INTRODUCCIN

El ADN como material gentico : anlisis de la evidencia experimental

Los mecanismos de la herencia han sido objeto de estudio durante aos. Cmo se
transmiten las caractersticas de una generacin a otra? Cul es el material hereditario?

La idea de que el material gentico se transmite de manera fsica, desde los

progenitores a sus descendientes, fue aceptada desde los inicios del concepto de herencia.
La investigacin de la estructura de las biomolculas, que se inici a finales del siglo XIX,
progres considerablemente sentando las bases para la descripcin del material gentico en
trminos qumicos.

Hasta la dcada de 1940 los genetistas consideraban que el material gentico estaba
en las protenas. Varios factores sustentaban esta creencia:
- la alta complejidad qumica de las protenas, ya que los aminocidos pueden disponerse
en una gran variedad de formas distintas
- la enorme abundancia de protenas en las clulas. Aunque el contenido en protenas
puede variar considerablemente, ms del 50% del peso seco celular corresponde a estas
molculas
- durante toda la primera mitad del siglo XX se acumularon datos que sugeran la relacin
entre herencia y protenas, como ser que ciertas enfermedades hereditarias humanas se
deben al bloqueo en el funcionamiento de determinadas protenas con funcin enzimtica.

Algunos investigadores, en cambio, comenzaron a relacionar la herencia con el cido

desoxi-ribonucleico (ADN), componente del ncleo celular que haba sido aislado por
primera vez en 1869 por F. Miescher. Se apoyaban, adems, en los trabajos de F. Griffith,
quien en 1928 pudo demostrar que clulas bacterianas (Diplococcus pneumoniae), de una
cepa virulenta y letal, inactivadas por calor, podan transformar a las bacterias de otra cepa
relacionada, no virulenta y no letal, en bacterias letales. En 1944, se public un trabajo de
Avery, Mc Leod y Mc Carty en el cual se reportaba al ADN como la sustancia responsable
de la transformacin que haba descrito Griffith.

Experimento de F. Griffith (1928), que demuestra la transformacin de cepas bacterianas No

Virulentas en cepas Virulentas, an cuando stas ltimas haban muerto por calor.

En 1952, A. Hershey y M. Chase realizaban experimentos destinados a esclarecer el

proceso por el cual la bacteria Escherichia coli es infectada por el virus bacterifago (o
fago) T2. El virus est compuesto en un 50% por protenas y en un 50% por ADN. Uno de
los componentes del fago penetra en la clula bacteriana, all se replica utilizando materiales
y energa de la clula y, tras el ensamble de muchos fagos nuevos, la clula se lisa y libera
los nuevos virus.

Pero es el ADN o son las protenas del fago las que penetran a la clula y dirigen
la reproduccin viral? Para establecerlo, realizaron una serie de experimentos, cuyo diseo
se esquematizan en la figura correspondiente.
 Se utilizaron los radioistopos 32P y 35S para poder seguir los componentes
moleculares de los fagos durante la infeccin, ya que el 32P marca especficamente el ADN,
que contiene fsforo pero no azufre, y el 35S marca las protenas, que contienen azufre
pero no fsforo.

Se cultivaron las clulas de E. coli en presencia de 32P o 35S y se infectaron,

posteriormente, con el virus T2. Los nuevos fagos producidos durante la infeccin
presentaron marcado radiactivamente el ncleo ADN o la cubierta proteica,
respectivamente.

Los fagos marcados fueron aislados y se usaron para infectar bacterias no

marcadas. Al producirse el contacto fago-bacteria quedan formados los complejos de
adsorcin. Estos complejos se aislaron y se sometieron a una fuerte agitacin para separar
los fagos que estaban unidos la pared de las bacterias. Las partculas virales fueron
separadas de las bacterianas mediante centrifugacin, para proceder, luego, a la deteccin
de radioistopos.

La deteccin de radioistopos, mostr que la mayora del ADN marcado con 32P se
haba transferido al interior de las clulas bacterianas despus de la adsorcin; por otro
lado, la mayora de la protena marcada con 35S permaneca en las cubiertas vacas de los
fagos ("fantasmas"), fuera de la clula bacteriana . Despus de esta separacin, las clulas
bacterianas, que contenan ahora el ADN viral, se lisaron al producirse los nuevos fagos.
Los fagos de la progenie contenan 32P pero no 35S.

Descripcin, resumida, resumida de las experiencias de Hershey y Chase (1952).

 Experiencia de Hershey y Chase
En las bacterias incubadas en 32P se producen virus activos con el fsforo incorporado. Como el fsforo forma
parte del ADN pero no de las protenas, ste sera el material gentico necesario para la reproduccin.
CICLO CELULAR

El ciclo celular puede ser definido como el "programa" para el crecimiento y la

divisin celular (proceso de reproduccin celular) que posee cada clula. El ciclo celular
tiene sistemas de control, que regulan tanto las diferentes actividades celulares como la
velocidad a la que se producen, operando a travs de "frenos" moleculares. Estos
controles pueden detener el ciclo celular en sitios de control o momentos determinados en
la vida de una clula.

En la mayora de las clulas que integran los diferentes tejidos de un organismo

pluricelular, el ciclo celular produce dos clulas hijas, idnticas ente s y a su clula
progenitora.

Las diferentes Existen ciclos celulares especializados donde esos eventos

actividades metablicas que
tienen lugar en el ciclo celular
pueden dividirse en cuatro
fases: G1, S, G2 y M
divisin celular (que puede
ser mitosis para clulas
somticas o meiosis para
clulas especializadas en la
reproduccin sexual). Una
reproduccin exacta de la
clula requiere que todas
estas fases estn
coordinadas.
no siguen la secuencia ya sealada. Ejemplo de ello son los
ciclos con fases S repetidas, sin intervencin de fases M,
conocidos como endociclos. Este tipo de ciclo da lugar a un
incremento del nmero de cromosomas. Contrariamente
existen ciclos celulares bsicos de meiosis en los cuales se
realizan dos fases M secuenciales, sin participacin de fases
S. Una tercer variacin es aquella vista en los ciclos
interrumpidos, como aquellos que ocurren despus de la
fertilizacin de huevos de anfibios. Estas clulas se
caracterizan porque sufren ciclos extremadamente rpidos,
con fases S y M alternadas, sin crecimiento celular. Es
importante sealar que la reproduccin celular nunca
ocurrir si esos procesos son ejecutados en una forma
azarosa y que existen mecanismos que establecen e imponen
la secuencia de cada uno de los eventos del ciclo
(crecimiento, replicacin y mitosis) en cada especie.

El Ciclo Celular
1: una clula
eucarionte, en su
mnima expresin, con
el ncleo conteniendo
ADN.
2: la clula crece,
sintetiza materiales
propios.
3: la clula duplica su
ADN.
4: la clula se divide
pasando una copia de
ADN y la mitad del
citoplasma a cada
clula hija, que a su
vez repetir el ciclo.
Cmo se organiza el ciclo celular?

Las primeras observaciones al

microscopio ptico, determinaron dos
periodos principales del ciclo celular: La
divisin celular y la interfase. En la
divisin celular, que representa la
mitosis, se observa una gran actividad
de reorganizacin y movimiento en la
clula, donde los cromosomas se
condensan hacindose visibles. Esta
etapa finaliza con los procesos de
separacin de los cromosomas y
divisin celular. La interfase, que
comprende la mayor parte del ciclo
celular, se llama as por transcurrir entre
dos mitosis. En este periodo no se
observaba proceso activo alguno salvo
un incremento en el tamao celular. El
avance tecnolgico permiti identificar
los diferentes procesos que se producen
en la interfase, descartando la idea Etapas del ciclo celular: la Interfase (G1, S y
primitiva de inactividad o reposo y G2) precede a la etapa de Divisin Celular.
determinando la secuencia ordenada de
los complicados y elaborados
preparativos que finalizan con la divisin
celular.

Interfase

Durante la interfase tienen lugar acontecimientos conocidos, en su globalidad, como

crecimiento. Estos incluyen la sntesis de nuevas organelas, la sntesis de protenas y la
replicacin del ADN.

El periodo de interfase se divide en las etapas G1 (crecimiento celular, implica una activa
sntesis proteica y de otros constituyentes celulares), S (duplicacin del ADN) y G2 (sntesis
de protenas relacionadas con la divisin celular).

