Ao de la Diversificacin Productiva y del Fortalecimiento de la

Educacin

Universidad Nacional Del Per

Facultad de Medicina Humana
Escuela profesional de Enfermera

Practica de Laboratorio
PERFIL LPIDO

ASIGNATURA: BIOQUIMICA

DOCENTES: DRA.VIOLETA MORIN GARRIDO

DR. CARLOS HOLGUIN MAURICCI}

ALUMNA: FIORELLA DIOSESFERNANDEZ

Piura - 2015

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 INDICE

I. MARCO TEORICO

Concepto

Porque se realiza

Como se obtiene la muestra para el anlisis

Como se utiliza el perfil lipdico

II. PRACTICA DE LABORATORIO

Determinacin del colesterol total

Determinacin del HDL

Determinacin de los triglicridos

III. CUESTIONARIO

IV. BIBLIOGRAFIA

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 I. Marco Terico:
Concepto: Un perfil lipdico es un grupo de pruebas solicitadas
generalmente de forma conjunta para determinar el riesgo de
enfermedad cardaca coronaria. Las pruebas que conforman un perfil
lipdico han mostrado ser buenos indicadores de la posibilidad de
presentar un infarto de miocardio o un accidente vascular cerebral
provocado por obstruccin de los vasos sanguneos o por
endurecimiento de las arterias (aterosclerosis). El perfil lipdico tpico
incluye:
El perfil lipdico mide lo siguiente:

El colesterol total, que es la suma de los diferentes tipos de

colesterol.
Las lipoprotenas de alta densidad (HDL) colesterol, que suelen
recibir el nombre de colesterol "bueno". Las lipoprotenas pueden
considerarse el sistema de transporte de la sangre de su hijo. Las
lipoprotenas de alta densidad transportan colesterol al hgado para
su eliminacin.
Las lipoprotenas de baja densidad (LDL) colesterol,
generalmente conocidas como colesterol "malo". Las lipoprotenas
LDL que se acumulan en el torrente sanguneo pueden tapar los
vasos sanguneos e incrementar el riesgo de afecciones cardacas.
Los triglicridos, que almacenan energa hasta que el organismo
la necesita. Si el cuerpo acumula demasiados triglicridos, los
vasos sanguneos se pueden tapar y provocar problemas de salud.

Un perfil lipdico ms extenso puede tambin incluir:

Colesterol VLDL
Colesterol no-HDL
Por qu se realiza?
El perfil lipdico permite verificar los niveles de lpidos en la sangre, que
pueden indicar el riesgo de una persona de padecer enfermedades
cardacas o arterosclerosis (el endurecimiento, estrechamiento o
bloqueo de las arterias).Algunos expertos consideran que el colesterol
elevado en nios es un gran problema de salud pblica que en muchos
casos pasa desapercibido. Por lo tanto, es importante estar atento a los
niveles de colesterol de su hijo, en especial si alguno de los padres
sufre de colesterol elevado.

Cmo se obtiene la muestra para el anlisis?

Extraccin de la muestra por puncin de una vena del antebrazo o a
veces por puncin directa en un dedo. Esta alternativa es la que se
utiliza cuando se pretende analizar la muestra en un dispositivo porttil.
Es necesario haber estado en ayunas durante 9-12 horas; es posible
que se le permita beber agua.

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 Cmo se utiliza el perfil lipdico?
El perfil lipdico se utiliza para determinar el riesgo de enfermedad
cardaca y como gua para decidir cmo debe ser tratada una persona
en situacin de riesgo. Los resultados del perfil lipdico se consideran
conjuntamente con otros factores de riesgo conocidos de enfermedad
cardaca para proporcionar un plan de tratamiento y seguimiento. En
funcin del perfil lipdico y de otros factores de riesgo se plantean
distintas alternativas teraputicas que incluyen cambios en el estilo de
vida como dieta y ejercicio fsico, o tratamiento con frmacos como
estatinas.

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 II. PRACTICA DE LABORATORIO
DETERMINACIN DEL COLESTEROL TOTAL

Fundamento del Mtodo:

La secuencia reaccionar es la siguiente:

Esteres del colesterol CHE colesterol cidos grasos
Colesterol O2 CHOD Colesten-3-ona H2O2
H2O2 4-AF fenol POD quinonimina roja.

