Ao de la Diversificacin Productiva y del Fortalecimiento de la

Educacin
Universidad Nacional Del Per
Facultad de Medicina Humana
Escuela profesional de Enfermera

Practica de Laboratorio # 1
SOLUCIONES BUFFER

ASIGNATURA: Bioqumica

DOCENTES: Dra. Violeta Morn Garrido

Dr. Carlos Holgun Mauricci

ALUMNA: Fiorella Paola Dioses Fernndez

Piura 2015
1
 INDICE

Objetivo

Marco terico

pH

Escala de pH

Buffer

Practica de Laboratorio

Ejercicio de practica

Cuestionario

Cuestionario 1

Cuestionario 2

Bibliografa

2
I. Objetivos

El objetivo de esta prctica es darnos a conocer sobre el

funcionamiento y la elaboracin de las soluciones amortiguadoras
de pH, empleando una visin sistemtica del equilibrio inico sobre
las soluciones acuosas.

II. Marco Terico

Ph: es una medida de acidez o alcalinidad de una disolucin. El pH

indica la concentracin de iones hidronio [H3O]+ presentes en
determinadas disoluciones.

Escala de Ph: Los cidos y las bases tienen una caracterstica que
permite medirlos: es la concentracin de los iones de hidrgeno (H+).
Los cidos fuertes tienen altas concentraciones de iones de hidrgeno
y los cidos dbiles tienen concentraciones bajas. El pH, entonces, es
un valor numrico que expresa la concentracin de iones de
hidrgeno.

Un buffer o tampn qumico, es un sistema constituido por un cido

dbil y su base conjugada, o por una base y su cido conjugado que
tiene capacidad tamponante, es decir, que puede oponerse a
grandes cambios de pH (en un margen concreto) en una disolucin
acuosa.

3
 III. Practica de laboratorio

Practica de los Buffers

El objetivo de esta prctica, es sealar al estudiante una de las tcnicas

esenciales utilizadas en los laboratorio bioqumicos y clnicos para
determinacin del metabolismo cidos y minerales.

PARTE I

Solucin de Tampn o Buffer

El buen funcionamiento de los
sistemas biolgicos requieren de un
control estricto del piel que rodea a
estos sistemas ya que los procesos
metablicos son inactivos fuera de
cientos lmites de cidos o
alcalinidad.
Se presume que la teora es conocida
por el estudiante habiendo sido
revisada en el curso de fsica o
qumica. En general hasta la
ecuacin de Henderson Hesselbach.

pH= pKa + log Sal (cidos)

Esta ecuacin permite calcular la relacin molar entre la sal (Aceptor de
protones) y el cido (donador de protones) para un pH y pK
determinados.

EJERCICIO DE PRCTICA

Al preparar 50 ml de una solucin 0.02 m de buffer fosfato pH 7.5 a partir de:

Una solucin 0.1 M de Na2HPO4 (fosfato disdico)

Una solucin de 0.05M de NaH2HPO4 (fosfato monosdico)
a) Medir el pH
b) Aadir el 1 ml HCl (0.05N) medir el pH nuevamente.
c) Medir el pH de 50 ml de H2O destilada
d) Aadir 1 ml HCl (0.05N)
e) Medir el pH nuevamente

Las relaciones involucrada en cada experimento

a) Solucin 0.1M de Na2PO4 (fosfato de sodio)
b) Solucin de 0.05M de NaH2HPO4 (fosfato monosdico)

Los clculos efectuados para la determinacin de las cantidades de las

diferentes soluciones a emplearse en cada caso.

4
 A continuacin hallaremos la cantidad de volumen que se necesita
para preparar el Buffer fosfato 0.02M a pH 7.5. Para esto utilizaremos
algunos clculos matemticos y qumicos.

