )

2.3.199 COMPRA DE OTROS BIENES

2.3.199.12 PRODUCTOS QUMICOS

Agua 1 Lt. 2,50 2,50

Destilada

Alcohol 1Lt. 8.00 8,00

etlico 96

2.3.2 CONTRATACIN DE SERVICIOS

2.3.21.21 PASAJES Y GASTOS DE TRANSPORTE

Transporte 1 da 40,00 40,00

(ida y vuelta)
1 personas

Hospedaje 1 da 50.00 50.00

1 persona

viticos 1 da 40.00 40.00

1 persona

2.3.22 SERVICIOS BSICOS, COMUNICACIONES, PUBLICIDAD Y

DIFUSIN

2.3.22.2 SERVICIOS DE TELEFONA E INTERNET

2.3.22.21 SERVICIO DE TELEFONA MVIL

Llamadas a 240 minutos 0.50 120,00

celular

2.3.22.23 SERVICIOS DE INTERNET

 Internet 100 horas 1,00 100,00

2.3.22.4 SERVICIOS DE PUBLICIDAD, IMPRESIONES, DIFUSIN E

IMAGEN INSTITUCIONAL

2.3.22.44 SERVICIO DE IMPRESIONES, ENCUADERNAMIENTO Y

EMPASTADO

Empastado 01 unidad 20,00 20,00

Impresiones 160 unidades 0.15 24,00

2.3.27 SERVICIOS PROFESIONALES Y TCNICOS

2.3.27.4 SERVICIOS DE PROCESAMIENTO DE DATOS E INFORMATICA

2.3.27.43 SOPORTE TCNICO

USB de 4 GB 01 unidades 30,00 30,00

de capacidad.

TOTAL (S/.) 1613.00

10.1. RESUMEN DEL PRESUPUESTO

CDIGO
NATURALEZA DEL GASTO COSTO ( s/ )
CLASIFICADOR
ALIMENTOS Y BEBIDAS PARA
2.3.11.12 22.50
CONSUMO ANIMAL
2.3.12 VESTUARIOS Y TEXTILES 296.00
2.3.15 MATERIALES Y TILES 41.00
2.3.15.3 ASEO, LIMPIEZA Y COCINA 69.50
2.3.18.1 PRODUCTOS FARMACUTICOS 462.00
SUMINISTROS DE USO 141.00
2.3.110.11
ZOOTCNICO
180.00
2.3.110.12 MATERIAL BIOLOGICO

2.3.199.12 PRODUCTOS QUMICOS 10.80

PASAJES Y GASTOS DE
2.3.21.21 130.00
TRANSPORTE
SERVICIO DE TELEFONA
2.3.22.21 120.00
MVIL
2.3.22.23 SERVICIOS DE INTERNET 100.00
SERVICIO DE IMPRESIONES,
2.3.22.44 ENCUADERNAMIENTO Y 44.00
EMPASTADO
2.3.27.43 SOPORTE TCNICO 30.00
Total: s/.1162.30
11. FINANCIAMIENTO
Con recursos propios y con los recursos disponibles de la Facultad de Farmacia y

Bioqumica de la Universidad Nacional de Trujillo.

II. PLAN DE INVESTIGACIN

1. REALIDAD PROBLEMTICA

La hiperglucemia es el trmino tcnico que utilizamos para referirnos a los

altos niveles de azcar en la sangre. El alto nivel de glucemia aparece cuando

el organismo no cuenta con la suficiente cantidad de insulina o cuando la

cantidad de insulina es muy escasa. La hiperglucemia tambin se presenta

cuando el organismo no puede utilizar la insulina adecuadamente.1

Las seales y los sntomas incluyen alto nivel de azcar en la sangre, altos

niveles de azcar en la orina, aumento de la sed, necesidad frecuente de orinar.

