DESERT BIOENERGY 2015

Consorcios Tecnolgicos Empresariales

de Investigacin en Biocombustibles a
partir de Microalgas

Avda. Kennedy 5145. Ofincina 61

Vitacura. Santiago de Chile
+562 2378 9348
www.desertbioenergy.cl

1
 Indice

Presentacin
05 Consorcio
05 Carta del Presidente del Directorio
09 Sobre el Consorcio
09 Historia
11 Misin
11 Objetivos
13 Aportes econmicos
13 Socios y estructura accionaria
15 Directorio
16 Recursos Humanos / Organigrama

PRESIDENTE DEL DIRECTORIO

Joep Stuijt

GERENTE GENERAL Subprograma 1

Rodrigo Benavides
25 BASES BIOTECNOLGICAS EN OPTIMIZACIN DE LA CALIDAD
DE LA MATERIA PRIMA EN LA PRODUCCIN DE BIODIESEL
DIRECTORIO
E-CL
Jacobus Stuijt
Beatriz Monreal
Sebastin Falkenberg
Subprograma 2
PRODALMAT LTDA.
31 INGENIERA METABLICA APLICADA A
BOTRYOCOCCUS BRAUNII
Ren H. Piantini Castillo

MOLINERA GORBEA S.A.

Luciano Rivas Subprograma 3
UNIVERSIDAD DE LA FRONTERA 35 BIOFIJACIN DE DIXIDO DE CARBONO (CO2) DE ORIGEN
INDUSTRIAL PARA LA PRODUCCIN DE BIOMASA MICROALGAL
Claudina Uribe B.

Subprograma 4
UNIVERSIDAD DE ANTOFAGASTA
Luis Alberto Loyola M.

41 DESARROLLO Y OPTIMIZACIN DE TECNOLOGAS

Fernando Fernndez
Carlos Eduardo Riquelme S. PARA LA PRODUCCIN DE BIOMASA MICROALGAL
45 Construccin, habilitacin y montaje de equipos en la Planta
DESERT BIOENERGY Piloto de Produccin Microalgal Tocopilla
www.desertbioenergy.cl
53 Planta Piloto para Biocombustibles
Av. Kennedy 5146, Oficina 61
Vitacura. Santiago de Chile 64 Produccin de Biocombustibles a partir de Microalgas
+56 2 2378 9348

Desarrollo de
DISEO E IMPRESIN
ORIN Producciones Grficas
75 capacidades humanas
www.orlandoduransaez.cl 81 Oportunidades de Negocio y Proyecciones futuras
(9) 439 25 84

Noviembre de 2015

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 DESERT BIOENERGY 2015

Corporacin

Socios

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 DESERT BIOENERGY 2015

Carta
del Presidente
EN EL AO 2015 NUESTRO CONSORCIO mostr impor-
tantes y determinantes resultados, consecuencia de aos
de investigacin, trabajo en equipo y dedicacin.
En el ao 2015 se logro continuar con la produccin de
microalgas en la planta piloto, para realizar actividades re-
lacionadas a la validacin de la biomasa en el mercado.
En el ao 2013, inauguramos la planta piloto de Micro Al-
gas en Tocopilla junto con la planta de produccin de Bio-
diesel y Biogs, logrando as una instalacin completamen-
te integrada desde el insumo del CO2 de la termoelctrica
hasta la produccin de biocombustibles.
El anlisis de mercado determin que exista una aplica-
cin de mercado en la acuicultura, lo cual permiti realizar
pruebas pilotos preliminares que finalizaron con xito.
Con esto, se concluy una etapa que abri nuevos desa-
fos para mejorar la produccin de microalgas, la obtencin
de los bioproductos y la validacin a mayor escala en los
distintos mercados de aplicacin.
>> Joep Stuijt
Presidente Directorio Los grandes desafos para el 2015 son continuar con la
etapa de produccin masiva de microalgas en un proyecto
que considera una escala mayor de produccin, para con-
cluir la validacin tcnica y comercial de algunos productos
en el mercado.
Por ltimo, quiero agradecer el apoyo cada uno de los inte-
grantes de los equipos de investigacin y administracin,
quienes han permitido que el Consorcio cumpla sus ob-
jetivos para en un futuro lograr la visin de Desert Bioe-
nergy, contribuir al pas disminuyendo las emisiones de los
gases de efecto invernadero, creando una nueva industria
de las microalgas en la que se desarrollen bioproductos
sustentables y se logre obtener bioenerga disminuyendo
las dependencias energticas actuales, construyendo una
planta productiva para abastecer el mercado desarrollado
y aprovechando la capacidad instalada de la planta piloto
para continuar con I+D.

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6
 DESERT BIOENERGY 2015

Carta
de Gerente General
HAN TRANSCURRIDO 5 AOS desde el inicio de este
innovador consorcio, conformado por prestigiosas em-
presas y universidades nacionales, con el apoyo de In-
nova CORFO y el Ministerio de Energa. Durante todo
este tiempo hemos anunciado importantes logros como
la construccin de la planta piloto de microalgas ubica-
da en la central termoelctrica de Tocopilla, como tam-
bin la posterior instalacin de la planta de biodiesel y
biogs. Sin embargo, este perodo no ha estado exenta
de dificultades que hemos sabido superar como equipo.
Tambin felicito y agradezco a todos los profesionales
y tcnicos que participan de esta iniciativa ya que han
realizado su mximo esfuerzo en buscar nuevas opor-
tunidades de negocios que permitan dar una viabilidad
a nuestra empresa. Es as como nos hemos focalizado
en optimizar nuestros procesos de produccin de mi-
croalgas, obtener una biomasa seca y viajar con gran
esfuerzo a Ecuador y la zona sur de Chile para realizar
pruebas experimentales en la alimentacin acucola y
>> Rodrigo Benavides validar las propiedades de nuestro producto.
Gerente General
Estamos en una etapa trascendental de nuestro desa-
Desert Bioenergy S.A.
rrollo, escalando nuestro proceso productivo y validan-
do la tecnologa desarrollada durante los ltimos aos,
estoy seguro que tambin seremos exitosos en esta
etapa y con ello poder concretar nuestro sueo, que te-
nemos desde hace varios aos, que es ver cultivado el
desierto mas rido del planeta con microalgas que sean
la fuente de alimentacin para la industria acucola na-
cional e internacional.

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8

CONSORCIO
DESERT BIOENERGY S.A.
D
esert Bioenergy S.A. es el consorcio em-
presa-universidad creado a fines del 2009
por las empresas Electroandina filial de E-Cl,
Molinera Gorbea, Algas Prodalmar y las Uni-
versidades de Antofagasta y Universidad de
La Frontera y que ha sido financiado parcial-
mente por Innova CORFO y el Ministerio de
Energa. Desert Bioenergy ha destinado sus
esfuerzos en realizar investigacin y desarrollo tecnologi-
co para la produccin de biocombustibles y bioproductos a
partir de microalgas, alinendose a los esfuerzos del Go-
bierno por pasar a la segunda generacin de combustibles
renovables, aquellos que se producen en base a recursos
cultivados que no compiten con los alimentos.
DESERT BIOENERGY 2015
Historia del Consosio
Innova Chile de CORFO realiz el 1 de Octubre de 2009 la
denominada Convocatoria Nacional de Consorcios Tecno-
lgicos Empresariales de Investigacion en Biocombustibles
a partir de Micro y Macroalgas. Los proyectos presentados
a esta convocatoira fueron evaluados por expertos inter-
nacionales de Estados Unidos, Portugal y Australia entre
otros, debido a su importancia y complejidad. El objetivo
del concurso organizado por Innova Chile de Corfo y el Mi-
nisterio de Energa, fue ampliar el desarrollo econmico y
productivo de Chile a travs de la creacin de consorcios
de investigacin sustentables en materia de produccin
de biocombustibles a partir de micro y macro algas, que
alcancen altos niveles de impacto, mediante la adopcin,
transferencia y comercializacin de sus resultados.
9
Desert Bioenergy S.A. fue uno de los tres consorcios
adjudicados con el proyecto Consorcio Desert Bioe-
nergy S.A. para la Investigacin y Desarrollo de la in-
dustria del Biocombustible a partir de Microalgas. El
monto total del proyecto asignado fue de $ 3.558 mi-
llones, y con un aporte de Innova CORFO y del Mi-
nisterio de Energia de $ 2.487 millones de pesos.
DESERT BIOENERGY
Generacin de tecnologa para a produccin de biodie-
sel y bioproductos a travs del cultivo de microalgas.El
consorcio Desert Bioenergy S.A. se form a fines del
2009 con el objetivo de desarrollar tecnologa para pro-
ducir biocombustibles de segunda generacin y otros
bioproductos a partir de microalgas que se cultivan en
las tierra aridas del norte del pas, utilizando gases de
combustion de fuentes fijas y agua de mar. Est em-
El proceso para producir biocombustibles consiste en cultivar una
microalga tanto en fotobioreactores cerrados como en sistemas abiertos
tipo raceway, luego cosechar estas microalgas, someterlas a un proceso de
transesterificacin para ser transformado en biodiesel y biogs.
presa est conformada por Electroandina, filial de E-CL
(44%), la Universidad de Antofagasta (31%), Producto-
ra de Algas Marinas (10%), Universidad de La Frontera
(10%) y Molinera Gorbea (5%).
El proyecto de investigacin y desarrollo tecnolgico de-
sarrollado por Desert Bioenergy contempl la ejecucin
de 12 lneas de investigacion, las cuales consideraron el
estudio y aislacin de diversas cepas de microalgas, es-
tudio gentico, diseo e implementacion de una planta
de cultivo de microalgas a nivel piloto con inyeccin de
gases de combustion proveniente de la central termoe-
lctrica de Tocopilla, obtencin de bioproductos de la
microalgas, desarrollo de la tecnologa para produccion
de biodiesel y biogas y el diseo y construccin de una
planta piloto de biocombustibles.
Desert Bioenergy se basa en disponer de un equipo de
investigadores de alto nivel en las especialidades de
10
biotecnologa, ingeniera y procesos proveniente tanto
de la Universidad de Antofagasta como de la Universi-
dad de La Frontera e investigadores propios del consor-
cio. El proyecto est orientado al desarrollo tecnolgico
de procesos basados en el concepto de una biorefineria
a partir de microalgas, con lo que el objetivo es poder
elaborar otros bioproductos de alto valor agregado en
conjunto al biogs y biodiesel. Nuestra ventaja compe-
titiva se basa en aprovechar la alta luminosidad y las
tierras aridas del Norte de Chile que no compiten con
la agricultura tradicional, la utilizacin de agua de mar
en los sistemas de cultivo, y el utilizar gases de com-
bustion con CO2 provenientes de la central Termoe-
lctrica de Tocopilla propiedad de E-Cl, mejorando los
rendimientos de los cultivos y con ello una ventaja en el
costo de produccin de la biomasa de microalgas. Du-
rante el proceso de investigacin se han aislado tanto
cepas originarias de la zona de Tocopilla como tambin
la introduccin de otras cepas del Norte de Chile que se
desarrollan en agua dulce y que se han adaptado a con-
diciones de agua salada. En trminos simples el pro-
ceso para producir biocombustibles consiste en cultivar
una microalga tanto en fotobioreactores cerrados como
en sistemas abiertos tipo raceway, para luego cosechar
estas microalgas, someterlas a un proceso de transes-
terificacin directa que finalmente ser transformado en
biodiesel y biogs.
Hemos demostrado que es factible tcnicamente pro-
ducir biodiesel y biogs a partir de microagas pero en
esta etapa no es viable econmicamente, sin embar-
go vemos que la gran oportunidad de las microalgas
es utilizarlas como alimento en el mercado acucola en
particular como alimento de salmones y camarones,
donde dada nuestra tecnologa basada en producir a
bajos costos vemos un importante potencial en dicho
mercado.
 DESERT BIOENERGY 2015

Misin
Nuestra misin como empresa es ser un consorcio
empresa universidad, donde generamos tecnologa
innovadora. Desarrollamos tecnologa innovadora para
el cultivo y procesamiento de microalgas, produccin de
bioproductos, bajo el concepto de biorefinera.
Investigamos para desarrollar tecnologa que permita
la produccin de biocombustibles y otros bioproductos
comerciales a partir de microalgas a escala industrial y
en trminos competitivos en el mercado nacional. Nues-
tra idea es generar paquetes tecnolgicos competitivos
para que se implementen procesos productivos y co-
merciales y, como consecuencia de estas inversiones,
se genere la cadena productiva en Chile a partir de-
bioproductos de microalgas.

Objetivos
Nuestro principal objetivo en Desert Bioenergy es que
buscamos originar desarrollos tecnolgicos para cul-
tivar microalgas y la elaboracin de bioproductos en
trminos competitivos con el mercado, recorriendo la
cadena productiva que se inicia con el desarrollo de
tcnicas para el cultivo masivo de microalgas de alto
potencial productivo hasta la obtencion de bioproduc-
tos comerciales.

11
1. Objetivos Especficos
del Proyecto

DESARROLLO DE TECNOLOGA CAPACIDADES I+D

Promover la generacin de conocimiento cientfico, Incentivar la formacin y capacitacin de personal
investigacin y desarrollo tecnolgico aplicado en las cientfico y tecnolgico de alto nivel en Chile y la trans-
reas de la industria de las microalgas, biocombustibles ferencia tecnolgica al sector industrial.
(ERNC) y bioproductos.

ESCALACIN PLANTA PILOTO NEGOCIO PRODUCTIVO

Implementar una planta piloto a escala semi-industrial Consolidar la formacin de un negocio productivo en
de cultivo de microalgas y produccion de biodiesel y bio- la zona norte, sustentable y lder en la temtica de los
gs en las instalaciones de la central trmica de Toco- bioproductos comerciales a base de microalgas.
pilla propiedad de E-Cl, que permita validar los parme-
tros relevantes para el escalamiento de una biorefinera
a partir de microalgas.

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 DESERT BIOENERGY 2015

2. Aportes
Econmicos
EL proyecto desarrollado por Desert Bioenery dispone
de un presupuesto de $ 3.558 millones de pesos, los
cuales fueron aportados por Innova Corfo y el Ministerio
de energa, de $ 2.487 millones de pesos y por parte de
los socios de DBSA de $ 1.070 millones de pesos en
proporcin a su participacin accionario segn se indica
en la tabla siguiente.

ACCIONISTAS ACCIONES PARTICIPACIN

E-CL 257.812 44,4%
Universidad de Antofagasta 181.274 31,2%
PRODALMAR 55.000 9,5%
Universidad de La Frontera 55.500 9,6%
Molinera Gorbea 31.154 5,4%
TOTAL CAPITAL 580.740 100%

3. Socios y
Estructura Accionaria
UFRO
10%
10% PRODALMAR MOLINERA
GORBEA
5%

E-CL
44%

31% UA

13
14
 DESERT BIOENERGY 2015

4. Directorio
Se realizan reuniones de directorio mensualmente en
Desert Bioenergy donde participan los respresentan-
tes y directivos de las empresas y universidades socias
del consorcio, entregando los principales lineamientos
a seguir en la sociedad, seguimiento de los resultados
y transfiriendo su conocimiento y experiencia de las em-
presas y universidad para el xito de Desert Bioenergy.
El directorio de DBSA est integrado por 9 miembros
titulares y sus respectivos suplentes ms la participacion
del secretario del directorio y el gerente general, adems
cabe destacar que los estados financieros de la sociedad
son auditados anualmente por una empresa de auditoria
externa y se elabora una memoria anual donde se desta-
can los principales logros y avances del consorcio

E-CL PRODALMAR LTDA.

Jacobus Beatriz Sebastin Ren H.

Stuijt Monreal Falkenberg Piantini Castillo

UNIVERSIDAD DE LA FRONTERA MOLINERA GORBEA S.A.

Claudina Luciano
Uribe B. Rivas

UNIVERSIDAD DE ANTOFAGASTA

Luis Alberto Fernando Carlos Eduardo

Loyola M. Fernndez Riquelme S.

15
5. Recursos Humanos

MIEMBROS DIRECTORIO

GERENTE GENERAL

COORDINADOR UA COORDINADOR UFRO ADMINISTRACIN TRANSFERENCIA Y

DIFUSIN

Controller

SP1 SP2 SP3 SP4

Determinacin Ingeniera Biofijacin Produccin de
de Cepas Gentica CO2 origen biomasa
Aplicada B industrial microalgal en Asistente
Contador Administracin
Braunii Planta Piloto

SP5 SP6 SP7 SP8 SP9

Optimizacin de Diseo e Produccin de Obtencin de Diseo y
procesos de implementacin compuestos biogs contruccin de
extraccin y de procesos bioactivos planta piloto
recuperacin para la para
de aceite produccin de biocombustibles
biocombustibles

16
 DESERT BIOENERGY 2015

6. El Proyecto - Programa de I+D

Desde nuestro comienzo, DBSA tiene una serie de hitos marcha, Administracin del Consorcio, Construccin de
que fuimos cumpliendo de acuerdo a nuestros objeti- la planta de microalgas, Construccin de la planta de
vos, estos se pueden resumir en 5 aspectos: Puesta en biodiesel y Validacin comercial.

Puesta en marcha Administracin Construccin Construccin Validacin

del Consorcio Planta microalgas Planta biodiesel Comercial

2011 2012 2013 2014 2015

Investigacin en Desarrollo de Sistema de CO2 en Salmn

Universidades investigacin cultivos de microalga Camarn
Desarrollo de Obtenciin de productos Larvas de peces
Tecnologa y su caracterizacin
Abaln

Produccin Caracterizacin Protena Bio-Oil

masiva de biomasa
microalgas

Desarrollo de
una patente de
Biorefinera
a partir de
microalgas

Estudio Inyeccin Produccin Bioetanol

de cepas gases de biodiesel a partir de
combustin y biogs carbohidratos
de biomasa
microalgal

17
El cumplimiento de nuestros objetivos ha con-
llevado a generar una serie de logros y bene-
ficios en desarrollo de nuevos procesos y pro-
ductos sustentables, los cuales se pueden
resumir en el diagrama inferior de esta pgina
Nuestros beneficios nos han permitido crear rela-
ciones con la comunidad logrando aumentar las ac-
LOGROS Y BENEFICIOS
Captura de gases de efecto Relaciones con la
invernadero. comunidad
Cultivo de Microalgas
utilizando gases de
combustin
Proceso sustentable con
agua de mar, luz solar y
gases de combustin.
Los principales logros y beneficios de Desert
Bioenergy han sido:
Captura de gas de combustin y usar terrenos
no aptos para la agricultura en la zona norte
Proceso sustentable capturando CO2, utilizando
agua de mar para producir biomasa de microalgas.
18
tividades relacionados al cultivo de microalgas en
Tocopilla. Desert Bioenergy busca reconocer y po-
tenciar el talento en los jvenes tocopillanos permi-
tiendo que alumnos con desempeo destacado del
Liceo Politcnico Diego Portales Palazuelo puedan
ser capacitados para llegar a ser operadores de la
planta piloto de Tocopilla.
Transferencia tecnolgica. Nueva industria en la zona
norte del pas
Integracin Universidad con
Empresa y Comunidad
Transferir tecnologa en el cultivo de microalgas
desarrollando en la universidad hacia la industria.
Desarrollo de un nuevo negocio para diversificar
la industria en la zona norte de Chile, que ser el
cultivo de microalga para uso como alimento ani-
mal.