H2PO4 + OH HPO4-2 + H3O

pH = pKa + pb [Sal]
[acido]

7,5 = 6,8 +log [Sal] sal=a

[acido]

0.7= log a
0.02-a

5,0119= a
0.02 - a

a = 0,0167 mol Na2PO4

Luego Calculamos el volumen que necesitamos en NA2PO4

O,1 mol de Na2PO4 1000 ml

8,35 x 10-4 moles de Na2PO4

X=8,35 ml de NA2PO4
Calculamos la cantidad de volumen de NAHPO4 que necesitamos 0.02
0.0167= 0.0033 moles de NaH2PO4

O.O33 moles de NaH2PO4

X 50 ml

X= 1,65 x 10-4 moles de NaH2PO4

0.05 moles de NaH2PO4 1000 ml

1,65 x 10-4 de NaH2PO4 Y ml

Y=3,3 ml de NaH2PO4

a) Las lecturas obtenidas en el potencimetro

Debido a que no contamos con el potencimetro, para medir el pH
utilizaremos un indicador universal, que nos va a permitir calcular un pH
aproximado pero no exacto, de acuerdo a la coloracin que toma la
muestra. Para esto debemos tener en cuenta la siguiente tabla:

5
 Color pH
Rojo 4
Anaranjando 5
Amarillo 6
Verde 7
Azul 8
Indigo 9
Violeta 10

En un vaso precipitado tendremos el Buffer fosfato 0.02M a pH 7,5 que

est formando por 8,35 ml de NA2PO4 y 3,3 ml de NaH2PO4 a lo cual le
aadiremos agua destilada hasta completar los 50 ml.
En otro vaso de precipitado solo tendremos 50 ml de agua destilada
Luego utilizaremos el indicador universal para calcular el pH de cada uno
de las soluciones que se encuentran en los vasos, observaremos que el
vaso que esta con agua destilada tiene un color verde, y podemos
deducir que se encuentra a pH nuetro, mientras que el vaso con el buffer
tambin es de color verde pero un poco ms oscuro y podemos afirmar
que se encuentra a un pH aproximado de 7,4.

b) Como reaccionaron las soluciones buffer al aadir sales Na(OH) o HCl?,

cambio el Ph?
Buffer fostato 0.02M

+ Na (OH)

pH =7.8

Cuando agregamos hidrxidos de sodio al buffer podemos notar que la

solucin toma un color medio azul por lo que podemos decir que tiene
un pH de 7.7 y la variacin con respecto al estado inicial no ha sido
mucho, es dbil el buffer impide que el pH cambie bruscamente.

+ HCl

Agua pH=7

Cuando agregamos HCl el color de la solucin se toma ms oscura y

podemos decir que el pH ha tenido un ligero cambio.

6
c) Cambio el pH del H20 al aadir Na(OH) o HCl?

+Na(OH)

H)

Cuando agregamos hidrxidos de sodio podemos ver que el color

verde cambio a violeta, lo que significa que hubo un cambio muy
grande en el pH de 7 a 10 aprox. La solucin se vuelve alcalina.

+ HCl

Cuando agregamos cido clorhdrico el color del vaso se torna rosado,

lo que significa que el pH disminuyo a menos de 4 y por lo tanto la
solucin se volvi cida.

2. a. Preparar 50 ml de una solucin 1/50 m de buffer fosfato pH 7.5 a

partir de:
Una solucin de 0.1m de NaHHPO4 (fosfato monosdico)
Una solucin 0.1N de Na(OH)
b. Medir el pH
c. Aadir 1ml HCl (0.05N), medir el pH nuevamente
d. Medir el pH de 50 ml de H2O destilada
e. Aadir 1ml HCl (0.05N)
f. Medir el pH nuevamente

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 CUESTIONARIO 1

a) Las relaciones involucradas en c/ experimento.

Una solucin 0.1 M de Na2HPO4 (fosfato disdico)
Una solucin de 0.05M de NaH2HPO4 (fosfato monosdico)

b) Los clculos efectuados para la determinacin de las cantidades de

diferentes soluciones a emplearse en cada caso.
X= 1,65 x 10-4 moles de NaH2PO4
Y=3,3 ml de NaH2PO4

c) Las lecturas obtenidas en el potencimetro.

d) Como reaccionaron las soluciones buffer al aadrseles Na(OH) o HCl ,
cambio el PH?
Cuando agregamos HCl al buffer, no cambi de color, es decir si
amortigu

En cambio cuando agregamos NaOH al buffer, aumenta el pH y

se toma de color verde azulado.