Material
Material para toma de muestra:
(i) - Tubos de ensayo
(ii) - Gradillas
(iii) - Pipetas automticas
- Pipetas de 5 ml

Equipo
- Bao Mara
- Espectrofotmetro
Centrfuga

Reactivos
STANDARD : Solucin Colesterol 200 mg%
ENZIMAS : Colesterol Esterasa ( CHE )
Colesterol Oxidasa (CHOD)
Peroxidasa (POD)
4 aminofenazona (4-AF)
BUFFER : Solucin Buffer Ph 6,8 conteniendo Fenol y Colato de Sodio.
REACTIVO DE TRABAJO: Reconstituir el contenido de un vial de enzimas
con una parte de enzimas con una parte de Buffer. Transferir al frasco de
Buffer enjuagando varias veces el Val con el mismo. Mezclar hasta
disolucin completa. Homogeneizar y usar.

Procedimientos
En tres tubos de ensayo, colocar:
B STD D

STANDARD --- 30 ul ---

MUESTRA --- --- 30 ul
RVO DE 3 ml 3 ml 3ml
TRABAJO

Incubar 5 minutos en Bao Mara a 37C.

Leer en Espectrofotmetro a 505 nm , llevando el aparato a cero con el
blanco.

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 Calculo de resultados
Colesterol mg%: Abs.D x Factor
Factor : Conc.Std (200 mg %)
Abs.Conc

b) VALORES NORMALES: 170 240 mg%

Abs. = 0.32
Abs. Std = 0.27

Factor=200/0.27=740.74
Colesterol total=0.32 *740.74 = 236.8 mg%

DETERMINACION DE HDL
Fundamento del Mtodo
Las lipoprotenas de alta densidad (HDL) se separan precipitando
selectivamente las lipoprotenas de baja densidad y muy baja densidad (LDL
y VLDL) mediante el agregado de Sulfato de Dextrn de PM 50.000 en
presencia de iones Mg .
En el sobrenadante separado por centrifugacin, quedan las HDL y se realiza
la determinacin del colesterol ligado a las mismas.

Materiales
Material para toma de muestra.
-Tubos de ensayo
-Gradilla
-Pipetas de 1 ml
-Micropipetas

Equipos
-Espectrofotmetro
- Centrfuga

Reactivos
-REACTIVO DEXTRN: Solucin de sulfato de Dextrn.
DEXTRN DE MAGNESIO: Solucin de cloruro de magnesio
-REACTIVO MAGNESIO DE COLESTEROL ENZIMTICO

Procedimiento:
En un tubo de ensayo, colocar:
- 01 ml de muestra + 100 ul de Reactivo Precipitante.
- Homogeneizar agitando durante 20 segundos.
- Dejar 30 minutos en refrigerador.
- Centrifugar 15 minutos a 3,000 rpm.

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 - Extraer el sobrenadante lmpido y usarlo como muestra en el sgte
procedimiento:
En tres tubos de ensayo, colocar:
B S D
Sobrenadante -- -- 100 ul
Standard -- 30 ul --
Rvo de trabajo de 3 ml 3 ml 3 ml
colesterol

Mezclar e incubar durante 15 minutos a 37C.

Retirar del Bao y enfriar.
Leer a 505 nm en espectrofotmetro, llevando a cero con el blanco.

Calculo de resultados
Desconocido:
HDL Colesterol mg% = Abs. D x F
Calculo del factor F= Conc del estndar( 200 mg% ) = 169.26
Abs. Std
Factor=43.7/0.27=169.26
Concentracin del HDL=0.21*169.26 =41.2mg%

Valores normales :
VN = 35-70 mg%

DETERMINACIN DE LOS TRIGLICERIDOS

Significacin Clnica
Los triglicridos son lpidos absorbidos en la dieta y tambin producidos en
forma endgena a partir de los carbohidratos.
Su medicin es importante en el diagnstico y manejo de las hiperlipidemias.
Estas enfermedades pueden tener origen gentico o ser secundarias a otras
tales como nefrosis, diabetes mellitus y disfunciones endocrinas. El aumento
de triglicridos se ha identificado como un factor de riesgo aterosclerticas.

Fundamento Terico
Triglicridos Glicerol + cidos grasos
Glicerol kinasa
Glicerol + ATP Glicerol 1 P + ADP
GPO
Glicerol 1 P + O2 H2O2 + dihidroxiacetonafosfato
POD
2 H2O2 + 4- AF + clorofenol quinonimina roja

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 REACTIVOS PROVISTOS
BUFFER:
Solucin buffer Good conteniendo cloro fenol, pH 7,5.
ENZIMAS:
Viales conteniendo lipoprotena lipasa, glicerol kinasa (GK), glicerol fosfato
oxidasa (GPO), peroxidasa (POD), adenosina trifosfato (ATP) y 4-
aminofenazona (4-AF).
Standard: solucin de glicerol 2,26 mmol/l (equivale a 2 g/l de triolena).
STANDARD:
Listo para usar
REACTIVO DE TRABAJO:
5/10 x 20ml de Buffer a un vial de Enzimas.
Mezclar hasta disolucin completa. Homogenizar y fechar.

