Ao 2017 FISIOLOGA

ANIMAL (3067).
MEDICINA
VETERINARIA.
Trabajo prctico:
Sangre

Profesor encargado: la profesora

ESTUDIANTES: LAUTARO GUTIERREZ,
LSADSA,DSADSAD,DSADSADSAD,SDASDSAD,SADSADS
AD
ndice

Introduccin.Pag 2
-Manejo de tcnicas de grandes animales
-Coagulacin
-Cascada de coagulacin
-Anticoagulantes.

Objetivo

Materiales y mtodos
-

Resultados
-

Discusiones y conclusiones
-

Bibliografa

pg. 1
Introduccin

-Manejo y tcnicas de extraccin en animales grandes

-Existen distintas tcnicas para trabajar con grandes animales como lo son los equinos
o los bovinos. La seguridad debe ser primordial al manejar con estas especies, ya que su
tamao y su fuerza es la necesaria para hacer un dao importante con los manejos
inadecuados. Cuando se trabaja con caballos y bovinos se debe tener en cuenta que tanto sus
piernas como sus cabezas son muy peligrosas si el veterinario se coloca en una posicin
donde pueda ser alcanzado por estas. Un caballo tiene una gran amplitud de las piernas
traseras, por lo que jams debe uno colocarse en este ngulo; en una vaca tambin hay riesgo
pero es mucho menor. Ambos animales poseen grandes cabezas y msculos fuertes en el
cuello para utilizarlas como bolas de demolicin por lo que lo recomendado es colocar una
parte del cuerpo (brazo, codo, etc.) sobre este con la rigidez suficiente para aqu cuando el
animal mueva su cabeza, el veterinario sea empujado y no reciba el impacto directo, el cual
puede ser muy grave, ms si da en la cabeza del veterinario (gran posibilidad cuando se
trabaja en la zona del cuello o cabeza del animal).
El mtodo de extraccin de sangre es el siguiente: Sujetar correctamente al animal y
localizar la vena por palpacin mediante presin suave e intermitente con el dedo
ndice y mayor sobre la zona de proyeccin del vaso sanguneo. Luego efectuar
tricotoma ya que mejora las condiciones aspticas y permite una mejor visualizacin
de la vena. Realizar antisepsia con algodn embebido en alcohol sobre la zona a
punzar, del centro a la periferia, a pelo y contrapelo. Para fijar la vena se coloca el
dedo pulgar sobre el vaso sanguneo y se presiona inmediatamente por debajo del
sitio de puncin. La puncin debe realizarse con la aguja con el bisel hacia arriba y
en un ngulo de 35-45 grados, re-direccionando inmediatamente la aguja siguiendo
el recorrido del vaso. Posteriormente se tracciona lentamente el mbolo de la jeringa
para extraer sangre hasta el volumen deseado y se retira la jeringa y la aguja,
presionando suavemente con algodn embebido en alcohol sobre el punto de puncin
para facilitar la hemostasia. Sacar la aguja de la jeringa y colocar la sangre en los
tubos correspondientes, vertindola suavemente sobre las paredes de los mismos.

- Coagulacin
-La coagulacin o hemostasia es el procedimiento para evitar la prdida de sangre de
un vaso sanguneo daado. El proceso de la coagulacin es el siguiente:
1-Espasmo vascular (Contraccin de la pared del vaso sanguneo y adhesin
plaquetaria al subendotelio)
2-Formacin del tapn plaquetario y activacin de la cascada de coagulacin.

pg. 2
 3-Formacin del coagulo (consolidacin del cogulo plaquetario; formacin
de trombina y fibrina).
4- Retraccin del cogulo (regeneracin del endotelio; reduccin del tamao
del cogulo; Comienzo de fibrinlisis-Proceso Fibrinolitico=degeneracin de fibrina)
5-Lisis del cogulo (plasmina o plasmingeno: Sustancia central del proceso
Fibrinolitico).
Una de las clulas ms activas durante el proceso de hemostasia, son las plaquetas.
Estas se activan, cuando se detecta en la sangre sustancias extraas, liberadas por endotelios
daados, como la serotonina, el factor de activacin plaquetaria, etc. Estos se encargan de
formar el tapn plaquetario.

