UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE CHILE

FACULTAD TECNOLGICA
DEPARTAMENTO DE CIENCIA Y TECNOLOGA DE ALIMENTOS
INGENIERA DE ALIMENTOS

PRE INFORME: DETERMINACION DE

SALMONELLA Y SHIGELLA

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS II

Profesor : Laura Almendares

Ayudante : Flavia Ruiz
Fecha de Entrega : 05 de Septiembre del 2017
Nombre Integrante : Roco Fredes Valenzuela
INDICE

INTRODUCCION ........................................................................................................................ 1
Objetivo General: ............................................................................................................................ 1
Objetivos Especficos:.................................................................................................................... 1
REVISION BIBLIOGRAFICA ....................................................................................................... 2
Bacterias .......................................................................................................................................... 2
Medios de cultivos .......................................................................................................................... 7
Agares .................................................................................................................................................... 7
Caldos .................................................................................................................................................... 8
MATERIALES Y METODOS ....................................................................................................... 9
Materiales ........................................................................................................................................ 9
Reactivos y medios de cultivo ...................................................................................................... 9
Equipos ............................................................................................................................................ 9
DIAGRAMAS DE FLUJO............................................................................................................. 9
RESULTADOS.11-12

DISCUSION Y CONCLUSION..13-17

BIBLIOGRAFIA......18
INTRODUCCION

Las bacterias son microorganismos unicelulares relativamente simples, dado que su material
gentico no est encerrado por una membrana nuclear especial. Las clulas bacterianas se
denominan procariontes (Tortora, Funke y Case, 2007). Son los microrganismos ms abundantes
del planeta, se encuentran en todo hbitat de la tierra, creciendo en el suelo, en manantiales
calientes y cidos, en desechos radioactivos y en las profundidades del mar. En el planeta se
encuentran bacterias beneficiosas para los seres humanos, pero tambin patgenas transmitidas
por los alimentos o aguas contaminadas, como los gneros Salmonella y Shigella que se estudiaran
en el siguiente informe.

El gnero Salmonella pertenece a la familia Enterobacteriaceae. Es una bacteria anaerobia

facultativa, Gram negativa, tiene forma de bacilo y en su estructura posee flagelos. Son oxidasa
negativa, fermentan la glucosa y producen cido y gas. Una caracterstica importante de la
Salmonella es que la mayora de estas no fermentan la lactosa ni la sacarosa. Este gnero prolifera
en el intestino, hay algunas especies de esta familia que son patgenas para el ser humano
causando as una infeccin llamada Salmonelosis la cual se origina por va de transmisiones fecal-
oral a travs de alimentos y agua contaminada (Anmat, 2011). Salmonella se encuentra en
diferentes productos como los de pollo, aves, pavo, huevo, etc.

Por otra parte, Shigella, es una bacteria que tiene caractersticas similares a la Salmonella, ya que
pertenece a la misma familia, es Gram negativa y tiene forma bacilar, pero no tiene en su estructura
flagelos y son aerobios - anaerobios facultativos. Se caracteriza por no fermentar la lactosa, ser
inmvil y pocas veces produce gas a partir de hidratos de carbono. En los seres humanos puede
provocar la enfermedad llamada Shigelosis, donde uno de los primeros sntomas que se ve es la
disentera (diarrea con sangre).Shigella se encuentra mayoritariamente en las frutas y verduras
crudas.

Los mtodos para detectar ambas bacterias, dependen de las caractersticas de cada una, del
medio de cultivo, lo que implica el pre enriquecimiento y el enriquecimiento selectivo, seguidos de
los pasos de aislamiento y las pruebas de identificacin.

OBJETIVOS

Objetivo General:
- Investigar la presencia de Salmonella y Shigella en muestras de alimento.

Objetivos Especficos:

Conocer las caractersticas de Salmonella y Shigella en los alimentos.

Conocer las caractersticas de Salmonella y Shigella en diferentes medios de cultivo.
Observar y diferenciar las colonias que se encuentren en los medios de cultivos analizar.