Las clulas de diferentes tejidos poseen distinta duracin de sus ciclos celulares y esta
variacin se observa, principalmente, en la duracin de la etapa G1. En esta etapa ocurre
una intensa sntesis de protenas. Tambin se incrementa el nmero de ribosomas y de
mitocondrias. El tamao celular aumenta debido a la incorporacin de materiales para
sntesis.
En G0 la clula es sensible a
Eventualmente, una clula puede salir de G1 y entrar en
seales de diferenciacin, en
otra etapa llamada G0. Si esto ocurre, la clula contina
el caso de organismos plurice-
sus actividades metablicas pero no ingresa a la segunda
lulares, o de inicio de procesos
etapa del ciclo, la fase S, por lo tanto no presenta un ciclo
sexuales, en el caso de
celular pues no se reproduce. Un ejemplo de este tipo de
organismos unicelulares.
clulas lo representan las clulas cardacas y las clulas
nerviosas, que nunca de dividen y permanecen
constantemente en la etapa G0.

En la siguiente fase del ciclo, S, la clula duplica todo su material gentico y sintetiza
protenas histnicas, que se unirn al ADN formando los nucleosomas. Al final de esta
etapa, la clula contiene el doble de la cantidad de ADN que posea al inicio.
ADN

Histonas

El ADN de las clulas eucariontes

se asocia con protenas llamadas
histonas. La molcula bicatenaria
de ADN se enrolla a estas
protenas formando unidades
estructurales denominadas
nucleosomas. Esta disposicin
favorece la compactacin del
ADN.

En este esquema se muestra el enrollamiento de la

molcula de ADN alrededor de las protenas Histnicas.
En la fase G2 la clula sintetiza protenas relacionadas con la divisin celular y realiza el
ensamblaje de los centrolos (cuyas protenas haban sido sintetizadas en la etapa G1).
Cuando una clula se divide, sus cromosomas migran a los futuros ncleos de las clulas
hijas unindose a protenas que forman las fibras del huso acromtico. Estas protenas se
sintetizan durante la fase G2.

La reproduccin o divisin celular culmina con el ciclo de la clula. Las clulas somticas
(clulas de todos los tejidos del cuerpo) se dividen por mitosis, originando luego de la
divisin dos clulas idnticas entre s e idnticas a la que les dio origen. En la meiosis,
divisin celular exclusiva de clulas sexuales, se producen gametas, que poseen la mitad de
la informacin gentica que la clula original y
su nico propsito es la reproduccin sexual.

Aunque los detalles de cada ciclo celular

eucariota varan entre los organismos, los
puntos esenciales son comunes a todos ellos.
En un ciclo celular que produce dos clulas
hijas idnticas, el ADN se duplica, se segrega
y finalmente la clula original se divide para
dar lugar a dos clulas nuevas
independientes, cada una con una dotacin
gentica idntica a la de su hermana.

Qu hace que una clula comience el complicado proceso de la divisin

celular? Cmo se detiene?

Existe una variedad de protenas que regulan y controlan la duracin de cada una de las
etapas del ciclo celular. Entre ellas, se encuentran las ciclinas, las quinasas dependientes
de ciclinas (Cdc2 y p34), los inhibidores CDK, la protena G Cdc42, y las integrinas; adems,
algunos genes supresores tumorales (especialmente p53 y Rb),.

Las experiencias con levaduras y la fisiologa celular de los anfibios dieron las primeras
pautas para comprender la regulacin del ciclo celular, es decir, los factores que regulan la
duracin de la fase G1 o, dicho de otra forma, los factores de determinan el final de una
etapa y el inicio de la siguiente. El interpretar estos fenmenos nos permite llegar a la
comprensin del programa que controla la reproduccin celular.

Los primeros avances sobre los mecanismos de control del

Micrografa electrnica de
clulas de levadura:
Saccharomyces cerevisiae
ciclo celular en eucariotas se han realizado empleando como
modelo las levaduras. Las levaduras son hongos unicelulares
que presentan grandes ventajas como modelo de estudio del
ciclo celular eucariota. Son organismos muy adecuados
porque tienen tiempos de generacin cortos (90 minutos) y su
genoma es alrededor de 100 veces menos complejo que el de
una clula de mamfero, pero mantienen el mismo tipo de
organizacin del ciclo celular que los eucariotas
multicelulares. Adems, al ser fciles de manipular
genticamente, es posible aislar mutaciones (variaciones) en
genes que controlan procesos celulares bsicos, clonar los
genes identificados por esas mutaciones y realizar deleciones
(eliminar) de genes especficos.
El desarrollo de nuevas tecnologas ha
revelado que los mecanismos que controlan el
ciclo celular han sido conservados a travs de
la evolucin de las clulas eucariontes. En la
ltima dcada se han podido identificar
algunos genes y molculas responsables de
este programa. Estos estudios nos muestran
que las molculas responsables de esta
regulacin corresponden a vas metablicas
comunes, evolutivamente conservadas, desde
las levaduras hasta las clulas eucariontes de
mamferos superiores.
Estos nuevos conocimientos colocan el
estudio del ciclo celular dentro de una
nueva perspectiva y demuestra la
universalidad que este tiene en el proceso
de evolucin. Asimismo, indican que el
control de la progresin del ciclo celular
es importante en las diferentes especies de
la escala evolutiva. De hecho en la
actualidad, posee una gran importancia en
el mbito clnico, por su importante papel
en el cncer.

El conocimiento actual del ciclo celular en levaduras se obtuvo a travs de la bsqueda de

mutaciones en genes que codifican para componentes de la maquinaria del ciclo celular.
Basndose en que la divisin celular es esencial para la proliferacin de los organismos, se
aislaron mutaciones que afectan el ciclo celular y, por consiguiente, los ciclos reproductores.

Las mutaciones condicionales, por ejemplo, inactivan un

producto gnico en ciertas condiciones pero no en otras.
Las ms comunes son las mutaciones termo sensibles en
las que el producto del gen mutado funciona de modo
normal a una temperatura pero no a otra. Entre los
mutantes termo sensibles obtenidos se seleccionaron
aquellos que afectaban a un gen del control del ciclo
celular. Estos se diferenciaban del resto porque todas las
clulas de una poblacin que portan esa mutacin se
detienen en el mismo punto del ciclo celular cuando se
incuban a la temperatura adecuada. A estas mutaciones,
y por extrapolacin, a los genes a los que afectan, se les
llama cdc (Ciclo de Divisin Celular).
En cierto momento, las clulas
normales cesan su crecimiento, ya sea por la falta de
nutrientes, la falta de espacio u otros factores, y se
detienen en un momento tardo de la etapa G1
llamado punto R (restriccin).
Estos estudios han permitido
identificar una familia de protenas
quinasas dependientes de ciclina, que
juegan un papel central en los
procesos claves del ciclo celular: la
entrada en ciclo, la sntesis de ADN y
la regulacin de la mitosis. Estas
quinasas son las subunidades
catalticas de un complejo que incluye
tambin una subunidad proteica
reguladora, denominada ciclina. La
ciclina, determina la localizacin o la
especificidad de sustrato de la
quinasa. Esta asociacin de subunidad
cataltica y reguladora define las
funciones de la quinasa a lo largo del
ciclo. En concreto, cada complejo de
Ciclinas determina una funcin de la
quinasa a lo largo del ciclo.
 Degradacin

Cdk

Entrada en
mitosis
FPM
Mitosis
G1 Ciclinas
G1
R
G2
Cdk-ciclinas

Ciclinas
mitticas S

Cdk

Degradacin

La protena quinasa (Cdk) se asocia con distintas ciclinas en las

diferentes etapas del ciclo celular, y forma el complejo Cdk-ciclinas.
Este complejo activado conduce a la clula a travs de las etapas del
ciclo. La degradacin de las ciclinas inactiva el complejo. FPM: factor
promotor de mitosis (Cdk + ciclina)

Una vez sobrepasado el punto R, estn obligadas a seguir a travs del resto de las fases del
ciclo, y luego a dividirse. La fase G1 se completa rpidamente y, en la fase S, comienza la
sntesis de ADN y de histonas. Otro mecanismo de control se lleva a cabo durante el
proceso mismo de duplicacin del material gentico, en la fase S, y asegura que la
duplicacin ocurra slo una vez por ciclo. Luego, la clula entra en la fase G2 del ciclo. En
G2, existe otro punto de control en el cual la clula "evala si est preparada para entrar en
mitosis. Este control acta como un mecanismo de seguridad que garantiza que solamente
entren en mitosis aquellas clulas que hayan completado la duplicacin de su material
gentico.
La naturaleza del control, o de los controles, que actan en el punto R sigue siendo objeto
de intensa investigacin, no slo a raz de su inters como mecanismo biolgico, sino
tambin por su importancia potencial en el control del cncer. El pasaje de la clula a travs
del punto R depende de la integracin del conjunto de seales externas e internas que
recibe. El sistema de control del ciclo celular est basado en dos protenas clave, las
ciclinas y las protenas quinasas dependientes de ciclinas (Cdk), que responden a
esta integracin de seales.

