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Cours de toxicologie Dr BOUKHERBACHE .

S 2017/2018

GNRALITS ; DFINITIONS
Historique
Dfinitions
Formes dintoxication
Domaines toxicologiques
Principaux types dintoxication

I. Historique :

Le terme Toxicologie = provient du terme grec toxikon qui signifie arc ; [lutilisation de
flches empoisonnes (poison) reprsente une des premires applications intentionnelles dune
substance toxique], et logos (enseignement)
Il a t cr au dix-septime sicle.

Dj les hommes primitifs utilisaient des mdicaments (par ex. les plantes) pour la gurison
mais ils taient conscients de la dangerosit des poisons (ex. morsure de vipre).
Il y a dj plus de 3000 ans quen Chine leffet toxique de laconit, de larsenic et de lopium
tait connu.
En 1500 avant J.C., de vieux documents de mdecine gyptienne font mention de leffet
toxique de la plante de Safran ( Crocus sativus )

Bien que les effets de certains poisons fussent connus des Grecs et Romains dans lantiquit et
que leurs emplois des fins criminelles aient t poursuivis au cours du moyen ge et de la
renaissance, ce nest quau dbut du XVIIIme sicle et principalement au XIXme sicle que la
toxicologie devient rellement une discipline scientifique.

II. Dfinitions

Toxicologie: science des poisons

Science multidisciplinaire, applique les toxiques : elle sintresse leurs:


Origine, tiologies
Proprits physiques chimiques et biologiques
Devenir et biotransformations
Modalits et mcanismes d'action sur les systmes vivants
dtection et quantification
Moyens pour combattre les toxiques (thrapeutiques)(voies d'limination, antidotes,
traitements) ;
Mthodes de prvention, au diagnostic, au pronostic, la surveillance mdicale...
1. Poison et toxique : Poison vient du mot latin potio = breuvage et est synonyme de toxique.

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Dfinir le poison n'est pas chose aise et les nombreuses dfinitions proposes sont passibles de
critiques.
FABRE et TRUHAUT considrent que : Une substance est un poison quand aprs
pntration dans l'organisme une dose relativement leve en une ou plusieurs fois trs
rapproches ou par petites doses longtemps rptes, elle provoque de faon passagre ou
durable des troubles d'une ou de plusieurs fonctions, troubles pouvant aller jusqu
lannihilation complte et amener la mort

PARACELSE : toutes les substances sont, haute dose, des toxiques y compris les plus
ncessaires. C'est la dose qui fait le poison
Dosa sola fecit venenum
Toxique = poison substance qui provoque des blessures, des maladies ou la mort
d'organismes par une raction chimique.
Poisons ceux qui agissent dose trs faibles
Xnobiotique toute substance exogne chimique introduite dans un organisme vivant.

2. Toxicocintique: tude du devenir dun toxique dans lorganisme


3. Toxicodynamie: tude du mode daction toxique du xnobiotique. S'intresse linfluence
qu'exerce un toxique sur l'organisme et aux facteurs qui interviennent dans la rponse
toxique.
4. Intoxication / Empoisonnement : Aprs pntration du toxique dans lorganisme par
quelque voie que ce soit une dose leve en une ou plusieurs fois trs rapproches ou par
petites doses longtemps rptes, il provoque immdiatement ou terme de faon passagre
ou durable des troubles dune ou de plusieurs fonctions de lorganisme(mort)
Intoxication aigue
Intoxication chronique.
Le terme empoisonnement dsigne les troubles occasionns par les poisons lorsque ceux-ci sont
administrs dans un but de nuire (acte de malveillance).

III. Formes dintoxication

On distingue gnralement deux types dintoxications selon la frquence et la dure de


lexposition :

Forme d'intoxication Frquence d'administration Dure de l'exposition

AIGU Unique < 24 heures

SUBAIGU Rpte <= 1 mois

SUBCHRONIQUE Rpte de 1 3 mois

CHRONIQUE Rpte > 3 mois

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Toxicit aigue

Exposition de courte dure, absorption rapide du toxique;


dose unique ou multiples doses sur une priode ne dpassant pas 24h;
Les manifestations dintoxication se dveloppent rapidement.