Resumen de subproyectos
que integran el proyecto DESERT BIOENERGY S. A.
1enBases biotecnolgicas
optimizacin de la
2 Ingeniera metablica
aplicada a Botryococcus
calidad de la materia
prima en la produccin de
biodiesel
Asegurar la disponibilidad de incu-
los de las mejores cepas producto-
ras de biodiesel y otros bioproductos.
Los objetivos especficos del sub-
programa son los siguientes:
Validar los parmetros biticos y
abiticos de mejor rendimiento para
el cultivo eficiente de microalgas en
forma masiva.
Ampliar la diversidad gentica y es-
pecfica de cepas para la produccin
de biodiesel y bioproductos.
Seleccionar las microalgas de me-
jor crecimiento y mayor contenido de
lpidos y bioproductos.
Desarrollar y mantener procesos
de produccin constante de inculos
microalgales, para abastecer culti-
vos experimentales e industriales.
3 Biofijacin de dixido
de carbono (CO ) de
braunii
La ingenieria metablica se refiere
al uso de genes y protenas pertene-
cientes a una especie en particular,
que le otorga a ella alguna caracte-
rstica especifica. Bajo esta premisa
es posible aumentar y mejorar cier-
tas caractersticas de inters biotec-
nolgico entre una especie y otra.
Los objetivos del subprograma son
los siguientes:
Identificar los genes involucrados
en la biosntesis de hidrocarburos
en Botryococcus braunii y analizar
su funcionalidad en huspedes he-
terlogos.
Desarrollar la biotecnologa mi-
croalgal para obtener una microalga
recombinante y/o la sobreexpresin
de las protenas involucradas en la
biosntesis de hidrocarburos.
DESERT BIOENERGY 2015
2
origen industrial para la
produccin de biomasa
microalgal
El objetivo general de este proyecto
es aprovechar fuentes industriales
emisoras de Dixido de Carbono
para su utilizacin como fuente de
carbono en el cultivo de microalgas.
Los objetivos especficos son:
Disear e instalar sistema de
captacin de gases de combustin
proveniente de fuentes emisoras e
inyeccin de estos en los sistemas
de cultivos microalgales.
Determinar la concentracin pti-
ma de gases de combustin, princi-
palmente CO2 en cultivos microal-
gales a nivel primario y masivo.
Probar a nivel piloto la tecnologa
desarrollada.
19
 4optimizacin
Desarrollo y
de
tecnologas para la
produccin de biomasa
microalgal
El objetivo general planteado en el
subprograma 4 es determinar las
mejores condiciones de cultivos y
mejorar el diseo de sistemas de
cultivos, obteniendo mejores pro-
ductividades de los sistemas en
condiciones out-door.
Los objetivos especficos del sub-
programa 4 son:
Construccin y evaluacin de sis-
temas de prototipos de sistemas
masivos, para evaluacin de sus
ventajas en manipulacin y costos
de produccin.
Disear la construccin de una
planta de produccin piloto para ob-
tencin de biomasa microalgal en
dependencias de la termoelctrica
Tocopilla.
Semi-automatizacin de sistemas
de cultivos masivos en la Unidad de
Microbiologa Aplicada para deter-
minacin de parmetros de cultivos
ptimos.
20
5 Optimizacin de
procesos de extraccin y
6 Diseo e
implementacin
recuperacin de aceites
e hidrocarburos desde
biomasa microalgal
El objetivo general planteado es se-
leccionar proceso costo-efectivo y
condiciones de lisis celular y extrac-
cin/recuperacin de hidrocarburos/
lpidos desde la biomasa microalgal
lisada.
Los objetivos especficos del sub-
programa 5 son:
Investigar la relacin entre el es-
tado fisiolgico de la biomasa mi-
croalgal, la composicin de la pared
celular con la eficiencia del proceso
de lisis y extraccin/recuperacin de
hidrocarburos/lpidos.
Optimizar procesos para la lisis
celular y posterior extraccin/recu-
peracin de lpidos desde biomasa
microalgal.
Evaluar el rendimiento del proceso
seleccionado en biomasa desde ce-
pas de algas genticamente modifi-
cadas para alterar la estructura de
la pared celular.
de procesos para
la produccin de
biocombustibles refinados
El objetivo general planteado en
el subprograma 6 es: Producir bio-
combustibles a partir de hidrocar-
buros/aceites extrados de biomasa
microalgal.
Los objetivos especficos del sub-
programa 6 son:
Desarrollar biocombustibles me-
diante la refinacin directa de hidro-
carburos/aceites crudos extrados
de biomasa microalgal.
Validar la tecnologa de produc-
cin de biodiesel por transesterifica-
cin qumica y enzimtica utilizando
aceites crudos extrados de bioma-
sa microalgal.
Obtener biocombustibles de hidro-
carburos/aceite crudo de microal-
gas, a travs de procesos de refina-
cin por membranas.
Determinar la rentabilidad econ-
mica de los procesos y productos
desarrollados.

7microalgal
Uso de biomasa
para
la produccin de
compuestos bioactivos
El objetivo general es obtener pro-
ductos bioactivos a partir de torta
microalgal aplicables a la industria
alimentaria y biofarmacutica.
Los objetivos especficos son:
Caracterizar torta microalgal res-
pecto de compuestos de inters (ca-
rotenoides, polisacridos, protena,
cidos grasos, fibra).
Evaluar mtodos de extraccin de
biocompuestos presentes en bio-
masa microalgal.
Desarrollar productos en base
a resultados de caracterizacin y
separacin de biocompuestos de
biomasa microalgal; Evaluacin de
extractos como neuroprotectores o
anti-inflamatorio, en cultivos celula-
res epiteliales, de miocitos de ms-
culo liso, cardiaco, celulas PC12.
Obtener extractos de microalgas,
y principios de bioactivos que per-
mitan desarrollar transferencia tec-
nolgica, cadena de valor, licencias
y/o patentes.
8 Obtencin de metano 9 Diseo y
biognico a partir de construccin de planta
biomasa microalgal
El objetivo general planteado en el
subprograma 8 es: Generacin de
metano biognico a partir de bioma-
sa microalgal residual.
Los objetivos especficos del sub-
programa 8 son:
Optimizar el proceso de diges-
tin anaerobia bajo condiciones de
alta salinidad y concentraciones de
amonio.
Desarrollar un proceso de reutili-
zacin de amonio para el cultivo de
microalgas.
Desarrollar un proceso de reciclaje
y captura de CO2 utilizando los culti-
vos de microalgas para la refinacin
de biogs.
Estudio de pre-factibilidad tcnico
econmica de los usos potenciales
del metano biognico.
DESERT BIOENERGY 2015
Waldo Nell
experimental para
producir biocombustible
de biomasa microalgal
El objetivo general es: Disear y
construir Planta Experimental para
sintetizar por medio de transeste-
rificacin directa biocombustible a
partir de biomasa microalgal.
Los objetivos especficos son:
Definir proceso de sntesis de bio-
combustible en planta experimental
Especificacin de subprocesos
para la sntesis de biocombustible en
planta experimental
Realizar diseo de ingeniera de
planta experimental
Construir planta experimental en
Temuco
Trasladar e instalar planta experi-
mental en Planta Termoelctrica en
Tocopilla
Puesta en funcionamiento de plan-
ta experimental Planta Termoelctri-
ca en Tocopilla.
21
 La investigacin se realiza con el apoyo de la Univer-
sidad de Antofagasta y la Universidad de La Frontera,
donde participan destacados investigadores con grados
de doctor, magster e ingeniera y tcnicos donde adi-
cionalmente se utilizan parte de sus instalaciones como
laboratorios equipados especialmente para realizar este
tipo de investigacin. En la siguiente figura se muestran
las lneas de investigacin que lideran ambas universi-
dades todas ellas gestionadas por la administracin de
la empresa.

MODELOS DE INTERRELACIONES ENTRE UNIVERSIDADES

Y LNEA DE INVESTIGACIN PARA GENERAR EMPRESAS TECNOLGICAS

Desarrollo y optimizacin Caracterizacin-Lisis-

Cepas Microalgas extraccin de aceite Administracin

Produccin de
Genes y biotecnologa Biodiesel
de microalgas

Otros Bioproductos Apoyo I + D

Sistema de CO2 en
cultivo microalga
Biogs

Planta piloto cultivo Difusin y

Planta piloto
biodiesel transferencia

22
 DESERT BIOENERGY 2015

INTERRELACIONES ENTRE LOS SUBPROGRAMAS CORRESPONDIENTES AL

CONSORCIO DBSA Y SUS MBITOS DE ACCIN I+D

PROGRAMA I+D DEL CONSORCIO

SUBPROGRAMA 5
SUBPROGRAMA 1 Optimizacin de procesos
Bases biotecnolgicas de extraccin y recuperacin
de Materia Prima en la de aceites e hidrocarburos
produccin de Biodiesel desde biomasa microalgales

SUBPROGRAMA 6
Diseo e implementacin de
SUBPROGRAMA 2 procesos de biocombustibles
Ingeniera Metablica refinados a partir de aceites
aplicada a Botryococcus y biohidrocarburos extrados
Braunii de biomasa microalgal

SUBPROGRAMA 7
SUBPROGRAMA 3 Uso de biomasa microalgal
Biofijacin de CO2 de origen para la produccin de
industrial para la produccin compuestos bioactivos
de Biomasa Microalgal

SUBPROGRAMA 8
SUBPROGRAMA 4 Obtencin de Metano
Desarrollo y optimizacin biognico a partir de
de tecnologas para la biomasa microalga
produccin de biomasa
microalgal

SUBPROGRAMA 9
Combustin de aceites,
biohidrocarburos y biodiesel
a partir de biomasa
microalgal

LNEAS DE TRABAJO PARA LA INNOVACIN

(Cadena de valor de la produccin de
biocombustible)

Estudio y
seleccin de Cepas

Crecimiento y produccin NUEVOS

de Microalgas PROCESOS

NUEVOS
Lisis - Secado SPIN OFF EMPRESAS
PRODUCTOS

Extraccin de aceite y NUEVOS

hidrocarburos SERVICIOS

Bioproductos

23
24

SUB PROGRAMA 1
BASES BIOTECNOLGICAS EN OPTIMIZACIN DE LA CALIDAD
DE LA MATERIA PRIMA EN LA PRODUCCIN DE BIODIESEL
COMO OBJETIVO GENERAL se plantea asegurar la
disponibilidad de inculos de las mejores cepas pro-
ductoras de biodiesel y otros bioproductos. Respecto a
los objetivos consideramos validar parmetros biticos
y abiticos, ampliar la diversidad especficas de cepas
para la produccin de biomasa y con ello seleccionar
las cepas potenciales para la produccin de diferentes
bioproductos (biodiesel, fuente de protenas, lpidos,
cidos grasos, pigmentos antioxidantes). Una vez se-
leccionada las cepas, desarrollar un protocolo de man-
tencin y produccin constante de inculos, con la finali-
dad de abastecer cultivos experimentales e industriales.
SELECCIN
La seleccin de cepas se realiza llevando a cabo recolec-
cin de muestras de agua de diversos sectores caracte-
rizados por presentar las condiciones ambientales favo-
rables para el crecimiento microalgal, stas consideran
especficamente radiacin solar y diversas concentracio-
nes de sales. Las campaas de recoleccin de muestras
se realiza en: Laguna Cejar (Localizada a 20 kilometros
aproximadamente de San Pedro de Atacama, a 2600 mts
de altitud); Laguna de Chaxa (Localizada en la segunda
regin a 7 kilometros al suroeste de Toconao, a 45 kilo-
DESERT BIOENERGY 2015
metros al sur de San Pedro de Atacama); Laguna de Pei-
ne (San Pedro de Atacama. El Loa, Chile); Jere (se ubica
en el borde noreste del gran Salar de Atacama, Cordille-
ra de Domeyko. La colecta se realiz manualmente con
recipientes estriles, dichas muestras fueron recibidas
en el laboratorio y puestas en condiciones controladas
de temperatura (20C) y luz e inoculadas en dos medios
de cultivo (f/2 y JM) para su mantencin y aclimatacin.
Adicionalmente se realiza una campaa de muestreo de
aguas de mar del condensador de la termoelctrica de
E-CL en Tocopilla.
AISLAMIENTO
El aislamiento fue realizada utilizando una combinacin
de procedimientos de identificacin de microalgas en su
medio natural y en condiciones de cultivo en el labora-
torio, usando tcnicas de enriquecimiento, microfishing,
diluciones seriadas y aislamiento en slido, con me-
dios enriquecidos tanto para favorecer el crecimiento de
clorofceas y diatomeas. Las cepas aisladas se man-
tienen en cultivos en lquido y respaldadas por cepa-
rio en slidos, los cultivos al momento de alcanzar una
concentracin mnima se registraron microfografias de
campo claro y de eplifluorescencia. El principal objetivo
25
de ste procedimiento es identificar cualitativamente las
cepas que presentar acumulacin de lpidos intracelula-
res y registrar su tamao. Las celulas que fluorescen a
un filtro de luz especifico frente al microscpico, son se-
leccionadas por presentar cualitativamente acumulacin
de lpidos.Posterior a obtener las cepas aisladas stas
se inoculan en un medio enriquecido en fuente de nitr-
geno, para facilitar y optimizar su crecimiento y as obte-
ner la concentracin celular necesaria para caracterizar
las cepas microalgales en las Unidades Relativas de
Fluorescencia (URF), stos resultados cuantificaran la
cantidad de lpidos presentes en cada una de las cepas.
Las campaas de muestreo resultaron en un total de
24 cepas microalgales aisladas, seleccionando el 88%
de ellas, la clase ms abundante encontrada fue Clase
Bacillariophyceae, seguida por el 13% de la Clase Chlo-
rophyceae (Tabla 1).

TABLA 1 | CANTIDAD DE CEPAS AISLADAS POR SECTOR DE MUESTREO

PUNTOS DE N DE CEPAS N DE CEPAS CLASE CLASE
MUESTREO AISLADAS SELECCIONADAS BACILLARIOPHYCEAE CHLOROPHYCEAE
Cejar 7 6 6 C1

Chaxa 8 8 8 ND

Jere 4 4 4 ND

Peine 2 1 1 1

ACT 3 2 2 1

TABLA 2 | TAMAO CELULAR (M) Y LPIDOS TOTALES POR EPIFLUORESCENCIA

IDENTIFICACIN CEJAR CEJAR CEJAR CEJAR CEJAR CEJAR CEJAR CHAX CHAX CHAX CHAX CHAX
1 2 3 4 5 6 7 a1 a2 a3 a5 a6
TAMAO (m) 10 20 9 6 12 22 7 6 a 7 5 6 7 9

* LPIDOS SI SI SI SI SI SI NO SI SI SI SI SI

IDENTIFICACIN CHAX CHAX JERE JERE JERE JERE PEINE PEINE ACT1 ACT2 ACT3
a7 a8 1 2 3.1 3.2 Verde Caf
TAMAO (m) 5a8 8a9 12 10 a 13 12 12 4 5 8 6 13

* LPIDOS SI SI SI SI SI SI NO SI NO SI SI

REGISTRO DE CEPAS AISLADAS EN DIFERENTES PUNTOS DE MUESTREO

A B

LAGUNA DE CEJAR (A) Microfotografa de campo

claro; (B) Microscopia de epifluorescencia (fluorescencia
amarillo oro indica lpidos totales); aumento 100x

26
 DESERT BIOENERGY 2015

A B

LAGUNA DE CHAXA (A)

Microfotografa de campo claro; (B)
Microscopia de epifluorescencia
(fluorescencia amarillo oro indica lpidos
totales); aumento 100x.

A B

JERE (A) Microfotografa de campo

claro; (B) Microscopia de epifluorescencia
(fluorescencia amarillo oro indica lpidos
totales); aumento 100x.

A B

LAGUNA DE PEINE (A) Microfotografa

de campo claro; (B) Microscopia de
epifluorescencia (fluorescencia amarillo oro
indica lpidos totales); aumento 100x.

27
TOCOPILLA AGUA DE MAR
(A) Microfotografa de campo claro;
(B) Microscopia de epifluorescencia
(fluorescencia amarillo oro indica lpidos
totales); aumento 100x.

A B

La siguiente etapa en la bsqueda de cepas microalga-
les productoras de sustancias bioactivas, contempla la
adaptacin de ellas a cultivos intensivos. En esta fase
las cepas seleccionadas son expuestas a las condicio-
nes de cultivo controladas de luminosidad, temperatura,
pH y nutrientes. Debido a que cada grupo de clulas
tiene condiciones de crecimiento variables dependiendo
de su fuente natural de crecimiento, lo primero es eva-
luar el efecto de diversos medios de cultivos reportados
bibliogrficamente como ptimos en diversas cepas mi-
croalgales (Chu 13, F/2, Jaworskis Medium, Fiztgerald
y BG-11), los cuales servirn como lnea base para de-
terminar la capacidad de cada cepa a la adaptacin en
condiciones de cultivo intensiva.

CURVA DE CRECIMIENTO DE UNA DE LAS CEPAS MICROALGALES AISLADAS Y

CULTIVADAS EN CONDICIONES CONTROLADAS
Densidad ptica 540nm ACTverde

Tiempo (das) Tiempo (das)

28
 DESERT BIOENERGY 2015

Caracterizar las cepas seleccionadas en cuanto a la can- productora o no de algn subproducto de inters comercial.
tidad de lpidos determinado gravimtricamente de cada Algunas de las cepas aisladas en el subprograma 1
una de ellas y, clasificarlas en cuanto a su potencial como etapa 1 con su nombre cientfico a nivel de especie.