1
REVISION BIBLIOGRAFICA

Bacterias
Salmonella:

El gnero Salmonella, pertenece a la familia Enterobacteriaceae. La Salmonella es un bacilo Gram

negativo no esporulados. Son bacterias de respiracin anaerobia facultativa que se caracteriza por
ser oxidasa negativa. Mayoritariamente son bacterias mviles en presencia de abundantes flagelos
pertricos. (C. Faura, E. Arosemena, M. Calvo, L. Manteca, M. Martin, G. Ordoez, F. Ponsa, M.
Pontes, E. Rodrguez y D. Zekaria) Como se puede observar en la figura 1.

La Salmonella tiene una tasa de crecimiento o tasa de divisin de 40 minutos. Esta prefiere crecer
a 37C, pero tiene la capacidad de crecer en una amplia gama de temperaturas entre los 6 a 46 C.
(A. Brands, 2006), su pH ptimo de crecimiento es de 7 7,5 y su actividad de agua optima es de
0,99 (Elika).

Existen muchos tipos de Salmonella como; S. entrica, S.choleraesuis, S. enteritidis, S. paratyphi,

S. typhi, S, Borogi, S. typhimurium y S. arizonae, las diversas formas de Salmonella que pueden
infectar a las personas se denominan serotipos, estos estn estrechamente relacionados ya que
comparten ciertas caractersticas estructurales (A. Brands, 2006). Se han descrito ms de 2.500
serotipos de Salmonella que muestran una gran adaptacin para el crecimiento en el hombre y los
animales. Los serotipos ms importantes desde el punto de vista de la Seguridad Alimentaria son
Enteritidis principalmente asociado al consumo de huevos o carne de pollos contaminados y
S.Typhimurium siendo las principales fuentes de infeccin el ganado vacuno y porcino, aunque
tambin se asla en aves, y ganado ovino y caprino (Elika).

Su estructura antignica cuenta con la presencia de dos clases de antgenos: Antgeno (H)
flagelares y los antgenos (O) somticos. En algunas cepas se encuentran un antgeno de superficie
conocido como K (capsulares), al estar este antgeno relacionado con la virulencia de las cepas se
le denomina antgeno VI (Koneman y Allen,1999) que se relacionan con invasividad.

- Antgeno (O): Se encuentran en la pared de la bacteria. Estos son en su mayora

polisacridos .En cada clula bacteriana existen varios determinantes antignicos que hacen
que la pared se vea como un mosaico. (R. Cabello, 2007).
- Antgeno (H): Son los que se encuentran en los flagelos de las bacterias que poseen estos
organelos. Estos antgenos son de naturaleza proteica y en algunas ocasiones se pueden
distinguir antgenos en fase I y en fase II. (R. Cabello, 2007).
- Antgeno (K): Son los que se encuentran en la capsula de aquellas que bacterias que pueden
formar macrocpsula, microcpsula o capa mucilaginosa. Generalmente estos antgenos
estn formados por polisacridos. (R. Cabello, 2007).

2
La salmonelosis es una enfermedad transmitida de animales a humanos, de origen alimentaria, es
decir, se transmite a los humanos a travs del consumo de los productos alimenticios derivados de
los animales contaminados con Salmonella. La Salmonella es la causa mayoritaria de brotes de
toxiinfecciones alimentarias y de cuadros gastrointestinales. Por lo general, esta enfermedad suele
producir diarrea, dolor abdominal y fiebre, aunque tambin puede venir acompaada de dolor de
cabeza, nuseas y vmitos (Elika).

Los microorganismos del genero salmonella son bacterias ubicuas, siendo su principal reservorio el
intestino de los animales homeotermos y poiquilotermo. A pesar de no disponer estructuras de
resistencias, manifiestan una elevada capacidad de supervivencia en el medio ambiente. Mantienen
su viabilidad y capacidad infectiva durante varias semanas en el agua y suelos. Asimismo son
capaces de infectar al hombre y a los animales que pueden persistir como portadores de un largo
periodo de tiempo (C. Faura, E. Arosemena, M. Calvo, L. Manteca, M. Martin, G. Ordoez, F.
Ponsa, M. Pontes, E. Rodrguez y D. Zekaria).

3
 Figura 1. Imagen de Salmonella

Figura 2. Infogramas riesgos- Salmonella (Elika).

