MICROBIOLOGIA GENERAL

CICLO:
IV
DOCENTE:

- FARROMEQUE MEZA, ROSARIO

INTEGRANTES:

- PORTUGUEZ BAZALAR, Ana Luz

MARCO SANTOS, Williams
SOLIS OLIVA, Kristel
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INTRODUCCION

Un medio de cultivo est constituido por una mezcla de agua y sustancias que
en conjunto proporcionan los requerimientos nutricionales para el desarrollo de
los microorganismos.

La composicin de los medios de cultivo vara en funcin del grupo microbiano

que se pretende estudiar, y la preparacin del medio depende de la
complejidad qumica (composicin), el estado fsico y otras condiciones
requeridas (pH, concentracin, etc.).
Existen medios de cultivo comerciales empleados para el desarrollo de los
microorganismos ms comunes, sin embargo en muchas ocasiones se requiere
preparar el mismo mediante la mezcla de sus componentes.

Para el estudio de los microorganismos es indispensable contar entre otras

cosas con material y medios de cultivo estriles. En Microbiologa la
esterilizacin se define como el proceso mediante el cual se eliminan todos los
microorganismos (incluyendo formas de resistencia) de un objeto, medio o
superficie y su aplicacin garantiza la ausencia de microorganismos en el
material y medios de cultivo a ser empleados. Existen diversos mtodos de
esterilizacin, entre ellos: calor (seco o hmedo), filtracin (para sustancias
termolbiles y aire), radiaciones y aplicacin de gas de xido de etileno (para
jeringas y cajas de plstico).
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FUNDAMENTO TEORICO

Clasificacin de los medios de cultivo

Segn su origen:
a) NATURALES: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen
animal o vegetal como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya composicin
qumica no se conoce exactamente.
b) SINTTICOS: son los medios que contienen una composicin qumica
definida cualitativamente y cuantitativamente. Se utilizan para obtener
resultados reproducibles.
c) SEMISINTTICOS son los sintticos a los que se les aaden factores de
crecimiento bajo una forma de un extracto orgnico complejo, como por
ejemplo extracto de levadura.
Segn su consistencia
a) LQUIDOS: se denominan caldos y contienen los nutrientes en solucin
acuosa.
b) SLIDOS: se preparan aadiendo un agar a un medio lquido (caldo) a
razn de 15g/litro. El agar es una sustancia inerte polisacrida (hidrato de
carbono) que se extrae de las algas. Como esta sustancia no es digerida por
las bacterias no constituye ningn elemento nutritivo. Este conjunto
convenientemente esterilizado puede ser vertido en placas de Petri o en tubos
de ensayo y presentan la posibilidad de aislar y diferenciar bacterias, "procesos
que antes no eran posibles en medio lquido".
c) SEMISLIDOS: contienen 7,5 g de agar /litro de caldo. Se utilizan para
determinar la motilidad de las especies en estudio.
Actualmente se encuentran disponibles comercialmente con el agregado de
agar.
Segn su composicin: A causa de los requerimientos qumicos del mundo
microbiano, a veces es necesario agregar o eliminar componentes qumicos del
medio.
a) COMUNES O UNIVERSALES: su finalidad es el crecimiento de la mayor
parte de los microorganismos poco existentes. Es el medio ms
frecuentemente utilizado para mantener colonias microbianas. Por ejemplo:
agar comn o caldo comn.
b) ENRIQUECIDOS: estn compuestos de un medio base como apoyo del
crecimiento al cual se le puede agregar un gran exceso de nutrientes como
suplementos nutritivos, por ejemplo: sangre, suero, lquido asctico, etc. Se
utiliza para microorganismos que tienen grandes exigencias nutricionales.
c) SELECTIVOS: son slidos en los que la selectividad se consigue alterando
las condiciones fsicas del medio o aadiendo o suprimiendo componentes
qumicos especficos con el fin de inhibir el crecimiento de especies qumicas
cuyo crecimiento no interesa. Este tipo de medio slo permite el crecimiento de
un grupo de microorganismos e inhibiendo el de otros. Se utiliza para
seleccionar y aislar microorganismos a partir de poblaciones mixtas. Por
ejemplo Agar salado-manitol o Chapman (permite el crecimiento de ciertos
estafilococos).
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OBJETIVOS

- Al finalizar el trabajo prctico el estudiante estar en capacidad de:

Preparar adecuadamente medios de cultivo a partir de sus ingredientes y a

partir de medios de cultivo deshidratados.

Indicar el mtodo de esterilizacin apropiado.