- Cascada de coagulacin: Se llama cascada de coagulacin a las diversas reacciones en

cadena que terminan por formar una malla bastante compacta de fibrina. La existencia de esta
cascada se explica en que en cada paso de la cascada de coagulacin, se ven activados ms
sustancias que las que las activaron, por ejemplo, cuando se activa un poco del factor XII, se
activa ms proporcin del factor IX. El procedimiento de la cascada de coagulacin es el
siguiente:
1- Sustancias como la serotonina, el colgeno, activan el factor XII, el cual a su vez
activa el factor XI, mediante una accin proteoltica, con el cofactor calcio (muy importante).
El XI, activa al IX (con un complejo de XI, IX, XIII-este es activado por la trombina- y
calcio), el cual a su vez activa al factor X (factor comn de las vas intrnsecas y extrnsecas.),
este, formando un complejo con el factor V, el calcio, y los fosfolpidos plaquetarios activan
a la protrombina formando trombina, el cual es el ltimo paso, que activa el fibringeno
transformndola en fibrina. Por ltimo el factor XIII, estabiliza la polimerizacin de fibrina
hacindola ms estable -insoluble-.

- Anticoagulantes: Son sustancias que impiden la coagulacin de la sangre. Las principales

son:
-Heparina: sustancias que actan inhibiendo la trombina.
-Citrato de Na+: Acta como(sustancias atrapadoras).., atrapando al calcio,
evitando que este intervenga en la cascada de coagulacin.
-Dicumarol: Es un competidor de la vitamina K, es decir, es un anticoagulante que
acta a nivel del hgado, afectando la produccin de los factores de coagulacin K
dependientes.

- Hemlisis: La hemlisis es la consecuencia de colocar a una clula (glbulos rojos) en una

sustancia hipotnica. Lo que ocurre, es que el gradiente de concentracin est en direccin a
la clula, por lo que esta de llena de lquido hasta que la misma se rompe.
La hemlisis, es uno de los dos resultados posibles junto con la plasmlisis.

- Composicin de sangre (volemia y hematocrito): La sangre est compuesta por diferentes

clulas y sustancias en diferentes proporciones, la cuales poseen rangos especficos para cada
especie. En general la sangre suele ser el 7-8% del peso total del animal, a este total se le

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denomina volemia. De esta cantidad x, hay un porcentaje de plasma (54%) y de clulas
(46%). Este porcentaje de clulas es lo que se denomina hematocrito.

- Velocidad de sedimentacin globular (Vgs): Este es un anlisis que mide la velocidad con
la que sedimenta, o se separa, o bajan las clulas en una pipeta de Westergreen. Este posee
valores normales para cada especie, y en presencia de algunas patologas esta se ve afectada.

- Grupos sanguneos: Siempre que una protena extraa es inyectada al torrente sanguneo de
un animal las clulas producen una sustancia caracterstica que relaciona con dicha protena.
Estas sustancias es conocida como anticuerpo y la protena extraa se denomina antgeno.
Si el antgeno esta en forma de clulas, el anticuerpo formado reacciona con los mismo
produciendo una aglutinacin, entonces el anticuerpo se denomina glutinina y el antgeno
glutingeno. Los tipos de grupos sanguneos son: A, B, AB, O, y el factor Rh, que puede ser
positivo (+) o negativo (-).

Objetivo

Este documento es un informe del trabajo practico realizado el (fecha: --/--/--).. , en el

cual se vieron distintas tcnicas y procedimientos tericos puesto en prctica
relacionados con el tejido sanguneo.
El objetivo de este trabajo era realizar en la prctica los contenidos aprendidos en la cursada
relacionados con el tejido sanguneo, mediante procedimientos reales realizados por
los veterinarios en su prctica diaria. Por ende se debe prestar vital atencin no solo
a los resultados que se obtendrn del prctico, sino al procedimiento terico de cada
experimento.

Materiales y mtodos

Muestras utilizadas: - 10cm3 de sangre (recin extrada)

1. Extraccin de sangre:
Materiales:
Elementos de sujecin: bozal, bretes y cepos.
Tijeras
Algodn
Alcohol (antisptico)
Agujas 12 x 1.8
Jeringas de 10 ml
Tubos Khan
Bovinos y equinos

Procedimientos

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Sujetar correctamente al animal y localizar la vena por palpacin mediante presin
suave e intermitente con el dedo ndice y mayor sobre la zona de proyeccin del vaso
sanguneo. Luego efectuar tricotoma ya que mejora las condiciones aspticas y
permite una mejor visualizacin de la vena. Realizar antisepsia con algodn
embebido en alcohol sobre la zona a punzar, del centro a la periferia, a pelo y
contrapelo. Para fijar la vena se coloca el dedo pulgar sobre el vaso sanguneo y se
presiona inmediatamente por debajo del sitio de puncin. La puncin debe realizarse
con la aguja con el bisel hacia arriba y en un ngulo de 35-45 grados, re-
direccionando inmediatamente la aguja siguiendo el recorrido del vaso.
Posteriormente se tracciona lentamente el mbolo de la jeringa para extraer sangre
hasta el volumen deseado y se retira la jeringa y la aguja, presionando suavemente
con algodn embebido en alcohol sobre el punto de puncin para facilitar la
hemostasia. Sacar la aguja de la jeringa y colocar la sangre en los tubos
correspondientes, vertindola suavemente sobre las paredes de los mismos.

