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BIOAEROSOLES POR METODOLOGA DE LA SEDIMENTACIN PASIVA

G. Prez-Prez, O. Plazas-Silva, M.L Torres-Quiroga, M. Torres-Quiroga, D. Hernndez-


Garca.
Profesor: Ing. Rubn Cantero. Grupo Jueves 4:30 Laboratorio de control de emisiones atmosfricas, Ingeniera
Ambiental, Facultad de Ciencias Ambientales, Universidad de la Costa
Gperez22@cuc.edu.co, Oplazas1@cuc.edu.co, Mtorres16@cuc.edu.co, Mtorres17@cuc.edu.co,
Dhernand21@cuc.edu.co
24 de febrero de 2017
RESUMEN
En el presente informe se realiz el muestreo e identificacin de los microrganismo, hongos y bacterias, identificadas como
Bioaerosoles, encontradas en un ambiente especifico; en este caso se tom como punto de referencia la cafetera principal de
la universidad de la costa, en la cual se llev a cabo en muestre en forma pasiva, mediante el posicionamiento de una caja
de Petri con contenido Pate Count, como medio de cultivo; al cual se dej expuesto al ambiente durante 10 minutos, para
ser posteriormente encubado y analizado. Adems, la determinacin de estos Bioaerosoles permite contemplar el tipo de
ambiente y la exposicin que se tiene a ellos en esta universidad, sin contar con la implicacin que de por si se tiene por el
sitio de muestreo.

Palabras clave: Bioaerosoles, muestreo pasivo, bacterias, hongos.

ABSTRACT
In this report was carried out sampling and identification of the microorganism, fungi and bacteria, identified as
Bioaerosols, were found in an environment particular; in this case is took as point of reference the cafeteria main of the
University of the coast, in which is led to out in sampled in form passive, through the positioning of a box of Petri with
content Pate Count, as half of crop; which he left exposed to the atmosphere for 10 minutes, to be subsequently encubado
and analyzed. Also, the determination of these Bioaerosols allows contemplate the type of environment and the exhibition
that is has to them in this University, without counting with the involvement that of if is has by the site of sampling.

Key words: Bioaerosols, passive sampling, bacteria, fungi.

1. METODOLOGIA 3. Se ubicaron en el sitio durante 10 minutos,


pasado ese tiempo se cerraron y se llevaron a
SEDIMENTACION incubacin durante 48 horas.

1. Se escogi el sitio donde se va a realizar el CARACTERIZACION MACROSCOPICA


muestreo (cafetera).
1. Se observaron las dos muestras, describiendo
2. Con la respectiva proteccin (guantes, gorro y detalladamente lo que se observaba a simple vista.
tapabocas) se toman dos cajas Petri.
CARACTERIZACION MICROSCOPICA que esta se convierte en componente de transito
pera esta tipo de seres, los cuales adems
1. Se flameo la placa donde se va ubicar la variaran en sus especies en funcin de un sinfn
muestra. de condiciones especficas mismas de cada
ecosistema o sitio geogrfico; donde se presentan
2. Se calent el aza de forma horizontal, se enfro variaciones en cuanto a la altura y presin, los
un poco el aza en el medio para luego raspar la nmeros de poblacin, las actividades llevadas a
muestra (con cuidado de no retirar el medio), cabo en esta y an ms importante la
teniendo la muestra se ubica en la placa y se contaminacin que se presenta, ya que esta ltima
flameo para secar la muestra. juega un papel fundamental en la dispersin y
concentracin de los microrganismos presentes en
3. Se agreg una gota de cristal violeta a la ella. [2]
muestra por 60 seg, se lav con agua destilada (no
directamente sobre la muestra); Por 60 seg se
agreg Lugol, se agreg acetona y por ltimo se
agreg fucsina por 60 seg y se enjuago con agua 3. MARCO TERICO
destilada y se espera un poco a que se sequen a En los ambientes exteriores e interiores se
temperatura ambiente. encuentra un gran nmero de partculas de
diferente origen, forma y tamao suspendidas en el
4. A la muestra de hongo se le aplico azul de aire, ellas constituyen el aerosol atmosfrico. Se
lactofenol, y se le coloco el cubre objetos. pueden clasificar de diferentes formas, teniendo en
cuenta el origen (biolgico, orgnico, inorgnico), la
5. Una vez listas, se les aplico una gota de aceite localizacin (marina, continental, rural, industrial,
de inmersin y se pasaron a observar al urbana) y el efecto que pueden causar sobre las
microscopio, para las bacterias con un objetivo de superficies en que se depositan (qumico, txico,
100 y para el hongo un objetivo de 40. patognico, degradativo). [3]
6. Se identificaron tanto las bacterias como el Dentro de las partculas de tipo biolgicas que se
hongo. encuentran en suspensin se encuentran especies
de microrganismos entre los cuales se pueden
encontrar, por lo que la atmosfera se considera
2. INTRODUCCION como un componente de transicin y transmisin
de dichos microrganismos ya que en la actualidad
no se ha indicado aun, que el aire contenga un
En la actualidad cada vez cobra una mayor grupo propio de microorganismos, sin embargo las
importancia la calidad del aire que se est condiciones ambientales y geogrficas generan
respirando, y an ms a fondo las implicaciones cambios en el aumento o disminucin del
mismas de dicha calidad si esta no se presentase aeroplancton. Es por esto que los microorganismos
en una forma positiva; teniendo en cuenta que por en el aire son un grupo alctono que vara con la
su composicin la atmosfera misma est altura y la temperatura dentro de la atmsfera. Los
constituida de vapores de agua, partculas de suelo valores ms altos de los microorganismos son los
y el mismo aire, esto permite pensar en esta como cercanos al suelo en especial los dos metros
un habitad mismo donde al igual que en los otros inferiores en donde se genera una interface,
componentes terrestres se desarrolla e interacta conocida como neuston, donde ocurre un
vida microscpica, destacando de ante mano el intercambio de aerosoles que se desprenden del
hecho de que se puede tomar a este como un suelo hacia el cenit areo, estos aerosoles
medio selectivo ya que por las mismas ya contienen diversos grupos de microorganismos que
mencionadas condiciones no toda clase de oscilan entre (101-104 UFC/m3) que disminuyen
microorganismos son capases de soportar las hasta los 200 metros y luego se tornan escasos a
adversidades de ella, por lo que se presenta como los 5000 metros, su presencia es rara en el lmite
sitio propicio para su dispersin la capa ms baja de la tropsfera y no se encuentran en la
de la atmosfera, es decir la troposfera. [1] estratsfera.[2]