Phaedactylum Amphora Chlorella

Navicula Fragillaria Nitzschia

RESUMEN DE LAS CEPAS QUE MEJOR SE ADAPTARON A CONDICIONES DE CULTIVO

MASIVO EN CUANTO A SU PRODUCCIN DE LPIDOS
CEPA MEDIO DE % SATURADOS MONO- POLI- Cb g/L
CULTIVO LPIDOS INSATURADOS INSATURADOS
ACTVerde UMA 3 12,3 2,5 2,5 7,3 0,66

ACTVerde UMA 3 + 1xFe 10,2 2,2 2,4 5,6 0,82

Mesocosmos UMA 3 10,2 2,6 3,9 4,4 0,6

Mesocosmos UMA 3 + 1xFe 13,2 3,3 4,7 5,2 0,87

RESUMEN DE LAS CEPAS QUE MEJOR SE ADAPTARON A CONDICIONES DE CULTIVO

MASIVO EN CUANTO A SU PRODUCCIN DE LPIDOS
CEPA MEDIO DE HUMEDAD PROTENA % CENIZAS FIBRA
CULTIVO LPIDOS CRUDA
Mesocosmos UMA 2 1,4 46,1 4,5 14,5 0,4

ACTVerde UMA 2 0,3 3,42

B. braunii UMA 2 3,4 31,4 7,7 27,2 1,8

Scenedesmus F/2 8,8 17 4,5 3,4 2,9

Chlorella F/2 11 31 12,1 11,5 7,2

pyrenoidosa

Chlamydomonas sp. F/2 7,9 48,2 7 7,2 2,1

29
 IDENTIFICACIN TAXONMICA DE
TODAS LAS CEPAS AISLADAS Y
MANTENIDAS
EN EL CEPARIO DE LA UNIDAD DE
MICROBIOLOGA APLICADA

RTULO UMA ESPECIE >> Curva de crecimiento de una de

mesocosmos Phaeodactylum tricornutum las cepas microalgales aisladas de
agua de mar. Escalamiento realizado
ACT CAF Denticula kuetzingii desde laboratorio (2 25 litros)
Hasta cultivos outdoor en sistemas de
A 7,4 Chlorella vulgaris
cutlivo cerrado 0,4 1 m3.
MI 2L Bacillariophyta sp. Fragillaria sp.
CURVA DE CRECIMIENTO DE UNA DE
Cejar 5 Nitzschia sp.
LAS CEPAS MICROALGALES
Q Amphora cf. Capitellata

ACT VERDE Tetraselmis sp. 2,0

Biomasa en gramos por litro de cepa

mesocosmos en bolsas de 400 litros
Caldera D1 Psammodictyon sp.
1,6
Chaxa 5 Amphora coffeaeformis

A 7,2 Nitzschia communis 1,2

MI 2 cH Cylindrotheca closterium

D Denticual kuetzing 0,8

Caldera E Psammodictyon sp.

0,4
Peine CAF Denticula kuetzingii

PS Chlorella pyrenoidosa
0,0
Ec Denticula kuetzingii 1 3 5 7 10 12 14
Tiempo (das)
Jere Navicula brockmannii

30

SUB PROGRAMA 2
INGENIERA METABLICA
APLICADA A BOTRYOCOCCUS BRAUNII
EL OBJETIVO GENERAL PLANTEADO en ste subpro-
grama es identificar los genes involucrados en la biosn-
tesis de hidrocarburos en Botryococcus braunii y analizar
su funcionalidad en huspedes heterlogos, como tam-
bin desarrollar la biotecnologa microalgal para obtener
una microalga recombinante y/o la sobreexpresin de las
protenas involucradas en la biosntesis de hidrocarburos.
LOS OBJETIVOS ESPECFICOS
Identificar los genes involucrados en la biosntesis
de hidrocarburos en Botryococcus braunii y analizar su
funcionalidad en huspedes heterlogos.
Ampliar la diversidad gentica y especfica de cepas
para la produccin de biodiesel y bioproductos.
Desarrollar la biotecnologa microalgal para obtener una
microalga recombinante y/o la sobreexpresin de las pro-
tenas involucradas en la biosntesis de hidrocarburos.
RESUMEN
La ingeniera metablica se refiere al uso de genes y pro-
tenas pertenecientes a una especie en particular, que le
otorga a ella alguna caracterstica especifica. Bajo esta
premisa es posible aumentar y mejorar ciertas caracters-
ticas de inters biotecnolgico entre una especie y otra.
DESERT BIOENERGY 2015
Sin embargo, al trabajar con una especie no secuencia-
da, fue necesario plantear como primer objetivo secuen-
ciar su genoma y transcriptoma, lo que permiti descifrar
en parte, la caja negra que subyace bajo la produccin
de cidos grasos en Botryococcus braunii. Los principa-
les resultados obtenidos consisten, luego de un anlisis
bioinformtico, tener los primeros genes candidatos, que
pueden estar funcionando en la microalga para producir
cidos grasos.
Se identificaron varios genes involucrados en diversas ru-
tas metablicas de cidos grasos, con los cuales se traba-
jara para determinar su relacin directa en la biosntesis
en la microalga. Para esto se usara la validacin usan-
do real-time PCR. Luego de esto se espera dirigir todo
la investigacin desarrollada en el subprograma a la
obtencin de una microalga recombinante que pueda so-
breexpresar alguno de los genes y as aumentar la pro-
duccin de cidos grasos. Se realiz una reprogramacin
de resultados dirigida especficamente a la clonacin de
los genes involucrados en las rutas metablicas de cidos
grasos en huspedes heterlogos. Primero se determina-
ra si se cuenta con la secuencia completa de estos ge-
nes, y se evaluar su clonacin en vectores de expresin
31
en Escherichia coli. Luego se evaluar la transformacin
gentica en una microalga modelo, Chlamydomonas rein-
hardtii.
Identificacin de los genes involucrados en la biosntesis
de hidrocarburos en Botryococcus braunii y analizar su
funcionalidad. En B. braunii se desconocen las vas de
sntesis de hidrocarburos y cidos grasos, los genes
que codifican las enzimas involucradas en estas vas
y como stas se interrelacionan. Segn lo descrito
se plantea que las vas de sntesis de isoprenoides
dan origen a monoterpenos, sesquiterpenos y diterpe-
nos (Holstein and Hohl, 2004), los cuales constituyen
hidrocarburos de origen natural. Una estrategia para
descifrar la maquinaria biosinttica de esta microalga
es analizar su transcriptoma, primero utilizando inhi-
bidores de la sntesis de cidos grasos y realizando

GENES DEL TRANSCRIPTOMA SELECCIONADOS PARA VALIDAR SU EXPRESIN

GENES CT1 CURVA CT2 CURVA CT3Z CRITERIO %
MELTING MELTING 2 EFICIENCIA
1 CoppB 33.90 OK N.D. - N.D. NO -
2 CyanoG 33.72 OK 34.91 OK 35.9 SI -
3 CytB6 30.79 OK N.D. - 31.9 SI -
4 CytBC1 37.04 OK 34.9 OK N.D. NO -
5 CytC 37.04 OK 33.9 OK 33.88 SI -
6 Cytox 33.42 OK N.D. - 35.88 SI -
7 CytP450 N.D. - N.D. - - NO -
8 dnaD 35.29 OK N.D. - N.D. NO -
9 Hel56 32.76 OK 35.97 OK 37.9 SI -
10 Elf 33.42 OK 35.91 OK 35.8 SI -
11 Etef1 33.62 OK 33.89 OK 34.89 SI -
12 Atpsyn 32.12 OK 35.9 OK 40.9 SI -
13 Ferthio 34.53 OK 37.12 OK 35.91 SI -
14 Ferche N.D. - N.D. - - NO -
15 FeSOD 29.49 OK 30.88 OK - SI 95
16 FlacytC N.D. - N.D. - - NO -
17 GluFru6 33.2 OK 32.88 OK 32.9 SI
18 GluRex 34.77 OK N.D. - N.D. NO -
19 GluSTM N.D. - 34.91 OK N.D. NO -
20 Glust 34.63 OK 35.9 OK 34.91 SI -
21 Gly3Pdh 30.1 OK 30.88 OK - SI 106
22 HSP 32.33 OK 33.93 OK - SI 101
23 HSP90 29.08 OK 30.91 OK - SI 96
24 C5S1des N.D. - 33.89 OK 35.90 SI -
25 Dagat N.D. - 36.99 OK N.D. NO -
26 FAD 31.23 OK 31.91 OK - SI 105
27 FAD3 N.D. - N.D. - 42.1 NO -
28 MnSOD 30.83 OK 31.91 OK - SI 105
29 S9des 29.77 OK 29.92 OK - SI 83
30 S14des 37.13 OK N.D. - 37.89 SI -
31 Tagli 32.89 OK N.D. - 33.84 SI -
32 ABC1 N.D. - N.D. - - NO -
33 ThioRed 33.57 OK 31.9 OK 33.89 SI -
34 ACTBB 30.75 OK 31.88 OK - SI 101
35 CytP450R 33.54 OK 35.9 OK 36.9 SI -
36 Btub 26.35 OK 26.88 OK SI 96
37 Btub2B 31.25 OK 32.91 OK 32.87 SI -
38 Bact 37.15 OK N.D. - 42.19 SI -
39 Cop9 N.D. - 6.23 - N.D. NO -
40 Coppt 8.2 - 33.91 OK 33.9 SI -

32

una librera substractiva y luego con el diseo y
anlisis del transcriptoma completo de esta microalga
(substractive sequencing hibridization SSH, 454 se-
quencing, real time PCR, etc).
PRINCIPALES RESULTADOS
Los principales resultados obtenidos en este subprogra-
ma son:
Preparacin de material biolgico de B. Bbraunii:
Protocolo estandarizado de extraccin de cidos nu-
cleicos (RNA y DNA) para B. braunii, que es aplicable
a otras microalgas en general.
Extraccin de RNA total verificacin de calidad y
cantidad: Principal resultado: Protocolo estandarizado
de uso mediante un nanoespectrofotometro.
Preparacin de cDNA: Protocolo estandarizado utilizan-
do kit de marca Fermentas (Life Technologies).
Seleccin y validacin de genes housekeeping para
B. braunii: Cuatro genes seleccionados de housekee-
ping como son GAPDH, -actina, 18SrDNA y -tubuli-
na. Se estandarizo su uso para efectos de validacin
en la expresin de genes blanco.
Seleccin y validacin de genes housekeeping para
B. braunii: Cuatro genes seleccionados de housekee-
ping como son GAPDH, actina,18SrDNA y tubulina. Se
estandarizo su uso para efectos de validacin en la
expresin de genes blanco.
Para validar la expresin de los genes involucrados en
la sntesis de cidos grasos y otros, se seleccionaron
40 genes, entre ellos c5-sterol desaturase, diacilglicerol
DESERT BIOENERGY 2015
O-aciltransferasa 2b, y otros directamente relaciona-
dos. Adems se seleccionaron otros genes relacionados
con el metabolismo general de la microalga y algunos
genes marcadores de estrs.
Los partidores se disearon usando el software Pri-
mer Express 3.0. Adicionalmente se evaluaron los par-
tidores diseados y se determinaron su especificidad,
amplificacin (CT) y su porcentaje de eficiencia y la
factibilidad de trabajar con ellos en experimentos en
tiempo real.
Usando las secuencias obtenidas desde el anlisis
bioinformtico del transcriptoma de B.braunii se iden-
tificaron in silico varios genes descritos como posi-
bles genes housekeeping y genes responsables de la
sntesis de cidos grasos. Las secuencias correspon-
dientes a estos genes fueron usadas para el diseo
de partidores usando el software Primer Express 3.0.
Luego se realiz extraccin de RNA total desde cul-
tivos de la microalga en diferentes condiciones tales
como, fase de crecimiento, deprivacin de nitrgeno,
aumento de salinidad, esto con la finalidad de tener
diversidad de condiciones y as validar si la expresin
de los genes es constitutiva o no. Se valid la expre-
sin de los genes Ef-tu, -tubulina, -actina y Gapdh,
determinndose mediante anlisis estadstico usando
el software Bestkeeper, que el mejor control de
expresin constitutiva lo constituye el gen de la
-tubulina, seguido por Gapdh.
Ambos genes ( -tubulina y Gapdh) sern usados para
cuantificar y validar la expresin de los genes involu-
crados en la biosntesis de cidos grasos.
Validacin de la expresin en las diferentes fases del
33
crecimiento de B. braunii para su correlacin con la continua y con un numero de rplicas n=3. Con
sntesis de cidos grasos. intervalos de 5 das se tomaron 200 ml de cada
rplica, se centrifugaron y se procedi a eliminar
Los genes para los cuales se pudo determinar una
la carga bacteriana usando un protocolo de lavado
eficiencia de los partidores cercana al 100 (rango
celular descrito en Rivas et al. (2010). Luego el
de valores 80-115) fueron utilizados y se determin
pellet se almacen a -80C o bien se procedi a
su expresin cada 5 das durante el crecimiento de
la extraccin inmediata de RNA total para su pos-
la microalga en reactores tipo batch de 20 litros
terior almacenamiento a -80C.
con medio nutritivo UMA2, a 20C, con iluminacin

TABLA 1 | EXPRESIN DE EL GEN DELTA 9 TABLA 2 | EXPRESIN DEL GEN DELTA 12

DESATURASA AL DA 25 DE CULTIVO DESATURASA AL DA 25 DE CULTIVO
Delta 9 Desaturasa/ tubulina1 120 Delta12-des

100
10
80
8
Relative expression

6 60
Relative expression

4
40
2
20
0,0
D5 D10 D15 D20 D25 D30
0,0
Tiempo (das) 5 10 15 20 25 30
Tiempo (das)
>> Expresin del gen Delta 9 desaturada. >> Expresin del gen Delta 12 desaturasa da 25 de cultivo.

DELTA 9-DESATURASA DELTA 12-CIDO GRASO-DESATURASA

Estearoil-coA 9 desaturasa (S9-des) (EC 1.14.19.2). La 12-desaturada o cido graso desaturasa (fatty
9-desaturasa, tambin conocida como estearoil-CoA acid desaturase, FAD) (12-des) (EC 1.14.19.6),
desaturasa-1, es usada para sintetizar cido oleico, un cumple la funcin de desaturar el cido oleico
c. graso monoinsaturado, componente ubicuo de to- (18:1n-9) para formar cido linoleico (18:2n-6). La
das las clulas. La 9-desaturasa produce c. Oleico validacin permiti determinar que la mayor expre-
por la desaturacin del c. Esterico, un c. Graso sin para el mRNA de este gen ocurre alrededor de
saturado. Ambos son sintetizados en las clulas desde los das 25 y 10 de cultivo en Batch (Tabla 2)
c. Palmtico. Ambas enzimas se encuentran rela-
cionadas con la biosntesis de cidos grasos en B.
braunii race A (UMA2), comprobando la aproximacin
descrita por Baba et al. [2012]. En la Tabla 2 clara-
mente se puede observar que la mayor expresin del
mRNA de este gen ocurre en el da 25 de cultivo en
batch de la microalga (Tabla 1).

34

SUB PROGRAMA 3
BIOFIJACIN DE DIXIDO DE CARBONO (CO2)
DE ORIGEN INDUSTRIAL PARA LA PRODUCCIN
DE BIOMASA MICROALGAL
El objetivo general planteado es aprovechar fuentes in-
dustriales emisoras de dixido de carbono para su utili-
zacin como fuente de carbono en cultivo de microalgal.
LOS OBJETIVOS ESPECFICOS
Disear e instalar sistema de captacin de gases de
combustin proveniente de fuentes emisoras e inyeccin
de estos en los sistemas de cultivos microalgales.
Determinar la concentracin ptima de gases de com-
bustin, principalmente dixido de carbono en cultivos
microalgales a nivel primario y masivo.
Probar a nivel piloto la tecnologa desarrollada.
Se instal una planta piloto para producir biomasa de
origen microalgal en las instalaciones de Electro Andina,
EC-L en la ciudad de Tocopilla, en una superficie de 700
metros cuadrados, en la cual se instalaron 18 reactores
DESERT BIOENERGY 2015
de bolsas de 1 metros cbicos de capacidad y tres Race
way de capacidad entre 4,7 5,5 m3 metros cbicos
respectivamente, junto a los sistemas auxiliares de agua,
aire, conduccin de gases de combustin y cosecha de
microalgas.
En Diciembre 2013 fue culminada la implementacin
de la lnea de gas de combustin y abastecimiento de
agua de mar, a partir de dicha fecha se inici la puesta
en marcha, evaluando el funcionamiento del compresor
de gas de combustin, las lneas accesorias, sistemas de
inyeccin y flujos de gas. Posterior a obtener los resulta-
dos de la exposicin, los cuales indicaron que un cultivo
con control de pH (pH=8) mediante inyeccin de gas de
combustin mejora el aprovechamiento de los nutrientes
y por consiguiente la produccin de biomasa en un 26%,
dichos resultados nos dan el pie inicial para mejorar las
condiciones de operacin y adaptabilidad de la cepa mi-
35
 croalgal para seguir en la lnea de optimizar la produccin
y operacin continua de la planta piloto de Tocopilla.
A partir de Mayo del 2014 iniciamos con el control auto-
mtico de inyeccin de gases de combustin, esto nos ha
permitido mejorar las producciones y aumentar el volu-
men de producto diario, consiguiendo tener los primeros
resultados de la calidad de la biomasa expuesta a este
tipo de gas. De dichos resultados los ms importantes
sera la acumulacin de metales pesados en la biomasa,
de los cuales cabe destacar que todas las biomasa pro-
ducidas hasta el momento en la planta de Tocopilla (con o
sin gas de combustin) se encuentran bajo la norma para
ser incorporada como suplemento alimenticio en ganado
(max 30 mg/kg), peces (max 5 mg/kg), aves (max 30 mg/
kg) y adems como materia prima para uso en fertilizan-
tes (max entre 21 a 41 mg/Kg).
ACTIVIDADES ASOCIADAS
Registro de la composicin de los gases de combustin
Unidad 14 y 15 de E-CL
La termoelctrica realiza un monitoreo constante de la
composicin de los gases de combustin correspondien-
te a la unidades 14 y 15 de las cuales la planta est ob-
teniendo el gas de combustin para realizar el control de
pH mediante inyeccin automtica.
Las concentraciones de CO2 y NOX se encuentran en el
rango aceptable y tolerable para la cepa en estudio. Es
importante poner especial atencin las elevadas concen-
traciones que registra el dixido de azufre (SO2), debido
a que la bibliografa reporta que cuando la microalga se
ve expuesta a niveles cercanos a los 400 ppm, el pH dis-
minuye por debajo de 4 en 24 hrs, y esto puede causar
decaimiento del cultivo en menos de 2 das.