4
 Shigella:

Pertenece a la familia Enterobacteriaceae, es un bacilo de 1 a 3 micras por 0,6 micras, Gram

negativo, que se presenta solo o en pareja, inmvil, no capsulado y no forma esporas. No produce
cido sulfhdrico, ni desdoblan la urea, reducen los nitratos a nitritos, Voges- Proskauer negativo,
citrato negativo, lactosa negativo. Son fermentadores de la glucosa con produccin de cido pero
no de gas. Tambin son aerobios o anaerobios facultativos, con temperatura optima de crecimiento
de 37C, y pH de 7,6 a 7,8. Tiene cuatro especies: dysenteriae (Serogrupo A, 13 serotipos), flexneri
(Serogrupo B, 6 serotipos), boydii (Serogrupo C, 18 serotipos), y sonnei. (Serogrupo D, un serotipo),
cada serotipo est determinado por los lipopolisacridos de la pared celular (Antgeno O). Shigella
es un bacilo Gram negativo inmvil que no tiene flagelos y por lo tanto carece de antgenos H. (R.
Cabello, 2007). Las condiciones de supervivencia de la bacteria son muy sensible a condiciones
medioambientales y se destruye fcilmente, no sobrevive a tratamientos trmicos y no crece a
temperatura de refrigeracin (Elika).

La va de entrada es oral y los factores de patogenicidad principales incluyen la capacidad de

invasividad y la produccin de una exotoxina llamada toxina de Shiga. La cepa S. dysenteriae tipo
1 producen altos niveles de citotxica (toxina de Shiga). Shigella llega al colon y se une a receptores
de la superficie de las clulas, penetra y proliferan dentro de las clulas y lisa de la vacuola
fagocitica. La invasin y la lisis de la vacuola endoctica se refleja en la fijacin del Rojo Congo. La
hemolisis de la Shigella utiliza actina polimerizada dentro de las clulas invadidas para moverse
dentro de estas y diseminarse hacia las clulas vecinas (R. Cabello, 2007).

Un pequeo inoculo de Shigella es suficiente para producir la enfermedad conocida como shigelosis
caracterizada por sntomas generales como diarrea, fiebre, nauseas, vmitos y dolor abdominal,
pudiendo ser ms leve o grave dependiendo de las especies implicadas (Elika). Se disemina de
persona a persona en brotes y en alimentos contaminados como frutas y vegetales crudos, al igual
que el agua de beber y albercas, que se han encontrados brotes. La infeccin bacteriana ocasiona
cambios en el recto, coln y ocasionalmente, en el coln terminal. Macroscpicamente hay un
exudado mucupurulento con edema, hiperemia y friabilidad de la mucosa y tambin se puede
encontrar ulceraciones visibles. (R. Cabello, 2007).

5
 Figura 3. Imagen de Shigella

Figura 4. Infogramas riesgos- Shigella (Elika).

6
Medios de cultivos

Agares

Agar Salmonella Shigella (SS):

Es un medio altamente selectivo y diferencial. La inhibicin de las bacterias del grupo coliforme, se
logra con la mezcla se sales biliares, citrato de sodio, tiosulfato de sodio (agente quelante) y verde
brillante. Adems el medio tiene incorporado lactosa como nico carbohidrato y rojo neutro como
indicador de pH. Salmonella y Shigella no fermentan la lactosa y forman colonias translucidas o
incoloras; las bacterias fermentadoras de lactosa que logren crecer en el medio, forman colonias
rojizas y generalmente mucoides. Este medio tambin contiene sales de hierro como indicador para
detectar la produccin de sulfuro de hidrogeno, las bacterias que lo produzcan forman colonias con
un centro negro debido a la precipitacin de sulfuro frrico.

El agar se puede inocular con heces u otros materiales altamente contaminados.