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 CUESTIONARIO 2

a) Seale sustancias de uso clnico que se usan como sustancia

hidroelectrolticas
Soluciones cristaloides: o soluciones azucaradas o electrolticas,
cuya funcin primordial es la de expandir el volumen
intravascular gracias a su contenido en Na+, o aportar energa
a travs de su contenido en azcar.

Soluciones coloides: son soluciones que contienen partculas de

alto peso molecular, que se encuentran suspendidas y permiten
la expansin del plasma, aumentando su osmolaridad, por lo
que su funcin en la retencin de agua en el lquido
extravascular, permite la restitucin de la perfusin tisular
ptima.

SOLUCION GLUCOSALINA Llamado tambin suero salino

isotnico, se caracteriza por tener una composicin en base a
glucosa al 3,6%, con ClNa al 0,3%, que es indicado para la
reposicin de agua sin dficit de electrolitos, o como medio de
va para la administracin de medicamentos, aportando
energa en forma escasa. Esta solucin no es indicada para su
uso cuando el paciente tiene algn grado de hiperhidratacin
como en la cirrosis heptica con anasarca, hiperglucemia,
hipopotasemia, hiponatremia o hipocloremia, ya que la dilucin
de los electrolitos en mencin podra empeorar un cuadro
donde existe dficit de los mismos. Por el contenido electroltico
algunos medicamentos pueden interactuar con el suero
isotnico como los diurticos, corticosteroides, insulina o
antidiabticos orales, carbonato de litio, digoxina, etc, por lo
que el momento de su administracin se deber hacer una
evaluacin escrupulosa del paciente.

SOLUCION SALINA HIPERTONICA Las soluciones hipertnicas, se

caracterizan por tener una concentracin mayor de sales (ClNa
5%, 7,5%), por lo que su uso, permite una reposicin volumtrica
ms rpida, manteniendo su efecto por el lapso de 24 h, con la
evidente mejora de la resistencia vascular perifrica, por lo que
su uso en pacientes en estado de shock ha sido difundido, de
igual manera al aportar una concentracin mayor de ClNa, se
mejora el ndice cardiaco y el flujo en el bazo, reduciendo la
presencia de secuestro esplnico.

GELATINAS Son sustancias polipeptdicas derivadas del

colgeno animal, a las cuales se aaden puentes de urea,
conteniendo una concentracin de 3,5% de poligelinas y alto
contenido de K+ y Ca++,que se modifican qumicamente para
que tengan una duracin mayor en el espacio intravascular y
cuyas concentraciones son del 4%. Tienen un tamao molecular
pequeo, lo que permite su fcil eliminacin, permaneciendo
en el torrente circulatorio por 2 a 4 horas.

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b) Que es una solucin tampn o buffer? Como se regula el pH?
Un tampn, buffer, solucin amortiguadora o solucin
reguladora es la mezcla en concentraciones relativamente
elevadas de un cido dbil y su base conjugada, es decir,
sales hidrolticamente activas. Tienen la propiedad de mantener
estable el pH de una disolucin frente a la adicin de cantidades
relativamente pequeas de cidos o bases fuertes. Este hecho es
de vital importancia, ya que meramente con un leve cambio en
la concentracin de hidrogeniones en la clula se puede producir
un paro en la actividad de las enzimas.

c) Que sustancias de uso clnico se usa como indicadores el pH?