El medir con frecuencia el nivel de azcar en la sangre es una de las medidas

preventivas que puede tomar para mantener la diabetes bajo control. 1

Para evitar otros sntomas de la hiperglucemia es necesario que se controle y

trate los altos niveles de azcar en la sangre sin perder tiempo. 1

Es importante tratar la hiperglucemia apenas se detecta. Si no lo hace, puede

sufrir una afeccin denominada cetoacidosis (coma diabtico). La

cetoacidosis se desarrolla cuando el organismo no cuenta con la suficiente

cantidad de insulina. Sin la insulina, el organismo no puede utilizar la glucosa

como combustible. Por ende, el organismo descompone las grasas (lpidos)

para utilizarlas como energa. 1

Cuando el organismo descompone las grasas, aparecen productos residuales

denominados cetonas. El organismo no tolera grandes cantidades de cetonas

y trata de eliminarlos a travs de la orina. 1

Desafortunadamente, el organismo no puede deshacerse de todas las cetonas

y, por lo tanto, se acumulan en la sangre. Como resultado, puede presentarse

un cuadro de cetoacidosis. 1

La cetoacidosis puede provocar la muerte y requiere tratamiento inmediato.

Los sntomas incluyen dificultad para respirar, aliento con olor frutal, nuseas

y vmitos, boca muy seca, seales y los sntomas incluyen alto nivel de azcar

en la sangre, altos niveles de azcar en la orina, aumento de la sed y necesidad

frecuente de orinar. 1

El mecanismo predominante responsable de la hiperglucemia despus de la

administracin de corticoides es la reduccin de la captacin de glucosa por

resistencia a la insulina heptica y perifrica, pero tambin por inhibicin de

la secrecin de la insulina, lo que condiciona sobretodo hiperglucemia

postpandrial. A pesar de la amplia experiencia con el uso de corticoides,

sorprendentemente, disponemos de escasa informacin respecto al patrn de

la hiperglucemia inducida por los mismos. El patrn vara ampliamente,

dependiendo del tipo de glucocorticoide utilizado as como de la dosis y

frecuencia de la administracin. Los corticoides de accin intermedia

(prednisona y metilprednisolona) tienen un pico de accin a las 48h y una

duracin de accin de aproximadamente 1216h21. En los pacientes sin

diabetes, y en aquellos con diabetes bien controlada, la hiperglucemia

inducida por glucocorticoides de accin intermedia en dosis matutina se

caracteriza por una ausencia o mnima elevacin de la glucemia en ayunas.

Por tanto, las glucemias basales son normales o mnimamente elevadas, pero

se produce un aumento exagerado de las glucemias postpandriales,

especialmente despus de la comida, lo que determina hiperglucemias por la

tarde y noche. En estos casos deberemos seleccionar las medidas teraputicas

con efecto hipoglucemiante preferente por la tarde y escaso o nulo en la

madrugada para evitar la hipoglucemia. Cuando estos preparados corticoideos

se utilizan a dosis de dos o ms veces al da, la hiperglucemia dura las 24h,

pero mantiene un predominio postpandrial. 2,3

Los glucocorticoides de accin prolongada, como la dexametasona, tienen un

efecto hiperglucemiante ms prolongado. En voluntarios sanos se ha

cuantificado en alrededor de 20h22, pero que en la prctica clnica parece ser

superior. En este caso el perfil de hiperglucemia suele prolongarse ms de

24h, es predominantemente postpandrial con un ligero descenso de la

glucemia durante el ayuno nocturno. Por tanto, el riesgo de hipoglucemia

nocturna relacionada con el uso de frmacos hipoglucemiantes con efecto

durante las 24h es menor. 2,3

El trabajo realizado por Mara Luisa Fernndez Lpez y Mara Fellez

Carballada (2015) en Corua Espaa titulado: Hiperglucemia inducida

por tratamiento con Glucocorticoides. Donde se concluy que la

Hiperglucemia es un problema de salud frecuente, que en la prctica clnica

habitual puede generar ingresos hospitalarios, prolongacin de los mismos y

visitas urgentes reiteradas sin una adecuada solucin del problema.2

 As mismo en el trabajo de investigacin realizado por Barreto S. (2015) en

La universidad nacional de Asuncin Paraguay, titulado: Efecto agudo de

moringa olefera sobre la hiperglucemia inducida por dexametasona en

ratas Wistar.Determin que La administracin de dexametasona produjo

hiperglucemia, con cifras muy elevadas, a pesar de haber utilizado la dosis de

dexametasona habitual para desencadenar hiperglicemia en ratas Wistar.4

2. JUSTIFICACIN

(FALTA)

3. PROBLEMA

Cul es el efecto del Deflazacort y Dexametasona sobre la glucemia en rattus

norvegicus var. albinus?

