INSTANT PROV 3.
Colocar a lmina no Instant Prov III e deixar por 20 segundos (tambm
Colorao diferencial rpida em hematologia
INFORMAES TCNICAS
O conjunto de corantes INSTANT PROV um produto para colorao pantica
(rpida) diferencial dos elementos figurados do sangue.
As clulas sanguneas apresentam estruturas, tanto nucleares como
citoplasmticas, com afinidades eletivas por corantes cidos, bsicos ou neutros.
Esta variao de afinidade pelos corantes que permite a classificao
morfolgica dos diferentes tipos de clulas sanguneas. Os ncleos das clulas
tomam as cores bsicas, enquanto os corantes cidos agem sobre elementos
citoplasmticos. Os corantes neutros ou policrmicos, coram alm dos
constituintes acidfilos e basfilos, tambm outros componentes de reao
neutrfila.
O INSTANT PROV composto de corantes cidos e bsicos, assim todas as
estruturas celulares podem ser coradas conforme sua afinidade.
DENOMINAO GENRICA: CORANTE PANTICO PARA HEMATOLOGIA
REGISTRO NO MINISTRIO DA SADE: 10287910055
APRESENTAO
- Conjunto de 500 ml Cd. 1319
1 frasco com 500 ml de Instant Prov I
1 frasco com 500 ml de Instant Prov II
1 frasco com 500 ml de Instant Prov III
- Conjunto de 1000 ml Cd.1321
1 frasco com 1000 ml de Instant Prov I
1 frasco com 1000 ml de Instant Prov II
1 frasco com 1000 ml de Instant Prov III
COMPOSIO
Instant Prov I
Soluo alcolica de ciclohexadienos 0,1%
Instant Prov II
Soluo aquosa de azobenzenosulfonico 0,1%; estabilizante I 3%; conservante
0,26%
Instant Prov III
Soluo lcoolica de fenotiazinas 0,1%; estabilizante 1,5%; conservante 1. Eritrcitos - Colorao rsea;
0,26%
ARMAZENAMENTO E TRANSPORTE DO PRODUTO
Transportar e armazenar o produto em temperatura ambiente entre 15 a 30 C.
CUIDADOS NA UTILIZAO DO PRODUTO
Utilizar equipamentos de proteo individual (luvas, avental e mscara).
O Instant Prov I possui lcool metlico que pode ser nocivo atravs de inalao,
ingesto e absoro cutnea. Pode provocar efeitos agudos como: fadiga, nusea,
desconforto visual, acidose e midrase.
Os Instant Prov II e III possuem como estabilizante o produto azida sdica que
pode ser nocivo sade se ingerido, podendo causar hipotenso, taquicardia e
hipotermia.
MATERIAIS NECESSRIOS NO FORNECIDOS COM O PRODUTO
Lmina de microscopia, lmina extensora e cronmetro.
AMOSTRA
Extenso sangunea.
CUIDADOS NO MANUSEIO DA AMOSTRA
Por tratar-se de material biolgico, manusear a amostra clnica de acordo com as
normas de biossegurana e utilizar equipamentos de proteo individual (luvas,
avental e mscara) .
TCNICA DE USO
CONFECO DA EXTENSO SANGUNEA
A extenso sangunea deve ser confeccionada a partir de sangue, recm coletado,
sem anticoagulante, em lminas perfeitamente limpas, isentas de gordura e
polidas. Prepara-se a extenso conforme descrito abaixo:
1. Colocar aproximadamente duas gotas de sangue em um dos lados da lmina, a
quantidade de sangue no deve ser muito grande para que a extenso no fique
muito espessa;
2. Com auxlio da lmina extensora realizar a extenso sangunea;
3. Os fatores que influenciam na qualidade da extenso sangunea so: a
quantidade de sangue, a velocidade empregada no movimento com a lmina
extensora, o ngulo entre a lmina extensora e a lmina de microscopia e a
limpeza e qualidade das lminas de microscopia e extensora;
4. A extenso satisfatria deve ser fina e homognea, de margens livres, pois s
as que renem estas condies apresentam os leuccitos e eritrcitos sem
deformaes e convenientemente distribudos;
5. As extenses devem ter boa qualidade e serem feitas no dia da colorao e
leitura. Extenses velhas coradas a partir de um ou mais dias aps sua confeco
no apresentam boa colorao;
6. A extenso sangunea deve ser realizada rapidamente, antes que inicie a
coagulao;
7. Deixar secar ao ar.
TCNICA DE COLORAO
1. Aps a extenso sangunea estar devidamente seca, submergla no Instant
Prov I. Cronometrar o tempo de dez segundos. fundamental que este tempo seja
rigorosamente marcado e seguido a risca . Durante estes dez segundos no h
necessidade de se executar qualquer movimento. Aps o tempo de dez segundos ,
retirar a lmina do Instant Prov I e deixar escorrer durante cinco segundos
(tambm devidamente cronometrado). O corante pode escorrer para dentro da
prpria cuba que contm o corante;
2. Aps o escorrimento de cinco segundos, submergir a lmina no Instant Prov II.
Seguir exatamente o procedimento descrito para o Instant Prov I;
devidamente cronometrado). Aps o tempo de colorao, retirar a lmina do
corante e deixar escorrer durante cinco segundos . Este tempo tambm deve ser
devidamente cronometrado . Aps este tempo, lavar a lmina em gua corrente
abundante. Recomenda-se, durante a lavagem, limpar a lmina na parte de trs
para que o corante impregnado no interfira na microscopia. Deixar secar bem,
levar ao microscpio em objetiva de imerso e realizar a leitura.