Sustancia qumica que permite medir el pH de un medio.
Habitualmente se usan sustancias que cambian su color al
cambiar el pH de la disolucin donde est disuelto. El cambio de
color se debe a un cambio estructural inducido por la protonaci
n / desprotonacin de la especie.
Los ms conocidos son:
El naranja de metilo
La fenolftalena: es un indicador de pH que
en disoluciones cidas permanece
incoloro, pero en presencia de
disoluciones bsicas toma un color rosado
con un punto de viraje entre pH=8,2
(incoloro) a pH=10 (magenta o rosado). Sin
embargo en pH extremos (muy cidos o
bsicos) presenta otros virajes de
coloracin; en la cual la fenolftalena en
disoluciones fuertemente bsicas se torna
incolora, mientras que en disoluciones
fuertemente cidas se torna naranja.

d) Que ocurre en los procesos de alcalosis o acidosis? (Metablico-

Respiratorio?
Al exceso de cido se le llama acidosis (tiene un pH inferior a 7,35)
y un exceso en las bases se llama alcalosis (pH superior a 7,45). El
proceso que hace un desequilibrio en la acidz sangunea es
clasificada en funcin de la etiologa de la alteracin (bien sea
respiratoria o metablica) y la direccin del cambio en el pH
(acidosis o alcalosis). Esto produce los siguientes cuatro procesos
bsicos:

10
 dixido de
Proceso pH Compensacin
carbono

Acidosis
baja baja Hiperventilacin
metablica

Acidosis Aumento de la
baja sube
respiratoria excrecin renal de H+

Alcalosis
sube sube Hipoventilacin
metablica

Aumento de la
Alcalosis
sube baja excrecin renal de
respiratoria
CO3H

e) Cules son los buffer orgnicos e inorgnicos en el organismo y

que

Tampones Fisiolgicos: Son los sistemas encargados de

mantener el pH de los medios biolgicos dentro de los valores
compatibles con la vida, permitiendo con ello la realizacin es
de funciones bioqumicas y fisiolgicas de las clulas, tejidos,
rganos, aparatos y sistemas.
Se dividen en amortiguadores orgnicos e inorgnicos y as
mismo, atendiendo a su ubicacin, se distribuyen en
plasmticos y tisulares.
Tampones Orgnicos:
1. Las protenas y aminocidos como tampn, son electrolitos
anfteros, pueden ceder protones (cidos) como captarlos
(base) y a un determinado pH (en su pI), tener ambos
comportamientos al mismo tiempo. La carga depende del
pH del medio. Es un amortiguador de tipo nivel Tisular.
2. Tampn hemoglobina Es un tampn fisiolgico muy eficiente
debido tanto al cambio de pK que experimenta al pasar de
la forma oxidada a la reducida, como a la gran abundancia
de esta protena en la sangre (15 % del volumen total
sanguneo).
La propiedad de la hemoglobina, permite el transporte de

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 una determinada cantidad de CO2 liberada en los tejidos. La
hemoglobina oxigenada que llega a los tejidos se disocia
liberado O2, un proceso que est favoreciendo por el estado
de los tejidos (Baja pO2, menor pH y alta pCO2).

Tampones inorgnicos
1. Tampn carbnico/bicarbonato, est constituido por H2CO3
y HCO3. Aunque su valor de pK (6,1) est algo alejado del pH
fisiolgico de la sangre (7,4), es un sistema muy eficaz debido
a que:
La relacin HCO3 - / H2CO3 es muy alta (20/1), lo que le
proporciona una alta capacidad tampn frente a los cidos;
Es un sistema abierto, con lo que el exceso de CO2 puede ser
eliminado por ventilacin pulmonar de manera rpida;
El HCO3 - puede ser eliminado por los riones mediante un
sistema de intercambio con solutos.
2. Tampn fosfato, es muy eficaz para amortiguar los cidos

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 IV. Bibliografa

https://es.wikipedia.org/wiki/Fenolftale%C3%ADna

http://es.slideshare.net/ciencias-enfermeria-fucs/unidad-4-soluciones-de-uso-
clnico

http://www.monografias.com/trabajos73/preparacion-soluciones-
buffer/preparacion-soluciones-buffer.shtml

http://www.profesorenlinea.cl/Quimica/PH2.htm

https://es.wikipedia.org/wiki/Buffer

https://es.wikipedia.org/wiki/PH

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