4. HIPTESIS

El deflazacort y la dexametasona producen hiperglicemia en rattus norvegicus

var. albinus

5. VARIABLES

5.1.Variable independiente:

Deflazacort y Dexametasona

5.2.Variable dependiente:

El efecto sobre la glicemia en rattus norvegicus var. albinus

6. OBJETIVOS:

6.1.OBJETIVO GENERAL

Determinar el efecto de deflazacort y dexametasona sobre la glucemia en rattus

norvegicus var. albinus

 6.2. OBJETIVOS ESPECFICOS

Medir frecuentemente los valores de glicemia en los grupos experimentales a

las dosis administradas.

7. DISEO DE CONTRASTACIN

La presente investigacin es de tipo experimental con un diseo de estmulo

creciente que se detalla a continuacin:

A A

X1

B B
X2

Leyenda:

GRUPO PROBLEMA I: conformado por 6 rattus norvegicus var. albinus

GRUPO PROBLEMA II: conformado por 6 rattus norvegicus var. albinus

X1: 60 g de Dexamentasona por Kg de peso corporal.

X2: 600 g de Deflazacort por Kg de peso corporal.

III. METODOLOGA

1. Universo Muestral :

Todos los Especmenes sanos de rattus norvegicus var. albinus, criados en el

Instituto Nacional de Salud Lima.

1.1. criterios de exclusin y inclusin de la muestra:

Inclusin:

Haber nacido y crecido en el bioterio del Instituto Nacional de Salud

Especmenes machos y hembras.

Exclusin:

Especmenes hembras en periodo de embarazo.

Especmenes machos y hembras que no tengan problemas de salud a simple

vista.

2. Muestra:

El tamao de la muestra a tomar ser de 12 especmenes Rattus

norvegicus var. albinus; 6 hembras y 6 machos.

3. Material Biolgico:

12 especmenes entre hembras y machos, aparentemente sanos, de Rattus

norvegicus var. albinus; con pesos promedios comprendidos entre 250 a

300 gramos, procedentes del bioterio del Instituto Nacional de Salud

Lima, los que fueron trasladados en sus respectivas jaulas al bioterio de la

Facultad de Farmacia y Bioqumica de la Universidad Nacional de Trujillo

La Libertad.

4. Material de para administracin en el bioterio:

Sonda Nasogstrica N 21

Jeringas tuberculinas.

Cepillo con hueco para sondear.

 Alcohol etlico 70 para la asepsia de las colas de los animales de

experimentacin antes de la extraccin de la muestra

Algodn

Caja fijadora de ratas

Frascos color mbar

Gradilla para tubos

Jaulas para ratas

Jeringas hipodrmicas

Lancetas

Guantes

Comida para especmenes.

Agua

5. Material de laboratorio:

Antes de comenzar a trabajar con las muestras, asegurarse de que todo lo

mencionado a continuacin est disponible en la mesa de laboratorio:

Mortero de porcelana

Pipetas de 1 mL y 5 mL

Probeta de 100 mL

Tubos de ensayo pirex

Vasos de precipitacin de 10 mL y 50 mL

Filtros de membrana de 0.22 mm.

Material de vidrio de uso comn en el laboratorio.

6. Medicamentos de Estudio:

Deflaxacort tab. 6 mg
 Dexametasona tab. 20 mg

7. Equipos de laboratorio:

Balanza de triple brazo de precisin 0.1 g OHAUS

Balanza analtica Balanza analtica 0.0001 g OHAUS

Bao Maria elctrico MEMMERT

Glucmetro Accu-Chek Active de laboratorios Roche

Tiras reactivas de Accu-Chek Active

8. PROCEDIMIENTO:

Antes de comenzar a trabajar con los especmenes, asegurarse de que todo lo

mencionado en punto materiales, insumos y reactivos est disponible.

A continuacin se describe el paso a paso de lo que se har con el espcimen

desde su adquisicin hasta las tomas de muestras para determinar el nivel de

glucosa de cada espcimen.

Es necesario utilizar guantes para este trabajo analtico como medida de

bioseguridad adems de llevar la indumentaria correspondiente en un

laboratorio de anlisis.

8.1. RECOLECCIN DE LA MUESTRA DE MEDICAMENTOS:

Se compraran los medicamentos Dexametasona y Deflazacort de manera

aleatoria de farmacias ubicadas en el centro de la ciudad.