IMPLEMENTACIN DE CAPTACIN E INYECCIN DE GAS DE COMBUSTIN

PLANTA PILOTO TOCOPILLA
CARACTERIZACIN DE LA COMPOSICIN DE LOS GASES
Filtro de arena
Caera agua
de mar

Sistema de
Ozono
Centrfuga
Recirculacin

Lnea de gas CO2 puro

Sistema B400
Oficina camarn - bodega

Lnea de Gas
de Combustin
Mdulo Interna
Biodiesel

Sistema 3m3

Red de cosecha
Red de Clarificado
Lnea de gas de combustin

36
 DESERT BIOENERGY 2015

CARACTERIZACIN DE LA COMPOSICIN DE LOS GASES

REGISTRO DE COMPOSICIN DE LMITES TOLERABLES PARA
GASES DE COMBUSTIN UNIDAD N.GATIDANA RESPALDO BIBLIOGRFIO
14 Y 15 E-CL* JIAN & ZHANG (2013)**
COMPONENTE MIN MAX MIN MAX UNIDAD

CO2 8 12 10 20 %

NOX 212 265 100 300 PPM

SO2 382 955 100 400 PPM

* Registro proporcionado de laboratorio monitoreo E-CL ** Publicaciones cientficas 2013

REGISTRO FOTOGRFICO DE LA INTERCONEXIN DE LAS UNIDADES 14 Y 15 DE LA

CENTRAL E-CL TOCOPILLA Y LA PLANTA DE CULTIVO DE MICROALGAS

LNEA DE GAS COMBUSTIN EXTERNA

Vlvula de cierre de Lnea de gas:

conexin lnea 14 y Condensador Caera de acero al
15 E-CL carbono

Compresor de aire, Vlvula de seguridad

acumulador y filtro de eliminacin de
gas de combustin condensado

37
 REGISTRO FOTOGRFICO DE LA LNEA DE GAS DE COMBUSTIN INTERNA DE LA
PLANTA PILOTO DE CULTIVO DE MICROALGAS TOCOPILLA

LNEA DE GAS COMBUSTIN INTERNA

Ingreso de lnea Compresor

de gas a planta de capacidad 1 m3
microalgas

Rotmetro: flujo de
Regulador de
ingreso de gas a los
presin
sistemas de cultivo

38
 DESERT BIOENERGY 2015

SISTEMA DE CONTROL AUTOMTICO DE PH
Las unidades de cultivo cerrado (m3) y Abierto (RW)
cuentan con un sistema de registro de pH mediante un
electrodo y controlador, el cual emite la seal hacia el
programa DAQFactory. Dicho programa est configura-
do para controlar los niveles de pH en el medio de culti-
vo, dicho control funciona accionando las electrovlvu-
las para permitir el paso del gas de combustin. El flujo
al cual entra el gas al cultivo es controlado finalmente
mediante un rotmetro. La mantencin de las condicio-
nes de pH optima (7-8) mediante inyeccin de gases de
combustin, genera un aumento en la produccin pro-
medio de un 26%.

SISTEMA DE CONTROL AUTOMTICO DE PH MEDIANTE INYECCIN DE

GAS DE COMBUSTIN

CONTROL AUTOMTICO DE PH MEDIANTE LA INYECCIN DE GAS DE COMBUSTIN

NANNOCHLOROPSIS GADITANA SISTEMA DE CULTIVO 1 M3
M3 (s/Gas) M3 (c/Gas)

1,4

1,2
Slidos Totales, g/L

1,0

0,8

0,6

0,4

0,2

0,0
0 5 10 15 20 25 30
Tiempo (das)

39
 ANLISIS DE METALES PESADOS EN BIOMASA OBTENIDA EN CULTIVOS DE
N.GADITANA PLANTA PILOTO TOCOPILLA

Respecto a la composicin de metales pesados
presentes en la biomasa microalgal, se presentan
resultados de biomasa microalgal sin exposicin
obtenidos en octubre 2013 con niveles cuantifica-
bles de 1,6 mg/kg y biomasa expuesta aproximada-
mente 30 das al gas de combustin que contienen
entre 0,12 - 0,368 mg/Kg de biomasa, en todos los
casos la composicin de arsnico est bajo la nor-
ma para alimento para uso en acuicultura o agri-
cultura.

DETERMINACIONES/RESULTADOS DE LOS ENSAYOS

ENSAYOS UNIDAD LD LC 32586
(METODOLOGAS)
Arsnico (6) mg/kg 0,003 0,010 1,621

Cadmio (8) (**) mg/kg 0,05 0,10 <0,05 Resultados

Mercurio (4) (**) mg/kg 0,005 0,010 0,007 2013

Plomo (8) (**) mg/kg 0,2 0,5 <0,2

DETERMINACIONES/RESULTADOS DE LOS ENSAYOS

ENSAYOS UNIDAD LD LC 49512
(METODOLOGAS)
Arsnico (2) mg/kg 0,003 0,010 0,120 Resultados
Cadmio (3) (**) mg/kg 0,05 0,10 <0,05 2014
Microalga
Mercurio (1) (**) mg/kg 0,005 0,010 0,005 expuesta
a gases de
Plomo (3) (**) mg/kg 0,2 0,5 <0,2 combustin

40

SUB PROGRAMA 4
DESARROLLO Y OPTIMIZACIN DE TECNOLOGAS PARA
LA PRODUCCIN DE BIOMASA MICROALGAL
El objetivo general planteado es optimizar las condicio-
nes de operacin, definiendo los parmetros de cosecha,
centrifugacin, obtencin del producto y calidad del mis-
mo. Todo lo anterior con el fin de establecer condiciones
constantes y estables de operacin.
LOS OBJETIVOS ESPECFICOS
Construccin y evaluacin de sistemas de prototipos de
sistemas masivos, para evaluacin de sus ventajas en
manipulacin y costos de produccin.
Disear la construccin de una planta de produccin
piloto para obtencin de biomasa microalgal en depen-
dencias de la termoelctrica de Tocopilla.
Semi-automatizacin de sistemas de cultivos masivos
en la Unidad de Microbiologa Aplicada para determina-
cin de parmetros de cultivos ptimos.
Las actividades contempladas en el presente subprogra-
ma considera el trabajo de investigacin base en la opti-
mizacin de las condiciones y sistemas de cultivo, lo cual
se encuentra desarrollado en la etapa N1, donde a la fe-
cha tenemos definidos la calidad y cantidad de nutrientes
a utilizar en los medios de cultivo, stos mismos han se-
guido en la lnea de optimizacin en la eficiencia y costos
DESERT BIOENERGY 2015
asociados. En base a esto hemos logrado en la actuali-
dad reducir el costo del medio de cultivo en aproximada-
mente un 50%, realizando el remplazo de los nutrientes
de grado tcnico por fertilizantes agrcolas de bajo costo,
dichos resultados nos permite producir niveles similares
en produccin de biomasa (0,04 g/L da) con un aumento
en la acumulacin de lpidos. Adems estn definidas un
80% de las estrategias de cultivo masivo, las cuales con-
sideran: porcentajes de inoculacin, tasas de cosecha,
cultivo de modo semicontinuo y protocolos de manejo
productivo para cada uno de los sistemas, Metodologas
de reduccin de volmenes de cosecha mediante la tc-
nica actualmente en evaluacin (Floculacin con FeCL3).
La Planta Piloto de Tocopilla se encuentra construida y
habilitada funcionando actualmente con niveles producti-
vos superiores (1 1,2 g/L) a los obtenidos con anteriori-
dad en la Universidad de Antofagasta (0,5 0,7 g/L). Los
sistemas de cultivo instalados fueron; sistema de cultivo
cerrado 0,4 m3 (8 unidades) 8 unidades, sistema de cul-
tivo cerrado tipo panel 1m3 (18 unidades) y sistema de
cultivo abierto tipo Raceway 6 m3 (3 unidades). La Planta
piloto de Tocopilla (PPT) funciona actualmente con con-
trol de pH. Las lneas de gas de combustin y agua de
41
mar que alimentarn la planta estn en funcionamiento
desde Octubre del ao 2013.
Actualmente la PPT posee una capacidad productiva de
38 m3 divididos en: 3,2 m3 en sistema de cultivo cerrado
(0,4 m3); 18 m3 en sistemas de cultivo cerrado 1 m3 y
16,7 m3 en sistemas de cultivo cerrado (raceway 5,6 m3).
La etapa de puesta en marcha de la PPT, a resultado con
xito debido a que se disminuyeron los tiempos de ino-
culacin utilizando una tcnica desarrollada en la Unidad
Sistema de cultivo cerrado tipo panel (1 m3)
Sistema de control y gestin de parmetros
42
de Microbiologa Aplicada, dicha tcnica de inoculacin
permite transportar volmenes de inculo razonable y
acortar el escalamiento en aproximadamente 21 das.
Respecto a las metodologas de concentracin y trans-
porte de biomasa, actualmente estn siendo evaluadas
a escala masiva las dosis de floculante determinado y
realizando modificaciones al manejo y recuperacin del
clarificado y floculo con el fin aumentar la eficiencia de
floculacin.
Control inyeccin CO2
Registro de luminosidad y
temperatura ambiente
Software de control y registro de parmetros
 DESERT BIOENERGY 2015

1. SEMI-AUTOMATIZACIN DE SISTEMAS
DE CULTIVOS A ESCALA PILOTO, USADOS
EN LA U. DE ANTOFAGASTA
Se realiz la instalacin de un sistema de control
de pH mediante inyeccin de CO2 puro, adems de in-
cluir registro de oxgeno disuelto, temperatura del cultivo,
temperatura ambiental y radiacin solar, en los sistemas
de cultivo tipo panel (1 m3) de la Universidad de Antofa-
gasta.
del cultivo y evitar un descenso del mismo. Para ellos
se registraron los niveles de pH durante la preparacin
del medio de cultivo lo cuales con la adicin del tam-
pn (T1) el pH bajo a 5,9 y al tratamiento sin adicin
de tampn (T2) bajo a 5,2 (Tabla 4). Adicionalmente
se verific la produccin de biomasa para cada trata-
miendo, resultando una diferencia significativa entre los
tratamientos, siendo el tratamiento 1 un 30% superior el
tratamiento 2 (Tabla 5).
7,0

2. EVALUACIN DE PROTOTIPOS MASIVOS 6,0

a. Calidad y cantidad de nutrientes 5,0

La cepa en estudio fue cultivada en sistemas de cul-
4,0
tivo cerrado, evaluando diferentes concentraciones de T1

pH
la fuente de Nitrgeno, manteniendo siempre la propor- 3,0 T2
cin 5:1 con la fuente de fosforo. Los resultados mues-
tran que un cultivo con 6 mM de NaNO3, presenta una 2,0
diferencia estadsticamente significativa con el resto de
los tratamientos. 1,0

0,014 0,0
Agua de Agua + Cloro Agua Adicin Medio
0,012 Mar Neutralizada de cultivo

0,010 >> TABLA 4 | Variacin de pH durante la preparacin del

Pbiomasa (g/L da)

medio de cultivo.
0,008
0,006 0,35
0,004 0,3
0,002
0,25
Produccin de biomasa (g/L)

0,0
3mM NaNO3 6mM NaNO3 9mM NaNO3 12mM NaNO3 0,2

0,15
>> TABLA 3 | Productividad de biomasa (g/L da) de
Nannochloropsys sp en sistemas de cultivo cerrado (Bolsas 0,1
de 400L).
0,05
b. Calidad de agua 0
T1 T2
Estudio de la variacin de pH en el tratamiento de agua, Tratamientos
durante inoculaciones y semicontinuos.
>> TABLA 5 | Produccin de biomasa de Nannochloropsys
Debido a que durante la preparacin del cultivo los ni- sp en un cultivo con adicin de bicarbonato de sodio como
tampon de pH.
veles de pH disminuyen por la adicin de los nutrientes
lo cual es letal en los cultivos microalgales, se evalu
la variacin del pH durante la desinfeccin del agua y c.Concentracin de inculo
adicionalmente se utiliz un tampn de grado tcnico Siguiendo la lnea de optimizacin de las condiciones
(bicarbonato de sodio) para corregir inicialmente el pH de cultivo, es primordial considerar evaluar la concen-

43
tracin de inoculacin en los sistema de cultivo a utilizar
en la planta piloto, esto nos permitir determinar que
volumen de cultivo microalgal inicial se debe utilizar,
optimizando el tiempo de inicio del cultivo semicontinuo,
ahorro en la cantidad a utilizar de inculo y evitar fotohi-
nibicin por exceso de luz.
Para ellos se evaluaron diferentes concentraciones de
inoculacin en el sistema de cultivo cerrado tipo panel
1 m3 y en el sistema de cultivo abierto tipo Raceway 7
m3 Los resultados muestran que al utilizar un 30 % de
inculo la productvidad es un 40% superior que el 20%
de inculo.

TABLA 6 | PRODUCCIN DE BIOMASA (A) Y PRODUCTIVIDAD DE BIOMASA (B) DE

NANOCHLOROPSYS SP EN SISTEMA DE CULTIVO CERRADO TIPO PANEL (1m3)
20% 30%
0,09

0,08

0,07

0,06

0,05
Biomasa g/L da

0,04

0,03

0,02

0,01

0,00
0 5 10 15 20
Tiempo (das)

>> TABLA 6 | Produccin de Biomasa (A) y Productividad de Biomasa (B) de Nannochloropsys sp en sistema de cultivo
cerrado tipo panel (1m3).

La planta piloto de microalgas con inyeccin de gases dustrial de microalgas.

de combustin, utilizando agua de mar en forma conti-
nua todo el ao, para ello disponemos de operadores
provenientes del Liceo Politcnico de Tocopilla. Esta
planta piloto ha permitido validar condiciones reales
de operacin y cultivo de microalgas determinando las
principales variables que definen el proceso masivo de
microalgas y los costos que existiran en una planta in-
Esta planta tambin es sustentable con el medio am-
biente ya que recicla todos los residuos como seran en
una planta industrial.
El gran logro de esta planta ha sido operada en forma
continua y a nivel masivo simulando condiciones indus-
triales de cultivo de microalgas.

44
 DESERT BIOENERGY 2015

Construccin, habilitacin y montaje de

equipos en la planta piloto de produccin
microalgal en Tocopilla
La construccin, habilitacin y montaje del equipamiento
en la planta piloto de Tocopilla finaliz en Abril del 2013,
contando con laboratorios y oficinas, sistemas de culti-
vos cerrados de 0,4 y 1 m3 y sistemas de cultivo abierto
(4,7 5,5 m3). Obteniendo un volumen efectivo de cul-
tivo entre 3 - 37 m3.

PLANTA PILOTO DE CULTIVO DE MICROALGAS TOCOPILLA

Filtro de arena

Caera agua
de mar

Sistema de
Ozono
Centrfuga
Recirculacin

Sistema de recirculacin y tratamiento

de agua de cosecha

Centrifugacin
Lnea de gas CO2 puro
Sistema B400
Oficina camarn - bodega

Lnea de Gas
de Combustin
Mdulo Interna
Biodiesel

Sistema 3m3

Red de cosecha
Red de Clarificado
Lnea de gas de combustin

>> Planta Piloto de cultivo de microalgas Tocopilla

45
>> Construccin Planta Plioto de cultivo de microalgas Tocopilla.

>> Sistemas de cultivo cerrado (0,4 1 m3).

46

>> Sistemas de cultivo cerrado 1 m3).
>> Sistemas de cultivo abierto tipo Raceway (4,7 5,5 m3).
HABILITACIN SISTEMA DE
INYECCIN GAS DE COMBUSTIN
La central trmica de Tocopilla cuenta con dos chime-
neas (unidades 14 y 15), la lnea completa de imple-
mentacin de control de pH mediante inyeccin de gas
se compone de:
LNEA EXTERNA: La lnea de gas externa inicia en las
conexiones de las unidades 14 y 15 de la central trmi-
ca E-CL Tocopilla, ambas lneas se unen en una lnea
DESERT BIOENERGY 2015
principal de acero inoxidable, el enfriamiento produce
un condensado el cual es capturado en un reactor. Este
condensador cuenta con un ingreso y salida del gas,
adems de un visor de nivel. Posterior al condensador
la lnea sigue en acero al carbono hasta la planta de
microalgas (300 metros).
LNEA INTERNA: La lnea interna de gas inicia en el
ingreso a la caseta que contiene el filtro de gas y el
compresor de aire de capacidad de 1 m3 de volumen,
el equipo trabaja a una presin interna de 10 bar y se
47
controla la salida a la lnea de distribucin de gas de los
sistemas de cultivo con un regulador de presin a 2 - 5
bar, terminando en un rotmetro el cual permite regular el
volumen de ingreso (max.130 LPM).
Difusores de gas: Los difusores de gas de combustin se
disearon en funcin de las necesidades de cada tipo de
sistema de cultivo (cerrado tipo panel de 1 m3 y abierto
tipo Raceway).
PANEL 1 M3: El gas de combustin ingresa al sistema
de cultivo separada del aire para la agitacin, mediante
un difusor fabricado en manguera porosa y fijado al fondo
con la ayuda de una varilla de acero inoxidable.
RACEWAY 4,7 M3: El gas de combustin ingresa al cul-
LNEA DE GAS COMBUSTIN EXTERNA
PLANTA PILOTO TOCOPILLA
48
tivo en un foso incorporado en el sistema de cultivo, la
difusin del gas es mediante dos discos microporosos.
Sistema de Control automtico de pH mediante inyeccin
de gas de combustin: Las unidades de cultivo cerrado
(1 m3) y Abierto (RW) cuentan con un sistema de registro
de pH mediante un electrodo y controlador, el cual emite
la seal hacia el programa DAQFactory, dicho programa
est configurado para controlar los niveles de pH en el
medio de cultivo, dicho control funciona accionando las
electrovlvulas para permitir el paso del gas de combus-
tin, el flujo al cual entra el gas al cultivo es controlado fi-
nalmente mediante un rotmetro. El programa de control
nos permite obtener adems un registro de los niveles
de pH y temperatura ajustando los intervalos de tiempo.
 DESERT BIOENERGY 2015

LNEA DE GAS COMBUSTIN INTERNA

PLANTA PILOTO TOCOPILLA

UNIDAD DE OBTENCIN DE PRODUCTO

La unidad de obtencin de producto contempla una cla-
rificadora, marca ALFALAVAL modelo CLARA 15, el
equipo trabaja a un caudal de cosecha de entre 0,5 a
0,6 m3/hr, realizando entre 6 a 7 descargas por da.
Actualmente se estn procesando 3,2 4,5 m3/da, ob-
tenindose entre 10 a 14 L/da de producto concentrado
el cual corresponde a una produccin que vara entre
0,7 1 kg/da.