Debido a que algunos componentes del medio pueden precipitar con el calentamiento, este medio
se prepara calentando hasta ebullicin por dos o tres minutos hasta su disolucin completa y no se
autoclava. Por esta razn se debe utilizar dentro de las primeras 24 o 48 horas de preparado, ya
que con el paso del tiempo se puede volver inhibitorio incluso para las bacterias antes mencionadas.
(E. Rodrguez, M. Gamboa, F. Hernndez y J. Garca, 2005)

Agar Sulfito Bismuto (SB):

Es un medio selectivo que se utiliza para aislar la bacteria Gram negativo que produce la fiebre
tifoidea, Salmonella typhi, de las heces. El sulfito de bismuto inhibe a las bacterias Gram positivas
y tambin a la mayor parte de las bacterias intestinales Gram negativos (distintas de S. typhi)
(Tortora, Funke y Case, 2007).

Agar Xilosa, Lisina y Desoxicolato (XLD):

Es selectivo y diferencial para las especies de Shigella y Salmonella. La sal, desoxicolato de sodio,
inhibe muchos bacilos Gram negativos que no son patgenos entricos y a los Gram positivos. El
indicador rojo fenol en el medio detecta el aumento de acidez causado por la fermentacin de los
hidratos de carbono. Los patgenos entricos, como las especies de Shigella, no fermentan estos
hidratos de carbono de modo que sus colonias permanecen incoloras (de color rosa o rojo similar
al medio sin sembrar). Las colonias de especies Salmonella tambin son incoloras en XLD debido
a la descarboxilacion de la lisina, que produce un aumento del pH que determina que el indicador
de pH vire al rojo. Estas colonias a menudo exhiben un centro negro como resultado de la
produccin de H2S por las especies de Salmonella. Varios de los microorganismos no patgenos
fermentan uno o ms de los azucares y producen colonias amarillas (A. Forbes, 2009).

Agar Verde Brillante Rojo fenol (BPL):

Medio de cultivo selectivo utilizado para el aislamiento de Salmonella en aguas y alimentos. Tiene
una fuerte concentracin de verde brillante, de manera que inhibe el crecimiento de la mayora de
microorganismos, excepto Salmonella (Allaert & Escol, 2015).

7
Caldos

Caldo Rappaport Vassiliadis (RV):

Es un medio de cultivo selectivo utilizado para el enriquecimiento de Salmonella en agua y

alimentos. Sus principios se basan en que el medio esta formulado basndose en cinco
caractersticas diferenciales de Salmonella respecto a otras enterobacterias, como la capacidad de
resistir altas presiones osmticas, capacidad de multiplicacin a pH relativamente bajos, son
relativamente ms resistentes a la presencia del verde malaquita, tienen relativamente menos
requerimientos nutricionales y la temperatura de incubacin es un factor selectivo (C. Vandevenne
y M. Escol, 2002).

Caldo Selenito Cistina (SC):

Es un medio de cultivo selectivo utilizado para el enriquecimiento de Salmonella en aguas y

alimentos. En los principios que se basa es que el selenito sdico inhibe el crecimiento de bacterias
intestinales, coliformes y enterococos, principalmente en las primeras 6 12 horas siguientes al
inicio de la incubacin. Despus, el efecto inhibidor disminuye lentamente. As, Salmonella, Proteus
y Pseudomonas no son inhibidos. La Cistina mejora sensiblemente el crecimiento de Salmonella
(C. Vandevenne y M. Escol, 2002).

Caldo Tetrationato (TT):

Medio de cultivo que junto con el tiosulfato excedente, inhibe de igual forma coliformes y otras
bacterias acompaantes, sin alterar las bacterias reductoras de tetrationato como salmonella sp. Y
Proteus sp.. Adicionalmente, las sales biliares que contiene inhiben considerablemente a todos los
microorganismos de presencia obligatoria en el intestino. (Palumbo y Alford, 1970)

8
MATERIALES Y METODOS

Materiales
Asas
Bistur
Esptulas
Gradillas
Matraz Erlenmeyer o frasco de 500 mL
Pipetas graduadas
Pinza metlica
Placa Petri
Rastrillo
Tubo de ensayo

Reactivos y medios de cultivo

Agar Salmonella Shigella (SS)
Agar Sulfito Bismuto (SB)
Agar Xilosa, Lisina Desoxicolato (XLD)
Agar Verde Brillante Rojo fenol (BPL)
Agua Peptonada Tamponada
Agua Peptonada Tamponada (0,1%)
Caldo Rappaport Vassiliadis (RV)
Caldo Selenito Cistina (SC)
Caldo Tetrationato (TT)
Solucin Novobiocina al 1%
Equipos
Balanza
Contador de colonia
Estufa de incubacin 35C y 42 C 1C y 43C 0,2C
Vortex