Las protenas Cdk, como todas las quinasas, actan activando otras protenas por
fosforilacin y se encuentran presentes en todas las clulas eucariticas durante todo el
ciclo celular. Las ciclinas son protenas activadoras que se unen a las quinasas y regulan su
actividad. El nivel de ciclinas vara a lo largo del ciclo, ya que su concentracin aumenta en
determinados momentos y disminuye, por degradacin, en otros. El ensamblado de las Cdk
con las ciclinas, su activacin y el desensamblado constituyen un proceso cclico que dirige
la sucesin de las distintas fases del ciclo celular. Existen varios tipos de ciclinas que
pueden agruparse en dos clases principales: las ciclinas de G1 y las ciclinas mitticas. Las
ciclinas de cada una de estas clases actan en la fase correspondiente. del ciclo celular.
Los eventos que conducen a una clula desde la fase G2 a la mitosis son ms conocidos.
La ciclina mittica se acumula en forma gradual durante G2 y se une a la quinasa formando
el complejo Cdk-ciclina, tambin llamado factor promotor de la mitosis (FPM). Este complejo
fosforila ciertas protenas especficas, induciendo los cambios estructurales que conducen a
la mitosis. Entre ellos, se pueden mencionar la condensacin de los cromosomas, producida
por fosforilacin de una de las histonas, el desensamblado de la envoltura nuclear y la
organizacin de los microtbulos en el huso mittico. El complejo Cdk-ciclina es
rpidamente inactivado durante la mitosis por degradacin de la ciclina mittica

En los ltimos aos se han encontrado
tambin homlogos a estas quinasas en
todos los eucariotas en los que se han
buscado, y que incluyen desde el gusano
nematodo Caenorhabditis elegans, la mosca
Drosophila melanogaster , mamferos como
el ratn y el hombre y plantas como
Arabidopsis thaliana. Estas evidencias
indican que el sistema de control del ciclo
celular es general en todos los eucariotas.
Estos complejos se activan en G1, haciendo
que las clulas haploides no puedan
detenerse, lo que proporciona el carcter de
irreversibilidad a la entrada en el ciclo
celular. Otros complejos de ciclinas activan
el inicio de la replicacin, regulan la
formacin de los husos mitticos, la divisin
nuclear y el crecimiento en G2.

En sntesis : la regulacin del ciclo celular determina un control sobre la divisin y el

crecimiento celular. Los fallos o errores en la regulacin normal del ciclo celular pueden
conducir a enfermedades como el cncer. Algunos de los factores y protenas que regulan
los diferentes eventos del ciclo celular son:

CdK (quinasa dependiente de ciclinas, agrega fosfato a una protena), junto con las
ciclinas son las principales llaves de control para el ciclo celular, causando que la
clula se desplace de G1 a S o G2 a M.
FPM (Factor Promotor de la Maduracin) incluye la CdK y ciclinas que
desencadenan la progresin del ciclo celular.
p53 Es una protena que funciona bloqueando el ciclo celular si el ADN esta daado.
Si el dao es severo esta protena puede causar apoptosis (muerte celular).
p27 Es una protena que se une a ciclinas y CdK bloqueando la entrada de la clula
en fase S.

Los niveles de p53 estn incrementados

En adelante se analizarn los principales
procesos que ocurren en las etapas G1 y G2,
es decir, los eventos principales que
determinan la sntesis de protenas.
en clulas daadas. Esto otorga tiempo
para reparar el ADN por bloqueo del
ciclo celular. Una mutacin de la
protena p53 es condicin ms frecuente
que conduce al cncer.
En el sndrome de Li Fraumeni, un
defecto gentico en la p53 determina una
alta frecuencia de cncer en los
individuos afectados.
 La mejor manera de concebir la estructura
del ADN es imaginndose una escalera
La etapa G1 : Sntesis de Protenas construida a base de nucleticos. La parte
azcar/fosfato del nucletido conforma los
Como se mencion anteriormente, la etapa G1 lados de la escalera, y las parejas de bases
del ciclo celular comprende la sntesis de la se enganchan para formar los peldaos.
mayor parte de las protenas que posee una La disposicin espacial de la molcula
clula. Si relacionamos este hecho con la gran determina luego la formacin de la doble
variedad de funciones de las protenas y con su hlice del ADN.
participacin en todos los procesos metablicos
celulares, podremos inferir la gran importancia de esta etapa en la vida de una clula. Es en
este momento donde la clula construye sus biomolculas y complejos macromoleculares,
duplicando las estructuras subcelulares y aumentando su volumen.
Para poder sintetizar una protena es necesario buscar y copiar la informacin necesaria
del ADN, pues en la secuencia de sus nucletidos se encuentra la receta o informacin
para armar una protena.
Antes de comenzar a describir las etapas de la transcripcin (sntesis de ARN a partir de un
molde de ADN) y traduccin (sntesis de una protena con la informacin transcripta en el
ARN), volveremos a repasar las caractersticas del ADN (descriptas en el mdulo de
biomolculas).

Estructura del ADN

El ADN es una macromolcula, un

polmero formado por nucletidos. Re-
cordemos que cada nucletido est for-
mado por un azcar (en este caso la
desoxirribosa), una base nitrogenada
(adenina, guanina, citocina y timina) y un
grupo fosfato. Los nucletidos forman
cadenas, unindose a travs de enlaces
3,5 fosfodister. El ADN posee dos
cadenas (es bicatenario), que se
disponen en el espacio en forma
antiparalela. Las bases nitrogenadas
forman los escalones , unindose de
forma complementaria (adenina con
timina y citocina con guanina). Esta
macromolcula se enrolla formando una
hlice.

El ADN posee la informacin necesaria

para sintetizar protenas. La secuencia de nucletidos determina la secuencia final de
aminocidos en la protena, y este orden en los aminocidos define la funcin biolgica de la
protena.

Durante la etapa G1, el ADN se encuentra en un estado laxo, situacin que permite copiar
sectores con informacin (genes) para la sntesis de protenas. A este estado del ADN se lo
 llama cromatina. La cromatina puede presentar, a su vez, dos formas, la eucromatina o
cromatina verdadera (corresponde el estado ms laxo) y la heterocromatina (que
representa un estado ms condensado que el anterior). Los sectores transcriptos
corresponden a la forma ms laxa del ADN, es decir, la eucromatina.

Como pasa la informacin del ADN al ARN?

Sntesis de ARN: Transcripcin

El proceso de sntesis de ARN o TRANSCRIPCIN, consiste en hacer una copia

complementaria de
un segmento de Hay tres tipos de ARN (ver Unidad 2):
ADN. El ARN se El ARN ribosmico (ARNr) es el ms abundante y
diferencia estructu- corresponde al 50% del total de ARN. Constituye los
ralmente del ADN ribosomas celulares.
porque es mono- El ARN de transferencia (ARNt) posee entre 73 y 90
catenario (est nucletidos, representa el 45% del total de ARN, su funcin
formado por una es llevar aminocidos hacia los ribosomas para la sntesis de
nica cadena), posee protenas..
ribosa (azcar El ARN mensajero (ARNm) ,que posee en promedio 1000 o
pentosa) y porque 1500 nucletidos, corresponde aproximadamente al 5% del
posee uracilo, base total de ARN, lleva una copia del cdigo gentico obtenida a
nitro-genada que partir de la secuencia de bases del ADN. Esta copia
reemplaza a la timina especfica determina la secuencia de aminocidos de las
del ADN. protenas.

El primer paso de la sntesis consiste en la asociacin de la enzima ARN-polimerasa a una

regin del ADN denominada promotor. La enzima cambia su configuracin, desenrollando
una vuelta de hlice (para esto debe separar las histonas que estn unidas al ADN y
separar ambas cadenas complementarias del
Heterocromatina: forma inactiva ADN a travs de la ruptura de los enlaces
condensada de ADN localizada sobre todo puente de hidrgeno que unen las bases
en la periferia del ncleo, que se tie complementarias). Esto genera una burbuja de
fuertemente con las coloraciones. La ARNpolimerasa
heterocromatina puede ser de dos tipos
diferentes: la constitutiva, idntica para
todas las clulas del organismo y que carece ADN
de informacin gentica, y la facultativa,
diferente en los distintos tipos celulares y
que contiene informacin sobre todos
aquellos genes que no se expresan. ARN-
Eucromatina: Representa la forma activa de polimerasa
la cromatina en la que se est transcribiendo
el material gentico de las molculas de
ADN a molculas de ARN mensajero. Se
encuentra diseminada en todo el ncleo y no Burbuja
es visible al microscopio ptico. de
trascripcin
replicacin en la cual ambas cadenas del ADN
permanecen separadas en un pequeo tramo, mientras la ARN polimerasa realiza la
polimerizacin de los ribonucletidos para formar ARN, utilizando una de las hebras
de ADN como patrn o molde.
La ARN-polimerasa se desplaza por la hebra patrn, insertando ribonucletidos, y
siguiendo la complementariedad de bases. De acuerdo a esto, si la secuencia de ADN es

3'... TACGCT...5'

La secuencia de ARN complementaria es

5'... AUGCGA...3'

Mientras se realiza este proceso se genera una hebra hbrida ADN-ARN, pero a medida
que se avanza en la transcripcin, la
cadena de ARN se libera y el ADN
restablece su estructura bicatenaria,
unindose nuevamente a su hebra
complementaria.
Trascripcin
en la burbuja
Si bien el proceso de transcripcin es
similar en todos los tipos celulares,
existen algunas diferencias que
mencionaremos a continuacin. ARN
mensajero

TRANSCRIPCIN EN PROCARIONTES

En la primer etapa o etapa de iniciacin, la enzima ARN polimerasa se une a un cofactor.