8.2. ADQUISICIN DE LOS ESPECIMENES:

Los especmenes de rattus norvegicus var. albinus sern adquiridos de Lima

del I.N.S. donde se compraran los especmenes con las caractersticas de

inclusin y rechazo; as mismo con pesos promedios comprendidos entre 250

a 300 gramos.

8.3. TRASLADO Y ADAPTACIN AL AMBIENTE DE LOS

ESPECIMENES:

El traslado de los especmenes se har en 2 jaulas uno para machos y uno

para hembras, como se adquirirn en el INS - Lima se traern en bus hasta

la Ciudad de Trujillo teniendo cuidado de no generar estrs, y previendo

de cumplir con las normativas para el cuidado de los animales de

experimentacin, segn lo indica la tica de investigacin.

En la ciudad de Trujillo se proceder a llevarlos al bioterio de la Facultad

de Farmacia y Bioqumica, la cual debe estar previamente acondicionada

y limpia para albergar de los especmenes; esta debe de tener las dos jaulas

para los grupos experimentales en los cuales se debe acondicionar un

depsito para la comida y otro para el agua que consumirn los

especmenes.

Los especmenes sern adaptados a las condiciones de ambiente y otros

factores de estrs a los que puedan estar sometidos al momento de la

ubicacin en sus respectivas jaulas.

Se recomienda que la adaptacin de los especmenes se deba hacer durante

una semana para que factores externos no alteren los niveles normales de

glucemia de los especmenes.

8.4. ARMADO DE LOS GRUPOS EXPERIMENTALES:

Los animales de experimentacin sern distribuidos de forma aleatoria en

dos grupos de trabajo, denominados como sigue:

 Grupo I: grupo Dexametasona, que debe contener 6 especmenes de

Rattus norvegicus var. albinus, de los cuales tres especmenes son

machos y tres especmenes hembras.

Grupo II: grupo Deflazacort que debe contener 6 especmenes de Rattus

norvegicus var. albinus, de los cuales tres especmenes son machos y tres

especmenes hembras.

8.5. USO DE UN CUADERNO DE ANOTACIONES DE LA

EXPERIMENTACIN

El uso de del cuaderno de anotaciones de la experimentacin es para no

perder ninguna observacin que pueda darse durante la ejecucin.

Este instrumento nos permitir registrar los niveles de glucosa en cada

toma de muestra, pesos e incidentes durante la ejecucin de la

investigacin.

8.6. TOMA DE PESO

Para tomar el dato de peso del espcimen se proceder a adaptar la canasta

con tapa usado para pesar, luego se ira pesando espcimen por espcimen

y aleatoriamente se pondr en una de las jaulas.

El dato de peso solo es referencial para determinar la dosis de

medicamento a administrar. Por lo que no se debe sacar un promedio de

pesos del espcimen.

8.7. TOMA DE MUESTRA

Para la toma de muestra se debe tener en cuenta que la medicin de

glucosa correspondientes al grupo I y II se les deja 12 horas en ayunas

 antes de la extraccin con esto se hace homogneo la toma de muestra, si

consideramos la toma de muestra a las 6 de la maana, se debe retirar 6

de la tarde del da anterior los alimentos y el agua ad. livitum para dar las

caractersticas de lo que en un procedimiento de anlisis clnico.

Antes de la puncin se debe vascularizar la cola para la correcta extraccin de

sangre, para esto se debe masajear la cola de la rata desde la base de la cola

hasta el pice.

A cada animal se le extraer una muestra de sangre por puncin de la cola,

previa asepsia de la misma.

La extraccin de sangre se har con una lanceta, se debe hacer una puncin

con la lanceta en el pice de la cola del espcimen y se toma una gota de sangre

sobre el kit reactivo.

8.8. USO DEL GLUCMETRO

Para determinar los niveles de glucosa en sangre de ratas se usar un kit

comercial, el glucmetro Accu-Chek Active de laboratorios Roche. La

muestra de sangre se obtendr luego de hacer una pequea incisin en el pice

de la cola hasta obtener una gota homognea y aplicar directamente sobre la

tira reactiva del glucmetro.5

El Glucmetro Accu-Chek Active de laboratorios Roche, este est compuesto

de 2 partes el glucmetro (contiene al lector del chip) y la tira reactiva con

chip.6
Para empezar con la medicin saque una tira reactiva del recipiente y cirrelo

inmediatamente para que las tiras reactivas no se daen. El medidor se

enciende automticamente al insertar la tira reactiva en la ranura de las tiras

reactivas siguiendo la direccin marcada por las flechas, esto se debe a que se

inserta la tira y el chip se posa sobre el lector del medidor.6

Despus de confirmar en la pantalla que el cdigo coincide con el cdigo del

recipiente, parpadearn los smbolos de la tira reactiva y la gota de sangre.6

Aplique una gota de sangre extrada por la puncin hecha en el pice de la

cola, en el centro de la zona naranja a los 10 segundos el medidor indicara la

cantidad de glucosa en mg/dl.