9
 DIAGRAMAS DE FLUJO
Determinacin de Salmonella:

Preenriquecimiento no selectivo

Pesar 25 o 50 gr de muestra

Proporcin muestra/ agua peptonada

Homogenizar con 225 o 450 mL de agua peptonada tamponada 1:9

Incubar el homogenizado a 35 1 C por 18 a 24 horas

Enriquecimiento selectivo
1) 1 mL a tubo con 10 mL con caldo Selenito Cistina
2) 1 mL a tubo con 10 mL con caldo Tetrationato
Transferir a 3) 0,1 mL a tubo con 10 mL con caldo Rappaport Vassiliadis

Incubar por 24 horas 1) Caldo Selenito Cistina a 35 1C

2) Caldo Tetrationato a 43 0,2C / 35 1C
3) Caldo Rappaport Vassiliadis a 42 1C
Aislamiento en agar selectivo

-SS
-SB
Extender por asada de cada uno de los caldos en la superficie de las placas con agar -XLD
-BPL

Incubar las placas a 35 1C por 24 a 48 horas

Observar en las placas la presencia de colonias sospechosas

-TSI
De cada placa seleccionar 2 o ms colonias e inocular cada una de ellas en -LIA
-MIO

Realizar pruebas bioqumicas

Confirmacin serolgica y prueba bioqumicas adicionales

Figura 5. Diagrama de flujo del procedimiento para la determinacin de Salmonella.

9
 Determinacin de Shigella:

Pre- Enriquecimiento

Pesa 25 gr

Adicionar a matraz con 225 de caldo de enriquecimiento para

Shigella con 0,5 ug/mL de Novobiocina

Homogenizar

Incubacin
-Anaerbicas O2<1%, con 9 al 13%
de CO2
Incubar el caldo Shigella en las siguientes condiciones
-Temperatura de 41,5 +/- 1C
durante 16 a 20 horas.

Siembra en placas y seleccin de colonias

Mezclar el contenido de los cultivos obtenidos

1) Agar Mac Conkey baja selectividad
Inocular mediante un asa las superficies de los siguientes agares 2) Agar XLD moderada selectividad

Incubacin

Incubar las placas a 37C durante 20 a 24 horas

Observar aspecto de las diferentes Shigellas 1) Agar Mac Conkey: Incoloro y transparente

2) Agar XLD: mismo color del medio y

(Variacin dependiendo del agar)
transparentes

Figura 6. Diagrama de flujo del procedimiento para la determinacin de Shigella.

10
 RESULTADOS

ANALISIS DE SALMONELLA

Rellene en la siguiente tabla, dependiendo de los siguientes parmetros:

S/C=Sin crecimiento
C/C= Crecimiento
SS SB XLD BPLS
SC TT RP SC TT RP SC TT RP SC TT RP
ALIMENTO
CARNE MOLIDA S/C S/C S/C S/C S/C S/C S/C S/C S/C S/C S/C S/C
GRUPO 1
ALIMENTO
CARNE MOLIDA S/C S/C S/C S/C S/C C/C S/C S/C S/C S/C S/C S/C
GRUPO 2
ALIMENTO
PANITA S/C S/C S/C S/C S/C C/C S/C S/C S/C S/C S/C S/C
GRUPO 1
ALIMENTO
PANITA S/C S/C S/C S/C S/C C/C S/C S/C S/C S/C S/C S/C
GRUPO 2

OBSERVACIONES: la mayora de los cultivos se encontraban contaminados con otras colonias.