>> Centrifuga continua

0,6 1 m3/hr

49
>> Estanque de agua de mar, clarificado y residuos Planta Piloto Tocopilla.
DETALLES DE OPERACIN PRODUCTIVA DE BIOMASA MICROALGAL PLANTA
PILOTO DE TOCOPILLA
La planta piloto cuenta con un total de 37 m3 de culti-
vo, separado en sistemas de cultivo cerrado (21 m3);
y sistemas de cultivo abierto 16,5 m3. Al cabo de 12 a
15 das de cultivo se inicia su proceso de cultivo semi-
continuo, el cual consiste en remover un porcentaje del
cultivo diariamente y se repone el mismo volumen con
suplementacin de nutrientes. Durante el ao de cultivo
50
2013 el volumen que se repone durante los semiconti-
nuo es agua de mar fresca con la suplementacin del
100 % del medio de cultivo. Durante el ao 2014 se in-
corpor al proceso de cultivo un sistema de tratamiento
de clarificado, esto nos permiti reutilizar el agua del cul-
tivo disminuyendo los costos asociados a los nutrientes
durante el semicontinuo.
 DESERT BIOENERGY 2015

>> Tanque de ozonizacin. >> Generador de ozonizacin.

CULTIVO SEMICONTINUO PRODUCCIN

El cultivo semicontinuo se realiza cosechando entre 10 La operacin contempla la cosecha diaria entre el 10
15% del volumen total de cultivo, posteriormente por 15 % del volumen de cultivo, cosechando entre 2,5
bombeo es dirigido a un estanque general que rene la 3,7 m3/da, el producto obtenido es una pulpa micro-
cosecha total diaria, terminada la cosecha se inicia el algal entre 2 -10 litros/da a una concentracin variable
proceso de obtencin de producto, el cual es realizado
dependiendo de la concentracin del cultivo y el volu-
mediante centrifugacin (CLARA 15), el equipo concen-
men centrifugado, 7 20 % de slidos.
tra el producto obtenido una pulpa microalgal a una con-
centracin entre 12 18% de slidos, posteriormente
esta agua es retornada al sistema previo tratamiento.
6000 70000
58119
5000 60000 53928

50000
4000
Cosecha, litros

Volumen, litros

40000 32640
30030
3000 30000
2000 20000 14530 13482
7508 6528
1000 10000
0
0 Abril Mayo Junio Julio
0 5 10 15 20 Cosecha Promedio, Litros/semana
Nmero de cosechas Cosecha mensual, Litros/semana
>> Cosechas realizadas en planta piloto (2013). >> Cosechas realizadas en planta piloto Tocopilla (2014).

14 25
Produccin Pulpa, L/da

Produccin Pulpa, L/da

12
20
10

8 15

6 10

4
5
2

0 0
25 2 5 12 16 19 1 8 15 30 6 11 13 15 25 1 8 10 12 16 18 22 24 26 2 13 20 22 25 2 5 12 16 19 1 8 15 30 6 11 13 15 25 1 8 10 12 16 18 22 24 26 2 13 20 22
Febrero Marzo Abril Mayo Junio Julio Febrero Marzo Abril Mayo Junio Julio

>> Resumen de produccin constante de pulpa microalgal >> Resumen de concentracin de slidos en el producto,
Planta Piloto Tocopilla (2015). Planta Piloto Tocopilla (2015).

51
52

Planta Piloto
para Biocombustibles
La planta piloto de biodiesel y biogs esta integrada a la planta
piloto de microalgas en la central termoelctrica de Tocopilla,
permitiendo la produccin de biodiesel, biogs y microalgas en
un solo lugar.
1. DEFINICIN DE PROCESO PARA
SINTESIS DE BIOCOMBUSTIBLE
El proceso de sntesis de biocombustible a partir de
biomasa microalgal se define segn el diagrama de la
pgina 54. El proceso general comienza con reducir la
humedad de la microalga. Este proceso ser realizado
por medio de secado de aire en bandejas. En las
instalaciones de la Planta Termoelctrica se dis-
ponen de dos fuentes de energa para proveer de
calor latente necesario para remover la humedad
de la biomasa, energa elctrica y vapor. La selec-
cin del portador de energa se definir en funcin
de los costos de los equipos y operacin y del espacio
disponible. Desde el punto de vista de la instalacin, los
equipos de calentamiento elctrico son ms compactos
y econmicos, sin embargo su operacin es de mayor
costo. Los equipos de calefaccin por vapor saturado
son de mayor volumen y de instalacin ms costosa y
de operacin ms econmica. De acuerdo la dispo-
nibilidad de espacio, reducido, y de energa elctrica,
proveedor inmediato, una buena alternativa sera la
instalacin de un calentador de aire elctrico.
Una vez disminuida la humedad de la biomasa se
realizar en un reactor hermtico agitado el proce-
so de transesterificacin cida directa. Este proceso
consiste en mezclar la biomasa, el catalizador, y
el alcohol en conjunto con un solvente y producir
la sntesis de steres e inmediatamente su dilucin
por el solvente, todo a una presin cercana a la
DESERT BIOENERGY 2015
atmosfrica y a una temperatura de 55C.
El proceso de transesterificacin cida directa produ-
cir tres fases: una fase slida-alcohol (heavy) fase
gaseosa y una fase lquida (light).
La fase slida-alcohol consiste en biomasa agota-
da, alcohol y otros sern separados de las otras
dos fases utilizando un proceso de decantacin
por gravedad, en el clarificador 1 (clarification). Sin
embargo, se encuentra en estudio la separacin
de estos slidos mediante la utilizacin de filtros
consistentes con el tamao de partculas, de esta
manera se puede reducir de dos clarificadores a
uno solamente.
La fase gaseosa, compuesta por el solvente, biocom-
bustible y alcohol, ser extrado por succin y conden-
sado mediante un destilador. El equipo de enfriamien-
to propuesto para la destilacin ser un Water-Chiller.
Estos equipos poseen la ventaja de utilizar agua tra-
tada en un circuito cerrado logrando el descenso de la
temperatura mediante la incorporacin compacta de
un equipo de refrigeracin por fren.
La fase lquida, se retira por rebalse del clarificador
y enviada a la unidad de destilacin en donde se
separarn las fases de solvente y biocombustible me-
diante, calentamiento y condensado fraccionado para
separar el biocombustible, solvente y alcohol rema-
nente.
En el clarificador N2 se separarn la fase slida
y de desechos para tratamiento y/o proceso ulterior,
53
de la segunda fase lquida (light 2) por rebalse.
Esta fase ser transferida al destilador para produ-
cir la separacin del biocombustible del solvente y
el alcohol, por medio calentamiento y condensada
PROCESO DE SNTESIS DE BIOCOMBUSTIBLE
A PARTIR DE BIOMASA MICROALGAL
Biomass
Alcohol
Sulphuric acid
Solvent
P-2 / V-101 Mix 1
Vessel Procedure
P-1 / CL-101
Clarification
2. DEFINICIN DE PROCESO PARA
SINTESIS DE BIOCOMBUSTIBLE
El tamao de la planta se ha definido como la
cantidad de biomasa microalgal que se procesar
por cada ciclo de operacin. La produccin de bioma-
sa microalgal en la actualidad asciende a alrededor
de 130 kilogramos de biomasa, con 90% de hume-
dad, cada diez das. De acuerdo a la investigacin
realizada en los laboratorios de la Universidad de
La Frontera, la cantidades de catalizador y alcohol
necesarios para la reaccin corresponden a 3.9 y
122 litros respectivamente. El volumen que se debe
manejar en el reactor es de alrededor de 140 litros.
En consecuencia se define un reactor con una ca-
pacidad de 200 litros. Los equipos correspondientes
a los restantes subprocesos se definen para canti-
54
fraccionada. El biocombustible se depositar en el
fondo del destilador y las fases de alcohol y sol-
vente deben recuperadas juntas para su utilizacin
posterior.
Alcohol recirc
Solvent recirc
Light 1
Heavy 1 Light 2
Biodiesel waste
P-3 / CL-102
P-0 / V-102
Clarification
Batch Clarification
Ex biomass
dades iguales y menores.
La capacidad de procesamiento de biomasa microal-
gal con 10% de humedad por mes es 60 kilogramos,
con un output de biocombustible de 6 kilogramos
correspondiente al 10% de la biomasa seca.
La planta experimental requiere de la distribucin
fsica de equipos para procesos primarios y secunda-
rios en las dependencias de la Planta Termoelctrica
(Imgenes pgina 54). Definiendo aquellos primarios
como los equipos se separacin y destilacin y
aquellos secundarios, los de enfriamiento, calenta-
miento, contenedores de alcohol y solvente, elctrico
y todo aquel de soporte, el tamao de la planta
es adecuado considerando el espacio disponible y
considerando adems que se ha planificado la insta-
lacin de cultivos de microalgas.
DESERT BIOENERGY 2015

55
 PLANO REACTOR ANAEROBIO

3 2 1
Sensor pH, T, presin

10

Alimentacin
12 Bomba

Aislacin
4 9 Vlvula

Contrapeso
6

14
10
Gasmetro
13
11 15

7
8

E/fuente

56
 DESERT BIOENERGY 2015

CONSTRUCCION PRUEBAS DE SEGURIDAD Y

TRASLADO DE PLANTA DE BIODIESEL Y BIOGAS
HASTA E-CL TOCOPILLA

>> Estanque reaccin transesterificacin.

En el mes de Octubre 2013 se han realizado reunio-

nes de trabajo e inspeccin de soldaduras e inte-
gracin de equipos relacionados con Planta Piloto
Biodiesel y Biogs, que se trasladara a Empresa E-CL
Planta Tocopilla en instalaciones de Empresa Emel-
sicsa, en la ciudad de Temuco.
Se muestra en imgenes el estado de avance de las
unidades, que componen dicha planta.
En la imagen superior se aprecia la ubicacin de dis-
tintos componentes que conforman la planta piloto.
Esta disposicin, ser conectada mediante tuberas,
para el movimiento de fluidos, adems de un estan-
que, donde se desarrollara el proceso de Transes-
terificacin.
El diseo, espesor y calidad del acero inoxidable
han sido controlados para permitir procesos con mez-
clas que contienen cido sulfrico, metanol biomasa
de microalgas y presin de trabajo de 4 a 6 bar.
El equipo que se utilizara para destilacin, contiene
en el interior condensador tubular. Se ha verificado
que el haz de tubos interior sea de acero inoxidable
>> Estanque generacin Biogs.
La planta piloto de biogs comprende un estanque,
como lo muestra la imagen superior, que recibir de-
sechos microalgas agotada, para la generacin de
biogs, el cual se acumulara en estanque de fibra
ubicado en el exterior de la planta piloto.
El estanque de fibra para acumular biogs, se en-
cuentra construido y ubicado en otro recinto, que
por razones de espacio, no se ha integrado an en
esta planta. La etapa actual de trabajo consiste en
realizar pruebas reglamentarias de presin, a todos
los depsitos, sern supervisadas por Robinso Be-
tancourt para posteriormente proceder a la conexin
de redes de tuberas e instalacin de accesorios y
sistemas de control de la planta piloto. Todas las
unidades mostradas en el informe se encuentran
construidas a la vista y ubicadas en instalaciones de
Empresa Emelsicsa (Temuco) y trasladadas a Tocopilla.

57
Con fecha 16 de Noviembre 2013 a las 18:00hrs.
se realiza Inspeccin Tcnica a la Obra de Instala-
cin de Planta Biodisel y Biogs en Instalaciones
de Empresa Emelsicsa.

>> Se verifica trabajo de preparacin

Interna de Container para proceder >> Vista exterior container
a ingresar ambas plantas al interior preparacin puerta de
container. Vista exterior Implementacin acceso, en el fondo se
Puerta Lateral de acceso. aprecia unidad Planta de
Biodisel que ser inte-
grada en el interior.

>> Pintado interior >> Pintado interior, primera mano. Se

container, color blanco
recomendado por normas
para este tipo de instala-
ciones donde se realiza
Investigacin.
aprecian las rejillas de ventilacin INFE-
RIOR,exigidas Por SEC, que se encuentran
en implementacin por parte de Emelsicsa y
Pintado interior del Cielo. Al fondo unidades
que se integraran al interior del container.

58
 DESERT BIOENERGY 2015

UNIDAD DE
CONTROL ELCTRICO PLANTA
Emelsicsa desarroll sistema de control elctrico
para la Planta de Biodisel y Biogs. Se procede-
r a la instalacin en tanto el trabajo de pintado
interior permita el ingreso de personas, una vez
eliminados gases y olor de pintura.
El da Martes 19 de Noviembre de 2013 a las
10:00hrs. Don Luis Paiva realizar el Primer trabajo
de induccin a Ingenieros del Subgrupo 6 y Subgru-
po 9 para Operacin y Control de Funcionamiento,
en la Planta. Estas actividades son fundamentales
por tratarse de Planta que utiliza gases inflama-
bles, tomando el concepto de Conducta Respon-
sable para los Investigadores que manipulen y
accionen la Planta.

>> Unidad Sistema de Control

Elctrico Planta y Estanque
Acumulador de Gas, se instalar en
exterior de Container . Es el informe
como ITO, hasta el momento,
verificando se cumplen todas las
condiciones de seguridad y calidad
del trabajo.

59
INFORME DE DESPACHO
Planta de Biodiesel y Biogs
desde Temuco a Tocopilla
En Noviembre de 2013 se realiz la ltima inspeccin A las 10:30hrs. se comenz con el movimiento de
a la planta de Biodiesel y Biogs observando que la planta hacia el exterior del galpn para realizar el
todo este correctamente sealado para la conexin montaje sobre el camin como se muestra en las
en la planta E-CL como se observa en las imgenes. imgenes.

>> El montaje del container

sobre el camin se realiz
a las 10:30hrs.
El container fue despachado
a las 12:00hrs. del da 22
de noviembre de 2013 , a
E-CL, en donde la pluma de
carga maniobra con la Planta
Piloto.

60
 DESERT BIOENERGY 2015

Instalacin interna
de la Planta Piloto
La secuencia de imgenes indica la instalacin de
todos los componentes de Planta Piloto de Biodisel
y Biogs, enviada hasta Tocopilla, Planta E-CL

1 2

3 4
1. Planta Biodisel
2. Planta Biodisel
3. Instalacin destilador
4. Detalles conexin piping
5. Reactor transesterificacin
6. Tablero control elctrico

5 6
61
 CONCLUSIONES
La Planta piloto se he enviado en el tiempo con-
venido.
Los equipos y accesorios estn ubicados en los pun-
tos definitivos.
La planta se pint de color blanco en forma inter-
na, a peticin de la Gerencia.
Las pruebas de presin de seguridad se acredita-
ron con pruebas reglamentarias certificadas por el
ITO Robinson Betancourt. Especificaciones tcnicas y
espesores de materiales estandarizados fueron acre-
ditados en las inspecciones reglamentarias.
Acredito que La Planta Piloto se ha enviado hasta
Planta Tocopilla, desde las instalaciones de empresa
Emelsic, como se respalda con las imgenes pre-
cedentes.

FLUJO DE LA PLANTA PILOTO DE BIODIESEL

Agua fra
Evaporacin de solventes P-126 Solvente

Aador hexano
Biomasa Post Transesterificacin C-200

Vapor
Reaccin de transesterificacin
Condensador
Venteo

Venteo
Condensado

Hexano
Nitrgeno

Mezcla metilada
Microalga Nitrgeno
Condensado

T-200
Matanol
D-100 T-100
Ac. Sulfrico
R-100
R-100 Biodiesel
Vapor

Vapor

Tanque Tanque C-100

Lavado Decantacin
Condensado/agua

Condensado/agua

Destilador

>> Diagrama de flujo de la planta piloto de

biodiesel, donde se consideran todas las
entradas y salidas del proceso, recuperacin
de solventes, uso de gases de venteo, etc.
Actualmente, se ha contratado a un ingeniero
con conocimientos de prevencin de riesgos
como operador de la planta.

62
 DESERT BIOENERGY 2015

La planta piloto de biodiesel fue construa en acero,

considerando los estndares de seguridad de la Ter-
moelctrica E-CL Tocopilla, la cual considera bodegas
de almacenamiento de qumicos (metanol y hexano),
caseta para gases, bandejas antiderrames, protocolo
de emergencias, ducha de seguridad, tablero elctri-
co aislado y elementos personales de seguridad, entre
otras medidas e instalaciones.

Actualmente se han realizado dos Batch de prueba,
donde se ha utilizado biomasa con un 90% de humedad,
la cual fue obtenida directamente de la planta de pro-
duccin de microalgas, situada a metros del reactor. La
biomasa es concentrada utilizando una centrfuga conti-
nua, donde se obtiene la pulpa con la cual es alimentado
el reactor. La alimentacin de hace en forma remota,
de modo de evitar la exposicin del operario a qumicos
voltiles como el metanol y el hexano.
De estos batch se han actualizado los protocolo de ope-
racin y de seguridad en caso de accidente, por otro
lado se han ajustado las variables de operacin tales
como: tiempo de reaccin, dosis de reactivos, tempera-
tura de operacin, control del vapor (que se utiliza para
controlar la temperatura de reaccin), operacin del
condensador (recuperacin de solventes).
Los resultados indican que con una biomasa con 7,2 %
de cidos grasos, el 50% es transformada en biodiesel.
Paralelamente, se estudi el efecto de utilizar mezclas
de solvente en la reaccin de transesterificacin directa,
donde se observ que las mezclas no resultaron en un
efecto positivo, donde los mejores resultados se encon-
traron con metanol y cido sulfrico.

63
PRODUCCIN DE BIOCOMBUSTIBLES A
PARTIR DE MICROALGAS:
PLANTA PILOTO Y BIORREFINERA
COSECHA DE MICROALGAS
pH inicial

Densidad ptica sobrenadante [750 nm]

16 pH post adicin de FeCl3
Densidad ptica sobrenadante [750 nm]

10 3,0
Densidad ptica
14
8 2,5
12

pH medio de cultivo
10 1,5
6
8 1,5
6 4
1,0
4
2
2 0,5

0 0 0.0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 1 2 3 4 5 6
Dosis de coagulante [FeCl3 ] Corrida Experimental [N]

La primera etapa del proceso de biorrefinera se relacio-
na con tecnologas de cosecha de la biomasa. Para el
caso de microalgas como B. braunii, la cosecha puede
ser realizada por sedimentacin natural producida por
sustancias polimricas extracelulares que ayudan al
proceso. En este caso la biomasa microalgal puede ser
concentrada hasta 20 veces. En el caso de microalgas
con baja velocidad de sedimentacin, tal como N. gadi-
tana, los resultados obtenidos por los investigadores de
DBSA, mostraron que utilizando FeCl3 como coagulante
es posible concentrar la biomasa. La imagen A muestra
que utilizando una dosis de 48,5 (mg FeCL3/g biomasa
seca), fue factible obtener una densidad ptica en el so-
brenadante de 2,4 a 750 nm. En relacin al efecto del
pH, imagen B, se muestra que sobre un pH inicial de
6,95 se pueden alcanzar ptimos resultados. Este siste-
ma fue implementado en la planta piloto de Tocopilla de
DBSA y se encuentra operativo en la actualidad.

