L'auxine une phytohormone pas comme les autres.

14 Novembre 2012 , Rdig par Mr MagniezPubli dans #biotechnologies

La dcouverte de cette phytohormone:

En 1880, Francis Darwin tudie le phnomne de la courbure phototropique du coloptile d'avoine.
Chez les poaces, les feuilles sont caches par une sorte d'tui apple coloptile. Lors de la
germination le coloptile est capable d'orienter sa croissance en fonction de la lumire. Cette capacit
d'orientation s'appelle le phototropisme.

Il a ainsi pu observer qu'en plaant une plantule dans une boite ferme et en perant celle-ci d'un petit
trou pour laisser entrer une lumire unidirectionnelle, le coloptile se courbe vers la source de lumire.
La phase oppose la lumire croit plus vite que celle au contact de la lumire. Si on coupe le
sommet du coloptile, il n'y a plus de courbure, mme chose si on place un cache sur le coloptile.

Par ces rsultats, il en conclue que le stimulus est produit dans la partie haute du coloptile et il est
transmis vers le site d'action (la courbure) dans une partie plus basse.

En 1913, Boysen-Jensen spare le coloptile de la tige par un bloc de glose. Il observe une
courbure du coloptile. Il en conclut que la substance induisant la courbure du coloptile a migr
travers le bloc de glose. Il remplace le bloc de glose par des blocs de mica, de platine et par du
beurre de cacao. Il observe l'absence de courbure du coloptile. Ils en conclue que la substance n'est
pas de nature lectrique, ni liposoluble. Cette substance est de nature hydrosoluble.

En 1919, Arpad Paal et en 1923 Soding placent la plaque de mica sur le cot de la tige oppose la
lumire. Ils observent un arrt de la courbure. A l'inverse, si la plaque de mica est place sur le cot
de la tige face la lumire, la courbure est conserve. Ils en concluent que la substance migre des
concentration plus importante du cot plac l'obscurit par rapport celui face la lumire
provoquant ainsi la courbure vers la source de lumire.

En 1926, Went dpose des bouts de coloptiles sur un bloc de glose. L'ensemble des coloptiles et
du bloc de glose est ensuite dpos sur l'un des cots de la tige pralablement dcapite. Le tout est
ensuite plac dans une obscurit totale. Il observe la courbure de la tige du cot ou le bloc a t
dpos. Il constate que l'angle de la courbure dpend du nombre de sommet de coloptiles. Il en
conclue que la courbure est fonction de la concentration du messager.
En 1931, Kogl et Haagen Smit identifient la structure chimique du messager qui porte le nom
d'auxine (acide 3 indole actique ou AIA). Il possde une chaine actique et un noyau indole.

Structure chimique:
Il existe 2 types d'hormones:

les hormones d'origine naturelle (elles sont produites par les plantes) sont l'acide indole-3-
actique, l'acide 3-indole-butyrique et l'acide 4-chloro 3-indole actique, de structures proches, ou
encore l'acide phnylactique qui ne prsente toutefois qu'une faible activit auxinique.

Acide indole-3-actique

Les hormones d'origine synthtique, l'acide 2,4-dichlorophnoxyactique (2,4-D), l'acide 2-

mthoxy-3,6-dichlorobenzoque (Dicamba), l'acide 2,4,5-trichlorophenoxyactique (2,4,5-T) ou encore
l'acide 1-naphtalne actique (1-ANA).

Qu'elles soient naturelles ou synthtiques, le dnominateur commun l'ensemble des auxines,

semble rsider dans la distance fixe (0,55nm) entre la charge ngative porte par le carboxyle (sous
sa forme dissocie) et une charge positive plus faible porte par le reste de la structure.

Pourquoi utiliser des hormones d'origine synthtique?

L'acide 2,4-dichlorophnoxyactique est une hormone puissante. Elle peut tre utilise
commeherbicide. Si on dose fortement l'auxine, celle-ci induit la chute des feuilles.
En culture in vitro, le fragment de plante ne possde pas toutes les hormones lui permettant une
rgnration d'une plante entire. On utilise des hormones de type ANA, 2,4D qui sont stables et pour
un cot moindre.

Utilisation d'hormones anti-auxine:

Ce sont des molcules structures proches des auxines qui occupent les sites rcepteurs de lAIA
ou un site particulier du rcepteur sans induire la suite des vnements et la chane de transduction
du signal auxine.

Ces substances rentrent en comptiton avec lauxine.

Exemple de compos anti-auxine: 2-4-6 trichlorophnoxyactique.

Mthodes de dosage de l'hormone:

Le test de Went utilis en 1926 (cf la dcouverte de cette hormone) est un test biologique puisqu'il
dose la concentration de l'auxine en fonction de l'effet physiologique qui est l'intensit de la courbure
de la tige.
Cette mthode est trs facile mettre en oeuvre et pour un cot faible mais il est peu
prcis.On dtecte de 10-4g/l 10-5g/l.

