DETERMINACIN DE BIOMASA POR DENSIDAD PTICA DE E.

coli Y UNIDADES
FORMADORAS DE COLONIA

Katherin Johana Henao Alvarez

Resumen
en este trabajo se quiere mostrar de manera prctica como es el crecimiento de E.coli en
medio solido y liquido.

Palabras Claves: E.coli, dilucin seriada, UFC

Introducci Objetivo

La bacteria E.coli por aos ha sido uno de Obtener crecimiento bacteriano de

los organismos vivos ms estudiados por
los cientficos. Su versatilidad y pocas
demandas de crecimiento, la hace la ms
predetermina para realizar diferentes
estudios.
E.coli de forma seriada en cajas de
petri.
Obtener una lnea de crecimiento
estndar el na absorbancia de
medio de cultivo acuoso.

En esta ocasin se quiere verificar la Materiales

concentracin de biomasa por
determinacin de densidad ptica y la Erlenmeyer de 250 mL,
capacidad de formar UFC. conteniendo 50mL de caldo de
nutritivo
La absorbancia es una medida de la 6 Tubos de vidrio tapa rosca por
radiacin que absorbe una sustancia, grupo de trabajo
7 Pipetas de vidrio 5ml y dos 1mL
cuando sobre ste incide las ondas
3 Cajas de petri
electromagnticas, esta generalmente en la
Solucin salina NaCl 0.85%
regin visible de una determinada longitud estril
de onda. La absorbancia vara con la Beaker 250 mL
composicin y la concentracin de los Caldo de cultivo como blanco
elementos en una muestra, por lo que se Celdas para el espectrofotmetro
emplea comnmente en la en qumica
analtica para la caracterizacin de
lquidos y gases.(1) Equipos

A dems de la absorbancia tambin se Espectrofotmetro

deseaba saber cuantas UFC estaran Mecheros o cabina de flujo
presentes en cada una de las cajas de petri. laminar
Las UFC ayudan a saber de una manera Balanza
aproximada la cantidad de Incubadora a 37C
microorganismo que se encuentra en las
muestras de las disoluciones. (2)
Metodologa
Medios de cultivo
Para poder llevar acab el laboratorio era
importante determinar los medios de
cultivos en los que se iban a estudiar el
crecimiento microbiano.
Para realizar cualquier cultivo es
importante saber que nutrientes y
ambientes necesita para su optimo
crecimiento, en este caso se escogieron dos
medios uno slido y no lquido.(3)
1. Agua peptona: Es un medio de
cultivo utilizado normalmente para
detectar el crecimiento de
microorganismo.
Se utilizaron 7 tubos con 9ml de
agua peptona para cada uno, para
su preparacin se realizaron los
siguientes clculos
15 63
= 0,945
1000
Una vez se prepar el agua peptona
se distribuy de manera equitativa
en cada uno de los tubos. Luego se
llevaron al autoclave durante 30
minutos y se dej reposar en agua
fra para acelerar la perdida de
calor.
Una vez se estuvo a temperatura
ambiente se comenz a inocular el
primer tuvo con 1ml de muestra de
E.coli que ya haba crecido
previamente en un caldo nutritivo,
una vez se obtuvo los 10ml en l
tuvo nmero 1, despus se
comenz a llevar a cabo una
disolucin seriada hasta l tuvo
nmero 6, siendo el 7 un control
2. Agar nutritivo: Es un medio de
cultivo usado normalmente como
rutina para todo tipo de bacteria. Es
muy til dado que permanece
solido incluso a temperaturas un
poco altas, tambin cuenta con un
crecimiento bacteriano en que es
posible distinguir de mejor
maneras las UFC.(3)
Para llevar a cabo el laboratorio fue
necesario utilizar 7 cajas de petri
con un volumen aproximado de
18ml por unidad.
Para la preparacin del agar se
hicieron los siguientes clculos
28 125
= 3,5
1
Cuando el agar estuvo listo se llev
al autoclave durante 30 minutos, en
este tiempos se puso en
funcionamiento la bina de vio
seguridad, una vez estuvo lista se y
el agar ya estuviera listo se
comenz a servir el agar en cada
una de las cajas de petri, una vez se
solidifico se marcaron del 1 al 6,
siendo la 7 control.
En cada una de las cajas de petri se
introdujo 1ml de agua peptona ya
inoculada para la siembra segn la
disolucin correspondiente al
nmero de tuvo a excepcin de la
control.
Resultados y Discusin
Al momento de tenerlos tubos ya Se vio que el tubo nmero 7
inoculados se extrajo una muestra (imagen8) no cambio de
de 1ml del tuvo nmero 3 para turbulencia, segn esto se asume
tomar su absorbancia la cual arrojo que ninguno de los de ms tubos
un valor de 0,021. Luego se llev a estuvieron contaminados
la incubadora durante 24 horas y (imagen1)
luego se pasaran de ambiente.
Despus de que pasaron 8 das se
revis lo que sembr en los tubos y
las cajas de petri.
Tubos
Al momento de inocular los tubos
posean un color claro he igual en
cada uno de ellos.
Pasados 8 das severificaron y se
obtuvo los siquiente resultados

Imagen 2: Tuvo 1 C: 0.1 tomada en el

laboratorio de microbiologa
Universidad Libre

Imagen 1: Tubos inoculados con

E.coli en disoluciones seriadas.
Tomada en laboratorio de
microbiologa de la Universidad
Libre

Se pudo observar como todos los Imagen 3: Tuvo 2 C: 0.01 tomada en el

tubos obtuvieron un una laboratorio de microbiologa
turbulencia diferente segn el Universidad Libre
nmero de la disolucin.
 Imagen 7: Tuvo 6 C: 0.000001
Imagen 4: Tuvo 3 C: 0.001 tomada en
tomada en el laboratorio de
el laboratorio de microbiologa
microbiologa Universidad Libre
Universidad Libre

Imagen 5: Tuvo 4 C: 0.0001 tomada Imagen 8: Tuvo 7 C: 0.0000001

en el laboratorio de microbiologa tomada en el laboratorio de
Universidad Libre microbiologa Universidad Libre

Imagen 6: Tuvo 5 C: 0.000001

tomada en el laboratorio de
microbiologa Universidad Libre
 Imagen 12: Caja Petri 4, tomada en el
laboratorio de microbiologa
Universidad Libre Imagen 10: Caja Petri 2, tomada en el
laboratorio de microbiologa
Universidad Libre

Imagen 9: Caja Petri 4, tomada en el

laboratorio de microbiologa
Universidad Libre

Imagen 11: Caja Petri 3, tomada en el

laboratorio de microbiologa
Universidad Libre