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 ANALISIS DE SHIGELLA

Rellene en la siguiente tabla, dependiendo de los siguientes parmetros:

S/C=Sin crecimiento
C/C= Crecimiento
XLD
10-2 10-3
MUESTRA 1 C/C C/C

GRUPO 1 MUESTRA 2 C/C S/C

CARNE MOLIDA
MUESTRA 3 C/C S/C

MUESTRA 1 C/C S/C

GRUPO 2
MUESTRA 2 C/C C/C
CARNE MOLIDA

MUESTRA 3 C/C C/C

MUESTRA 1 C/C S/C

GRUPO 1
MUESTRA 2 C/C C/C
PANITA

MUESTRA 3 C/C C/C

MUESTRA 1 C/C C/C

GRUPO 2
MUESTRA 2 C/C S/C
PANITA

MUESTRA 3 C/C S/C

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 CONCLUSIONES Y DISCUSIONES

1. SALMONELLA

Para Salmonella se analizaron 4 agares distintos con 3 caldos diferentes, sembrados en cada uno
de ellos. Todo esto por duplicado, ya sea para carne molida o panita. Por lo tanto se obtuvieron 48
placas en total que fueron analizadas. En las cuales el crecimiento de Salmonella, tiene que ser el
siguiente:

- Agar Salmonella- Shigella: Todas las colonias que fermenten la lactosa tienden aparecer de
color rojo por el rojo neutro. El crecimiento de Salmonella aparecen colonias incoloras con
centros negros debido a la produccin de gas sulfuro de hidrogeno.(Winn y otros)
- Agar Sulfito Bismuto: Las colonias de Salmonella pueden sospecharse en este medio debido
a la tendencia a producir colonias con un brillo metlico negro (Elmer W.)
- Agar Xilosa, Lisina y Desoxicolato: Las colonias de Salmonella tambin son incoloras debido
a la descarboxilacin de la lisina, que produce un aumento en el pH que determina que el
indicador de pH vire al rojo. Estas colonias a menudo exhiben un centro negro como
resultado de la produccin de H2S por las especies de salmonella. Varios de los
microorganismos no patgenos fermentan uno o ms de los azucares y producen colonias
amarillas.(A. Forbes)
- Agar Verde Brillante Rojo fenol: Las colonias de Salmonella crecidas deben ser de color
rosado, rodeadas de un halo rojo, transparente ya que no fermenta la lactosa. Por el
contrario las bacterias fermentadoras de la lactosa forman colonias amarillo-
verdosas.(Pascual y Caldern)

Al analizar las muestras se pudo observar que en el nico medio de cultivo donde creci Salmonella,
fue en el Agar Sulfito Bismuto, con caldo de Rappaport Vassiliadis que dio positivo en 3 de las 4
muestras que se sembraron, esto se puede observar en la figura nmero 6 en la parte derecha, ya
que solo en esta se encuentra un precipitado negro y colonias con brillo metlico negro. SC Y TT
solo se observa un mnimo de precipitado negro, pero sin formar colonias metalizadas brillosas que
son especificas en este agar para Salmonella, segn bibliografa anteriormente mencionada.

En relacin con los dems agares se puede analizar que:

En los agares SS solo se encontraron colonias rosadas, sin ningn precipitado en el centro, estas
colonias rosadas o rojas segn Merck puede ser Escherichia coli. (Ver figura 5)

En la figura 7, se encuentra el agar XLD, en este se puede observar colonias de color amarillo,
rodeadas por zonas amarillas y zonas opacas. Por esta razn se puede decir que estn
contaminados con Serratia y Hafnia. (Merck, edicin 12)

Finalmente en los diferentes agares de BPLS las nicas colonias encontradas en todos los casos,
fueron de color amarillo, transparentes y en un medio de cultivo de color amarillo, distinto al inicial.
De acuerdo a esto las colonias contaminadas que se pueden encontrar en este tipo de agar, con
las caractersticas mencionadas son E. coli, Proteus vulgaris y Klebsiella. (Merck, edicin 12). ( Ver
figura 8)

13
Figura 5: Crecimiento de Salmonella en medio de cultivo SS.

Figura 6: Crecimiento de Salmonella en medio de cultivo SB.

14
Figura 7: Crecimiento de Salmonella en medio de cultivo XLD.

Figura 8: Crecimiento de Salmonella en medio de cultivo BPLS.

15
 2. SHIGELLA:

Se tuvieron 24 placas del Agar Xilosa Lisina Desoxicolato (XLD), 12 de ellas eran con muestras de
carne molida, siendo 6 diluidas a 10-2 y 6 a 10-3. La misma cantidad de muestra y de diluciones
para panita.