Este cofactor permite que la enzima reconozca y se acople a una regin del ADN llamada

En el esquema se muestra
la enzima ARN polimerasa
unindose al promotor del
ADN. La misma consiste
en una secuencia de
nucletidos que indica el
inicio de un gen.

promotor, la cual posee una secuencia de nucletidos especfica (TATAAT TTGACA).

Luego, en la siguiente fase o etapa de elongacin, la ARN polimerasa recorre la hebra de
ADN hacia su extremo 5. A medida que va leyendo la cadena de ADN agrega
ribonucletidos en forma complementaria con ste, sintetizando de esta forma, una hebra de
ARN en direccin 5-3. En sntesis, la ARN polimerasa reconoce el nucletido libre en el
ADN, ubica un ribonucletido complementario y, finalmente, polimeriza los ribonucletidos
para obtener una cadena. La energa necesaria para realizar la sntesis la proveen los
mismos ribonucletidos trifosfatados (ATPr, GTPr, UTPr y CTPr).

La ARN polimerasa
construye una cadena de
ARN utilizando como
molde los nucletidos del
ADN. La sntesis progresa
en sentido 53.

En la etapa de finalizacin la ARN polimerasa llega a una secuencia rica en G y C, que

indica la terminacin de la cadena. El ADN recupera su estructura y el ARN queda libre.

Al finalizar la sntesis, se
libera la enzima ARN
polimerasa y la molcula
de ARN recientemente
formada.
En las clulas procariontes, el ARNm transcripto es posteriormente traducido sin sufrir
modificaciones. Los ARNt y ARNr, en cambio, sufren procesos de maduracin que sern
analizados ms adelante.

TRANSCRIPCIN EN EUCARIONTES

Las clulas eucariontes poseen tres enzimas

ARN polimerasa I: transcribe el ARN
ARN polimerasas, estas son ARN polimerasa I, II
ribosomal 45S, que constituye
y III, cada una de ellas se ocupa de la sntesis de
posteriormente la subunidad mayor del
diferentes molculas de ARN.
ribosoma.
ARN polimerasa II: transcribe los ARN
En la fase de iniciacin, la enzima ARN mensajeros.
polimerasa II, que se ocupa de la transcripcin ARN polimerasa III: transcribe los ARN
del ARN mensajero, se une al sitio promotor del de transferencia y el ARN ribosomal 5S.
ADN por intermedio de protenas llamadas
factores basales de transcripcin. Estas
protenas, adems de iniciar la sntesis de ARN controlan y regulan la transcripcin de
determinados genes (ver regulacin de la transcripcin). La secuencia que indica el inicio de
la sntesis se llama Promotora.

Una vez iniciada la transcripcin, la

ARN polimerasa comienza a ubicar Las secuencias promotoras en clulas eucariontes
los ribonucletidos complementarios a estn determinadas por determinadas frecuencias
la secuencia de ADN que est de nucletidos. Una de ellas, llamada caja TATA,
copiando, continuando la sntesis en est formada por nucletidos de timina y adenina.
sentido 5-3. Si bien an no se ha Esta secuencia le indica a la ARN polimerasa
identificado una seal de terminacin dnde debe alinearse para iniciar la transcripcin.
en el ADN, se ha observado que Existen otras secuencias llamadas cajas CAAT y
cuando el ARN transcripto posee una CG, cada una de ellas con secuencias de bases
especficas. Cada una de estas cajas se ubica en
secuencia AAUAAA, la transcripcin
posiciones definidas en el ADN, siempre antes del
finaliza. En este sector acta una
enzima que corta la cadena unos punto de inicio de la transcripcin.
nucletidos despus de esta
secuencia. Este tipo de enzimas, capaces de romper los enlaces fosfodister que unen los
nucletidos, se denominan endonucleasas.

Los ARN de transferencia y ribosomales se transcriben de otros sectores del ADN, a travs
de la accin de ARN polimerasas especficas.

Maduracin de los ARN

En clulas eucariontes, los diferentes ARNs son modificados antes de salir del ncleo y
comenzar la sntesis de protenas.

Los ARN mensajeros, que contienen la informacin que codifica la estructura primaria de
una protena, sufren varios procesos que los modifican. Entre estas modificaciones post-
transcripcionales se mencionarn:

1) Agregado de un capuchn en el extremo 5 del ARN

2) Agregado de una cola poli A, en el extremo 3.
3) Corte y empalme del ARN original o transcripto primario
1) El capuchn (cap en ingls) consiste en la adicin de una molcula de 7-metil-
guanosina en el extremo 5 del ARN. Esta puede agregarse durante la transcripcin
y su funcin es impedir la degradacin enzimtica del ARNm inmaduro. El capuchn
tambin indica el sitio de inicio de la traduccin y participa en el proceso de corte y
empalme.
2) La cola poli A est formada por alrededor de 200 adeninas y se agrega a la
molcula de ARNm por la accin de una enzima especfica. Este proceso se
denomina poliadenilacin y colabora en exportar el ARNm desde el ncleo al
citoplasma evitando tambin su degradacin dentro del ncleo.
3) El ARNm que se transcribe inicialmente posee secuencias con informacin para la
protena, llamadas exones, y secuencias sin informacin, llamadas intrones. En el
proceso de corte y empalme, los intrones son removidos de la molcula, mientras
se unen los exones, produciendo una molcula ms corta que la inicial, llamada
ARNm maduro. Este
Los intrones corresponden a secuencias de proceso es exacto y se
tamao variable (entre unos pocos cientos de
pares de bases hasta cientos de miles de Las RNPpn reconocen los
pares de bases) que interrumpen la lmites de los intrones,
codificacin normal de algunos genes de produciendo la eliminacin
organismos eucariticos. Representan de los mismos. Cada intrn
secuencias que no tienen sentido (sin posee secuencias de inicio y
codificacin aparente) o significado gentico finalizacin, reconocidas
como los genes que codifican protenas o por las protenas nucleares
RNA estructurales y que afectan la que producen el clivaje,
traduccin fiel de la informacin gentica. eliminando el intrn en
Luego de la transcripcin, el RNA precursor forma de lazo y uniendo los
contiene las secuencias intrnicas y estas exones consecutivamente.
deben ser removidas antes que el RNAm deje Los intrones eliminados son
el ncleo. degradados en el ncleo.

lleva a cabo por una serie de ribonucleoprotenas nucleares (RNP pn) que reconocen
el inicio y final de cada intrn, los eliminan de la secuencia de ARN y empalman los
exones.

Existe un proceso de
empalme alternativo que
determina la formacin de
ARNm maduros con
diferente informacin y, por
lo tanto, que pueden generar
protenas diferentes en
algunos aminocidos.

Corte y Empalme
Los intrones son eliminados de
la molcula de ARN por las
ribonucleoprotenas nucleares.
Luego se produce el empalme
de los exones.
Existen genes eucariticos que no tienen intrones, como es el caso de algunos genes de
levaduras y otros, como el gen de la distrofina humana (relacionado con la enfermedad de
Duchenne) contiene ms de 60 intrones.
En general, los organismos procariontes no tienen intrones (si bien existen algunas
excepciones). En cambio, las arquebacterias (las bacterias ms primitivas, que se supone
dieron origen a las actuales) contienen algunos intrones en su genoma.

Los ARN de tranferencia son los ARN ms pequeos, presentan zonas de

complementariedad intracatenaria (dentro de la misma cadena) cuando la molcula se
pliega sobre s misma. Estos plegamientos les confieren una estructura caracterstica
semejante a la de una hoja de trbol. Existen distintos ARNt dentro de la clula, que difieren
en dos zonas: la regin 3' terminal, capaz de unirse a un aminocido especfico y una
porcin intermedia denominada anticodn que consiste en un triplete de nucletidos.

Cada ARNt posee una regin a travs

3 de la cual se une con un aminocido
5 especfico (en este esquema es la
fenilalanina) y una porcin llamada
anticodn, que posee una secuencia de
tres nucletidos. El anticodn es
fundamental en el momento de la
sntesis proteica, pues reconoce el codn
(secuencia de tres nucletidos en el
ARNm) y se une a l en forma
complementaria.

