El desarrollo de la prctica se centr en el desenvolvimiento de la reaccin de la
accin cataltica de una enzima y un catalizador inorgnico, en la medicin de la actividad cataltica y la influencia de un inhibidor en el proceso de catlisis. En la parte experimental primero separamos tres tubos con diferentes muestras, como se presenta acontinuacin: Tubo # 1: 3 ml de sangre al 1% Tubo #2: Una porcin de papa que fue previamente triturada Tubo #3: Una pequea porcin del que ser nuestro catalizador inorgnico MnO2 (Dixido de Manganeso) Sometimos las pruebas a varios factores, como lo fueron fsicos (temperatura) y qumicos (concentracin enzimtica, sustrato y resistencia a inhibidores): A. Se les administr 2ml de H2O2 al 3%(Perxido de Hidrogeno) a los tres primeros tubos de ensayo, los cuales fueron llevados a bao de mara a una temperatura de 37C durante 5 minutos, posteriormente se observ lo siguiente:
El tubo de ensayo que tena sangre present una reaccin de alta
intensidad, puesto que la liberacin de oxigeno (O2) y de calor que es producto de la degradacin del H2O2 (Perxido de Hidrogeno) fue en gran cantidad, tambin cabe agregar un hecho curioso y es que el color que adquiri la sangre al 1% al someterse a bao de mara fue traslucido. Del tubo que contena la papa se puede decir que la reaccin se present y que la temperatura n la que se dio la reaccin es favorable puesto que presenta buena cantidad de burbujeo y liberacin de energa. En el tubo con nuestro catalizador inorgnico MnO2 , la reaccin se presenta sin que haya una interferencia en la continuidad del proceso cataltico por parte del factor fsico al que fue sometido.
B. Tres nuevas muestras fueron sometidas a bao de mara en punto de
ebullicin durante 10 minutos, posteriormente fueron llevados a bao de mara a una temperatura de 37C y se procedi a administrarles 2ml de H2O2 (Perxido de Hidrogeno) a cada uno, los resultados fueron los siguientes: En el tubo de ensayo que contena la sangre la reaccin se presenta pero en menor medida si se compara con el primer procedimiento; hay poco burbujeo y la liberacin de calor fue mnima, es decir que se obtuvieron pocos productos de la degradacin del Perxido de hidrogeno; y nuevamente la sangre adquiri un tono transparente. En la papa tambin se observ poco burbujeo y liberacin de energa adems de una reaccin lenta al igual que con la sangre. En el tubo que contena MnO2, se observ una reaccin favorable, la actividad cataltica se dio de manera rpida al someter al tubo de ensayo al bao de mara en ebullicin, se obtuvieron ms productos de la degradacin del perxido de hidrogeno en comparacin con las reacciones anteriores. C. Se tomaron tres nuevas muestras que se sometieron a bao frio cuya temperatura oscilaba entre [9C y 10C] durante 10 minutos y se procedi a administrarles 2ml de H2O2 (Perxido de Hidrogeno) a cada uno, se observaron los siguientes resultados:
El tubo de ensayo que contena los 3 ml de sangre al 1% present una
reaccin lenta en comparacin a los que fueron sometidos a bao de mara, en el bao frio se produjeron pocos productos de degradacin del perxido de hidrogeno y el color de la sangre en el producto final no fue traslucido, sino de un tono rosa. En la papa se observ poco burbujeo y poca liberacin de calor, entonces se puede decir que la reaccin tambin fue lenta. En el tubo de ensayo que tena dixido de manganeso la reaccin no se dio en condiciones favorables puesto que hubo pocos productos de la degradacin del H2O2. D. Tres nuevas muestras fueron tomadas y a cada una se les administr 5 gotas de NaCN (Cianuro de sodio), posteriormente se les agreg 2ml de H2O2 y fueron llevados a bao de mara a una temperatura de 37C, estos fueron los resultados: En el tubo con la sangre, la reaccin no se dio al inicio, pero pasado un tiempo en el que el efecto del inhibidor desapareci, sta se present, aunque fue en menor medida que los experimentos iniciales. La reaccin en el tubo con la papa no se produjo inicialmente, fue pasado un tiempo que empez a darse de manera lenta, se puede decir que la reaccin es escasa y limitada en relacin a la presentada en la catalasa de la sangre, la accin de la catalasa presente en la papa bajo los efectos del inhibidor son mucho ms desfavorables y no se obtiene gran cantidad del producto. En el tubo de ensayo que contena dixido de manganeso la reaccin empez a darse pero se tuvo inmediatamente por la presencia del inhibidor NaCN, el cual fue un factor qumico que da la estructura de nuestro catalizador inorgnico y no permiti la continuidad en el proceso de catlisis.