Toxicit chronique

Lintoxication chronique rsulte dexposition rpte pendant une longue priode


de temps, doses faibles et rptes
Les signes dintoxication se manifestent soit par accumulation du toxique, soit par
accumulation des effets du toxique

Comparaison entre l'exposition aigu ou chronique et l'effet aigu ou chronique :


EFFET
AIGU CHRONIQUE
Effet court terme la suite dune
Effet long terme la suite dune
exposition court terme (ex. :
exposition court terme (ex. : trouble
AIGU

irritation cutane cause par le contact


respiratoire persistant la suite dune courte
avec une solution trs dilue dacide
inhalation dune forte concentration de chlore)
sulfurique)
EXPOSITION

Effet long terme la suite dune


Effet court terme la suite dune
exposition long terme (ex. : cancer du foie,
CHRONIQUE

exposition long terme (ex. :


du poumon, du cerveau et du systme
sensibilisation cutane
hmatopotique caus par lexposition des
lthylnediamine la suite dun
doses leves de chlorure de vinyle pendant
contact pendant plusieurs annes)
plusieurs annes)

IV. Domaines toxicologiques:


Toxicologie mdico-lgale (expertises judiciaires).
Hygine alimentaire (additifs, contaminants).
Hygine sociale: tude des toxicomanie et lutte contre la drogue.
Toxicologie professionnelle (industrie, agriculture).
Ecotoxicolgie (pollution de lair, des eaux, et du sol), et leurs rpercussions sur
lhomme et les quilibres biologiques.
Toxicologie applique descriptive.
Toxicologie clinique.
Biotoxicologie.
Toxicologie exprimentale: les essais de toxicit aigue et chronique.

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V. Principaux types dintoxication :

Empoisonnement suicide :
Les substances les utilise :
Mdicaments (psychotropes, digitaliques, )
Le monoxyde de carbone :gaz dchappement de voitures ;
Les pesticides ;
Les produits domestiques.
Empoisonnement criminel :
Par ex. arsenic, cuivre, cyanure
Empoisonnement accidentel
Erreur, confusion, imprudence, inattention
Lenfant +++
Ladulte => mauvis tiquetage.
Ex : intox par les plantes, les champignons, intox mdicamenteuses, intox / les produits
domestiques
Intoxication alimentaire
Produit toxique en lui mme
Produit rendu toxique
Intoxication professionnelle
Pb, Hg, solvants,
Intoxication due la pollution atmosphrique et hydraulique

NOTIONS SUR LA TOXICIT


1. Notion de dose :
Paracelse: Dosis Sola Facit Venenum
Toute substance peut entrainer une intoxication (mme les plus ncessaires), ce nest
quune question de dose;
La dose = rapport entre le poids de la substance absorbe / le poids de lorganisme qui
labsorbe
Exprime en mg/Kg
2. Relation dose-effet :
Toutes les substances chimiques sont toxiques = une dose leve effet nocif.
Une augmentation de la dose entraine une augmentation de lintensit et de la
diversit des effets toxiques mais aussi le pourcentage dindividus affects.
Cest la relation dose-effet ou exposition-effet.
La relation entre la dose dune substance introduite dans un organisme et la rponse
quelle dtermine se matrialise par une courbe en S :

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Relation dose- effet (effet = mortalit)
3. Notion de seuil :
Leffet toxique dpend de la quantit de la substance administre et du seuil
dapparition de ces effets.
Au del de la dose seuil, les effets toxiques augmentent lorsque quantit de la
substance administre augmente.
La notion de seuil toxique est importante pour fixer des normes.
La valeur seuil = quantit minimale sous laquelle il ne se produit pas deffet.

VALUATION DE LA TOXICIT DUNE SUBSTANCE.


valuation de la toxicit aigue
valuation de la toxicit chronique
Essais de cancrognse
tude de lembryo-toxicit et des effets sur la reproduction

Evaluation de la toxicit = Essais portant sur les mdicaments et les produits chimiques
en vue de leur AMM (autorisation de mise sur le march):
Lvaluation de la toxicit sappuie sur :
les tudes pidmiologiques
les tudes exprimentales in vivo
les tudes in vitro
Les tudes humaines
les tudes thoriques.