Molecula de ARN t
ARN t con el anticodn (bases AAA) en su
parte inferior, y el aminocido fenil
alanina unido en el extremo 3.

Un plegamiento posterior en el ARNt hace que adquiera la forma de la letra L., debido al
apareamiento entre algunos nucletidos. La forma L es la que acta en la sntesis proteica.
A la izquierda se muestra un esquema con el plegamiento final del ARNt. A la derecha se observa un
modelo molecular del ARNt, en su plegamiento en forma de L.

Esquema de las dos

subunidades ribosmicas.
Ambas migran desde el
ncleo al citoplasma en
forma separada y slo se
unen en el momento de
sintetizar una protena.

Los ARN ribosomales son transcriptos en varias molculas iniciales o precursoras, que
finalmente se unen para forman las dos subunidades que forman el ribosoma. Luego de un
procesamiento especfico, los ARNr maduros se unen a protenas formando complejos
nucleoproteicos (ribosomas) en una zona del ncleo celular llamada nucleolo. Como se
expresara anteriormente, cada ribosoma est compuesto por dos subunidades, una mayor y
otra menor, identificadas como 40S y 60S respectivamente (los nmeros hacen referencia a
los coeficientes de sedimentacin, que indican las velocidades con que sedimentan las
subunidades cuando son ultracentrifugadas). La subunidad menor posee dos sitios,
denominadas sitio P (por peptidil) y sitio A (por aminoacil). Por otro lado, la subunidad mayor
presenta un tnel por el que sale la cadena polipeptdica a medida que se sintetiza
Cul es la relacin entre la secuencia de bases en el ARNm y las protenas?

El cdigo Gentico

La comprensin del cdigo gentico implica el conocimiento de la herencia, el mecanismo

por el cual la informacin contenida en la molcula de ADN no slo puede ser transferida de
una generacin a la siguiente, sino la forma en que puede expresarse y determinar las
caractersticas de un organismo.

Para poder dilucidar el cdigo gentico fue necesario entender las relaciones entre el ADN y
las protenas. Si las protenas con sus 20 aminocidos, constituyen el "lenguaje de la vida"
(metfora de los aos 40) la molcula del ADN, con sus cuatro bases nitrogenadas,
representan el cdigo de este lenguaje.

Los cientficos comenzaron a plantearse la relacin entre los 20 aminocidos biolgicamente

importantes y los 4 nucletidos diferentes. Si cada nucletido "codificara" un aminocido,
slo podran traducirse en este lenguaje cuatro aminocidos. Si dos nucletidos
especificaran un aminocido, utilizando todas las combinaciones posibles, daran un total de
42, es decir 16 posibilidades o combinaciones, pero todava no alcanzaran para los 20
aminocidos. Por consiguiente, cada aminocido esta codificado por 3 nucletidos. Esto
proporcionara 43 64 combinaciones posibles, lo cual es suficiente para codificar los 20
aminocidos. No olvidemos que la combinacin de los 20 aminocidos produce todas las
protenas que una clula sintetiza, como si fueran las letras de un abecedario que forman las
miles de palabras en un lenguaje.

En otras palabras, el cdigo gentico es como un diccionario que establece una

equivalencia entre la secuencia de nucletidos del ADN y la secuencia de aminocidos de
las protenas. Como se indic anteriormente, cada aminocido est codificado por tres
bases nitrogenadas o tripletes. Sesenta y un tripletes codifican aminocidos y los tres
tripletes restantes indican la terminacin del mensaje. Una sencilla cuenta nos indica que
bastaran solo veinte tripletes para codificar todos los aminocidos.
Qu sucede con los tripletes que sobran? Ya se ha indicado que tres tripletes sealan la
terminacin de la cadena (seal STOP). Entre los sesenta y un tripletes que codifican
aminocidos habr algunos que debern codificar ms de un aminocido.
De hecho, existen tripletes sinnimos, que codifican para ms de un aminocido.

El siguiente cuadro muestra esta relacin:

 El Cdigo gentico
Relacin entre los distintos tripletes y los aminocidos que codifican. Obsrvese
que existen codones que, al no corresponder a ningn aminocido, constituyen
seales de fin de la traduccin o seales STOP. Los codones SINNIMOS se
diferenciasn solo en su ltimo nucletido, es decir que los dos primeros
nucletidos determinan especficamente al aminocido.

El cdigo gentico presenta determinadas caractersticas:

Es universal, pues est presente en casi todos los seres vivos conocidos. Solo
existen algunas excepciones en ciertas bacterias.
No es ambiguo, pues cada triplete especifica slo un aminocido. Existen tambin
tres tripletes que indican la terminacin de la cadena (seal STOP). Estos ltimos
son UGA, UAG y UAA.
Hay varios tripletes para un mismo aminocido, por ello se lo llama degenerado.
Esta situacin implica la existencia de tripletes sinnimos.

La sntesis de protenas o traduccin

La informacin que contiene el ADN se transcribe a los diferentes tipos de ARN. Los ARN
as sintetizados en el ncleo celular (en clulas eucariontes) son modificados antes de salir
hacia el citoplasma, lugar donde se sintetizan las protenas.
ADN

Transcripcin Ncleo

ARN

Traduccin Citoplasma

PROTENAS

El esquema que se observa a continuacin representa los que se conoci como el Dogma
Central de la Biologa. El flujo de informacin va desde el ADN a las protenas. Tambin se
indica la autorreplicacin del ADN, proceso que ocurre durante la etapa S del ciclo celular
(que ser analizado ms adelante). Es importante notar que los procesos de transcripcin y
traduccin ocurren reiteradamente durante cada ciclo, mientras que la
duplicacin del ADN se produce slo una vez por ciclo , salvo algunas excepciones
anteriormente citadas.
La traduccin es el proceso por el cual la informacin que contiene el ARN mensajero se
utiliza para la sntesis de una protena. Esta informacin determina el orden en que se unirn
los aminocidos, es decir, la estructura primaria de la protena.
Antes de comenzar a desarrollar las etapas de la traduccin repasemos la funcin de cada
uno de los ARNs que fueron transcriptos:

Es importante destacar que la Trascripcin y la Traduccin son independientes de la

Duplicacin del ADN. As, una clula que permanece en G0 , como por ejemplo la neurona,
puede realizar una activa sntesis proteica.
 1. ARNm: contiene en su secuencia de nucletidos la informacin que determina la
secuencia de aminocidos en una protena. Los ARNm son especficos para la
protena que va a ser sintetizada y derivan directamente de la informacin de un gen.
Cada gen contiene informacin para la sntesis de una determinada protena. En el
ARNm la informacin se lee a travs de los codones, secuencias de tres
nucletidos (Ver cdigo gentico).
2. ARNr: los diferentes ARN ribosomales se unen a protenas especficas para formar
los ribosomas. Estos estn formados por dos subunidades, una mayor y otra menor,
que migran desde el ncleo al citoplasma en forma separada y slo se unen en el
citoplasma en el momento de la sntesis de protenas. Los ribosomas constituyen el
lugar fsico de la sntesis proteica.
3. ARNt: transporta aminocidos de manera especfica. Existen 31 tipos diferentes de
ARNt, que actan como molculas intermediarias entre los codones del ARNm y los
aminocidos. Los ARNt poseen un anticodn (combinacin de tres nucletidos) que
es complementario a un
codn del ARNm.

Este esquema muestra una

secuencia de codones en el
ARNm y su correspondientes
anticodones en el ARNt.

El proceso de sntesis proteica es muy similar en procariontes y eucariontes, si bien es un

poco ms compleja en stos ltimos.

Ahora analicemos cmo es la unin de los aminocidos con los ARNt correspondientes.

Una aminoacil-ARNt sintetasa une el aminocido al ARNt

El aminocido se une a su correspondiente ARNt por la accin de la enzima aminoacil-

ARNt sintetasa. Para realizar este enlace es necesario el aporte de energa proveniente del
ATP.

Aminocido + ATP Aminocido-AMP + PP

En una primera reaccin un aminocido se carga de energa, formando un complejo con el

AMP, aminoacil AMP. El nombre de este complejo est dado por el aminocido, as el
leucinil AMP contiene leucina; el fenilalanil AMP contiene fenilalanina y el metionil-AMP
tiene metionina. Dado que el AMP deriva de la hidrlisis de un ATP, se libera pirofosfato
(PP).