La mthode immunologique consiste doser la concentration de l'auxine grce au test ELISA on

dpose dans un plaque multipuits l'extrait vgtal contenant une certaine concentration d'auxine
doser. L'ensemble est plac l'tuve afin que l'auxine s'attache sur le plastique. Ensuite on vide
l'extrait. On amne les anticorps anti-auxinique qui reconnaissent la forme des molcules auxiniques
et se fixent dessus. On procde un rinage. On dirige un deuxime anticorps contre l'anticorps anti-
auxinique. Cette anticorps possde une enzyme qui au contacte de son substrat incolore va interragir
avec celui-ci et le colorer. Le dosage de la concentration de l'auxine est fonction de la quantit de
l'anticorps anti-anticorps auxinique c'est dire en fonction de l'activit enzymatique
qu'il porte.La dtection de l'activit enzymatique se fait l'aide d'un spectrophotomtre.
Cette mthode est beaucoup plus prcise on dtecte 10-9 g/l.

La mthode HPLC (High-performance liquid chromatography) couple avec un spectrofluorimtre.

On fait traverser l'extrait vgtal avec une certaine concentration d'auxine doser travers une
colonne contenant un gle de silice l'aide d'un solvant (souvent du mthanol et de l'eau). Certains
composs tranent dans la colonne d'autres passent plus vite. A la sortie le dtecteur
spectrofluorimtrique repre Les diffrents composs de notre extrait dont l'auxine doser. Le rsultat
graphique apparat sous forme de spectre fluorescent en fonction du temps de migration dans la
colonne. Il suffit de reprer le pic correspondant l'auxine en ralisant un tmoin partir d'auxine
commercial et par comparaison reprer le pic qui nous intresse. La surface de ce pic et fonction de la
concentration d'auxine dans l'extrait. On peut galement utiliser un autre dtecteur comme un
spectromtre de masse.
Cette mthode est encore plus prcise. On dtecte 10-12g/l.

Localisation de cette hormone:

On estime que la concentration de l'auxine en moyenne est de 10-9g/g de tissus.
Ces sites de synthse sont les bourgeons foliaires (mristmes) et moindre mesure dans les
mristmes racinaires et les tissus ags (feuilles adultes).
En gnral les cellules en division produisent des auxines et donc n'importe quelles cellules peuvent
produire des auxines.
 Effets physiologiques de cette hormone:
L'tude physiologique d'une hormone ncessite quelques rgles respecter:
Le choix de l'auxine: AIA; ANA; 2,4D. Attention, d'une hormone l'autre les effets peuvent tre
diffrents.
Le choix du matriel vgtal: l'espce vgtale; l'tude sur plante entire ou sur un fragment.
Le choix de la concentration de l'auxine: selon les concentrations les effets peuvent tre
diffrents.

Elongation cellulaire:
L'auxine stimule l'auxse (longation cellulaire). elle active la production de pompes protons. Ces
pompes expulsent des protons dans le milieu extracellulaire ce qui fait diminuer le pH dans la
paroi et augmenter le potentiel de membrane (la tension entre les deux cts de la membrane est
plus forte). Il sagit de lhypothse de la croissance acidodpendante .Lacidification de la paroi a
pour consquence dactiver les expansines (enzymes) qui coupent les liaisons hydrogne entre les
microfibrilles de cellulose et dautres composants de la paroi cellulaire. Larmature de cellulose se
relche et les polysaccharides de connexion sont spars, grce aux enzymes de la paroi cellulaire
qui peuvent y accder plus facilement. La paroi devient plus extensible. Lefflux des protons favorise
aussi lentre dions potassium qui vont, par unmcanisme dosmose, induire lentre deau dans la
cellule, do une augmentation de la pression de turgescence qui sapplique sur la totalit de la paroi
par lintermdiaire du cytoplasme. La cellule peut alors stirer . La cellulose synthase procde la
reconstruction de la cellulose.

L'auxine stimule les pompes protons ATP dpendant en quelques minutes.

L'auxine stimule l'entre d'eau dans la vacuole: elle stimule la synthse des aquaporines
(canaux protiques eau qui se trouve dans la membrane).
L'auxine joue un rle sur l'orientation des microtubules.
L'auxine active la synthse des enzymes comme la cellulose synthase en quelques heures.
L'auxine inhibe l'longation des racines. A forte concentration, il y a synthse d'thylne dans
la plante.

La division cellulaire:
L'auxine stimule la division cellulaire, c'est dire les mitoses en culture in vitro. Un fragment d'une
plante plac dans un milieu nutritif contenant de l'auxine provoque l'apparition de cellules
indiffrencies appelescals. Les cellules d'un tissu diffrenti doivent se ddiffrencier (perte de
leurs spcialisations) puis entrer en mitose.