El medidor se apaga automticamente al retirar la tira reactiva. El resultado se

guarda en la memoria con fecha y hora.6

8.8.1. FUNDAMENTO

Este glucmetro hace una determinacin fotomtrica de la glucosa mediante

tincin de glucosa con oxidorreductasas. (Sinnimo: reaccin mediante

glucosa deshidrogenasa pirrolquinolinaquinona o PQQ)6

8.8.2. CONTROL DE LAS CARACTERISTICAS BASALES DE LOS

ESPECIMENES:

Estos controles de las caractersticas basales de los especmenes se realizaran

despus de la semana de adaptacin al ambiente de los especmenes.

A cada ejemplar se le registrara su peso, se le marcara con un plumn

indeleble para poder diferenciar por sus pesos. Anotar el peso y la indicacin

de la parte donde se marcara a los especmenes, en una tabla para cada grupo

esto se anotara en el cuaderno de anotaciones de la experimentacin.

A cada ejemplar se le registrara su peso para determinar la dosis

correspondiente de medicamento.

Despus de haber tomado el dato de peso de los especmenes se proceder a

registrar los datos de glucosa basal de todos los especmenes para lo cual se

debe seguir la tcnica de uso del glucmetro descrito para la toma de muestra,

estos datos se anotaran en un cuadro por cada grupo experimental, que se

registrara debidamente en el cuaderno de anotaciones de la experimentacin.

La toma de la glucosa basal se har en ayunas por lo cual se debe hacer el da

despus del ultimo da de la adaptacin de los especmenes y seguir el

procedimiento de toma de muestra para dar las caractersticas de lo que en un

procedimiento de anlisis clnico se debe hacer para la determinacin de

glucosa en sangre.

8.8.3. ALIMENTACIN DE LOS ESPECMENES:

La alimentacin de los especmenes debe ser rigurosa, con alimento

balanceado adquirido en el INS y con agua ad. Livitum.

8.8.4. DETERMINACION DE DOSIS

Para la determinacin de la dosis se debe proceder pesando a los especmenes

de los 2 grupos experimentales. Y con esto tomar el valor posolgico de

medicamento por Kg de peso corporal.

Luego de sacar el dato por dosis a administrar se debe calcular el total de dosis

a administrar.

Plasmar todos estos datos en el cuaderno de anotaciones de la

experimentacin.

Se trabajara con la dosis de 60 g de Dexametasona por Kg de peso

administrado por va oral. As mismo se trabajara con 600 g de Deflazacort

por Kg de peso corporal administrado por la misma va. Se decide esta dosis

ya que de este ltimo su potencia es 10 veces menos que la de la

dexametasona.7,8

9. PREPARACIN DE UNA SOLUCIN DEL MEDICAMENTO

POR CADA GRUPO EXPERIMENTAL

Para preparar los medicamentos despus de haber sacado las dosis por

especmenes y calculado el requerimiento de medicamento durante el tiempo

establecido se pulveriza las tabletas, las que se guardan en un frasco mbar de

boca ancha; y del cual se tomarn los pesos para preparar cada una de las dosis

a administrar.

Cada dosis a administrar debe estar diluida en 1 mL de agua; tener en cuenta

que para sacar la dosis se debe hacer con la posologa de administracin por

un kilogramo de peso de persona.

Para fines prcticos se trabajar con la preparacin de todas las dosis

necesarias para la administracin del frmaco al da, es decir se calcular la

sumatoria de pesos de los 6 especmenes y se igualara a 1 kg, lo que se requiera

para la administracin a los 6 especmenes se le pesar un exceso del 5 % del

total se diluir en 7 mL; seguido de esto se calcular la concentracin de la

solucin para determinar qu cantidad de mililitros que se les administrar.

Se debe preparar la dosis por exceso por si se perdiera un poco de esta

solucin.

Hacer todo este procedimiento para cada uno de los medicamentos y grupos

experimentales.