Por otra parte se tiene en cuenta que de cierta Entre los tipos de microrganismos que se pueden
forma dichos microorganismos no son autctonos encontrar en la atmosfera se encuentran bacterias,
la atmosfera como tal si no que al ser esta, sino
esporas fngicas, algas, virus, protozoos, granos (por ejemplo, mohos y levaduras) se desarrollan
de polen, etc: bien en ambientes fros. Otras especies
microbianas (por ejemplo, Aspergillus sp,
En cuanto a los hongos estn considerados los Legionella pneumophilao
organismos de mayor importancia como agentes Thermoactinomycesvulgaris), alcanzan su
biodeteriorantes de la materia orgnica, pues desarrollo ptimo a temperaturas elevadas. Los
adems de producir enzimas extracelulares, ambientes muy hmedos favorecen el desarrollo
presentan estructuras somticas, llamadas hifas de los hongos, de las bacterias y de los caros del
(estructuras filiformes por las que circula el polvo domstico. El movimiento del aire contribuye
citoplasma plurinucleado), que ejercen presin al transporte, mantenimiento y paso al aire de los
mecnica sobre el soporte producindole contaminantes biolgicos procedentes del exterior
debilitamiento. La mayora de los hongos presentes o contenidos en un reservorio del interior. El grado
en los ambientes interiores son saprofticos, pues y tipo de luz tambin pueden favorecer o inhibir el
obtienen los nutrientes para su metabolismo de desarrollo de los microorganismos. Por ejemplo, la
materiales muertos, materia inorgnica u orgnica luz ultravioleta inhibe dicho crecimiento y la
tales como madera, papel, pintura, suelo, polvo, ausencia de luz impide la formacin de esporas de
piel, alimentos, etc [3] algunos hongos (Altemariasp.). Los organismos
vivos precisan de nutrientes para su supervivencia
Por otra parte Las bacterias son organismos ms y desarrollo; stos son muy variados pero
complejos que los virus y a diferencia de ellos son resumiendo, se podra decir que el agua y la
capaces de vivir, en un medio adecuado, sin la materia orgnica son los dos recursos principales
necesidad de un husped para completar su de que se sirven estos organismos para vivir. Por
desarrollo. Es de destacar la capacidad de elaborar lo tanto, todos aquellos materiales y estructuras en
esporas que presentan algunas bacterias. Las las que se renan esas dos condiciones pueden
esporas no son ms que formas de vida resistentes ser considerados como substratos colonizables por
a condiciones adversas. Pueden resistir, durante los microorganismos. [4]
aos incluso, altas temperaturas, sequedad, falta
de nutrientes, etc., recuperando su estado normal y
capacidad infectiva al entrar en contacto con un
medio adecuado para su desarrollo. [4] 4. RESULTADOS Y DISCUSIN

Los virus son las formas de vida ms simples.