4 x 50 ml: reconstituir el contenido de un vial de Enzimas con una porcin

de Buffer y luego transferir al frasco de Buffer enjuagando varias veces.
Homogenizar y fechar.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10C) hasta la fecha de
vencimiento indicada en la caja. No mantener a temperaturas elevadas
durante lapsos prolongados.
Reactivo de Trabajo: es estable 30 das en refrigerados (2-10C)
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS
El Reactivo de Trabajo puede presentar una coloracin rosada que no afecta
su funcionamiento.
Lecturas del Blanco superiores a 0.160 D.O. o lecturas del Standard
anormalmente bajas, son indicios de deterioro del Reactivo. En tal caso,
desechar.
CONDICIONES DE REACCION
Longitud de onda: 505 nm en espectofotmetro o 490 530 en
fotocolormetro con filtro verde.
Temperatura de reaccin: 37C
Tiempo de reaccin: 5 minutos
Volumen de muestra: 2,5 ml
Volumen de reactivo: 2,5 ml
Volumen final de reaccin: 2,5 ml

PROCEDIMIENTO
Homogeneizar la muestra antes de usar, especialmente frente a sueros
lechosos.
En tres tubos de fotocolormetro o cubetas de espectrofotomtricas marcadas
B (blanco), S (Standar) y D(Desconocido) colocar.
B S D
Muestra - - 3 ul
Standard - 3 ul -
Reactivo de 3ml 3 ml 3 ml
Trabajo

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 Mezclar, incubar 5 minutos a 37C y leer a 505nm
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCIN FINAL
El color de reaccin final es estable 60 minutos, por la absorbancia debe ser
leda dentro de este lapso.
CALCULO DE LOS RESULTADOS
Corregir las lecturas con el blanco de reactivos y usar las lecturas corregidas
para los clculos.

[]STD
TG mg% = D x F factor
Abs.STD

F= 200/ 0.30 = 666.6

Triglicridos mg % = 031 * 666.6
TG mg % = 206.8
Valores normales: Menores de 150 mg%

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Ver sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. Los reductores
disminuyen la respuesta de color, mientras que los oxidantes colorean el
Reactivo aumentando los Blancos. Las contaminaciones con glicerol
producen resultados falsamente aumentados.

DETERMINACIN DE LDL
Seguir la frmula:
LDL = colesterol total HDL trigliceridos/5
LDL= 236.8- 41.2- 41.2
LDL =154.4 mg%

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 III. CUESTIONARIO

Seale y comente que factores resultan de riesgo para los niveles

de los diferentes tipos de colesterol en la sangre.

Colesterol y Diabetes. La diabetes (tipo I y tipo II) puede aumentar las

cifras de colesterol. De hecho, los niveles de colesterol deseables en
los diabticos son ms bajos que en la poblacin general.
Colesterol y Obesidad. Los pacientes obesos suelen tener
hipertrigliceridemia y un nivel bajo de HDL (colesterol bueno). Bajar de
peso produce un aumento de los niveles de HDL, una reduccin de los
niveles de triglicridos, mejor tolerancia a la glucosa, disminucin de
los niveles de insulina y cido rico, y descenso de la tensin arterial.
Colesterol y Sedentarismo. El ejercicio es una de las
recomendaciones generales para el tratamiento y la prevencin de la
hipercolesterolemia. Entre las consecuencias positivas del ejercicio
fsico sobre el organismo destaca la mejora de la capacidad pulmonar,
del sistema cardiovascular y de los niveles de colesterol y de tensin
arterial.
Colesterol y Alcohol. El consumo excesivo de alcohol causa
hipertrigliceridemia.
Cuando el nivel de colesterol en sangre es superior al normal se habla
de hipercolesterolemia y puede deberse, entre otros factores, a la
ingestin excesiva de cidos grasos saturados que inhiben la sntesis
de los receptores o disminuyen su afinidad para las LDL, de modo que
el colesterol no puede ser captado por los receptores celulares y
permanece en sangre.

