Chromatographie Liquide de Haute Performance (HPLC)

ChromatographieLiquidedeHaute
Performance(HPLC)
ParSushaCheriyedath,GCS

LachromatographieliquidedeHauteperformance(HPLC)estdevenueune
sparationetunemthodeanalytiquetrsversatilesetpuissantesaucours
desannes.C'estuneformeavancedelachromatographieliquide(LC).

Aulieud'introduirelesolvantenflauetdeluipermettredes'goutterversle
bassousl'influencedelagravit,danslaCLHPl'chantillonestobligatoirepar
leflausousdeshautespressionsdepresque400atmosphres,ayantpour
rsultatunesparationplusrapideetplusefficace.

Cettetechniqueestgalementchromatographieliquidehautepression
appele.

LePrincipedelaCLHP
LaCLHPsuitlemmeprincipefondamentalquelachromatographie.Les
Diffrentscomposantsdansl'chantillonontdesaffinitsvariablesaumatriau
adsorbant.Cecientraneunediffrencedansledbitpourchaquecomposant
quimneleursparationpendantqu'ilssortentduflau.Laseulediffrence
estquelavitesseetlasensibilitdelaCLHPestbeaucoupplusleveque
celleduLCdl'applicationd'unehautepression.

L'importancedepressionappliquedpenddeplusieursfacteurstelsquela
longueuretlediamtreduflau,ledbit,latailledesparticulespendantla
phasestationnaire,etlacompositionenphasemobile.

LesComposantsdelaCLHP
Flaux:DesflauxdeCLHPsontnormalementfaitsd'acierinoxydableetsont
50300mmlongtempsavecundiamtreinternede25mm.Ilssontremplis
d'adsorbants(phasestationnaire)deladimensionparticulaire310m.

InjecteurTmoin:L'chantillonestinjectenflauparuninjecteurquiest
capabledetraiterdesvolumestmoindel'ordrede0,1100mLsousdes

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hautespressionsdejusqu'4000psi.

Rservoir:Lesolvantoulaphasemobileestmisdansunrservoirenverre.
C'esthabituellementunmlangedeliquidespolairesetnonpolairesdontles
concentrationsdpendentdelacompositiontmoin.

Pompe:Lesolvantdanslaphasemobileestaspirparunepompedu
rservoiretforcparleflaudeCLHPetpuisledtecteur.

Dtecteur:LedtecteurdansunsystmedeCLHPestsitul'extrmitdu
flauetiltrouvelescomposantsdel'chantillonquis'luentduflau.
Diffrentstypesdedtecteurstelsquelesdtecteursdefluorescence,masse
spectromtriques,UVspectroscopiques,etlectrochimiquessontutiliss.

SystmesdeCollectedesinformations:Lesignedudtecteurestreupar
lesenregistreursquisontutilisspourtraiter,enregistrer,etreproduiredes
donneschromatographiques.Lesdonnessontinterprtesetintgrespar
unordinateurquiproduitunchromatographeconvivial.

LaTechniquedelaCLHP
LesphasesprincipalesdanslatechniquedesparationdeCLHPsontcomme
suit:

Injectiondel'chantillonliquideenflaucontenantlaphasestationnaire.
Diffrentscomposantstmoinsontforcsenbasdutubeparhaute
pressiondelapompe.
DesComposantssontsparssousl'influenced'interactions
chimiques/matriellesvariesaveclesparticulespendantlaphase
stationnaire.
Lesanalytessparessontrecensesparledtecteuractuell'extrmit
duflau.
Ledtecteurmesurelaconcentrationdescomposants.
DesDonnesdudtecteursonttraitesetunchromatogrammeest
produit.

LesApplicationsdelaCLHP
LaCLHPesttrsutilisedanslesapplicationssuivantes:

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AnalysequalitativeSparationdeproduitchimiquethermiquement
instableetdecompossbiologiques,parexemple,mdicaments(aspirin
etibuprofne),sels(chloruredesodium),protines(blancd'oeufou
sang),produitschimiquesorganiques(polystyrneetpolythylne),
phytothrapiesetextraitsdecentrale.
AnalysequantitativePourdterminerlaconcentrationd'uncompos
dansunchantillonenmesurantlahauteuretlazonedelacrte
chromatographique.
Prparationdessubstancespurespourcliniqueetdestudes
toxicologiquesetdanslasynthseorganique.C'estgalement
chromatographieprparatoireappele.
AnalysedeTracec'estl'analysedescompossactuelsdansdes
concentrationstrsfaiblesdansunchantillon.C'esttrsutiledans
pharmaceutique,latoxicologie,ambiants,etdestudesbiologiques.

RvisparAfsanehKhetrapal,BSC(Chris)

Rfrences
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1837629/pdf/bmj00251
0037.pdf
http://polymer.ustc.edu.cn/xwxx_20/xw/201109/P02011090626309
7048536.pdf
http://chemwiki.ucdavis.edu/Core/Analytical_Chemistry/Instru
mental_Analysis/Chromatography/High_performance_liquid_chrom
atography
http://laboratoryinfo.com/hplc/

[DavantagedeRelev:Chromatographie]

LastUpdated:Aug18,2016

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