Estn constituidas nicamente por material
gentico: ADN (cido desoxirribonucleico) o ARN DATOS R1 DATOS R2
(cido ribonucleico) y una cubierta proteica. Son
parsitos obligados, es decir, precisan de un
husped para poder reproducirse. La infeccin la
llevan a cabo inyectando su material gentico en COLONIAS UFC UFC
las clulas del husped. Una vez en su interior se
sirven de la maquinaria biolgica del husped para SP1 1 9
producir copias de s mismos hasta lograr su total
recomposicin y en un nmero tal que rompe las SP2 7 2
membranas celulares pasando as a infectar
nuevas clulas.[4] SP3 2 0
Por otra parte la supervivencia, reproduccin y SP4 1 0
dispersin, de estos en el aire de virus, bacterias,
hongos y otros contaminantes biolgicos, Hongo 1 0
dependen, en gran medida, de las condiciones del
entorno en que se encuentran. Factores tales como Tabla 1: Datos obtenidos en la prctica de
la temperatura, la humedad relativa, el movimiento
del aire, la luz y las fuentes de alimento, laboratorio.
principalmente, van a determinar el grado en que
los microorganismos se encontrarn en el
ambiente. En general, las temperaturas bajas 1000
inhiben el crecimiento de muchos CUFC =
Ecuacin (1)
microorganismos; no obstante, algunos de ellos
COLONIAS CUFC CUFC PROMEDIO %
R1 R2

SP1 100 900 500 43,48

SP2 700 200 450 39,13

SP3 200 0 100 8,69

SP4 100 0 50 4,35

Hongo 100 0 50 4,35

Tabla 2: Resultados obtenidos mediante las


ecuaciones (1).

Anlisis: se logr observar 5 tipos de colonias,


entre los cuales se encontr que 4 de ellos eran
especies bacterianas y 1 era un hongo. Adems se Figura 1: Comparacin de lo observado en la
pudo constatar que la especie SP1 (cocos y bacilos prctica con la realidad. Fuente: Propia.
largos), son los que ms predomina en las dos
muestras que se tomaron con un 43,48%, seguido 5. CONCLUSIONES
de la especie SP3 (bacilos largos) con 39,13% de
las colonias. Por otra parte cabe destacar que en la Concluimos que Lo observado en la
experiencia no es vlido hablar de la afectacin caracterizacin microscpica de las muestras se
encuentro que los hongos que all estaban no se
que estos pueden causar en nuestra salud
encontraban bien formados, debido a que estos
especficamente debido a que el mtodo de necesitan ms tiempo de formacin que las
sedimentacin pasiva no permite identificar los bacterias; en la placa SP3 no se encontr nada,
dimetros de las partculas ni los posibles rganos debido a un error sistemtico personal.
que estos pueden llegar a afectar.
Las afectaciones en la salud del ser humano no se
pudieron medir, debido a que se utiliz otra
metodologa diferente a la del impactador de
SP1 Cocos y Basilos cascada.
largos

SP2 Basilos largos 6. REFERENCIAS

SP3 Nada [1] Rosas, I., Salinas, E., Martnez, L., Eslava, C.,
& Cravioto, A. (2004). Bacterias en la Atmsfera.
Microbiologa Ambiental.
SP4 Basilos
[2] Araujo, J., Rojas, Y., y Yegres, F. (2013).
HONGOS Aspergillus Evaluacin aeromicrobiolgica en la costa del
puerto de La Vela de Coro, patrimonio cultural de la
humanidad. Multiciencias, 13(4), 355 - 362
Tabla 3: Bacterias y Hongos encontrados en las
muestras. [3] Alonso, S. F. B. (2010). Estudio de la
concentracin microbiana del aire en depsitos del
Archivo Nacional de Cuba. Augmdomus, 1, 118- Figura 3: Toma de muestra por sedimentacin
137. pasiva. Fuente: Propia.

[4] (2007). Microbiologa del aire. Proquimes s.a.,


Divisin ambiente. Recuperado de
http://www.proquimes-sa.com/ambiente/img/phi/c-
aire/12.pdf

7. ANEXOS

Figura 4: Procedimiento de aplicacin de


indicadores de tincin (cristal violeta, lugol,
acetona y fucsina) y el lavado despus de esta.
Fuente: Propia.

Figura 2: Caja Petri con el medio de cultivo (plate


count). Fuente: Propia.