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PROCEDIMIENTO

1. Preparacin de BROTH RM-VP(100ml)

OBSERVACION: una vez esterilizado todos los materiales a
trabajar, empezamos a preparar el caldo nutritivo

Frmula:

Pectona de carne.....................................................7.0.
Glucosa..............................................................5.0.
Tampn difosfato............................................5.0.

pH final: 6,9 +- 0,1 a 25c

1.1 Medir 100ml en la probeta.

1.2 leer cuidadosamente las instrucciones de preparacin del medio de

cultivo asignado

1.3 Pesar las cantidades fijadas para cada medio de cultivo

1.4 Calculamos los gramos a pesar: 17g.1000ml

X100ml

X = 1.7g
1.5 Pesamos 1.7g del caldo RM-VP en un papel kraft. Cerrar
inmediatamente el frasco de
medio de cultivo.

1.6 Disolver en un frasco, la porcin

pesada del caldo nutritivo con los
100ml de agua destilada.

1.7 Luego de disolver todo el

contenido en el frasco, pasamos a
cubrir la boca de la botella con papel kraft y aluminio.
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1.8 Luego lo llevamos a bao Mara

para darle la temperatura
adecuada, por 20 minutos.

1.9 Luego lo llevamos a Esterilizar en autoclave por

15 minutos a 15 libras de presin (121 C)
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2. Preparacin del Agar citrato Simmons (50ml).

Frmula:

Ingredientes por litro /22g.

Sulfato de Magnesio..............................0.2 g
Difosfato de Amonio..................................1 g
Fosfato Dipotsico....................................1 g
Citrato de Sodio........................................2 g
Cloruro de Sodio.......................................5 g
Agar........................................................15 g
Azul de Bromotimol..............................0.08 g

PH final: 6.8 0.2 a 25 C.

2.1 Medir 50ml en la probeta.

2.2 Leer cuidadosamente las instrucciones de preparacin del Agar citrato

asignado

2.3 pesar las cantidades fijadas para el Agar

citrato de Simmons.

2.4 calculamos los gramos a pesar:

22g.1000ml
X50ml

X = 1.1g

2.5 Pesamos 1.1g del Agar citrato de Simmons en un papel kraft. Cerrar
inmediatamente el frasco del Agar.

2.6 Disolver en el matraz, la porcin pesada del Agar citrato con los 50ml de
agua destilada
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2.7 Luego de disolver todo el contenido en el

frasco, pasamos a cubrir la boca de la botella
con papel kraft y aluminio.

2.8 Luego lo llevamos a bao Mara para darle la

temperatura adecuada, por 20 minutos.

2.9 Luego lo llevamos a Esterilizar en autoclave

por 15 minutos a 15 libras de presin (121 C
3. Preparacin del Agar SIN (50ml).

Frmula:

pH final: 7.3 0.1

3.1 Medir 50ml en la probeta.

3.2 Leer cuidadosamente las instrucciones de preparacin del Agar SIM

3.3 pesar las cantidades fijadas para el Agar SIM.

3.4 calculamos los gramos a pesar:

30g.1000ml
X50ml

X = 1.5g

3.5 Pesamos 1.5g del Agar SIM en un papel

kraft. Cerrar inmediatamente el frasco del Agar.

3.6 Disolver en el matraz, la porcin pesada del Agar SIM con los 50ml de
agua destilada
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3.7 Luego de disolver todo el contenido en el frasco, pasamos a cubrir la

boca de la botella con papel kraft y aluminio.

3.8 Luego lo llevamos a bao Mara para darle la temperatura adecuada, por
20 minutos.

3.9 Luego lo llevamos a Esterilizar en autoclave por 15 minutos a 15 libras

de presin (121 C)

CONCLUCION

Mediante el desarrollo de esta prctica aplicamos los procedimientos que

se debe realizar para la elaboracin de una correcta preparacin de un
medio de cultivo. Siguiendo los pasos predeterminados.

REFERENCIA BIBLIOGRAFICA

LIBROS:

Tortora G.J., Funke B.R., Case C.L. Introduccin a la Microbiologa.

Editorial Acribia SA, Zaragoza Espaa, 1993.

Vullo D.L., Wachsman M.B., Alch L.E. Microbiologa en Prctica.

Editorial Atlante S.R.L. Buenos Aires, 2000.

Freeman, B.A., "Microbiologa de Burrows", 22 Edicin

Interamericana, McGraw HiI!, 1989.

PAGINAS WEBS:

http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/guia.pdf

http://micromarravilla.blog.com.es/2009/03/25/preparacian-de-medios-
de-cultivo-5832217/

http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp4.pdf
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http://www.monografias.com/trabajos101/manual-practicas-microbiologia/manual-practicas-
microbiologia.shtml#recomendaa#ixzz3YYwiDfgA

http://es.scribd.com/doc/17102209/1-LABORATORIO-DE-MICROBIOLOGIA-I#scribd