Lo esperado es que Shigella crezca como colonias transparentes y del mismo color que el medio
de cultivo. Esta bacteria, al no fermentar la xilosa, la lactosa, ni la sacarosa, no produce que vire
a amarillo el rojo fenol. Tampoco decarboxila la lisina, por lo que no se produce color rojo purpura
alrededor de las colonias, ya que no se produce cadaverina. (Pascual & Calderon, 2000).

Al analizar las muestras y comparar los resultados, se puede observar que todas las muestras ya
sea de panita o de carne molida en la dilucin de 10-2 obtuvieron crecimiento de Shigella, como se
observa en la figura numero 9. Estas colonias se pueden observar que son transparentes y del
mismo color que el medio de cultivo XLD rojo, que es lo que seala la bibliografa. Tambin se
presenta en algunas zonas un color amarillo que se debe a la degradacin de la xilosa, lactosa y
sacarosa virando el rojo-fenol del medio a amarillo, algunas colonias que se pudieron haber formado
son: Hafnia, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis(Merck, edicin 12).

En las siembras de dilucin 10-3 se pude observar en la (figura 10), que las muestras de carne
molida solo tres de ellas obtuvieron un crecimiento de Shigella. Y en panitas la misma cantidad de
placas con crecimiento. Nuevamente se observa una decoloracin amarilla, las colonias que
pudieron haber crecido fueron nombradas anteriormente por bibliografa.

Figura 9: Crecimiento de Shigella con dilucin de 10-2

16
 Figura 10: Crecimiento de Shigella con dilucin de 10-3

En conclusin, solo se logr observar el gnero Salmonella en el agar Sulfito Bismuto con el caldo
de Rappaport Vassiliadis, ya sea en las dos muestras de panita y una de carne molida. Por otra
parte Shigella se logr observar en todas las muestras de carne molida y panita con la dilucin
10-3 y en la dilucin 10-2 se lograron observar en los dos alimentos panita y carne molida pero en
menor cantidad de muestras 3 y 3 respectivamente, ya que se encontraban ms diluidas. Es
importante destacar que para verificar que las muestras sean verdaderamente Salmonella y
Shigella, es necesario realizar pruebas bioqumicas que las confirmen en los dos casos.

Finalmente, se puedo lograr conocer distintos medios de cultivos, como los caldos y agares
selectivos y/o diferenciales para Salmonella y Shigella. Los cuales dndonos distintos tipos de
colonias diferentes a las analizadas en este laboratorio. Pudimos conocer variedad de Bacterias y
su apariencia respectiva en cada uno de los cultivo, algunas de ellas fueron Hafnia, Serratia,
Proteus vulgaris, etc.

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 BIBLIOGRAFA

Tortora, G., Funke, B., & Case, C. (2007). En Introduccin a la Microbiologa (pg. 323).
Arosemena, E., Calvo, M., Manteca, L., Martin, M., Ordoez, G., Ponsa, F., . . . Zekaria, D.
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Allaert, C., & Escol, M. (2015). En Mtodos de anlisis microbiolgicos de los alimentos
(pgs. 182-184).
Danielle A. Brands. I Edward Alcamo (2006), Salmonella. (pg. 16)
A. Forbes (2009). Diagno0stico Microbiolgico. (pg. 100)

Romero Cabello, R. (2007). En Microbiologa y parasitologa humana (pgs. 773-779).

E. Rodrguez, M. Gamboa, F. Hernndez y J. Garca (2005). Bacteriologa general:
Principios y prcticas de laboratorio (pg. 134)
Corrie Allaert Vandevenne, Marta Escola Ribes (2002). Mtodos de anlisis
microbiolgicos de alimentos (pg. 182)
Palumbo, S y Alford, J (1970), Inhibitory action of tetrathionate enrichment broth. (Pgs.
970-976)
Koneman, E. y Allen, S. (1999) Diagnostico microbiolgico
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Sitio web:
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Agroalimentaria.
Sitio web:
https://dieteticaieselgetares.files.wordpress.com/2017/02/shigella.pdf
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Manual de Merck, edicin 12.

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