Aunque el contenido de colesterol en la dieta es capaz de producir

modificaciones en las concentraciones de colesterol total y LDL, existe
una gran variabilidad ente las personas en su respuesta al aumento de
la ingesta de colesterol en la dieta y algunos autores consideran que
podra estar determinada genticamente.

Recomendaciones tcnicas y dietticas sugiere para controlar

el nivel de colesterolemia.

Dieta y estilos de vida

Una dieta adecuada y un estilo de vida saludable (no fumar y mantener
un nivel de actividad fsica acorde con la edad y la condicin fsica de la
persona) pueden reducir el riesgo de enfermedad coronaria. Por ello, es
deseable que la poblacin adopte dichos hbitos, de modo global y, en
especial, aquellos grupos de personas con mayor riesgo de sufrir
aterosclerosis, como son los fumadores, hipercolesterolmicos, obesos,

pg. 10
 diabticos, hipertensos, sedentarios y los familiares de enfermos con
cardiopata isqumica precoz.

Recomendaciones dietticas
Se debe recomendar una dieta equilibrada, con el aporte conveniente de
caloras para conseguir un peso adecuado (un ndice de masa corporal
entre 20 y 25, cuando es superior a 25 se considera sobrepeso y si es
superior a 30 se califica de obesidad). Es conveniente establecer una
reduccin ponderal pactada con el paciente, lo que le ayudar a alcanzar
el objetivo propuesto. Puede ser razonable alcanzar una prdida semanal
de 0,5 kg, para lo que se necesita conseguir un balance energtico
negativo de 500 kcal/da. Para ello es de especial utilidad el aumento de
la actividad fsica.

Actividad fsica
La actividad fsica aerbica tiene efectos beneficiosos sobre el peso
corporal, la presin arterial, los lpidos plasmticos (elevacin de la
concentracin plasmtica del cHDL)

Qu factores tienen influencia sobre el nivel de colesterol

sanguneo?

Un nivel alto de colesterol puede ser la consecuencia de: inactividad fsica,

mala dieta, obesidad, edad, sexo y herencia gentica.
Un ritmo de vida sedentario, una dieta poco saludable y la obesidad son en
nuestro tiempo las causas ms comunes de padecer colesterol. Esto
conlleva enfermedades del corazn e infartos. La mayora de la poblacin
sufre de problemas de peso debido a una dieta inapropiada (demasiadas
grasas saturadas, carbohidratos y sal) y falta de ejercicio fsico. Para
prevenir el desarrollo de complicaciones a los pacientes con sobrepeso se
les recomienda que practiquen algn deporte o hagan algo de ejercicio, as
como una dieta sana.
La edad y el sexo son otros factores a considerar. Aunque las personas
pueden presentar un alto nivel de colesterol a cualquier edad, los niveles
aumentan gradualmente con la edad. Aunque el infarto es ms comn en
los hombres, las mujeres tambin pueden padecer enfermedades
coronarias, aunque raramente desarrollan algn problema antes de la
menopausia.
La herencia gentica es otro factor importantsimo que contribuye a tener
problemas de. Las personas afectadas a problemas de colesterol por
disfunciones genticas es debido a que o bien producen excesivas
cantidades de esta sustancia o no son capaces de eliminarla
correctamente. Bajo estas premisas, los niveles de colesterol son muy
difciles de controlar. Las personas con niveles altos de colesterol que
tienen antecedentes de un familiar con enfermedad del corazn deberan
complementar su medicacin con una dieta adecuada y ejercicio fsico
regular. As evitamos complicaciones.

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 Utilidad del colesterol sanguneo

Precursor de todos los dems esteroides corporales.

Se encuentra formando parte de membranas celulares,
lipoprotenas, cidos biliares y hormonas esteroideas.
El colesterol es un importante constituyente de los clculos biliares,
pero su principal funcin patolgica, lo constituye la produccin de
aterosclerosis de arterias vitales, causando enfermedad coronaria,
cerebrovascular y vascular perifrica.
Tambin es productor de la glucosa, el glucgeno, los cuales son de
suma importancia para la supervivencia de los seres humanos.

IV. Bibliografa

http://es.familydoctor.org/familydoctor/es/diseases-conditions/coronary-
artery-disease.html

http://www.lablih.net/20/informacion-medica/846-sabes-que-importancia-
tiene-tu-perfil-lipidico.html

http://kidshealth.org/parent/en_espanol/medicos/blood_test_lipid_panel_
esp.html#a_Qu_eacute__es

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