En un segundo paso esa energa es utilizada para adicionar este complejo al ARNt
correspondiente. Esta reaccin es catalizada por la enzima aminoacil ARNt sintetasa y
forma una molcula esencial para la sntesis proteica: el aminoacil-ARNtAA que reconoce el
codn complementario en el ARNm.
Aminocido-AMP + ARNt Aminocido-ARNt + AMP

Es importante destacar que la energa

del ATP usada en la primera reaccin
queda contenida en la unin qumica
entre el aminocido y el ARNt, y ser
utilizada posteriormente en la sntesis
de protenas.
Existen 20 aminoacil-ARNt sintetasas diferentes,
cada una de ellas posee una estructura especfica
que reconoce a un aminocido y al ARNt
correspondiente. Ambos reconocimientos
permiten que cada uno de los 31 tipos de ARNt se
una slo a uno de los 20 aminocidos usados en
la sntesis proteica. Ello es posible porque cada
aminoacil ARNt sintetasa identifica al ARNt por
el anticodn, la parte ms especfica del ARNt
No obstante, en los ARNt existen otras seales
que son reconocidas por la enzima, generalmente
tramos de nucletidos cercanos al anticodn.

El extremo 5' de los ARNm contiene una secuencia de

aminoacil-ARNt
sintetasa
Algunos ARNm se localizan
en sitios prefijados en el
citoplasma, de modo que las
protenas que codifican se
sintetizan y se concentran en
esos sitios. Un ejemplo es el
ARNm de la actina, que se
sita en la zona perifrica de
las clulas epiteliales donde
se deposita la mayor parte
de la actina .
alrededor de 10 nucletidos, previa al codn de
ARNt iniciacin, que no es traducida. En algunos ARNm esta
secuencia participa en el control de la traduccin y en
otros regula la estabilidad del ARNm, es decir, su
supervivencia, evitando su degradacin. Existe otra
secuencia especial del ARNm que se halla despus del
codn de terminacin (entre ste y la cola poli A). Esta
secuencia tambin controla la supervivencia del
ARNm.
Una vez que los ARNt estn cargados con el aminocido
correspondiente puede iniciarse el proceso de traduccin.
La traduccin consta de las siguientes etapas: etapa de
inciacin, etapa de elongacin y etapa de finalizacin.

Iniciacin:
Los ARNm salen hacia el citoplasma por los poros de la envoltura nuclear. Una vez en el
citosol, cada ARNm se combina con nuevas protenas y con ribosomas, que lo habilitan para
ejercer su funcin codificadora durante la sntesis proteica. Entre las protenas se encuentra
la llamada CBP (por cap binding protein), que se
combina con el cap en el extremo 5 del ARNm. Por ejemplo, la secuencia
El primer codn, entonces, capaz de ser traducido, AUGGCCUGUAACGGU en el
es el codn AUG, cuya informacin codifica al mensajero, es traducida a partir del
aminocido metionina. Cuando el codn AUG se codn AUG. Los codones siguientes
halla en otras localizaciones en el ARNm codifica a sern GCC, UGU, AAC y GGU, que
las metioninas del interior de las molculas codifican, respectiva-mente, los
proteicas. Al especificar el primer aminocido de la aminocidos alanina, cisteina,
protena, el codn AUG de iniciacin determina el asparagina y glicina.
encuadre de los sucesivos tripletes, lo que asegura
la sntesis correcta de la molcula.

El codn de iniciacin se ubica prximo a la caperuza 5'. Este triplete va precedido de una
secuencia especfica de nucletidos (AGGAGG) que indica la zona de unin del ARNm con
el ribosoma.
La etapa de iniciacin es regulada por protenas
El complejo de iniciacin se forma citoslicas llamadas factores de inciacin (IF). El
cuando la subunidad menor del factor IF-4 se liga a una secuencia intermedia entre el
ribosoma reconoce la caperuza y se cap y el codn de iniciacin. Esta unin requiere
une al ARNm en la zona prxima al energa que es provista por un ATP. Luego, el ARNt
codn de iniciacin. Esta etapa unido a la metionina se coloca en el sitio P de la
necesita de la colaboracin de subunidad menor del ribosoma, reaccin que utiliza el
factor IF-2 y la energa de un GTP. Posteriormente otro
diferentes protenas, factores de
iniciacin (FI) y el aporte de energa factor de iniciacin, el IF-3, con la ayuda del IF-4
suministrada por el GTP. coloca el extremo 5 del ARNm sobre una de las caras
Simultneamente se acopla un ARNt, de la unidad menor del ribosoma, la que posee los sitios
que contiene un anticodn P y A. De inmediato la subunidad menor detecta al
complementario al AUG, es decir el codn de AUG de iniciacin, que se coloca en el sitio P.
UAC. Este transfer porta el De esta forma, el ARNt unido al aminocido metionina
aminocido metionina. Una vez queda ubicado en el sitio P de la subunidad menor,
encajado el ARNt-metionina, se establecindose la unin codn-anticodn. El
liberan los FI y se acopla la acoplamiento correcto entre estos dos tripletes es
subunidad mayor del ribosoma, imprescindible para asegurar el encuadre apropiado de
ensamblndose de esta forma el los siguientes codones del ARNm en los sitios P y A del
ribosoma completo y funcional. ribosoma.

Etapa de Iniciacin
Secuencia de sucesos que ocurren en la Iniciacin de la traduccin.

Elongacin de la cadena peptdica:

Esta etapa consiste en la adicin de aminocidos para formar la cadena peptdica (protena).
Este proceso es catalizado por la enzima peptidil transferasa. As, cada nuevo aminoacil
ARNt que ingresa al ribosoma deja su aminocido a la cadena en crecimiento.

Los aminocidos se unen por medio de uniones peptdicas

La unin de los aminocidos se realiza a travs de un enlace peptdico (se unen el grupo
carboxilo de un aminocido y el grupo amino del aminocido siguiente, con prdida de una
molcula de agua). Cualquiera que sea su longitud, la protena mantiene el carcter
anfotrico de los aminocidos aislados, ya que contiene un grupo amino libre en uno de sus
extremos y un grupo carboxilo en el otro extremo. La protena se sintetiza a partir del
extremo que contiene un grupo amino libre. Ello es correspondiente con la direccin 5 3
usada para la traduccin del ARNm.

Los mecanismos para

alinear a los aminoacil
ARNt de acuerdo con
el orden de los
codones del ARNm
son complejos.
Requieren de los
ribosomas, cuya
primera tarea, como
ya se mencionara
anteriormente, es
localizar al codn AUG
de iniciacin y
adaptarlo
correctamente para
que el encuadre de
ese triplete y el de los
siguientes sea el
Esquema general de la sntesis de protenas adecuado. Luego el
ribosoma se desliza
hacia el extremo 3 del ARNm y traduce a los sucesivos tripletes en los aminocidos
correspondientes. Estos son trasladados ( de a uno por vez) por los respectivos ARNt. Los
enlaces peptdicos se producen dentro del ribosoma. Finalmente, cuando el ribosoma llega
al codn de terminacin (en el extremo 3 del ARNm) finaliza la sntesis proteica y se libera
la protena.

La etapa de alargamiento o elongacin de la cadena peptdica comienza, entonces, cuando

al sitio A del ribosoma se acerca otro ARNt cargado con su aminocido (su anticodn es
complementario con el segundo codn del ARNm, con el cual se une). La reaccin es
mediada por un factor de elongacin llamado EF-1 que necesita energa que es aportada
por un GTP.

Al quedar el nuevo ARNt cargado con el aminocido cerca del metionil-ARNt, localizado en
el sitio P, se produce el enlace peptdico entre la metionina y el siguiente aminocido, al
mismo tiempo que se desacopla el primer ARNt de la su aminocido, la metionina. El
complejo formado ahora por el ARNt unido a la metionina y al segundo aminocido, queda
ubicado en el sitio A del ribosoma. La unin peptdica es catalizada por la subunidad mayor
del ribosoma. La energa requerida para producir este enlace es aportada por el mismo
aminocido, que haba sido provisto de energa durante su unin al ARNt. Luego, el
ribosoma se corre tres nucletidos en direccin del extremo 5 del ARNm. Este proceso,
llamado traslocacin, es mediado por el factor de elongacin EF-2 y tambin consume
energa que es aportada, en este caso, por un GTP.

Como vemos, desde el punto de vista energtico la sntesis proteica es bastante costosa, ya
que por cada aminocido que se incorpora se consumen dos GTP y un ATP, este ltimo
gastado durante la sntesis del aminoacil-ARNt.
El corrimiento del ARNm hace que el codn de iniciacin sea desalojado del sitio P, y, por
consiguiente, del ribosoma. El segundo codn se encuentra ahora en el sitio P y el tercer
codn que ser traducido, ingresa al sitio A. El corrimiento de los codones desplaza
tambin a los ARNt , por lo que el ARNt que contena inicialmente la metionina sale del
ribosoma y se desprende del codn de iniciacin. De esta forma el dipptido recientemente
formado pasa del sitio A al sitio P.