A B

>> A. Determinacin de condiciones de floculacin >> B. Sedimentador para cosecha y biomasa cosechada.
usando FeCl3. Planta Piloto Tocopilla

64
 DESERT BIOENERGY 2015

PRODUCCIN DE PROTEINAS
La segunda etapa del proceso de biorrefinera investi-
gada se relacion con el desarrollo de un proceso para
la extraccin de protenas de la biomasa previamente
cosechada evitando la prdida de cidos grasos y car-
bohidratos. Lo anterior, con la finalidad de favorecer las
etapas posteriores de produccin de biodiesel y biogs.
Esta extraccin de protenas fue investigada utilizando
un proceso qumico como se indica en el diagrama. El
proceso consiste en la solubilizacin de la protena a pH
alcalino y temperatura con agitacin constante. Luego
de la solubilizacin, son separadas dos fases por grave-
dad o centrifugacin. La fase superior contiene protena
soluble mientras que la biomasa sedimentada es una
biomasa remanente que puede ser usada para produ-
cir biodiesel y biogs. La precipitacin de las protenas
solubles puede ser realizada al punto isoelctrico de las
protenas, es decir, al pH al que las protenas no tienen
carga neta. Entonces, se producen dos fases: un aisla-
do proteico (fase inferior) y una fase lquida remanente
(fase superior). La fase lquida remanente puede ser re-
utilizada para alimentar el medio de cultivo de microal-
gas luego de su neutralizacin o, si se utiliza agua dulce
durante el downstream, puede ser usada para alimentar
la digestin anaerbica para la produccin de biogs.

Agitacin

Neutralizacin
Control de pH Y T

Protena Fase
Soluble Lquida

Biomasa
Cosechada

Reactor
Biomasa remanente Aislado proteico
para la produccin de
Biodiesel

65
 PRODUCCIN DE BIODIESEL
La tercera etapa del proceso de biorrefinera est rela-
cionada con la investigacin de una nueva tecnologa
para producir biodiesel a partir de biomasa remanente
producida luego de la extraccin de protenas. La ex-
traccin de protenas previa bajo las condiciones esta-
blecidas, permite concentrar los cidos grasos en la ma-
teria prima para incrementar la produccin de biodiesel.
Asimismo, la biomasa puede ser usada directamente
luego de la cosecha. El proceso funciona con biomasa
hmeda, con un contenido de agua que va entre 20 a
80%. La biomasa hmeda reacciona con un alcohol y
un catalizador, sin ningn proceso de secado previo o
proceso de extraccin de lpidos para producir biodiesel.
Este proceso es llamado Transesterificacin Directa H-
meda (TDH). El digrama inferior muestra un esquema
del proceso usando biomasa desproteinizada.

ESQUEMA DEL PROCESO DE TRANSESTERIFICACIN DIRECTA (TDH) PARA PRODUCIR

BIODIESEL EN EL MARCO DE LA BIORREFINERA DE MICROALGAS
Metanol recuperado

Hexano recuperado

Metanol Hexano
Sedimentador

Biomasa remanente post Transesterilizacin directa Fase no polar

extraccin de protenas hmeda
Fase hidroflica

Biomasa
H2SO4

Biomasa remanente para la

produccin de BioGas

BioDiesel Destilacin

Residuo lquido rico en

carbohidratos
Biomasa, Biomasa remanente y productos
Corriente lquida

66
 DESERT BIOENERGY 2015

Dentro de la investigacin realizada, se compar los sante para una rpida digestin anaerbica.
rendimientos y pureza del biodiesel producido utilizando
La produccin de biogs utilizando B. braunii remanente
la biomasa microalga hmeda directamente y utilizando
post transesterificacin directa fue analizada, obtenin-
biomasa desproteinizada. Los resultados permitieron
dose cerca de 250 ml CH4/g SV, lo cual correspondi a
validar el concepto de biorrefinera permite mejorar los
un 43% del potencial terico. El potencial metanognico
rendimientos debido a que la biomasa utilizada ya se
de biomasa remanente de N. gaditana post extraccin
encuentra con una acumulacin de cidos grasos y me-
de protenas y luego de las etapas sucesivas de extrac-
nor contenido de protenas (Tabla 6).
cin de protenas y transesterificacin tambin fue eva-
luado, obtenindose potenciales de 200 ml CH4/g SV y
300 ml CH4/g SV, respectivamente.
80
A
Rendimiento de biodiesel [%]

Concentracin de sulfato en el reactor [g/L]

Sulfato residual de biomasa [%]
60 100 Sulfato remanente en biomasa 100 5
Lmite de inhibicin en digestin
anaerbica
80 Concentracin de sulfato 80
4
40

Sulfato-masa [gSO4-2]
60 60
3
20 40 40
2
20 20
0
Materia prima 0 0 1
control 1 2 3 4
Tratamiento [etapa]
>> TABLA 6 | Comparacin de rendimiento y pureza del >> TABLA 7 | Comparacin de los
biodiesel producido utilizando la biomasa microalga hmeda rendimientos de produccin de biodiesel
usando (A) biomasa microalgal completa
PRODUCCIN DE BIOGS y (B) biomasa remanente luego de la
extraccin de protenas, producida bajo
La cuarta etapa se relaciona con el estudio de tecnolo- condiciones de TDH.
gas para la produccin de biogs a partir de biomasa
remanente y lquidos residuales producidos durante las B
diferentes etapas de la biorrefinera descritas previa- 350
Potencial metanognico [mL CH4/gSV]

mente. 300

Para el caso del uso de biomasa post transesterificacin 250

directa, se estudiaron alternativas para acondicionar la 200
biomasa. Esto se contextualiza en que durante la tran- 150
sesterificacin se utiliza cido sulfrico como cataliza-
100
dor, lo cual genera altas concentraciones de sulfato re-
sidual en la biomasa remanente. Como el sulfato es un 50
inhibidor de la digestin a anaerbica se realizaron su- 0
cesivos lavados de la biomasa remanente, establecin-
dose que luego de dos o 3 lavados, sta es factible de 0 10 20 30 40
Tiempo [d]
ser utilizada como sustrato en la digestin anaerbica.
Se evalu adicionalmente el uso del residuo lquido ge- >> TABLA 8 | A. Contenido de sulfato en
biomasa residual y eficiencia de remocin
nerado post transesterificacin en el cual se determi- luego de sucesivos lavados. B. Potencial
n un alto contenido de carbohidratos de entre 13 a 16 metanognico de biomasa remanente de
mg/L, lo cual significa que es una materia prima intere- B. braunii.

67
>> Planta piloto de biodiesel,
Tocopilla. Al lado, planta
piloto de biodiesel y biogs
de DBSA.

68
 DESERT BIOENERGY 2015

PLANTA PILOTO PARA LA PRODUCCIN

DE BIOCOMBUSTIBLES A PARTIR DE
MICROALGAS
La Planta piloto para la Produccin de Biodiesel y Bio-
gs de DBSA, se encuentra emplazada en Tocopilla y
fue inaugurada en Diciembre de 2013.
El proceso de produccin de Biodiesel y Biogs de la
planta piloto de Tocopilla consiste en la reaccin entre
metanol, cido sulfrico y la pasta de microalga (80%
de humedad) y luego de dejar reaccionar durante un
tiempo definido a una temperatura dada. A continuacin
se realiza una extraccin con hexano, dnde se sepa-
ran las diferentes fases (hexnica, metanlica y bioma-
sa residual). Posteriormente se realiza una destilacin
al vaco de la fase hexnica para separar el biodiesel
producido. La biomasa residual obtenida del proceso
de biodiesel, previa dilucin, es degradada mediante
digestin anaerbica.
La planta es dividida en tres zonas:
a. Zona de Almacenamiento de Reactivos y Materias Primas
b. Zona de Produccin de Biodiesel
c. Zona de Produccin de Biogs

PLANTA DE BIOGS
Dada la alta generacin de residuos que se producen
durante la operacin de la planta para la produccin de
biodiesel a partir de microalgas y de acuerdo a los re-
sultados obtenidos en los objetivos previos, se plante
la alternativa de implementar una planta de produccin
de biogs para tratar los residuos y generar energa. La
actividad busc disear una planta piloto para ser imple-
mentada en Tocopilla junto a la planta de transesterifica-
cin directa para la produccin de biodiesel.
En el diagrama de la pgina 70, se muestra el flujo de la
planta piloto de biogs. sta consiste en un reactor de 1
m3 de volumen total (R-200) y un gasmetro de fibra de
vidrio de 1,5 m3 aprox. de volumen til con volumen to-
tal del tanque invertido de 2 m3 (G-100). Adems, cons-

69
ta de 1 estanque de 250 L para la preparacin de la ali- temperatura del digestor. Se implement adicionalmente
mentacin que incluye sistema de agitacin (T-300). La sensores (controladores) de temperatura y pH. Adems,
planta opera con un termo calefactor de 80L (C-201) que la planta consta con un absorbedor de H2S, un quema-
utiliza agua desmineralizada (T-400) para mantener la dor de gas y un para-llama a la salida del gasmetro.

DIAGRAMA DE FLUJO DE PLANTA DE BIOGS

Agua desmineralizada

Alimentacin: Acumulador de biogs,

- Biomasa Gasmetro
- Agua
T-400 Vacumetro Parallamas Purificador
Calefactor
35C

Sensor
(PT-100) P-40
Quemador
biogs
Parallamas
Q-100

T-300 pH
C-201 metro
T

G-100

Toma Control de
B-600
Muestra R-200 Temperatura
Visual
B-500
Reactor Anaerbico

DIAGRAMA DE FLUJO DE PLANTA DE BIODIESEL

Agua fra
Evaporacin de solventes P-126 Solvente

Aador hexano
Biomasa Post Transesterificacin C-200
Vapor

Reaccin de transesterificacin
Condensador
Venteo

Venteo
Condensado

Hexano
Nitrgeno

Mezcla metilada
Microalga Nitrgeno
Condensado

T-200
Matanol
D-100 T-100
Ac. Sulfrico
R-100
R-100 Biodiesel
Vapor

Vapor

Tanque Tanque C-100

Lavado Decantacin
Condensado/agua

Condensado/agua

Destilador

70

>> Composicin de biogs durante la puesta en marcha.
>> Planta piloto de biogas, Tocopilla.
DESERT BIOENERGY 2015
LOS INICIOS DE LA INVESTIGACIN
El inters en el uso de algas, y particularmente de mi-
croalgas como materia prima para la produccin de
biocombustibles, es en mayor medida el resultado de
la capacidad de algunas microalgas para acumular lpi-
dos disponibles para la produccin de biodiesel. Para la
produccin de biodiesel a partir de microalgas, el pro-
ceso convencional se basa en el secado de la biomasa
y posteriormente, la extraccin de los lpidos totales. El
procedimiento de extraccin de lpidos es usualmente
llevado a cabo usando solventes no-polares, tales como
hexano y/o ter de petrleo,
entre otros. Posteriormen-
te, los lpidos extrados son
usados para la produccin
de biodiesel a travs de una
reaccin de transesterifica-
cin cida. Como solamente
aproximadamente el 10% de
la biomasa microalgal son
lpidos transesterificables, la
mayor parte de la biomasa
es perdida como un residuo
en este proceso.
Lo inicios de la investigacin
de DBSA apuntaron a la in-
vestigacin del proceso con-
vencional de produccin de
biodiesel, en donde luego de la cosecha de la biomasa
por centrifugacin, la microalga era sometida a un pro-
71
ceso de secado para la posterior extraccin de lpidos.
Luego de la transesterificacin de los lpidos extrados
para la produccin de biodiesel, el esquema inicial de
la investigacin realizada por DBSA inclua el uso de la
biomasa agotada para la produccin de un producto de
valor agregado rico en protenas. La biomasa remanen-
te final se utilizaba para la produccin de biogs a travs
de digestin anaerbica.
A travs de la investigacin desarrollada fue posible es-
tablecer la necesidad de modificar el esquema inicial del
proceso. Esto debido al alto gasto de energa necesaria
para el secado de la biomasa. Adicionalmente, debido al
uso de solventes y condiciones de operacin intensivas
durante el proceso de transesterificacin, la biomasa uti-
lizada para la produccin de protenas present caracte-
A B
COSECHA
SECADO BIOMASA
EXTRACCIN DE LPIDOS
TRANSESTERIFICACIN
BIOMASA RESIDUAL (70%)
SOLVENTES
EXTRACCIN DE
PROTENAS
DIGESTIN ANAERBICA
>> A Esquema inicial de proceso productivo
investigado por DBSA y B nuevo esquema de
proceso productivo propuesto por dbsa.
BIORREFINERIA DE MICROALGAS
El proceso de biorrefinera de microalgas desarrollado,
involucr diferentes etapas interconectadas entre s,
desde la cosecha de la biomasa microalgal, pasando
por distintos procesos productivos e incluyendo alterna-
tivas al uso de biomasa remanente. El proceso permite
el aprovechamiento integral de la biomasa adaptando
72
rsticas recalcitrantes, lo cual dificultaba la extraccin de
un producto de alto valor. En funcin de lo anterior, los
investigadores de DBSA propusieron un nuevo concepto
o esquema de produccin, el cual no consider el seca-
do de la biomasa y situ en el primer lugar del proceso
productivo la extraccin de protenas para la generacin
de un producto de alto valor. Adicionalmente, la reac-
cin de transesterificacin fue reemplazada por la tran-
sesterificacin directa hmeda, la cual permite el uso de
biomasa con contenidos de humedad de hasta un 80%.
Todo lo anterior, permiti desarrollar la investigacin de
downstream de DBSA en el marco del concepto de Bio-
rrefinera de microalgas, es decir, maximizando la ge-
neracin de productos y minimizando la generacin de
residuos a travs de un aprovechamiento integral de la
biomasa microalgal.
COSECHA
EXTRACCIN DE
PROTENAS
TRANSESTERIFICACIN
DIRECTA
DIGESTIN ANAERBICA
UPGRADING BIOGAS
cada etapa de produccin para la obtencin de varios
productos de inters comercial: protenas, biodiesel, y
biogs o biometano. Adems, el proceso incluye alter-
nativas de reutilizacin de aguas residuales para ser
reusadas en el mismo proceso.
El orden de las etapas permite la utilizacin ptima de
 DESERT BIOENERGY 2015

los componentes de la materia prima: protenas, carbo-
hidratos, lpidos y otros. Por lo tanto, la invencin per-
mite disminuir la produccin de residuos y las prdidas
de biomasa. El proceso downstream incluye la adapta-
cin de cada etapa del proceso para mejorar la etapa
siguiente del proceso de produccin. Las etapas son las
siguientes:
2. Produccin de protenas y/o aminocidos por solubili-
zacin de protenas a travs de un mtodo qumico
3. Produccin de biodiesel usando cidos grasos a partir
de biomasa
4. Produccin de biogs a partir de lquido y biomasa
remanentes

1. Cosecha para producir materia prima adecuada para 5. Y, alternativamente, produccin de metano luego del
ser usada en las siguientes etapas refinamiento del biogs.

PRODUCCIN DE SOLUBILIZACIN QUMICA

MICROALGAS + REFINACIN COSECHA DE PROTENAS
BIOGAS

PROTENAS

Sedimentador y pasta de microalga producida

Proceso de extraccin de protenas y

Raceway y bolsas de planta produccin
solubilizado proteico
microalgas Tocopilla

BIORREFINERA

TRANSESTERIFICACIN
BIODIESEL DIRECTA HMEDA

DIGESTIN ANAERBICA
Digestor anaerbico y gasmetro Planta de transesterificacin directa y
planta Tocopilla biodiesel producido

BIOGAS

>> Biorrefinera de microalgas.

73
74
 DESERT BIOENERGY 2015

DESARROLLO
DE CAPACIDADES HUMANAS
En la formacin del capital humano avanzado participa-
ron estudiantes de Universidad de Antofagasta y estu-
diantes de la Universidad de La Frontera, durante los 5
aos de duracin del Consorcio, donde se comprome-
tieron 5 becas de posgrados, 9 becas de doctorados, 18
tesis de magister y 27 tesis de pregrado.
Con estos programas se ha posibilitado formar profe-
sionales para realizar investigaciones en microalgas,
incluyendo anlisis y procesamiento.

75
BECAS DE POSTGRADO BECAS DE POSTGRADO
NOMBRE TTULO DE BECA PROYECTO TIPO DE BECA

Ivonne Mancilla Responsable de evaluacin de anlisis 1 Postdoctorado

de microalgas con potencial extraccin
de lpidos especficos para la produc-
cin de biodiesel.

Yanet Leyton Lobos Postdoctorado en desarrollo, evalua- 2 Postdoctorado

cin de actividades enzimticas en
microalgas.

Claudia Lorena Rabert Pinilla Estudi y caracterizar el sistema 5 1/2Postdoctorado

enzimtico de Botryococcus braunii
involucrado en el proceso de lisis, inclu-
yendo la implementacin de tcnicas
de anlisis, evaluacin de la produccin
de enzimas en las distintas etapas de
crecimiento, evaluacin de enzimas
hidrolticas comerciales en la lisis de la
microalga y la liberacin de lpidos.

Claudio Andrs Toro Aedo Postdoctorado Subprograma 6 para 6 1/2Postdoctorado

reemplazado a partir de abril
2012 por
Simonet Evelyn Torres Galvez
asistencia en funciones de investiga-
cin en la optimizacin del proceso
de extraccin y purificacin de aceites
de microalgas para produccin de
biodiesel.

Patricia Alejandra Navarrete Profesional cientfico-tecnolgico 7 1/2Postdoctorado

Gmez
a partir de marzo del 2012
reemplazada por Magdalena
Edith Cuevas Troncoso
responsable del desarrollo de pruebas
funcionales de extractos de protena o
fragmentos de aminocidos obtenidos
de microalgas con posibles propieda-
des farmacoteraputicas.