10. ADMINISTRACIN DE LOS MEDICAMENTOS A LOS

ESPECMENES

La administracin de los medicamentos en anlisis inicia nicamente cuando

estos ya estn preparados y listos para ser usados.

Sacar al especmen de la jaula tomndolo de la zona media de la cola, y

apyelo (sin soltarlo) sobre la superficie en la que trabajar que para este caso

ser una mesa del laboratorio de Toxicologa de la Facultad de Farmacia y

Bioquimica.9

Coloque la base de la cola del ratn entre sus dedos anular y meique, dejando

libre sus dedos pulgar e ndice Con rapidez pellizque con el dedo pulgar e

ndice, suave pero firmemente, la piel de la parte superior de cuello y

hombros, teniendo especial cuidado con los ratones agresivos ya que pueden

darse vuelta y morder. Levante al animal.9

Luego de Inmovilizar al animal en forma correcta, proceder a introducir la

sonda hacia la izquierda en forma lenta y suave a lo largo de la rama

mandibular derecha, aqu el ratn comienza a tragar y la sonda se inserta

dentro del esfago.9

Verificar que la sonda lleg al estmago colocando el extremo inicial en un

vaso de precipitacin lleno de agua, la formacin de burbujas indicar que la

sonda no est en el lugar adecuado para lo cual se debe proceder nuevamente

a colocarla.

Una vez realizado esto con una jeringa de tuberculina se administrar la

solucin del medicamento. Tener en cuenta que parte de la solucin a

administrar se puede quedar en la sonda, para evitar esto posterior a la

administracin se administra 0.5 mL de agua para poder asegurar que la

totalidad de la solucin correspondiente ha sido administrada. El esquema

seguir es de la siguiente manera:

Grupo I: grupo dexametasona: Se le administrar la dosis de dexametasona

por 30 das despus de la semana de adaptacin al ambiente; considerando el

dato de 60 g por kilogramo de peso.

Grupo I: grupo deflaxacort: Se le administrar la dosis de deflazacort por

30 das despus de la semana de adaptacin al ambiente; considerando el dato

de 600 g por kilogramo de peso.

11. EVALUACIN DEL NIVEL DE GLUCOSA:

A todos los animales de experimentacin de cada grupo de trabajo (I y II) se

les realizar el test para la medicin de los niveles de glicemia:

 - Post frmaco: - a los 45 y a los 90 minutos.8

Para la valoracin de glicemia se usar el glucmetro Accu-Chek Active de

laboratorios Roche y se seguir los pasos ya descritos, de igual manera como

para la toma de glucosa basal. Adems se debe seguir el procedimiento que

corresponde a la toma de muestra. El esquema a seguir es de la siguiente

manera:

Grupo I grupo dexametasona:

Se determinara su nivel de glucosa al da 0, 10, 20, 30, das.7

- Los das indicados para medir los niveles de glucosa se medir 2 veces a

los 45 y a los 90 minutos, para ver el efecto pos prandial de elevacin de

glicemia.8

Grupo II grupo deflazacort:

- Se determinara su nivel de glucosa al da 0, 10, 20, 30, das. 7

Los das indicados para medir los niveles de glucosa se medir 2 veces a los

45 y a los 90 minutos, para ver el efecto pos prandial de elevacin de

glicemia.8

12. ANLISIS ESTADSTICO:

Los datos sern cargados en una hoja de clculo de Microsoft Excel y se

calcular el promedio, desviacin estndar y la correlacin mediante la prueba

T de Student, se consider p< 0,05 como significativa. 4

 13. TICA EN CUIDADO DE ANIMALES PARA EXPERIMENTACIN:

1. Seleccionar el modelo animal adecuado para el estudio, teniendo en cuenta

sus caractersticas (las de la especie, cepa) y su adecuacin al experimento.

El reactivo biolgico debe estar bien definido. 10

2. Determinar el nmero de animales a utilizar. Se hace mediante estadstica;

utilizar el menor nmero posible de animales teniendo en cuenta el mnimo

necesario de ejemplares para que los resultados sean fiables y significativos.