Mientras tanto, un tercer aminoacil-ARNt ingresa en el ribosoma , se ubica en el sitio A, y su

anticodn se une al tercer codn de ARNm, otra vez por la intervencin del EF-1. El paso
siguiente comprende la formacin de una unin peptdica entre el dipptido y el aminocido
del tercer aminoacil ARNt. Esta unin peptdica genera un tripeptidil ARNt, que
permanece en el sitio P hasta la prxima traslocacin del ARNm.

Este proceso se repite sucesivamente codn tras codn. Debido a que con cada
traslocacin se corren tres nucletidos del ARNm , el extremo 5 se aleja progresivamente
del ribosoma y el extremo 3 se acerca a l en igual medida. Cuando el ribosoma se ha
alejado del extremo 5 del ARNm unos 90 nucletidos, en el codn de iniciacin se acomoda

Etapa de Elongacin
Secuencia de sucesos dela etapa de Elongacin
del polipptido. A medida que los ARNt traen
aminocidos a los sitios P y A del ribosoma, se
van produciendo las uniones peptdicas. El
polipptido sale del ribosoma por un canal de la
subunidad mayor. Producida la unin peptdica,
el ribosoma se corre un codn hacia la
derecha.
un nuevo ribosoma, lo cual da inicio a la sntesis de otra copia de la cadena proteica. Esto
se repite varias veces .

Finalizacin de la sntesis de protenas

Se produce cuando aparece uno de los codones de terminacin

(UAA,UAG,UGA ). En este momento un factor proteico de terminacin (RF) se une al codn
de terminacin e impide que algn ARNt con otro aminocido se ubique en el sitio A. En
este momento se produce la hidrlisis de la cadena peptdica y se separan las dos
subunidades del ribosoma.

En sntesis, la terminacin de la cadena polipeptdica est sealada por el ARNm mediante

un codn que no especifica la incorporacin de ningn aminocido . Cuando el ribosoma
llega a algunos de los codones indicados ms arriba, la protena terminada se libera del
ltimo ARNt, que tambin se separa del ARNm. Por ltimo tambin se disocian las
subunidades ribosmicas. Todos estos elementos pueden ser reutilizados en una nueva
sntesis.

protena

ARNm subunidades
ribosomales

Etapa de Finalizacin

Una vez finalizada la sntesis de una protena, el ARN mensajero queda libre y puede ser
ledo de nuevo. De hecho, es muy frecuente que antes de que finalice una protena ya est
comenzando la sntesis de otra, con lo cual, una misma molcula de ARN mensajero est
siendo utilizada por varios ribosomas simultneamente y produce varias copias de la misma
protena. A estas estructuras donde un mismo ARNm est siendo traducido por varios
ribosomas en forma simultnea se las llama polirribosomas o polisomas. En esta
estructura, cada ribosoma ejecuta la sntesis proteica de manera independiente, generando
cada uno un polipptido completo.
Cules son las principales diferencias entre la traduccin en clulas eucariotas
y procariotas?

Sin dudas, la principal diferencia radica en la maduracin del ARNm. En las clulas
procariotas el ARNm transcripto es traducido sin sufrir modificaciones. Como se recordar,
en estas clulas no existe una envoltura nuclear que separe el material gentico del
citoplasma. Por lo tanto, a medida que la ARN polimerasa transcribe el ARNm los ribosomas
comienzan la traduccin.

La eficiencia metablica en las clulas

La clula es capaz de realizar una gran variedad de procesos metablicos muy complejos,
todos ellos catalizados enzimticamente.

Cmo son regulados y controlados esos procesos? Evidentemente, esta pregunta nos
conduce a una segunda cuestin: Cmo hace una clula u organismo vivo para sintetizar
las protenas que necesita en funcin de sus
necesidades o de las variables condiciones del Opern: Conjunto de genes que regula la
medio que la rodea? Por lo general, las clulas produccin de una determinada protena.
no gastan energa en la sntesis o la Se lo ha estudiado en procariontes, como
degradacin de materiales si no es necesario. E. coli (ver ms adelante). El opern
La regulacin gentica de la sntesis de enzimas contiene genes estructurales, un gen
es un ejemplo: la clula solo sintetizar enzimas operador, un gen promotor y un gen
que catalicen la degradacin de una sustancia, regulador.
si la sustancia est presente; de lo contrario,
la sntesis de enzimas permanecer anulada. Para tratar de explicar esta forma de control,
los cientficos franceses F.Jacob, J.Monod, y A.Lwoff, en 1965, propusieron un mecanismo
de regulacin de la sntesis proteica para clulas procariontes. Este consiste en la operacin
de ciertos genes. Concretamente, la sntesis de enzimas est dirigida y regulada por
algunos genes ubicados en un segmento del ADN llamado Opern.

ARNpolimerasa

Operador
Promotor
Genes Estructurales
Gen Regulador
1 3
2
Direccin de la Trascripcin

Cromosoma bacteriano
Representacin esquemtica de un Opern
Est formado por un gen Promotor, un Operador y Genes Estructurales (1, 2 y 3) que codifican
enzimas. El Promotor es el sitio al cual se une la ARNpolimerasa para comenzar a transcribir
los genes . El Operador es el sitio al que puede unirse una protena represora que bloquea la
trascripcin.
Se describieron diferentes tipos de genes en el ADN, stos son:

Genes Estructurales: Son genes que codifican para las enzimas que catalizan una
va metablica. Los genes estructurales que son transcriptos en ARNm contienen la
informacin para la sntesis de una o varias protenas. En este ltimo caso se los
llama policistrnicos.
Gen Regulador: Produce una protena (llamada represora) que regula la
trascripcin de determinados genes de acuerdo a las diferentes condiciones del
medio. Puede activarse (sintetizando la protena represora) o desactivarse,
permitiendo en este ltimo caso la trascripcin de genes estructurales.
Gen Promotor: es una secuencia de nucletidos en el ADN. Esta secuencia es
reconocida por la ARN polimerasa al inicio de la trascripcin.
Gen Operador: Es una secuencia de nucletidos en el ADN, ubicada entre el gen
promotor y los genes estructurales. Si este gen es bloqueado por la protena
represora impide la trascripcin de los genes estructurales.

El siguiente esquema muestra la disposicin de los genes del opern lactosa. Este opern
regula el metabolismo de la lactosa, a travs de la trascripcin y traduccin de las enzimas
que catalizan este proceso.

Funcionamiento del sistema Opern Lactosa

Cuando ingresa lactosa al citoplasma bacteriano, sta se une ala Protena Represora (PR) y la
inactiva. De este modo, los Genes estructurales se transcriben y hay sntesis de enzimas
degradadoras de Lactosa. Cuando el disacrido se agota, la PR queda libre y bloquea la
transcripcin de los Genes Estructurales unindose al Operador. As, las enzimas degradadoras no
se sintetizan cuando no hay sustrato a degradar.
La ARN polimerasa se ubica en el gen promotor. Para poder
Los genes estructurales
realizar la transcripcin de los genes estructurales, el gen
tienen informacin para la
operador debe estar libre, es decir, sin protena represora.
sntesis de tres enzimas
En este mecanismo de regulacin, las enzimas que
vinculadas al metabolismo
metabolizan la lactosa slo se producen en presencia de
de la lactosa: la permeasa,
sta. Por lo tanto, si hay lactosa en el medio (la clula
la beta galactosidasa y la
puede utilizarla como fuente de energa), la misma lactosa
transacetilasa.
acta inhibiendo la protena represora (desactivndola) e
impidiendo de este modo que se una al gen operador.
Decimos en este caso que la lactosa acta como inductor de la sntesis de las enzimas
necesarias para su metabolismo. Con el gen operador libre, la ARN polimerasa tiene va
libre para transcribir los genes estructurales.

En ausencia de lactosa, la protena represora se une al gen operador impidiendo la

transcripcin de los genes estructurales. Esta protena represora ejerce un control negativo,
pues su interaccin con el ADN impide la expresin de los genes estructurales.

El opern lactosa tambin tiene un control positivo a travs de la concentracin de glucosa

disponible para ser metabolizada. Cuando hay glucosa en el medio, la bacteria metaboliza
exclusivamente este monosacrido. Pero si la concentracin de glucosa disminuye (al
mismo tiempo aumenta la concentracin de AMPcclico) comienza a funcionar el opern
lactosa. El AMPcclico acta unindose a una protena (llamada CAP) que se fija en un
sector especfico del promotor. Esto aumenta la afinidad del promotor con la ARN
polimerasa, estimulando la transcripcin de los genes estructurales y permitiendo, que la
clula pueda utilizar lactosa como fuente de energa.

Cmo regulan la expresin gentica las clulas eucariontes?