Laura Haydee Azocar Ulloa Profesional cientfico-tecnolgico 8 1/2Postdoctorado

asistencia en funciones de investiga-
cin y acondicionamiento de biomasa
microalgal residual para produccin de
biogs.

76
 DESERT BIOENERGY 2015

BECAS DE POSTGRADO BECAS DE DOCTORADO

NOMBRE TTULO DE BECA PROYECTO TIPO DE BECA

Sonia Vanessa Millao Millapi Extraccin de aceite y carotenoides de 5 Doctorado

microalga Nannochloropsis gaditana
usando dixido de carbono supercrtico:
estudio del pre-tratamiento del substrato,
optimizacin del proceso de extraccin y
capacidad antioxidante del aceite.

Ricardo Antonio Responsable de evaluacin de produc- 7 Doctorado

Hartley Belmar reemplazado tos con propiedad antioxidante. Tesis
a partir de Octubre 2012 por doctoral: Aplicacin de fragmentos poli-
Fabiola Alejandra peptdicos con propiedad farmacolgica
Zambrano Quezada extrados de microalgas.

Christin Arnoldo Responsable de ingeniera de biorreacto- 8 Doctorado

Vergara Ojeda res y cultivos de microalgas y postcosecha.

Tomas Guillermo Tesis Doctoral en el extranjero (Univer- 9 Doctorado

Mora Chandia sidad de Sao Paulo, Brasil): TITULO:
Produccin de BioOil mediante
pirolisis rpida de biomasa microalgal
y obtencin de subproductos utilizando
procesos de mejoramiento y reformado.

BECAS DE POSTGRADO BECAS DE MAGSTER

Pedro Vargas Aislamiento de bacterias desde sistemas 1 Magster
acuticos, con potencial para solubilizar
y/o mineralizar fosfato, para el desarrollo
de aplicaciones biotecnolgicas.

Pedro Vargas Desde marzo a diciembre 2013. Tema 4 Magster

tesis: implementacin de fotobioreac-
tores tubulares a escala piloto para la
produccin de biodiesel.

Jaime Antonio Nannochloropsis gaditana como fuente 5 Magster

Bravo Troncoso carbohidratos para el cultivo de Sac-
charomyces cerevisiae; evaluacin de
la produccin de biomasa y etanol.

Robinson Eduardo Utilizacin de biomasa microalgal ago- 6 Magster

Muoz Gonzalez tada para la produccin de combusti-
bles lquidos (Bio-oil), por medio de un
proceso de pirolisis.

Ana Mara Villegas Pptidos inhibidores de la enzima 7 Magster

ACE, a partir de biomasa microalgal de
Nannochloropsis gamitada.

Daniela Pino Evaluacin de las condiciones de 7 Magster

produccin en emulsiones simples y
dobles como transportadores de nu-
trientes y compuestos bioactivos.

77
 BECAS DE POSTGRADO BECAS DE MAGSTER
NOMBRE TTULO DE BECA PROYECTO TIPO DE BECA

Camila Medina Fracciones proteicas de alto valor 7 Magster

proteico con propiedades tecno funcio-
nales a partir de biomasa microalgal
Nannochloropsis gaditana.

Leslie Marjorie Meier Figueroa Remocin fotosinttica de dixido de 8 Magster

carbono mediante microalgas: una
atractiva alternativa para aumentar el
poder calorfico del biogs. Tesis para
optar al ttulo de Magster en Ciencias
de la Ingeniera mencin Biotecnologa.

Patricio Alejandro Aporte energtico de la digestin 8 Magster

Neumann Langdon anaerobia de la torta post-extraccin
de lpidos al proceso de produccin de
biodiesel a partir de microalgas.

lvaro Fernando Combustin y anlisis de propiedades, 9 Magster

Gonzalez Flores de Biohidrocarburos, biodiesel y otros
combustibles derivados microalgas.

BECAS DE PREGRADO
Vctor Pizarro Efecto de diferentes floculantes en la 4 Pregrado
eficiencia de la decantacin de la micro-
alga Nannochloropsis gaditana.

Hctor Berros Evaluar y optimizar un protocolo de 2 Pregrado

transformacin gentica, el cual nos
permita manipular genticamente a la
microalga B. braunii ya sea en forma
estable o transiente.

Hernn Vera Identificar genes que se expresen y se 2 Pregrado

encuentren involucrados en el meta-
bolismo general y de cidos grasos del
organismo Botryococcus braunii.

Ivette Antilef Estudio de ruptura celular de microalgal 5 Pregrado

(Botryococcus braunii) usando CO2
supercrtico.

Barbar Snchez Co-extraccin de carotenoides de 5 Pregrado

microalga (nannochloropsis gaditana)
y lpidos de canola (brassica napus)
usando dixido de carbono supercrtico.

Juan Pia Evaluacin de costos de produccin de 5 Pregrado

biodiesel a partir de microalgas; mode-
lacin y simulacin del proceso.

78
 DESERT BIOENERGY 2015

BECAS DE POSTGRADO BECAS DE PREGRADO

NOMBRE TTULO DE BECA PROYECTO TIPO DE BECA

lvaro Suazo Estudio de la composicin de aceite 6 Pregrado

de tres cepas de microalgas como
fuente de lpidos para la produccin de
Biodiesel.

Betty Cancino Obtencin aislado proteico a partir de 7 Pregrado

torta de microalga Botryococcus braunii.

Carolain Franco Desarrollo de investigacin sobre 7 Pregrado

compuestos bioactivos (carotenoides y
polifenoles) con actividad antioxidante,
azcares totales y protena soluble
presentes en microalga Botryococcus
braunii.

Maribel Catrilao Evaluar la extraccin slido lquido de 7 Pregrado

compuestos polifenlicos a partir de
torta de microalga B. braunii.

Camila Medina Obtencin de un hidrolizado proteico 7 Pregrado

con potencial bioactivo a partir de
aislado de microalga Nannochloropsis
gaditana.

Javiera Soledad Efectos de las condiciones de tempera- 7 Pregrado

Parada Crcamo tura de extrusin sobre la protena de
Nannochloropsis gaditana.

Hernn Daz Araneda Uso de floculantes para el incremento 8 Pregrado

de flux crtico en un biorreactor de
membrana anaerbico.

Francisco Javier 8 Pregrado

Cabrera Barriga

Ivn Alejandro Produccin de biogs y extraccin de 8 Pregrado

Fandez Garca protena soluble a partir de biomasa
de microalga Botryococcus braunii,
siguiendo un concepto de biorrefinera.

79
80

OPORTUNIDADES DE NEGOCIO
Y PROYECCIONES FUTURAS
Los contenidos de cidos grasos Omega 3, en particular el EPA de
nuestra microalga, la transforman en un importante complemento en
la alimentacin de salmones y camarones.
ACUCOLA
La salmonicultura en una de las actividades industriales
ms importantes de Chile, siendo adems uno de los pro-
ductores ms grandes del mundo, con aproximadamente
un 40% de la produccin mundial para el ao 2014, ubi-
cado por detrs de Noruega, con niveles productivos de
ms de un milln de toneladas, de un universo estimado
de 2,5 millones. El mercado de la alimentacin para los
cultivos de salmones se encuentra altamente concentra-
do en Chile y se producen aproximadamente 1 milln de
toneladas de alimentos para peces.
La acuicultura en Per y en Ecuador, en cambio, se con-
centra en los cultivos de camarones, conchas de aba-
nicos y tilapias. La acuicultura peruana en el ao 2010
alcanz poco ms de 89 mil toneladas. Se encuentra
dividida en diferentes especies dentro de las cuales el
camarn (langostino) junto con la concha de abanico
son las especies que ms se cultivan. La produccin
de langostinos el 2008 lleg alcanzar cerca de 13.500
toneladas.
En Ecuador la produccin de la acuicultura es mayor, de
aproximadamente de 280.000 toneladas anuales (FAO,
2010), siendo la industria camaronera una de las acti-
vidades ms importantes del sector productivo seguido
por el cultivo de Tilapia.
Existe un potencial crecimiento tanto en la acuicultura
general como a nivel mundial as como en los alimentos
que se elaboran y producen para sta. La produccin
acucola mundial alcanz en el 2010, 60 millones de to-
neladas. La acuicultura a nivel mundial va en aumento
y las necesidades de las distintas especies cultivadas
de adquirir una adecuada alimentacin tambin. Chile,
DESERT BIOENERGY 2015
Per y Ecuador se encuentran dentro de los principales
pases productores en la acuicultura de amrica latina.
En la industria acucola la alimentacin de las especies
es el principal y ms importa insumo de este tipo de
mercado, lo que la transforma en un factor relevante
en la industria. En relacin a las necesidades que tiene
este mercado de la alimentacin para la acuicultura de
adquirir materias primas ricas en cidos grasos polinsa-
turados, calidad proteica y calidad en los perfiles nutri-
cionales, se pretende solucionar la necesidad, a travs
de un prototipo que resulte ser una solucin diferencia-
dora a los problemas o necesidades del mercado de ali-
mentacin para la salmonicultura en Chile y los cultivos
de camarones en Per y Ecuador.
Existen diferentes factores que influyen en el crecimien-
to adecuado de camarones y salmones. Sin embargo
dentro de los ms influyentes estn los relacionados
con la alimentacin y la nutricin en las larvas, ya que la
calidad de la dieta en esta etapa es la que ms influye
en la supervivencia y crecimiento de las larvas.
Debido a las alzas en los precios y menor oferta del
aceite y harina de pescado, el mercado est en conti-
nua bsqueda de fuentes que puedan reemplazar los
requerimientos alimenticios de sus cultivos. Adems,
estn poniendo especial atencin en adquirir fuentes ri-
cas en Omega 3 (EPA y DHA) y calidad proteica, de ma-
nera de obtener una fuente sustentable de EPA (cido
eicosapentaenoico ) y DHA (cido docosahexaenoico).
El suministro de harina y aceite de pescado difcilmente
es capaz de satisfacer la demanda actual de la industria
del salmn. Se necesitan ingredientes alimenticios de
buena calidad para alimentos de animales y de pescado
81
 Owen Allen
para que exista suficiente protena para una poblacin
en crecimiento. El crecimiento de la industria salmoni-
cultora est generando una mayor demanda de harina y
aceite de pescado obtenido de forma sustentable para
ser usado como ingrediente alimenticio. Adicionalmen-
te, existe una mayor comprensin sobre el beneficio de
las cadenas largas de Omega 3 del aceite de pescado
para la salud humana, la cual es cada da ms recomen-
dada por expertos de la salud, generando una creciente
necesidad de suministrar aceite de pescado para consu-
mo humano .El resultado es que el contenido de EPA y
DHA proveniente de aceite de pescado en el salmn de
cultivo est disminuyendo cada vez ms y el contenido
de Omega 6 est aumentando, debido a que se sustituye
por aceites vegetales. Esta tendencia parece continuar
en los prximos aos y es muy probable que el mercado
del salmn haga una diferencia entre los salmones que
posean altos niveles de EPA y DHA y los que no.
Desert Bioenergy ve la oportunidad de destinar su cultivo
de microalgas para la realizacin de un producto aditivo
que logre aadir una calidad nutricional superior a la dieta
actual de salmones y camarones, como por ejemplo con
un alto contenido de cidos grasos polinsaturados. Sin
embargo, la investigacin dar como respuesta si el pro-
ducto a obtener ser un aditivo o suplemento capaz de
suplir los requerimientos nutricionales de estas especies,
en donde el producto final sea una mezcla de biomasa de
microalgas que cumpla no solo con aadir un aditivo rico
en Omega 3, sino que logre cumplir con los requisitos de
alimentacin en general, es decir que satisfaga tanto la
calidad proteica como, incorpore antioxidantes, omega 3,
vitaminas, minerales y otras propiedades adicionales de
la microalga como su contenido de glucanos que ayuda
a la supervivencia e inmunidad, y otros atributos caracte-
82
rsticos de cada cepa microalgal.
Desert Bioenergy propone el desarrollo de un alimento
seco de biomasa de microalgas producidos por Desert
Bioenergy S.A y la determinacin de sus propiedades
para el mercado de alimentacin del salmn y el ca-
marn que permita la formulacin de aditivos ricos en
cidos grasos Omega 3 y otras propiedades, como el
enriquecimiento de los alimentos o como suplemento
de stos.
Durante el ao 2014 las actividades realizadas por De-
sert Bioenergy hasta ahora han estado relacionadas
con la definicin del producto, con su caracterizacin, y
determinacin de su formato ideal. Esto permiti realizar
las pruebas pilotos con los salmones y las pruebas preli-
minares con larvas de camarones.
La definicin del producto implic la bsqueda de cepas
microalgales y el proceso que implica realizar el cultivo
de las microalgas. Si bien se siguen estudiando distintas
cepas de microalgas, las pruebas realizadas se hicieron
con una en particular debido a su contenido de Ome-
ga 3. Si bien las pruebas con salmones ya se hicieron,
la actividad de la bsqueda de cepas, an no ha sido
concluida debido a que se estima pertinente continuar
la investigacin en la mejora del producto y evaluar los
contenido de omega 3 de otras cepas que puedan ser
de inters en un futuro y puedan contribuir o aadir valor
al producto ya determinado.
Como conclusin a la etapa de las cepas, se determin
que la cepa ocupada hasta el momento era la indicada
debido a su alto contenido de EPA y debido al inters
comercial, sin embargo se decidi continuar buscando
nuevas alternativas de Omega 3, que contengan DHA
de manera de continuar explorando las cepas dispo-
 DESERT BIOENERGY 2015

nibles de forma paralela al desarrollo de las pruebas microalga en polvo, homogenizando para luego proce-
pilotos. der a extruir a una temperatura de 87 C y una presin
de 10,2 bar, obteniendo los pellets de 6 mm. Sin embar-
Una vez que se cultiv la cepa escogida para realizar
go, al momento de aceitar la dieta A, se observ que el
las pruebas, se realizaron las actividades de secado de
la microalga, en donde se evaluaron diferentes parme- pellet no fue capaz de absorber el porcentaje de aceite
tros para obtener el mejor producto posible. El formato incorporado, por lo tanto se dej escurriendo y por dife-
final fue la microalga seca que posteriormente se inclu- rencia de peso se determin que la dieta haba queda-
y en la dieta de los salmones para realizar la pruebas do con un 16 % de aceitado. Entonces, al momento de
de alimentacin. aceitar la dieta control se hizo al 16 % con una mezcla
de 50/50 de aceite de pescado y canola.
De manera paralela, se comenz de manera anticipada,
a prospectar el mercado para establecer alianzas es- CONTROL: ADITIVO: DIETA
tratgicas, para realizar las pruebas pilotos de manera DIETA COMERCIAL COMERCIAL+
adecuada, y para establecer las bases de la prospec-
cin cientfica y econmica.
MICROALGA
Las prximas actividades estarn relacionadas con con-
cluir la evaluacin de las cepas microalgales, determi-
nar la conservacin del producto, realizar la prueba con
los camarones.
Sobre las actividades de las Pruebas en Dietas para
engorda de salmn Atlntico. La investigacin fue reali-
zada con 202 adultos de salmn del Atlntico, los cua-
les fueron seleccionados y acopiados en un estanque
de 7 m3 durante 19 das, al culminar este periodo 140
peces fueron distribuidos en 4 estanques de 1 m3 con
35 peces/tk los cuales fueron aclimatados durante 16
das. Posterior a esta etapa se di inicio al proceso de
alimentacin durante 49 das con 2 dietas, una control y ADITIVO g/100g
la dieta control + 15% microalga (Dieta A), como se ve
Humedad 8,3
en el grfico inferior.
Protenas (%NXE 6,25) 35,2
Lpidos 25,0
Cenizas 10,5
Dieta A Fibra cruda 2,5
Extracto no nitrogenado 18,5
Energa (kcal/100g) 440

Dieta Control

DIETA CONTROL g/100g

Humedad 6,2
Para la fabricacin de las dieta control y Dieta A, se
Protenas (%NXE 6,25) 37,1
hizo en dos batch. Se adquirieron 120 Kg de la dieta
Lpidos 24,3
normal de la empresa Biomar sin aceitar, obteniendo la
Cenizas 9,0
premezcla del alimento para fabricar la dieta control y la
Fibra cruda 2,9
dieta A. Para la fabricacin de la dieta control se toma-
Extracto no nitrogenado 20,5
ron porciones de todas las moliendas, en el caso de la
Energa (kcal/100g) 229
dieta A adems se le agreg a las moliendas el 15% de

83
La alimentacin se entreg de forma manual de acuerdo
a la demanda de los peces, detenindose la entrega de
alimento cuando los peces no presentaban respuesta a la
alimentacin. Se entregaron 4 dosis en la maana de y 3
dosis en la tarde en los estanques que se muestran a con-
tinuacin.
El producto tiene buena aceptacin de parte del labo-
ratorio, el cual ayud a conseguir la confianza de un
segundo laboratorio que evalu el uso del producto.
Se consigue realizar pruebas adicionales con otro la-
boratorio del mismo sector, obteniendo resultados po-
sitivos.

CONCLUSIONES PRELIMINARES
Se comen el alimento con microalga
El alimento con inclusin de microalga fue mayor que
el control, obteniendo peces ms grandes que con el
control.
Se puede observar que los peces de la dieta control
tienden a escupir el alimento y despus buscarlo nueva-
mente, esta actitud no se ve reflejada en los estanques
con dieta experimental, este comportamiento puede es-
tar relacionado con la textura del pellet control el cual
es mucho ms poroso que el experimental el cual es
abundante en aceite

PRUEBAS EN CAMARONES
Con respecto a las pruebas con los camarones, stas
se realizarn en Febrero del 2015. Sin embargo ya se
realizaron las primeras pruebas preliminares en larvas
con las empresa ATISA con producto seco, en febrero
se realizarn pruebas a una escala mayor.
Producto aceptado y consumido por los estadios larva-
les evaluados, observando un comportamiento similar al
ser alimentadas con el alimento control (Spirulina).
La sobrevivencia es variable, lo cual no slo depende
del alimento si no adems de la estacin del ao, (con-
dicin climatica) calidad de la eclosin del camarn y
control de temperatura.