Cas particulier:

Le pouvoir rhizogne de l'auxine. Lorsqu'on place un fragment de racine dans un milieu contenant de
l'auxine, on peut observer l'apparition de racines latrales et non une prolifration anarchique.

Diffrentiation cellulaire:

L'auxine induit la formation du xylme et du phlome.

Embryognse somatique:
Les tissus de l'hypocotyle (partie de la tige situe entre sa base (collet) et les premiers
cotyldons de la plante) en prsence de 2,4D provoquent l'apparition de cals. Ces cals sont
ensuite placs dans un milieu liquide sans 2,4D . Certains cals vont alors se diviser pour former un
embryon sans qu'il n'y ait eu fcondation. Cet effet physiologique trouve son intrt dans les
laboratoires industriels. En effet, il est utilis pour la slection de nouvelles varits.

Tropisme:
phototropisme

gotropisme = croissance oriente selon l'apesanteur.

Les statocytes sont des cellules spcialises dans la perception de la gravit et situes au niveau de
la coiffe des racines. Ces cellules sont caractrises par la prsence damyloplastes avec des grains
d'amidons, spcialiss, appels statolithes. Les statolithes sont donc des plastes, cest--dire des
organites intracellulaires, excentrs au ple basal de la cellule par sdimentation (gravit). Ils exercent
ainsi une pression sur la membrane des rticulums endoplasmiques, induisant une augmentation du
calcium intra-cytoplasmique et lactivation des transporteurs de lauxine. Les changements de
rpartition de lauxine dans la racine provoquent ainsi des variations dans la croissance de celles-
ci.

Dominance apicale:
Chez la plupart des plantes, les bourgeons axillaires situs juste sous le bourgeon apical ne se
dveloppent pas. Le bourgeon apical se dveloppe rapidement vers le haut et les premires
ramifications ne se ralisent sous ce bourgeon qu' une certaine distance. La section du bourgeon
apical provoque le dveloppement immdiat des bourgeons axillaires situs en dessous de lui. Tout
se passe comme si, en fonctionnement normal, le bourgeon terminal exerait une action inhibitrice sur
les bourgeons axillaires situs en dessous de lui. Ce phnomne est appel la dominance apicale.

l'auxine applique sur la tige sectionne au niveau d'un bourgeon apical vite le dveloppement des
bourgeons axillaires et donc maintient la dominance apicale exerce par le bourgeon apical. A partir
de cette exprience, on peut dduire que le bourgeon apical exerce sa dominance par l'intermdiaire
de l'auxine. Le bourgeon terminal secrte de l'auxine. Celle-ci circule vers le bas et inhibe le
dveloppement des bourgeons axillaires. La concentration d'auxine diminuant progressivement,
l'inhibition s'exerce seulement sur une partie plus ou moins grande de la tige, variable selon les
plantes.

L'utilisation de mutants auxotrophes pour le tryptophane, possde une dominance apicale faible ce qui
conduit un dveloppement des bourgeons axillaires. La synthse en auxine tant faible, le bourgeon
apical ne peut exercer une inhibition.

Dveloppement des fruits:

L'auxine stimule les divisions de l'ovaire.

L'auxine stimule la croissance des fruits.

exprience de Nitsch en 1950:

Si on supprime les aknes (vrais fruits) pendant la croissance de la fraise le faux-fruit (rceptacle
floral) se dveloppe peu, j'ai une inhibition de sa croissance.

Si on supprime les aknes d'un cot de la fraise et qu'on les laisse de l'autre cot, la fraise se
dveloppe de manire asymtrique. Plus fort dveloppement du cot prsentant encore des aknes.

Si on supprime tous les aknes de la fraise et qu'on applique de l'auxine sur le receptacle floral, la
croissance de la fraise est normale.Lapplication dauxine rtablit le dveloppement de la fraise prive
dakne.

Si on applique de l'auxine sur le fruit en fin de croissance, le fruit murt: c'est la senescence du fruit.
On stimule la synthse d'thylne qui permet le murissement.
 Abscission (chute) des feuilles et des fruits:
Dans la partie basse du ptiole se trouve une zone responsable de la chute des feuilles appele zone
gnratrice. Les cellules de celle-ci se ddiffrencient et entrent en mitose, on obtient une sorte de
mristme o les cellules ont des parois fragiles: c'est la zone de rupture. En prsence d'auxine, on
inhibe la formation de cette zone gnratrice, mais en excs,l'auxine stimule la synthse d'thylne et
donc favorise la formation de cette zone.

Stress abiotique (stress du l'environnement):

Exemples de stress:

O3 (ozone); UV; dficite hydrique.

En stress hydrique, la plante ferme ses stomates au niveau de l'piderme des feuilles. La plante
produit l'acide abscissique qui dclenche la fermeture des stomates. Les auxines ont l'effet oppos.
Elles stimulent l'ouverture des stomates.