Es un hecho conocido que prcticamente todas las clulas de un organismo pluricelular

eucarionte (como nosotros) poseen la misma informacin gentica (una excepcin son las
gametas o clulas sexuales, es decir, vulos o espermatozoides). Esto significa que todas
las clulas tienen la potencialidad de sintetizar las mismas protenas y cumplir las mismas
funciones. Como sabemos, esto no ocurre as. Existen diferentes mecanismos a travs de
los cuales cada tipo celular es capaz de bloquear determinados sectores de la informacin
de su ADN. A continuacin, analizaremos algunos de ellos:

Condensacin del ADN en heterocromatina: Como se indic anteriormente, la cromatina

se presenta en dos estados, uno ms laxo llamado eucromatina y otro ms condensado,
llamado heterocromatina. Slo se transcriben (y posteriormente se traducen) los sectores
del ADN ms desplegados, es decir, los que corresponden a la conformacin de
eucromatina. Por otra parte, los sectores de heterocromatina varan de un tipo celular a otro,
determinando qu regiones del ADN sern transcriptas y qu regiones quedan ocultas.

Secuencias y protenas que controlan la transcripcin: Existen secuencias de

nucletidos en el ADN que pueden controlar (aumentando o disminuyendo) la tasa de
transcripcin de un determinado gen. Estas secuencias, intensificadoras o silenciadoras,
segn aumenten o disminuyan la transcripcin de ese gen, actan junto con protenas que
intereactan con el sitio promotor del gen. Por lo tanto, la transcripcin de un gen depende
de la actividad conjunta de secuencias especficas y protenas reguladoras.
Agregado de grupos qumicos (metilacin): Los grupos metilo (CH3), agregados a
nucletidos de citosina en determinadas regiones del ADN controlan la transcripcin de los
genes que los poseen. Cuanto ms grupos metilo posea un gen, menor ser su posibilidad
de expresin.

Existen otros tipos de controles que involucran complejos mecanismos moleculares. Algunos
de ellos determinan la durabilidad del ARNm, el transporte del ARNm desde el ncleo al
citoplasma y diversos controles en la traduccin.

Sea cual fuere el mecanismo de control de la expresin gentica, todos tienen en comn la
misma accin: seleccionar qu porciones del ADN se expresarn en cada tipo de clula.
As, una clula epitelial solo expresar la informacin concerniente a su propio
funcionamiento, y no sintetizar protenas especficas de clulas neuronales, sanguneas,
seas, etc.

MUTACIONES

Las mutaciones son cambios o variaciones, producidas al azar, en la secuencia de

nucletidos del ADN o bien en la cantidad de material gentico que posee un individuo.
Estas pueden aparecer por errores en la duplicacin o transcripcin, como as tambin
pueden ser producidas por agentes mutgenos. Algunas mutaciones son heredables, es
decir, pueden ser transmitidas a la descendencia. Para que esto suceda, las mutaciones
deben estar presentes en las clulas germinales (reproductoras). Si se produce una
mutacin en una clula somtica slo afectar al individuo y no pasan a su progenie.

Los agentes mutgenos pueden ser fsicos o qumicos. Entre los mutgenos qumicos ms
conocidos se pueden mencionar:
Acido nitroso: provoca la desaminacin (eliminacin del grupo amino) de la Citosina y
la Adenina
Gas mostaza y etilmetanosulfonato (EMS): introducen grupos alquilo en las bases
del ADN alterando la replicacin.
Benzopireno y otros hidrocarburos cclicos: se intercalan entre los pares de bases y
establecen enlaces covalentes entre las dos hebras del ADN.

Entre los agentes fsicos que producen mutaciones
se encuentran las radiaciones ionizantes de onda
corta (rayos ultravioleta y rayos X) y las emisiones
radiactivas de partculas. Estas radiaciones
producen cambios en los nucletidos y roturas en la
cadena de ADN, lo que dar lugar a fracturas en los
cromosomas y produce la muerte de las clulas.
La luz ultravioleta absorbida por los cidos nucleicos
puede producir tanto modificaciones en las bases
nitrogenadas que forman parte de los nucletidos del
ADN como la unin de dos pirimidinas contiguas en
la misma cadena. Esta ltima situacin da lugar a la
formacin de dmeros de pirimidina, que distorsionan
la molcula dificultando o impidiendo la correcta
replicacin del ADN.
Las mutaciones gnicas afectan
uno o varios de los nucletidos que
contiene un gen. Pueden
producirse por errores en la
replicacin del ADN, por ejemplo
el cambio de un nucletido por
otro o por omisin de algn
nucletido o grupo de nucletidos
durante este proceso. Estas
mutaciones se transmiten a todas
las clulas descendientes de la
clula en que por primera vez
surgi la mutacin. Si se trata de
una clula somtica, todas las
clulas producto de la mitosis
tendrn este error, si se trata de
una clula que origina gametas,
esta mutacin se transmitir a la
descendencia.
Existen varios tipos de mutaciones en funcin de los cambios que sufre el material gentico.
Podemos diferenciar tres tipos de mutaciones: gnicas, cromosmicas y genmicas.

Mutaciones gnicas
En estas mutaciones se produce un cambio en la estructura del ADN, es decir, un cambio
en la informacin gentica. Estas mutaciones aparecen cuando se produce un error en la
replicacin del ADN.

A T C T T G C A

T A GA G C G T Qu consecuencias puede traer una

mutacin?
En la figura aparece un error en la duplicacin
del ADN que cambia un nucletido de Adenina
por uno de Guanina. En los errores que se producen en la
duplicacin del ADN puede producirse el
cambio de un nucletido por otro (como en la figura). En este caso, llamado mutaciones
puntuales, las consecuencias pueden ser variadas:

Si el nucletido, una vez transcripto el ADN, pertenece a la tercera base de un

codn, es posible que el codn mutado sea sinnimo del codn normal. En este
caso, la mutacin se llama silenciosa pues no tiene consecuencias en la
traduccin (se traduce en el mismo aminocido que el codn normal).

ATG TCT TGT TGA ADN ATG TCT TGT TGA ADN
TAC AGA ACA ACT TAC AGA ACG ACT

AUG UCU UGU UGA ARNm AUG UCU UGC UGA ARNm

MET-SER-CIS Polipptido MET-SER-CIS Polipptido

Si el nucletido, al ser transcripto, cambia el su informacin y se traduce en un

aminocido diferente del normal tendr diferentes consecuencias de acuerdo a la
posicin del aminocido en la protena final. Por ejemplo, si este aminocido
desempeaba un rol esencial en el plegamiento de la protena o perteneca al sitio
activo o de regulacin de una enzima, la protena no tendr actividad biolgica.

ATG TCT TGT TGA ADN ATG TCT TGT TGA ADN
TAC AGA ACA ACT TAC AGA ACC ACT

AUG UCU UGU UGA ARNm AUG UCU UGG UGA ARNm

MET-SER-CIS Polipptido MET-SER-TRIP Polipptido

 Si el nucletido, al ser transcripto, cambia un codn intermedio del ARNm en un
codn de terminacin, la traduccin producir una protena ms corta y no
funcional.

ATG TCT TGT TGA ADN ATG TCT TGT TGA ADN
TAC AGA ACA ACT TAC AGA ACT ACT

AUG UCU UGU UGA ARNm AUG UCU UGA UGA ARNm

MET-SER-CIS Polipptido MET-SER Polipptido

Si se elimina un nucletido, la mutacin se denomina delecin y produce un

cambio en el marco de lectura. Esto significa que todos los codones a partir de la
mutacin cambiarn, por lo tanto la traduccin de este mensajero producir una
protena no funcional.

ATG TCT TGT TGA ADN ATG TCT TGT TGA ADN
TAC AGA ACA ACT TAC AG ACG ACT

AUG UCU UGU UGA ARNm AUG UCU GCU GA ARNm

MET-SER-CIS Polipptido MET-SER-ALA Polipptido

Si se agrega un nucletido, la mutacin se denomina adicin y produce un cambio

en el marco de lectura. Las consecuencias son similares a las mutaciones por
delecin.

ATG TCT TGT TGA ADN ATG TCT TGT TGA ADN
TAC AGA ACA ACT TAC AGAA ACG ACT

AUG UCU UGU UGA ARNm AUG UCU UUG CUG A ARNm

MET-SER-CIS Polipptido MET-SER-LEU-LEU Polipptido

En general, las mutaciones son perjudiciales, es decir, producen enfermedades o

alteraciones metablicas que desencadenan enfermedades. Pero en contadas ocasiones las
mutaciones pueden provocar cambios favorables. En estos casos raros, pero esenciales
para la evolucin de las especies , los individuos portadores de la mutacin poseen ventajas
adaptativas respecto a sus congneres. De este modo, el gen mutado podra (seleccin
natural mediante) sustituir al gen original en una poblacin dada.