Titulo IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS

Resumen

Introduccin con objetivo

Los hidratos de carbono son las biomolculas ms abundantes de la naturaleza. La mayora de los
hidratos de carbono contienen carbono, hidrgeno y oxgeno con una proporcin (CH2O)n", de aqu
el nombre de hidrato de carbono. Se han adaptado a una amplia diversidad de funciones biolgicas,
como fuentes de energa (p. ej., glucosa), elementos estructurales (p. ej., celulosa y quitina en los
vegetales e insectos, respectivamente) y precursores de la produccin de otras biomolculas (p. ej.,
aminocidos, lpidos, purinas y pirimidinas). Los hidratos de carbono se clasifican en monosacridos,
disacridos, oligosacridos y polisacridos, de acuerdo con el nmero de unidades de azcar sencillo
que contienen. (Mackee & Mackee, 2003).

Los monosacridos o azcares sencillos son polihidroxi aldehdos o cetonas. Los monosacridos con
un grupo funcional aldehdo se denominan aldosas, mientras que los que tienen un grupo ceto se
denominan cetosas. A menudo se describen con nombres como aldohexosas y cetopentosas, que
combinan la informacin sobre el nmero de tomos de carbono y los grupos funcionales. Por
ejemplo, la glucosa, un azcar de seis carbonos que contiene un aldehdo, se denomina aldohexosa.
Los monosacridos ms importantes son: glucosa, fructosa y galactosa. (Mackee & Mackee, 2003).

Los monosacridos son los azcares que no se pueden hidrolizar hacia carbohidratos ms simples.
Tambin pueden clasificarse como triosas, tetrosas, pentosas, hexosas o heptosas, dependiendo del
nmero de tomos de carbono. Los monosacridos ms abundantes en las clulas son las pentosas
y las hexosas. (Murray, 2009).

Cuando los monosacridos estn unidos mediante enlaces glucosricos, los monosacridos forman
varias molculas que realizan diversas funciones biolgicas. Los disacridos son glucsidos formados
por dos monosacridos, los ms importantes son: sacarosa, lactosa y maltosa. (Mackee & Mackee,
2003).

Azcares reductores y no reductores

Como los monosacridos y la mayor parte de los disacridos son hemiacetales y en consecuencia
contienen un grupo carbonilo reactivo, se oxidan con facilidad y forman productos diversos,
propiedad que se usa con frecuencia para analizarlos. Esos carbohidratos, incluyendo glucosa,
maltosa, celobiosa y lactosa, se llaman a veces azcares reductores.
Los azcares reductores se detectaban por su capacidad de reducir iones metlicos, como Ag y
formar productos insolubles. Los carbohidratos que son acetales, como la sacarosa, no se oxidan
con facilidad, porque ambos tomos de carbono anomricos estn fijos en un enlace glicosdico. Se
clasifican como azcares no reductores.
La capacidad reductora de un azcar polmero tiene inters ms que analtico. Las cadenas
polimricas de los oligosacridos y polisacridos tienen direccionalidad, con base en sus extremos
reductores y no reductores. En un polmero lineal suele haber un extremo reductor (el residuo que
contiene al carbono anomrico libre) y un extremo no reductor. Todos los enlaces glicosdicos
internos de un polisacrido contienen acetales.
Los residuos internos no estn en equilibrio con las formas de cadena abierta, por lo que no pueden
reducir iones metlicos. Un polisacrido ramificado tiene varios extremos no reductores, pero slo
un extremo reductor.
Las estructuras ramificadas de la amilopectina y el glucgeno slo poseen un extremo reductor,
pero muchos extremos no reductores. Es en esos extremos no reductores donde se efecta la
prolongacin y la degradacin enzimticas. (Horton, 2008).

El trmino oligosacrido se utiliza para polmeros de azcares relativamente pequeos que constan
de dos a diez o ms unidades de monosacrido, casi ninguno es digerido por las enzimas del ser
humano. (Mackee & Mackee, 2003).

Las molculas de polisacridos se utilizan como formas de almacenamiento de energa o como

materiales estructurales. Estn formadas por un gran nmero de unidades de monosacrido unidos
por enlaces glucosdicos. La mayora de los polisacridos comunes son molculas grandes que
contienen desde cientos hasta miles de unidades de azcar. Estas molculas pueden tener una
estructura lineal, como la de la celulosa o la amilosa, o pueden tener formas ramificadas, como las
que se encuentran en el glucgeno y la amilopectina. (Mackee & Mackee, 2003).
200 220

Los polisacridos, en contraste con las protenas y los cidos nucleicos, forman polmeros lineales y
ramificados. 273 Por esa razn los enlaces glucosdicos pueden establecerse con cualquiera de los
grupos hidroxilo del monosacrido. (voet & voet, 2006).