2. Tiempo de coagulacin (mtodo Lee-White):

Materiales:
-3 Tubos de Khan rotulados con los nmeros 1, 2 y 3
-Sangre sin anticoagulantes (3 cm3 )

Procedimiento
Verter suavemente 1 cm3 de sangre en los 3 tubos de khan, Inclinar suavemente en
forma repetida cada 30 seg. el tubo N1 hasta que coagule.
Inmediatamente, inclinar suavemente el tubo N 2 y luego que este coagula observar el
tubo N 3 (que ha permanecido inmvil).
Se tomara el tiempo con un cronmetro comenzando desde que la sangre comienza a
entrar en la jeringa hasta que se forma el coagulo en los distintos tubos. El tiempo de
coagulacin que se informa es el del tercer tubo.

Tiempo esperado de coagulacin

Bovino 4 15 min (Kaneko 1960)

Equino 4 15 min (Kaneko 1960)

Ovino 5 15 min (Gajewsski 1971)

Canino 3 _13 min (Larrain y col. 1956)

Felino 9.2 0.3 min (Osbaldiston y col. 1970)

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3. Desfibrinacin
Materiales:
-Sangre sin anticoagulantes (2 cm3 )
-Vaso de precipitado
-Perlitas de vidrio

Procedimiento
Colocar 2 cm3 de la sangre obtenida hacindola caer por las paredes de un vaso de
precipitado que contenga perlitas de vidrio. Agitar suavemente hasta que se forme la
red de fibrina adherida a las perlitas.

4. Tiempo de sangra (mtodo de Duke)

Materiales:
-Aguja, alcohol y algodn
-Papel de filtro y cronmetro
Procedimiento
Limpiar la zona de puncin con alcohol, realizar una pequea incisin en una zona de
microcirculacin. Cada 30 segundos, absorber la sangre con papel de filtro sin tocar la
oreja registrando el tiempo desde la puncin hasta la finalizacin del sangrado.
Los lugares de eleccin son los siguientes:
Caninos: Almohadilla plantar, piel de la oreja, cara interna del muslo y la nariz
Felinos: dem caninos
Bovinos: piel de la oreja y morro
Equinos: piel de la oreja y cara interna del labio
Suinos: piel de la oreja y cara interna del muslo
El tiempo de sangra esperado para las distintas especies de animales domsticos es de
1 5 min.

5. Mecanismo de accin de anticoagulantes in vitro e in vivo:

Materiales:
Tubos de Khan (5)
Sangre sin anticoagulantes (7 cm3 )
Dicumarol, heparina, citrato de sodio
Cl2Ca
Procedimiento
Colocar 1 cm3 de sangre en cada uno de los tubos (T) que contienen:

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 T1 nada, T2 dicumarol, T3 citrato de sodio (relacin anticoagulante: sangre = 1: 4), T4 y
T5 heparina (a este ltimo agregar 3 cm3 de sangre). Observar en cual de los tubos ocurre
coagulacin de la sangre.
En los tubos donde no se observa coagulacin agregar Cl2Ca y analizar los resultados.

6. Hemlisis
Materiales:
Sangre heparinizada (T5 de la experiencia 2)
Tubos de Khan (4)
Agua destilada
Solucin fisiolgica (NaCl 0.9 %)
Solucin NaCl 3 %
Detergente diluido

Procedimiento
En diferentes tubos de Khan agregar:
1- 1ml de sangre y 2 ml de agua destilada.
2- 1 ml de sangre y 2 ml de solucin fisiolgica ClNa 0.9 %
3- 1 ml de sangre y 2 ml de solucin ClNa 3 %
4- 1 ml de la suspensin del tubo 2 y agregar 1 ml de detergente diluido

7. Hematocrito (Hcto)
Materiales:
Sangre
Tubos capilares heparinizados para microhematocrito
Microcentrfuga y baco de lectura directa

Procedimiento
Cargar un tubo capilar con sangre y sellarlo en uno de sus extremos utilizando un mechero.
Centrifugar 5 y leer el porcentaje con un baco de lectura directa.
La mayora de las especies de animales domsticos tienen valores de hematocrito de 38 45
% con una media de 40 %.