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I. valuation de la toxicit aigue
A- Les tudes exprimentales in vivo

A- 1- Evaluation de la toxicit aigue systmique

a. Dtermination de la dose minimal mortelle (DMM) =

La dose minimale de substance capable de tuer un animal par administration IV lente,

Intrt: choisir les doses utiliser pour la DL50.

b. Dtermination de la dose ltale 50(DL50)

Dfinition de la DL50 = estimation statistique dune dose unique de produit suppose tuer
50% des animaux mis en exprience dans une mme espce animal.

Elle est exprims en mg de substance /kg de poids corporel (mg/kg).

Les conditions exprimentales sont prciser : espce, sexe, la dose, le nombre de lots, le
nombre danimaux /lot, la voie dadministration,

Protocoles exprimental:

Lessai est pratiqu habituellement sur 5 6 lots danimaux (le rat); chaque animal dun
mme lot reoit une dose identique de la substance tester, mais la dose administre diffre
dun lot lautre, afin que le pourcentage de mortalit varie entre 0 et 100.

On construit ensuite la courbe donnant le pourcentage de mortalit en fonction de la dose, on


dduit la DL50 par des moyens statistiques

Courbe de Trvan pour dtermination de la DL50


(% de mortalit en fonction du Log de la dose)

Lorsque la substance tester = gaz ou vapeur (administrs par inhalation), on tablie


la CL50 (mg/m3) = concentration atmosphrique entrainant la mort de la des
animaux dexprience pour une dure dexposition dtermine ; on peut galement

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retenir comme valeur le TL50 : temps ltal 50pour une concentration dtermine de
toxique.

Intrt de calcule de la DL50 :

Classification de produits chimiques selon leur toxicit

Classes de toxicit : chelle de Hodge et Sterner

DL50 orale (rat) Indice de toxicit

Jusqu' 1 mg/kg 1 = extrmement toxique

De 1 50 mg/kg 2 = hautement toxique

De 50 500 mg/kg 3 = modrment toxique

De 500 5 000 mg/kg 4 = lgrement toxique

De 5 000 15 000 mg/kg 5 = presque pas toxique

Plus de 15 000 mg/kg 6 = relativement inoffensif

Applications de la DL50 :
Evaluation du danger en cas de surdosage.
Programmation des tudes de toxicit sub-aigue et chronique chez les animaux.
Apports dinformation: apprciation grossire et prliminaire sur la toxicit qui peut
tre influence par plusieurs facteurs.
Index thrapeutique

Limites de la DL50 :
L'indice DL 50 sert frquemment pour exprimer la toxicit aigu ainsi que pour
classer et comparer les toxiques. Il a cependant une valeur trs limite, car il ne concerne
que la mortalit et ne donne aucune information sur les mcanismes en jeu et la nature des
lsions.

Il sagit dune apprciation grossire et prliminaire, qui peut tre influence par
plusieurs facteurs tels lespce animale, le sexe, lge, le moment de la journe, etc.

Problmes de transposition :
La transposition des rsultats obtenus de lexprimentation animale lhomme prsente des
obstacles et ceci pour diffrentes raisons :
Les diffrences dans le systme ADME entre lhomme et lanimal ;

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Certains effets ne peuvent tre mis vidence chez lanimal par ex : Cphales, vertiges,
nauses, Insomnies, fatigue, Troubles psychiques

Relation de transposition :
A partir de donnes obtenues chez lanimal on dtermine une concentration quivalente
en toxicit humaine CETH exprim en mg/l de plasma

CETH=DL50 /(Vd*1000)

Lopration dextrapolation reste approximative car le sujet idal pour des tudes relatives
lhomme est lhomme lui-mme .

A-2- valuation de la toxicit aigue par voie locale

1. Test de Draize :
Identification des produits irritants (test dirritation) : application sur la peau dun lapin ou
aprs introduction dans le sac conjonctival de son il => des ractions caractristiques
(rougeur, urticaire, et formation de vsicules, ncrose, conjonctivite, production de larmes).