FUNDAMENTO DE LAS PRUEBAS REALIZADAS

Ensayo de Molish: Este es un ensayo para reconocimiento general de carbohidratos en el que los
polisacridos y disacridos se hidrolizan con cido sulfrico concentrado hasta monosacridos y se
convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales reaccionan con -naftol
formando un color prpura violeta en el sitio de contacto de los dos lquidos.

El ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de los
aldehdos. ste se oxida a cido carboxlico y reduce la sal de cobre en medio alcalino a xido de
cobre, formando un precipitado de color rojo. Esta reaccin se produce en medio alcalino fuerte,
por lo que algunos compuestos no reductores como la fructosa que contiene un grupo cetona,
puede enolizarse a la forma aldehdo dando lugar a un falso positivo. Al reaccionar con
monosacridos se torna verdoso, y si lo hace con disacridos toma el color del ladrillo.

Ensayo con Lugol: El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y yoduro, permite
reconocer polisacridos, particularmente el almidn por la formacin de una coloracin azul-violeta
intensa y el glicgeno y las dextrinas por formacin de coloracin roja.

Ensayo de Seliwanoff: Este ensayo es especfico para cetosas que contengan 5 o ms tomos de
carbonos y se basa en la conversin de la cetosa en 5-hidro-metil-furfural y su posterior
condensacin con resorcinol formando as complejos coloreados. Es casi exclusivo para identificar
fructosa.

El objetivo de esta prctica es aplicar las distintas tcnicas de identificacin general y estructural de
carbohidratos.
Metodologa

Molish Molison: Se tom un tubo de ensayo y se coloc 1 mL de Lactosa. Despus, al carbohidrato

se le aadi 0.25 mL del reactivo de Molish, se mezcl y se agreg por las paredes (con mucho
cuidado y sin agitar) 1 mL de cido sulfrico concentrado. Finalmente, se realiz este mismo
procedimiento con los carbohidratos: glucosa, galactosa, sacarosa, almidn, amilopectina y
fructosa.
Reaccin de Fehling: Se tom un tubo de ensayo y se coloc 1 mL de Lactosa. Despus, al carbohidrato
se le aadi 1 mL de reactivo de Fehling (mezclando partes iguales de las soluciones Fehling A y Fehling
B), se mezcl y se calent a bao mara por 5 minutos. Finalmente, de igual manera se realiz este
mismo procedimiento con los carbohidratos: glucosa, galactosa, sacarosa, almidn, amilopectina y
fructosa.

Reaccin de Lugol: Se tom un tubo de ensaye con 1 mL de glucosa, se agito y se aadieron 5 gotas Lugol.
Despus, se repiti este mismo procedimiento utilizando almidn.

Reactivo de Selliwanoff: Se tom un tubo de ensaye y se coloc 1 mL de Lactosa. Despus, se aadieron

2 mL del reactivo Selliwanoff y se calent a bao mara por 5 minutos observando los cambios minuto a
minuto. Finalmente, se realiz este mismo procedimiento con los carbohidratos: glucosa, galactosa,
sacarosa, almidn, amilopectina y fructosa.

Resultados

Molish Molison:

Prueba Carbohidrato Color Resultado

Lactosa Rosa- +
Purpura
Molish Molison

Glucosa Rosa +
Galactosa Rosa Claro +
Sacarosa Rosa- +
Purpura
Almidn Rosa +
Amilopectina Rosa Claro +
Fructosa Rosa +
Reaccin de Fehling:

Prueba Carbohidrato Color Resultado

Lactosa Rojizo +
Glucosa Naranja +
Galactosa Amarillo +
Sacarosa Azul -
Fehling

Almidn Rojizo +
Amilopectina Azul -
Fructosa Rojizo +
*vir antes
de ser
calentado*
Reaccin de Lugol:

Prueba Carbohidrato Color Resultado

Lugol Glucosa Amarillo -
Almidn Caf +
Reactivo de Selliwanoff:

Prueba Carbohidrato Color Resultado

Lactosa No hubo -
cambios,
quedndose
Cristalino
Glucosa No hubo -
cambios,
quedndose
Cristalino
Galactosa No hubo -
cambios,
quedndose
Cristalino
Selliwanoff

Sacarosa Vir a los 5 +

minutos a
rosa tenue
Almidn No hubo -
cambios,
quedndose
Cristalino
Amilopectina No hubo -
cambios,
quedndose
Cristalino
Fructosa Vir a los 3 +
minutos a
rosa tenue
Discusin

Ensayo de Molish: Este ensayo es un ensayo para reconocimiento general de carbohidratos en el

que los polisacridos y disacridos se hidrolizan con cido sulfrico concentrado hasta
monosacridos y se convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales
reaccionan con -naftol formando un color prpura violeta en el sitio de contacto de los dos
lquidos.

Prueba Carbohidrato Color Resultado

Lactosa Rosa- +
Purpura
Molish Molison

Glucosa Rosa +
Galactosa Rosa Claro +
Sacarosa Rosa- +
Purpura
Almidn Rosa +
Amilopectina Rosa Claro +
Fructosa Rosa +

En el ensayo de mOLISH

Concusin

Bibliografa

Mackee, T & Mackee J 2003 Biouqimica: a base molecular de la vida (3era ed) McGraw Hill
interamericana Espaa

Murray, R, (2009)Harper. Bioquimcia ilustrada 281 ed Mexico McGraw Hill education, pag. 275

Horton, H. 2008 Principios de bioqumica 4ta ed Mexico: Pearson education, pag (236 y 239)

Voet, D. & Voet J. (2006). Bioqumica. (3era ed.). Buenos aires: Mdica panamericana
Tadeo, J. (s.f). GUA No 7: RECONOCIMIENTO Y DIFERENCIACIN DE CARBOHIDRATOS. 22 de Agosto
del 2017, de Universidad de Bogot Sitio web:
http://avalon.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/organica/guia_7_carbohi
dratos.pdf

POLISACRIDOS RAMIFICADOS, este amigas, es un extra:c

Los polisacridos ramificados (amilopectina, glucgeno) son ms solubles que los lineales
perfectos, puesto que disminuyen las interacciones intercatenarias y se facilita por tanto la
solvatacin. La disoluciones que contienen este tipo de polisacridos son fcilmente rehidratables
despus de desecadas. Por otra parte, a igual peso molecular y concentracin, las disoluciones de
estos polisacridos tienen una viscosidad menor que las de los lineales. La razn para ello hay que
buscarla en el hecho de que la viscosidad depende en general del "volumen efectivo", es decir, del
volumen de una esfera cuyo dimetro fuera igual a la longitud mxima de la molcula estirada. Este
volumen es siempre, en lneas generales, mayor en las molculas lineales que en las ramificadas
para un mismo peso molecular.

Existen excepciones, no obstante, en el caso de molculas lineales fuertemente plegadas. La

tendencia a la precipitacin de este grupo de polisacridos es pequea. A altas concentraciones
tienden a formar pastas pegajosas, probablemente por interacciones (entrelazamientos) entre las
cadenas laterales. Estos compuestos se utilizan por ello como adhesivos.
http://lem1polisacaridosyproteinas.blogspot.mx/2014/02/c-polisacaridos-ramificados.html

http://www.medicina.uat.edu.mx/bioquimica/quimicach/ALDOSAS_y_CETOSAS.htm

Todos los disacridos son azcares reductores (excepto la Sacarosa), ya que al menos tienen un -
OH hemiacetlico libre (grupo -OH adyancente al enlace del oxigeno), por lo que dan positivo a la
reaccin con reactivo de Fehling, a la reaccin con reactivo de Tollens, a la Reaccin de Maillard y
la Reaccin de Benedict. Otras formas de decir que son reductores es decir que presentan
equilibrio con la forma abierta, presentan mutarrotacin(cambio espontneo entre las dos formas
cicladas (alfa) y (beta)), o decir que forma osazonas.
https://es.wikipedia.org/wiki/Az%C3%BAcar_reductor

http://bioquimicaii.foroblog.net/t25-que-es-un-azucar-reductor

http://bioquimicamarzo-julio.blogspot.mx/2014/06/prueba-de-fehling.html

http://www.revistasbolivianas.org.bo/pdf/raci/v41/v41_a02.pdf