Tambin se debe definir el inculo (as como su dosis, va y frecuencia de

administracin) y determinar el final del experimento. 10

3. Realizar los procedimientos experimentales adecuados. Para ello, aparte de

la propia experiencia y profesionalidad, existen guas para el cuidado y manejo

de animales de laboratorio. Aqu son muy importantes los conocimientos

sobre el dolor, la sedacin y el manejo adecuado. Hay que fijarse en los signos

de estrs y de dolor propios del modelo animal seleccionado con el fin de

garantizar un buen diseo experimental. 11

4. Realizacin de pruebas piloto. La realizacin de stas permite establecer el

protocolo tanto en relacin a la manipulacin de los animales como en la toma

de los resultados y observaciones obtenidas en el estudio. Es en estas pruebas

piloto donde el investigador perfecciona y optimiza el manejo del animal as

como la tcnica a utilizar. 11

5. Determinar y definir el final del estudio experimental. En esta etapa es muy

importante definir debidamente el mtodo de eutanasia de los animales. sta

puede ser aplicada no nicamente al final del estudio, sin que tambin puede

ser necesaria en cualquier punto de ste debido a factores de estrs o dolor por

parte de los reactivos biolgicos. 11

Los mtodos aplicables son los establecidos en el 2000 Report of the AVMA

Panel on Eutanasia. 11
 REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

1. Hiperglucemia. AMERICAN DIABETES ASSOCIATION. [20 de marzo del 2015].

[online] [Citado el 07 de junio del 2017]. Disponible en:
http://www.diabetes.org/es/vivir-con-diabetes/tratamiento-y-cuidado/el-control-de-
la-glucosa-en-la-sangre/hiperglucemia.html?referrer=https://www.google.com.pe/
2. Fernandez M, Felz M: Hiperglucemia inducida por glucocorticoides. Habilidades e
Terapeutica. [Seriada en lnea] 2015. [citado el 07 de junio del 2017]; 21:117-120
Disponible en: http://www.agamfec.com/wp/wp-content/uploads/2015/10/Cadernos-
21-n2-4.pdf
3. Saig I, Prez A. Manejo de la hiperglucemia inducida por corticoides. Revista Clnica
Espaola [Online] 2010; [citado el 07 de junio del 2017] 210(3):397-403. Disponible
en: http://www.revclinesp.es/es/manejo-hiperglucemia-inducida-por-
corticoides/articulo/S0014256510002833/
4. Barreto S. Efecto agudo de moringa olefera sobre la hiperglucemia inducida por
dexametasona en ratas Wistar. 2015. [online] [Citado el 07 de junio del 2017].
Disponible en: http://scielo.iics.una.py/pdf/anales/v48n1/v48n1a04.pdf
5. Tasayco, N. (2007). Actividad hipoglucemiante del extracto hidroalcohlico de las
hojas de Smallanthus sonchifolius (yacn) en ratas con diabetes tipo 1 y 2. [Tesis para
optar el grado de Magister]. UNMSM, Per.
6. Roche Diagnostica. [homepage en internet]. Glucmetros Accu-Chek. [Actualizada

20 de noviembre del 2011, consultado el 07 de junio del 2017].Disponible en:

http://www.accu-chek.com.pe/productos/medidoresdeglucemia/active_nuevo.aspx

7. Amar, M., Adam, I., Enaia,A. et. al. Effects of Various Levels of Oral Doses

Dexamethasone (Al-nagma) Abused as Cosmetic by Sudanese Women on Wistar

Rats.(2013). Journal of Medical Sciences. 13(6):432-438.

8. Pistil, G. & Rodrguez, F. Dexametasona, Prednisona y Prenisolona: Estudio

comparative de su efecto hiperglicemiante en Rattus rattus var. Albinus.[Tesis].

Trujillo: Facultad de Farmacia y Bioquimica, Universidad Nacional de Trujillo; 1997.

9. Fuentes, F., Mendoza, R., Rosales, A. & Cisneros,R. Gua de manejo y cuidado de

animales de laboratorio: ratn. Lima: Ministerio de Salud, Instituto Nacional de

Salud,2008.

10. Aguilar .a y col (2012).Biotica en experimentacin animal. facultad de veterinaria. fecha

de acceso(04/06/17) disponible en:
https://ddd.uab.cat/pub/trerecpro/2011/85719/bioexpani.pdf
11. INS.Procedimiento para el uso de animales de laboratorio en el instituto nacional de salud.
fecha de acceso (04/06/17) disponible en:
http://www.ins.gob.pe/repositorioaps/0/2/jer/normatividad_01/manual%20procedimientos
%20ciea.pdf