8. Eritrosedimentacin o Velocidad de Sedimentacin Globular (VSG)

Materiales:
Sangre sin anticoagulantes
Pipeta de westergreen y soporte de pipeta
Citrato de sodio

Procedimiento

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Cargar el soporte de la pipeta de westergreen con sangre y citrato de sodio en relacin 1:4,
introducir la pipeta (de 200 mm) en el soporte y colocarla verticalmente. Registrar los
resultados de la VSG al cabo de una hora, tomando como valor de lectura los mm
descendidos en la sedimentacin de los eritrocitos.
Eritrosedimentacin
(VSG)
Bovinos 0 2 mm
Equinos 70 mm
Caninos 14 22 mm
Felinos 377 27 mm
Suinos Variable

9. Determinacin de grupos sanguneos

Materiales:
Lanceta
Portaobjetos
Suero anti-B, anti-A y anti-D

Procedimeinto
Colocar en un portaobjetos una gota (una al lado de la otra) de cada uno de los sueros anti-
B, anti-A y anti-D y depositar en cada una de ellas, una gota de sangre del pulpejo del dedo
(luego de la incisin con una lanceta). Mezclar suavemente el contenido en cada gota y
observar los resultados.
* si aglutina el 1 el grupo sanguneo es B
* si aglutina el 2 el grupo sanguneo es A
* si no aglutinan ni el 1 ni el 2 el grupo sanguneo es 0.
* si aglutina el 3 es RH (+), si no aglutina es (-).

Resultado

Resultados obtenidos

Tiempo de coagulacin

Los tiempos de coagulacin obtenidos de la muestra de sangre del bovino 1 son: 4,41 min
tomando como valor de referencia el tiempo medido en T3 para determinar el resultado
de la experiencia.

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Se encuentran dentro de los parmetros normales; lo que deja evidenciado que los
factores que intervienen en la va extrnseca de la cascada de la coagulacin estn
funcionando correctamente.

Desfibrinacin

En la sangre bovina, se form una red de fibrina que se evidencio como una masa
blanquecina de consistencia firme alrededor de las pequeas esferas de vidrio.

Tiempo de sangra (mtodo de Duke)

No se llevo a cabo por falta de tiempo.

Mecanismo de accin de anticoagulantes in vitro e in vivo

En esta experiencia los resultados in vitro obtenidos fueron:

Tubo 1 (sangre sin nada): cogulo formado.
Tubo 2 (Dicumarol): coagulo formado
Tubo 3 (Citrato de sodio): sangre sin coagular
Tubo 4 (heparina): sangre sin coagular

Los resultados esperados in vivo serian:

Tubo 1 (sangre sin nada): coagula formado
Tubo 2 (Dicumarol): sangre sin coagular.
Tubo 3 (Citrato de sodio): coagulo formado.
Tubo 4 (heparina): sangre sin coagular

Hemolisis

Agua destilada: Hemolisis no se ve, turbidez y se ve ms oscuro.

Solucin fisiolgica (Naci 0,9%): eritrocitos normales
Solucin NaCl al 3%: crenocito (eritrocitos deshidratados) menos nivel de turbidez pero
no tan evidente.
Detergente diluido: hemolisis por ruptura de membrana, turbidez y transparencia a la luz.

Hematocrito

Hematocrito
Bovino 1 32%

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 Conclusin
Se concluye que el bovino 1, est cercano a los valores normales. La pequea variacin
del rango normal puede explicarse, por los errores durante el procedimiento como los
son: Usar sangre con anticoagulantes y no sangre pura y directamente extraida.

Eritrosedimentacin o velocidad de sedimentacin globular (VSG)

Luego del tiempo determinado por la experiencia (una hora) se midi que decant 1 mm
en el bovino 1, lo cual es un valor normal para esta especie.

Determinacin de grupos sanguneos

Se concluy que las personas que poseen por ejemplo sangre A+, aglutinan con el anti A,
y no con el Rh. Lo cual confirma que esta persona es A+. Este es el funcionamiento bsico
de la determinacin de los grupos sanguneos.

Discusin y Conclusiones:

-Resultados ms importantes:

Muestras Tiempo de Coagulacin Eritrosedimentacin

(min) (VSG) (mm/h)
Bovino1 4,41 1
Bovino 2 1
Bovino 3 10 1
Equino 1 18,07 85
Equino 2 14,03 125

Resultados importantes Tiempo de coagulacin Eritrosedimentacin

(Valor normal equino: 4 (Valor normal equino: 70
15 min) mm)
(Valor normal bovino: 4 (Valor normal bovino:0 2
15 min) mm )
Equino 14, 03 min 85
Bovino 10 min 1

Conclusin final: Comparando las muestras de sangre de los animales trabajados se ve

que los resultados presentan valores normales para su especie respecto a la coagulacin
y para la eritrosedimentacin, excepto en el caso del equino, pero esto puede explicarse
por la falta de la aplicacin total del procedimiento. Estos errores pueden ser por ejemplo,

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 no dejar la pipeta de Westergreen en estado totalmente inmvil, lo cual explica un nmero
mayor de eritrosedimentacin.

