Introduccin a la Biologa. Departamento de Biologa.

FACENA-UNNE

Trabajo Prctico

Observacin de Cromosomas en Mitosis

Objetivos
1. Conocer y aplicar tcnicas para la observacin de cromosomas en mitosis.
2. Reconocer el proceso de mitosis y su importancia biolgica
3. Comprender el mecanismo de divisin celular
4. Distinguir las distintas fases de la mitosis
5. Entender el mecanismo de distribucin de los cromosomas durante la mitosis

Actividad 1

Material
Cebolla (Allium cepa).
1 frasco de boca ancha
Cubreobjetos y portaobjetos.
Lupa y microscopio ptico.
Fijador: 3 partes de alcohol comn y 1 parte de cido actico.
cido clorhdrico normal (agua: 1000 cm3 y ac. clorhdrico: 82 cm3).
Colorante: orcena actica.

Procedimiento

A- Retirar las catfilas secas y restos de races de una cebolla y colocar sobre la boca de un frasco lleno
de agua de modo que la porcin desde donde se originan las races toque el agua. Esperar unos das
hasta que las nuevas races alcancen aproximadamente 1 cm.
B- Cortar las races y fijarlas con alcohol-cido actico (3:1) durante 20 a 30 minutos (Idealmente de 8
a 24 horas para una mejor fijacin).
C- Colocar una raz en un portaobjetos.
D- Agregar una gota de cido clorhdrico 1N y flamear sin que hierva ni se seque.
E- Secar el cido sobrante y agregar una gota de colorante.
F- Aislar la regin meristemtica retirando la cofia y tejidos adultos.
G- Macerar el meristema con la parte posterior de una aguja histolgica.
H- Colocar suavemente un cubreobjetos sobre el macerado y bajo la lupa, golpear suavemente con la
aguja sobre el cubre en las regiones donde an el tejido permanezca sin disgregar.
I- Cubrir el cubreobjetos con un papel de filtro y apoyando el dedo pulgar sobre l, presionar en sentido
vertical cuidando que no se desplace horizontalmente el cubreobjetos.
K- Dibujar lo observado en x400.

1
Introduccin a la Biologa. Departamento de Biologa. FACENA-UNNE

Profase: los cromosomas comienzan a Metafase: los cromosomas se encuentran

condensarse y se observan como fibras en su mximo estado de condensacin
enrolladas y ubicados en el plano ecuatorial

Anafase: los cromosomas migran Telofase: se restablece la membrana

hacia los polos. nuclear y comienza la citocinesis.

Actividad 2

Material
Cromosomas gigantes en clulas de Portaobjetos.
Solucin salina.
glndula salival de Drosophila sp.
Agujas histolgicas.
Cscara de frutas bien maduras.
Papel de filtro.
Frascos de boca ancha.
Colorante: orcena actica.
Trozos de tul o gasa.
Moscas de la fruta (Drosophila sp.).

Procedimiento

A- Colocar los restos de frutas en un frasco y dejarlo al aire libre. Con un poco de buena suerte las
moscas se sentirn atradas por el manjar. Una vez que las mismas se encuentren dentro del frasco,
cubrirlo con tul.
2
Introduccin a la Biologa. Departamento de Biologa. FACENA-UNNE

B- Al cabo de algunos das aparecern huevos y posteriormente larvas (que se observan fcilmente
porque su cuerpo es blanco y sus partes bucales negras.
C- Colocar larvas de ms o menos 4 mm de longitud en un portaobjetos con una gota de solucin
salina.
D- Retirar la cabeza de la larva con una aguja sosteniendo el cuerpo de la misma con otra aguja. La
presin para retirar la cabeza debe ser firme y suave en tal forma que la cabeza salga junto con las
glndulas salivales.
E- Separar las glndulas en un portaobjetos, y colocar una gota de orcena actica.
F- Colocar el cubreobjetos y presionar suavemente sobre el mismo entre papeles de filtro.
G- Dibuje lo que se observa en x400.

Cromosomas de
glndulas salivales
de Drosophila sp.

Bibliografa

Bruce, A. et al. 1996. Biologa Molecular de la clula. Edit. Omega. S. A. Ed. 3ra. Barcelona.
De Robertis, E. M., L. Hib y R. Ponzio. 1996. Biologa celular y Molecular. Editorial El Ateneo.
Buenos Aires.
Karp, G. 1998. Biologa Celular y Molecular. Ed. McGraw-Hill Interamericana. Mxico.
Lodish, H.; Harvey. 2002. Biologa Celular y Molecular. 4ta edicin. Editorial Medica Panamericana.
Con CD Rom

Preguntas Orientadoras para afianzar el estudio

1- Cuales son los dos acontecimientos que determinan el avance o la detencin del ciclo celular?
2- Que grupos de protenas controladoras de estos acontecimientos actuan o inhiben?
3- Que funcion tiene el MPF (factor promotor de la maduracin para la mitosis)?
4- Que accin tienen las fosfatasas para desintegrar o reconstituir la envoltura nuclear y la citocinesis?
5- Que funciones tienen los microtbulos y los microfilamentos del citoesqueleto durante la divisin
celular?
6- Cuales son los elementos que componen el llamado: Aparato mittico? Que funcin cumplen sus
principales componentes?
7- Caractersticas morfolgicas de los cromosomas metafsicos.
8- Morfologa del cromosoma politnico.
9- Existen genes reguladores del proceso de divisin celular?
10- Tipos celulares de acuerdo a su capacidad de entrar o no en mitosis durante toda su vida.