84

BIOFERTILIZANTE
En Chile an no toma fuerza la iniciativa de imple-
mentar el uso de biofertilizantes a partir de microal-
gas en la agricultura, por lo tanto, una materializacin
de este tema, podra sentar las bases a nivel regio-
nal, para comenzar a difundir la oportunidad de utilizar
otras fuentes de abono en los cultivos. La finalidad
es la produccin de biofertilizantes a partir de micro-
algas, permitiendo por una parte valorizar el uso de la
biomasa microalgal, y con ello desarrollar el negocio de
produccin de biomasa microalgal y por otro el desa-
rrollo de una industria agrcola de biofertilizantes en la
zona, potenciando la agricultura regional. Teniendo en
cuenta que es un rea poco investigada y explotada
desde el punto de vista de una agricultura sostenible.
Por otro lado, en la actualidad con el aumento del uso
de fertilizantes qumicos, la tierra est perdiendo rpida-
mente su fertilidad, obligando a los agricultores a utilizar
una mayor cantidad de fertilizantes y en otros casos, a
dejar la agricultura como medio de vida. Es por esto que
el uso de biofertilizantes representa una importante al-
ternativa para contribuir a limitar el uso de fertilizantes
qumicos perjudiciales, as como pesticidas, reduciendo
el impacto negativo sobre el medio ambiente, aumentan
los rendimientos, disminuyen los costos, preserva la ca-
lidad ambiental y por ende nuestra calidad de vida, ya
que estos microorganismos son inocuos para la salud
humana.
Se evala la rentabilizacin del proceso a travs de la
obtencin de biomasa microalgal, la que a su vez ser
tratada para la obtencin de un producto final, el cual
tendr como finalidad su utilizacin como biofertilizante,
tomando en cuenta, la creciente demanda por produc-
tos orgnicos a nivel mundial y nacional, donde nuestro
pas, destina cada vez ms hectreas de tierras para
este tipo de prctica agrcola. Mediante la utilizacin del
desarrollo tecnolgico para la transformacin de esta
biomasa, se puede generar mayor valor agregado, el
cual es considerado un componente econmico clave.
COMPONENTES DE INNOVACIN
Marcar un precedente a nivel nacional. A nivel mun-
dial existen varios pases, los cuales estn imple-
mentado el uso de algas para la obtencin de biofer-
tilizantes, sin embargo en Chile no existen iniciativas
como esta, para producir biofertilizante a partir de micro-
algas, por lo tanto, la materializacin de este proyecto,
DESERT BIOENERGY 2015
podra sentar las bases a nivel nacional, para comenzar
a difundir esta materia prima, la cual por lo dems pre-
senta mltiples beneficios respecto de la materia prima
convencional para la produccin de biofertilizantes. El
permitir el desarrollo de biofertilizantes es fundamental
para potenciar el desarrollo de los cultivos de microal-
gas en la zona norte, ya que el desarrollo de sistemas
de cultivos de microalgas a nivel masivo no solo es una
actividad econmica por s sola, sino que adems per-
mite potenciar otras actividades econmicas a las agr-
colas como potenciar las actividad acucolas, porque la
biomasa microalgal tambin es un importante alimento
para peces y otras especies marinas que posteriormen-
te de pueden desarrollar habiendo disponible biomasa
microalgal a precios competitivos.
Utilizacin de la biomasa para transformacin en biofer-
tilizante: Se evala la rentabilizacin del proceso a tra-
vs de la obtencin de biomasa microalgal, la que a su
vez ser tratada para la obtencin de un producto final
(extracto), el cual tendr como finalidad su utilizacin
como biofertilizante, tomando en cuenta, la crecien-
te demanda por productos orgnicos a nivel mundial
y nacional, donde nuestro pas, destina cada vez mas
hectreas de tierras para este tipo de prctica agrco-
la. Mediante la utilizacin del desarrollo tecnolgico
para la transformacin de esta biomasa, se puede
generar mayor valor agregado, el cual es considerado
un componente econmico clave.
BIOFERTILIZANTES A PARTIR DE
BIOMASA MICROALGAL
Aminocidos en nutricin vegetales
Los aminocidos son los componentes bsicos de las
protenas. Estos constituyen, con los hidratos de carbo-
no y lpidos, el tercer grupo de sustancias fundamenta-
les de los organismos, tanto animales como vegetales.
Las protenas son sustancias orgnicas nitrogenadas
de peso molecular elevado. Estn formadas por unida-
des estructurales, los aminocidos, unidos entre s por
enlaces peptdicos. El grupo de sustancias denomina-
das protenas es muy amplio, sin embargo el nmero
de aminocidos existentes en la naturaleza es de unos
20. Las distintas protenas estn constituidas por series
definidas de aminocidos y poseen propiedades fisiol-
gicas muy especficas.
Las plantas sintetizan los aminocidos a travs de re-
85

acciones enzimticas por medio de procesos de amina-
cin y transaminacin. El primero de ellos se produce a
partir de sales de amonio absorbidas del suelo y cidos
orgnicos, producto de la fotosntesis y la transamina-
cin permite producir aminocidos a partir de otros pre-
existentes. La sntesis de protenas por la planta se rea-
liza a partir de los aminocidos, siendo imprescindible la
presencia de todos y cada uno de los constituyentes de
la protena en cuestin.
Por lo anterior, es que la utilizacin de hidrolizados de
protenas como fuente de aminocidos en el campo de
la fertilizacin se emplea en agricultura desde hace ms
de cuatro dcadas. Durante los ltimos aos se han ve-
nido realizando estudios e investigaciones para evaluar
el uso de diversas fuentes de protenas para la produc-
cin de estos hidrolizados y adems para explicar el me-
canismo de accin de los aminocidos y sus efectos en
los vegetales.
Para explicar en lo posible los mecanismos de accin del
efecto de la incorporacin de aminocidos, se procede
en la investigacin fundamentalmente por dos caminos:
86
Norsk Havbrukssenter
A. Evaluar los momentos idneos de aplicacin de los
diferentes cultivos; la influencia de los factores ambien-
tales; las dosis ms adecuadas en cada caso, etc.
B. Evaluar ms profundamente el mecanismo de accin
de los aminocidos respecto al metabolismo vegetal.
Por ejemplo los aminocidos pueden actuar cuando la
planta se encuentra bajo unas condiciones particulares,
cuando muestran unas necesidades especficas: en
momentos en pleno crecimiento, floracin, cambios am-
bientales como: heladas y sequas, enfermedades fn-
gicas o vricas. Algunos aminocidos, como la prolina,
juegan un papel fundamental en los equilibrios hdricos,
especialmente cuando las plantas sufren a causa de al-
guna alteracin fisiolgica.
Asimismo, se ha comprobado que los aminocidos,
pueden formar complejos unidos qumicamente con me-
tales (quelatos). Estos quelatos penetran ms fcilmen-
te en las clulas de la planta y por tanto los hidrolizados
de protena pueden jugar el papel de transportadores de
metales en la planta.
Con la investigacin realizada a la fecha se puede con-
 DESERT BIOENERGY 2015

Glicina - Precursor de la clorofila.

- Fuerte poder complejante de microelementos esenciales.

Prolina e Hidroxiprolina - Regulan el equilibrio hdrico de la planta.

- Mejoran la capacidad de resistencia ante situaciones de estrs por bajas temperaturas, falta de
agua o exceso de sales.
- Refuerzan las paredes celulares haciendo ms resistentes los tejidos.
- Mejoran la fertilidad del polen.

Glutmico
- Estimula los procesos de crecimiento de los meristemos radiculares, foliares y florales.
- Es una reserva natural de Nitrgeno en la planta que puede transformarse en otros aminocidos
gracias a las transaminasas.
- La Glutamato Deshidrogenasa es la enzima clave que hace asimilable por la planta el nitrgeno
mineral aportado en el abonado.

Serina - Regula el equilibrio hdrico de la planta.

- Es esencial en la sntesis de la clorofila.

Arginina - Es precursor de las poliaminas, necesarias para desencadenar la multiplicacin celular.

- Estimula el crecimiento de las races.
- Interviene en la sntesis de la clorofila.

Fenilalanina y Alanina - Es precursor de la lignina, que confiere resistencia a los tallos

- Fundamental para la sntesis de la clorofila.
- Importante en el metabolismo hormonal de las plantas.
- Induce mecanismos de resistencia a virosis.

cluir, a modo de resumen, los siguientes puntos:
Rpida absorcin y traslacin de los aminocidos por
las partes areas de las plantas.
Fcil metabolizacin.
Funcin alimenticia y poder catalizador y regulador del
crecimiento actuando en los mecanismos enzimticos
fundamentales.
Transportadores de los micro elementos.
HIDROLIZADOS DE PROTENAS PARA LA
OBTENCIN DE AMINOCIDOS
El disponer de una disolucin que contenga un eleva-
do contenido en aminocidos libres, permite aportar a
la planta la fuente directa para que sta sintetice las
protenas. Esta fuente de aminocidos libres se puede
obtener mediante el proceso de hidrlisis de sustancias
proteicas de origen animal o vegetal. Subproductos de
origen vegetal (carne y harina de guisantes, harina de
soja, girasol) se han probado con xito para obtenerlos.
Los hidrolizados de protenas pueden ser obtenidos por
diferentes mtodos tales como la hidrlisis cida, con
proteasas exgenas, o autolisis enzimtica. La materia
prima (protena) se somete a un proceso controlado,
hasta obtener un lquido fcilmente miscible en agua.
Aparte de que la solucin sea rica en aminocidos li-
bres, es importante que suministre aquellos de impor-
tancia biolgica, tales como: glicina, alanina, cido glu-
tmico y prolina.
Producto de la hidrlisis enzimtica de protenas se ge-
neran molculas ms pequeas como pptidos de ca-
denas larga, pptidos de cadena corta y aminocidos,
cumpliendo cada una de ellas un efecto particular en el
metabolismo y nutricin vegetal.
Rol de los aminocidos
Son nutrientes de absorcin inmediata esenciales para
la sntesis de protenas y enzimas, y son precursores

87
 de la clorofila y de hormonas. Tambin pueden quelatar
microelementos para que sean mejor absorbidos por la
planta.

ROL DE LOS PPTIDOS

Son molculas formadas por la unin de varios ami-
nocidos mediante enlaces peptdicos.
Pptidos de cadena corta: Son fcilmente absor-
bidos y sirven como transportadores al interior de la
planta de otros nutrientes. Se ha observado que en
determinadas circunstancias cumplen las siguientes
acciones fisiolgicas y bioestimulantes en plantas:
Activacin de enzimas como la Nitrato Reductasa,
Glutamato Deshidrogenasa y Malato Deshidrogena-
sa, que permiten una mejor asimilacin y utilizacin
de macro y micronutrientes.
Activacin de la sntesis de hormonas naturales de
las plantas como auxinas, giberelinas y citoquininas,
activadoras fundamentales del crecimiento vegetal.
Sirven de trasbordadores de otras sustancias con
las que se mezclan como fungicidas e insecticidas,
hormonas para el cuaje y micronutrientes (hierro,
zinc, manganeso, calcio, etc), favoreciendo la pene-
tracin y asimilacin por la planta.
Tambin pueden complejar microelementos para una
ms fcil absorcin por la planta.
Pptidos de cadena larga: Son de absorcin ms
lenta por las plantas y necesitan ser degradados a
pptidos de cadena corta y aminocidos para ser ab-
sorbidos por las plantas. Si se aplican por el riego,
estos pptidos van a favorecer la flora microbiana, y
mejorar la textura y estructura del suelo.
Se ha observado que en determinadas circunstancias
cumplen las siguientes acciones fisiolgicas y bioesti-
mulantes en plantas:
En aplicaciones al suelo y foliares son una reserva re-
gular de nutrientes.
Efecto mojante en aplicaciones foliares.
En aplicacin al suelo ayudan a activar la flora micro-
biana del suelo y mejoran la textura y estructura del mis-
mo (incrementan la porosidad, aireacin, capacidad de
retencin de agua, etc).

88

Biofertilizante de biomasa microalgal
en Desert Bioenergy S.A.
Las protenas a partir de microalgas han sido ampliamen-
te descritas para su utilizacin para la nutricin humana
y animal, pero en ambos casos se recomienda realizar
una hidrlisis enzimtica para mejorar la digestibilidad
de las protenas celulares. Es por ello que la biomasa de
microalgas tambin se ha propuesto como biofertilizante
por su perfil de aminocidos y su contenido en otras sus-
tancias naturales derivados de las microalgas.
Fertilizantes basados en aminocidos proveen a las
plantas con los elementos necesarios para desarrollar
sus estructuras, ahorrando energa metablica ya que
el nitrgeno no tiene que reducirse como sucede en el
caso de los nitratos que deben ser reducidos a amonio
antes de su incorporacin y conversin a -cetocidos
para sintetizar aminocidos.
Dentro de la investigacin realizada por Desert Bioener-
gy en la creacin de un producto basado en biomasa
DESERT BIOENERGY 2015
de microalgas con actividad bioestimulante y/o biofertili-
zante para cultivos agrcolas se destacan las siguientes
etapas:
ETAPA 1. Acondicionar la biomasa
microalgal para el proceso de produccin
del biofertilizante.
En esta etapa se evaluaron mtodos de pretratamiento
para el acondicionamiento de la biomasa microalgal, es-
pecficamente el efecto de la rotura de la pared celular
de las clulas microalgales para ver el efecto de esta
operacin respecto a la liberacin del contenido intrace-
lular, especficamente las protenas.
Para ello se utilizaron diferentes tcnicas como la mo-
lienda en seco, la sonicacin y la homogenizacin a alta
presin, y la estrategia de solubilizacin de protenas
89
 Waldo Nell

que mejores resultados dio fue aplicada a mayor escala,
determinndose la posibilidad de utilizar este protocolo
de acondicionamiento de la biomasa en una fase piloto
de produccin del biofertilizante.
similar como Otro 1 (20.07 g/L) y Otro 2 (28.30 g/L).
Adems en la Figura 1.1 se muestra la comparativa de
la cantidad de aminocidos de inters agrcola por pro-
ducto, con resultados iguales o superiores para los pro-
ductos de DBSA.

ETAPA 2. Evaluar diferentes mtodos

para la obtencin de un biofertilizante
concentrado.
Con el objetivo de evaluar diferentes condiciones de hi-
drlisis del contenido proteico de la biomasa microalgal,
se probaron diversas enzimas comerciales a diferentes
condiciones de operacin
Se trabaj con muestras de concentrados de biomasa
de cepas de Desert Bioenergy S.A. (DBSA 1, 2 y 3) y
se determin las condiciones de tiempo, pH, tempera-
tura y dosis para la obtencin del hidrolizado a base de
microalgas. Con las cepas de la empresa se obtuvieron
concentraciones de aminocidos libres en el producto
de 24.56, 18.87 y 28.00 g/L para DBSA 1, DBSA 2 y
>> Comparativa de la concentracin de aminocidos
DBSA 3, respectivamente, concentraciones similares a libres de inters totales y libres de productos similares
productos ya disponibles en el mercado de naturaleza disponibles en el mercado.

90
 DESERT BIOENERGY 2015

ETAPA 3. Evaluar la calidad del hidropnicos de batavia, un tipo de lechuga (Lactuca

biofertilizante en la industria agrcola.
Como prueba preliminar para evaluar el efecto de in-
corporar el biofertilizante en cultivos vegetales, se
realiz una prueba experimental preliminar en cultivos
sativa), en sistemas basados en la tecnologa NFT (Fi-
gura 1.2) con un sistema como control, es decir slo
se le repuso nutrientes, y a los otros 3 nutrientes y el
biofertilizante en dosis crecientes para cada sistema
(1, 3 y 5 mL/L).

>> Cultivos hidropnicos de lechuga con adicin de biofertilizante (das 0, 12, 19 y 27)

Se cosecharon las lechugas, midindose el largo y peso (61%) del peso de la lechuga con un valor promedio de
de la raz, y el nmero, largo y peso de las hojas. Se 315 g del cuarto sistema (5 mL/L) respecto al control
promedi los valores correspondientes a cada sistema, de 195 g.
para comparar el efecto de la adicin del producto sobre
la cosecha de los sistemas y se resumen las diferencias
Hojas Raz
respecto al control, como se muestra en la tabla adjunta. Dosis, Nmero Largo Masa Largo Masa
Se evidencia una mejora en todos los sistemas con ml/L
adicin del producto, notndose aumentos del nmero, 0 0% 0% 0% 0% 0%
largo y peso de las hojas, as como el peso de las ra- 1 18% 4% 22% 0% 14%
ces, esto significa unidades de lechuga prcticamente
3 18% 6% 27% -14% 31%
del mismo largo, pero con mayor cantidad de hojas y
gramaje. Adems a medida que aumenta la dosis de 5 30% 5% 61% -16% 39%
producto, existe un aumento lineal del nmero de hojas >> Cuadro comparativo del efecto de la adicin de 3
y peso de la raz, pero un aumento an mayor del peso dosis del biofertilizante a la solucin nutritiva sobre las
de la lechuga, obtenindose una mejora significativa caractersticas fsicas de la lechuga respecto del control.

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 DESERT BIOENERGY 2015

Agradecimientos
Agradecemos a todos los investigadores y Dr. David Jeison
colaboradores que participaron durante los cinco Dra. Simonet Torres
aos de ejecucin del consorcio Desert Bioenergy Dr. Fernando Romero
y permitieron llegar a logros que presentamos en este Dr. Robinson Betancour
libro. Los investigadores y colaboradores que fueron Sr. Hernn Daz
parte del consorcio fueron los siguientes: Sra. Carolina Beltrand
Sr. Vctor Pizarro
Dr. Carlos Riquelme Sr. Felipe Alcayaga
Dr. Rodrigo Navia Sr. Esteban Villegas
Sra. Claudia Seplveda Sr. Axel Godoy
Sra. Jazmn Bazaes Sr. lvaro Suazo
Sra. Paola Marticorena Sr. Isaac Reyes
Sr. Sebastin Vargas Sr. Leonel Gonzlez
Dra. Mariela Rivas Srta. Catherine Torres
Dr. Manuel Zapata Srta. Sonia Millao
Dr. Arturo Reyes Sr. Homero Vega
Sr. Claudio Barahona Sr. Diego Reyes
Sra. Karina Riveros Sra. Yanet Leyton
Sr. Sebastin Durn Sr. Robinson Muoz
Dra. Carolina Shene Sra. Betty Cancino
Dr. Edgar Uquiche Sr. Eduardo Morales
Dr. Gustavo Ciudad Sra. Noelia Seplveda
Dra. Mnica Rubilar Sra. Fabiola Valdebenito
Sra. Claudia Bahamondes Sr. Toms Mora
Sr. Patricio Nuez Sr. lvaro Gonzlez
Sr. Jimmy Villanueva Sra. Virginia Bizama
Sra. Fernanda Espinoza Sr. Guillermo Ramirez
Sr. Javier Leiva Sra. Ana Mara Rivacoba
Dra. Laura Azcar Srta. Sandra Carreo
Dr. Claudio Toro Srta. Fabiola Gaete

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