Anticoagulantes Bovino Bovino Bovino Equino Equino

1 2 3 1 2
Heparina Vitro: Vitro: Si Vitro: Si Vitro: Si Vitro: Si
Si Vivo: Si Vivo: Si Vivo: Si Vivo: Si
Vivo:
Si
Citrato de Na+ Vitro: Vitro: Si Vitro: Si Vitro: Si Vitro: Si
Si Vivo:No Vivo:No Vivo:No Vivo:No
Vivo:
NO
Dicumarol Vitro: Vitro: Vitro: Vitro: Vitro:
No No No No No
Vivo: Vivo: Si Vivo: Si Vivo: Si Vivo: Si
Si

Resultados importantes Sangre coagulada

Heparina Citrato de Dicumarol

Na+

Equino In vitro: Si In vitro: Si In vitro: No

In vivo: Si In vivo: No In vivo: Si

Bovino In vitro: Si In vitro: Si In vitro: No

In vivo: Si In vivo: No In vivo: Si

Conclusiones finales: Los resultados de los anticoagulantes fueron los esperados,

teniendo en cuenta que era sangre In vitro. Es correcto que la heparina haya funcionado
tanto in vitro como funcionara in vivo, ya que su accin anticoagulante est en inhibir a
la trombina, sustancia de la cascada de coagulacin.
El citrato de Na+ solo funcionaria in vitro, ya que dentro del torrente sanguneo se diluira,
perdiendo su capacidad. Y por ltimo el Dicumarol, no funciona in vitro, porque su

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 accin est en la competicin con la vitamina K, es decir que inhibe la formacin de los
factores de la cascada de coagulacin que se formen en el hgado (factores K
dependientes.)

Hematocrito
Bovino 1 32%
Bovino 2 41%
Bovino 3 27%
Equino 1 32%
Equino 2 16%

Resultados importantes Hematocrito

(Valor normal 38 45%)
Equino 32%
Bovino 41%

Conclusiones finales: Los niveles de hematocrito de la sangre de cada especie, respecto

a la cantidad analizada fueron valores normales para cada especie. Algunos resultados se
salen del rango normal, pero esto puede explicarse por el uso de sangre mezclada con
anticoagulante y no pura y recin extrada como sera lo recomendable.

Hemlisis
Solucin Fisiolgica -No cambia. Isotnico
(0,9% NaCl)

Agua Destilada -Opaco a la exposicin Hipotnico

de la luz.
Detergente -Ms oscuro a la vista. Es un jabn, por ende
-Brillante y transparente rompe los lpidos de la
a la luz. membrana.
ClNa 3% -Opaco a la exposin de Hipertnica
la luz.

Resultados importantes Hemolisis

Solucin Agua destilada Detergente CLNA 3%
fisiolgica (Hipotnica) (Jabn) (Hipertnica)
(Isotnica)

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 Equino No hubo Se visualiz -Ms oscuro a -Se visualiz
cambios turbidez y simple vista, turbidez y
opacidad. pero opacidad.
transparente a -No presenta
la exposicin diferencias con
de la luz. la solucin
fisiolgica.

Bovino No hubo Se visualiz -Ms oscuro a Se visualiz

cambios turbidez y simple vista, turbidez y
opacidad. pero opacidad.
transparente a -No presenta
la exposicin diferencias con
de la luz. la solucin
fisiolgica.

Conclusiones finales: Los colores, y texturas (trasparencia) presentados en cada tubo (sin
importar la especie) fueron los indicados para cada sustancia hipotnica, isotnica e
hipertnica. Como detalle interesante se puede decir, que la solucin fisiolgica
(sustancia isotnica) y el ClNa 3% (Sustancia hipertnica) no presentaron diferencias
visibles a simple vista.

Bibliografa
- (Captulo 4 de fisiologa de los animales domsticos-Dukes)
- (Libros: Autor o autores. Ao de publicacin. Ttulo. Edicin. Lugar de publicacin:
Casa publicadora)

Videos: Productor & Director. Ao. Ttulo. Formato: Motion picture, DVD, VHS.
Lugar de origen: Nombre.

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