Lvaluation permet de classer les substances en 5 groupes selon le pouvoir irritant:


Non irritant ; Fortement irritant ;
Faiblement irritant ; Extrmement irritant
Modrment irritant ;

B- Les alternatives aux tests de toxicit sur animaux in vivo


les tudes in vitro
Essais de Cytotoxicit In Vitro
Les tests de culture de cellules humaines = sont plus prcis que les DL50 chez les
animaux.
Capables de prvoir la toxicit chez les humains avec une prcision de 90%.

Les avantages des cultures de cellules humaines pour prvoir la toxicit :


Elles sont humaines et permettent dviter les diffrences despces.
Elles peuvent tre prleves partir dun tissu (peau, foie, ...) susceptible dtre
affect par une substance particulire.
Elles permettent au chercheur dtudier comment une substance endommage les
cellules et donc de savoir pourquoi elle est toxique.
Elles permettent dviter de faire souffrir et de tuer des animaux.

Les alternatives aux tests dirritabilit


Eytex (marque dpose)
Ce test destin mesurer lirritation oculaire utilise une protine vgtale.
Ce gel protinique clair devient vitreux lorsquil est en contact avec une substance irritante.

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Lpiderme humain reconstitu
Il sagit de plusieurs couches de peau humaine cultives en laboratoire et que lon peut
utiliser pour les tests dirritation cutane.
Lignes cellulaires cornennes

C- Les tudes thoriques


On peut utiliser les systmes informatiques professionnels pour prvoir la proprit irritante
de nouvelles substances sur la base de ce qui est dj connu au sujet de substances irritantes
ayant une structure chimique semblable.

D- Les tudes humaines


Utilisation de volontaires humains pour tester les nouvelles formulations.
Cest le test le plus fiable. On peut valuer lirritation chez les humains grce un patch.
On place les substances sur des petites zones en haut du dos et on applique le patch pendant 2
jours.
E- Enqute pidmiologiques
Lenqute comporte la comparaison entre deux groupes dindividus (cohortes) aussi
semblables que possible lexception du facteur tudi (exposition une substance
chimique) / approches statistiques pour pouvoir tablir relation de cause effet. La
consultation des organismes de sant peut tre bnfique

II - valuation de la toxicit chronique :


Etude exprimentale de la toxicit chronique:
Les objectifs de cette tude sont :

=>Prciser la nature de la toxicit, les mcanismes daction des substances chimiques, les
organes cibles, la rversibilit, la persistance, lapparition retarde des effets
=>Dterminer la dose sans effets observ (DSE)

Protocole opratoire:
Ils durent gnralement de 2 3 mois (toxicit subaigue et subchronique) jusqu 1 anne
(toxicit chronique)
Ils sont effectus sur des animaux prsentant des paramtres pharmacocintiques aussi
proche de ceux de lhomme (chien, et un rongeur: rat)
La voie dadministration est celle qui est prvue en clinique pour les mdicaments ou la voie
possible de pntration dans lorganisme pour les autre substances chimiques.
Plusieurs lots danimaux (des deux sexes) sont mis en exprimentation , y compris un lot
tmoin (pas moins de 10 animaux / lot)
Trois niveaux de doses sont utiliss: une dose forte (toxique), une dose faible (effet
pharmacodynamique) et une dose intermdiaire, le lot tmoin ne reoit pas la substance
tester

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Surveillance des animaux: consommation alimentaire, poids, hmatologie, biochimie,
analyse des urines, ophtalmologie, ECG, comportement
tudes pharmacocintique (toxicocintique) raliss diffrents stades de lexprience
Examens anapathologiques la fin de ltude

valuation des donnes obtenues:


- Si la toxicit nest pas trop svre, une dose sans effet (DSE) peut tre tablie et une dose
journalire admissible (DJA) peut tre extrapole;

En appliquant le plus souvent un facteur de scurit (facteur 100 recommand par lOMS)
qui tient compte de la diffrence de sensibilit entre lhomme et lanimal et des autres facteurs
de variabilit inter-individuels

III. Autres essais de toxicit par administration


ritre:
A. Les essais de cancrognse:

1. Tests de cancrognicit classique in vivo:

Effectus chez le rat et la souris, long et couteux, linterprtation reste toujours dlicate
malgr la multiplicit des tests mis en vidence

2. Autres tests prdictifs:


- tude de la cancrognicit transplacentaire
- Etude des aberrations chromosomiques dans diffrentes lignes cellulaires
- tude de lactivit mutagne (toute substance mutagne est 90 % cancrigne)
- La vitesse de synthse de lADN in vitro aprs injection dun corps chimique
- La capacit de transformation de lignes cellulaires in vitro

Le CIRC (Centre International de Recherche contre le Cancer) a pu dfinir sur le plan


du pouvoir cancrogne 5 groupes de substances chimiques:
=>G1: agents cancrognes pour lhomme (As, Benzne, Tabac)
=>G2A: agents probablement cancrognes pour lhomme (Cd, formaldhyde)
=>G2B: agents pouvant tre cancrogne pour lhomme
=>G3: agents ne pouvant tre classs du point de vue de leur cancrogncit
=>G4: agents probablement non cancrognes pour lhomme

B. Essais de mutagnse:
Mutagnse: phnomnes rsultant des interactions entre une substance chimique et le
matriel gntique des organismes
Substance mutagne = induit une mutation ou augmente sa frquence
Une substance mutagne est potentiellement cancrogne
La mutation peut tre:
o Chromosomique: altration morphologique des chromosomes

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o Gnomique: modification du nombre des chromosomes du gnome;
Cette tude est utilise pour le dpistage des substances mutagne et dtecter les
substances cancrognes,

Les tests de mutagnse sont groups en 3 catgories:


Tests de mutations gniques: test dAMES sur microorganisme in vitro, tests in
vitro sur microorganismes, sur cellules de mammifres ou sur des insectes
Tests de dtection des anomalies chromosomiques: sur des levures , des plantes,
insectes, lymphocytes humains, cellules de mammifres in vitro
Tests daltration de lADN

C. Les tudes de lembryo-toxicit et des effets sur la reproduction :

1. Les tudes des fonctions de reproduction avec tude de la fertilit du male et de la


femelle:
permettent de calculer diffrents index
=>index de fertilit:% des accouplements rsultant en grossesse
=>index de gestation: % de grossesses aboutissant la mise bas
=>index de viabilit: % de NN qui survivent au moins 4 jr
=> Index de lactation: % danimaux en vie au moment du sevrage 21 jr

2. Examens de toxicit ftale:


Ltude des effets de lembryo-toxicit sur le dveloppement prnatal et postnatal;

lembryo-toxicit se traduit par:


Lembryo-ltalit: la mort de lembryon ou du ftus, elle survient lorsque le produit a pu
exercer sa toxicit dans les premiers stades de la multiplication de loeuf (stade blastula)
la tratognicit: survient lorsque le produit exerce son action pendant lorganognse

La tratognicit se traduit par :


Une anomalies: altration morphologique permanente dun organe ou dun tissu et qui
naffecte pas les fonctions physiologiques.
Une malformations congnitales non hrditaires: altration morphologique
permanente qui affecte une fonction physiologique.
Une monstuosit: une altration morphologique permanente trs grave qui affecte
plusieurs fonctions physiologiques et peut induire la mort.

La tratognicit peut aussi rsulter dune action mutagne.

D. Autres essais dvaluation de la toxicit par administrartion rpte:


Essais de tolrance locale (peau, yeux)
Recherche du pouvoir allergisant
Recherche du pouvoir immunostimulant ou immunosupresseur

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CONCLUSION
La toxicologie exprimentale =
valuation de la toxicit des molcules, dtermination de leur mode daction (fonction,
organe, cellules, molcules ADN, enzymes), de leur toxico-cintiques, diffrents niveaux
de lorganisme, do pourra dcouler ltablissement dun traitement appropri de lintoxication
(toxico clinique)
Malgr les progrs de la toxicologie exprimentale et la mise en uvre dexamens de plus en
plus nombreux incorpor dans le protocole dessais long terme, des tudes supplmentaires
sont encore ncessaires pour la connaissance sur la nature de la toxicit et les mcanismes
daction des toxiques

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