COMENTRIOS SOBRE A TCNICA DE COLORAO
O tempo total de colorao de cinquenta e cinco segundos, 10 segundos no
corante I e II e 20 segundos no corante III, com intervalos de 05 segundos entre
um corante e outro para permitir que haja um escorrimento do excesso de corante.
O tempo de colorao recomendado pode ser alterado com a diminuio ou
aumento dos tempos dos corantes Instant Prov II e Instant Prov III para se possa
adaptar a colorao ao padro definido pelos tcnicos do laboratrio. Porm estes
tempos definidos como padro no laboratrio devem estar descritos em
procedimentos internos e sempre cronometrados para padronizao da tcnica.
A marcao do tempo fundamental para uma boa colorao e durante o
procedimento tcnico a lmina no deve ser retirada do corante, deve estar
totalmente submersa.
OBSERVAES
1. A tcnica de colorao deve ser seguida rigorosamente observando o volume do
corante (a extenso deve estar totalmente submersa no corante) e o intervalo de 5
segundos entre os corantes e o enxague (o corante deve escorrer bem).
2. Para evitar evaporao do corante I e alteraes nos corantes II e III, as cubas
devem ser guardadas bem fechadas.
3. Observar periodicamente o volume do corante I, pois pelo fato de ser alcolico
pode evaporar. O seu volume pode ser completado sempre que necessrio.
4. Os corantes II e III, que esto na cuba, no devem ser completados, e sim
desprezados. O tempo para que os corantes sejam desprezados depende do
nmero de lminas que so coradas diariamente. Ao desprezar o corante, a cuba
deve ser lavada com gua deionizada e estar seca antes de se adicionar novo
volume de corante.
LEITURA E INTERPRETAO
Atravs da colorao diferencial pelo Instant Prov, so visualizadas clulas
sanguneas com as seguintes caractersticas:
2. Plaquetas - Colorao azulada a prpura, com finas granulaes azurrfilas;
3. Neutrfilos - Citoplasma: colorao rsea com granulaes finas, especficas
na cor vermelha violeta. Ncleo: colorao vermelha violcea intensa;
4. Eosinfilos - Citoplasma: colorao rsea e granulaes eosinfilas em
vermelho brilhante com leve tom alaranjado. Ncleo: colorao vermelha
violceo;
5. Basfilos - Citoplasma: granulaes especficas de colorao parda escura a
preta. Ncleo: colorao vermelha violcea;
6. Linfcitos - Citoplasma: colorao azul celeste. Ncleo: cromatina nuclear
densa em colorao violeta-prpura intensa;
7. Moncitos - Citoplasma: colorao cinza azulado com granulaes
azurrfilas. Ncleo: colorao violcea, com cromatina nuclear, frouxa e estriada ;
LIMITAES DA TCNICA
No contaminar o corante Instant Prov I com gua. Esta contaminao ocorre,
principalmente, quando se utiliza o procedimento tcnico de corar vrias lminas
ao mesmo tempo (cuba com bero). Quando o mesmo bero que terminou a
colorao reutilizado, sem que esteja devidamente seco, a gua presente neste
carreada ao corante Instant Prov I. Na medida em que a contaminao aumenta a
tendncia a crenao dos eritrcitos e at hemlise total. Nesta situao so
observados leuccitos bem corados e eritrcitos deformados. Outra causa de
artefatos eritrocitrios (crenaes e hemlise) a permanncia das lminas a
serem coradas no ambiente mido do local onde se faz a colorao.
Alteraes no padro da colorao so observadas quando as lminas que
receberam a extenso sangunea, no esto devidamente secas, limpas e
desengorduradas.
No devem ser realizados outros tipos de coloraes (bacteriolgicas, como
exemplo) no mesmo local da colorao hematolgica por alterarem a qualidade da
colorao.
DESCARTE DO PRODUTO E DA AMOSTRA
Descartar o produto e a amostra de acordo com o programa de gerenciamento de
resduos do laboratrio.
Para o produto sem contato com a amostra seguir o plano de
gerenciamento de resduos qumicos.
Para a amostra e produto com amostra seguir plano de
gerenciamento de resduos infectantes ou possivelmente infectantes.
CONTROLE DE QUALIDADE
Devem ser confeccionadas extenses sanguneas e as mesmas devem ser
coradas pela tcnica descrita e o padro de colorao conforme o tem que
descreve leitura e interpretao. Este controle de qualidade deve ser realizado
quando se iniciar o uso do conjunto de corantes. A periodicidade do controle de
qualidade deve ser estabelecida pelo laboratrio.
GARANTIA DA QUALIDADE
Este produto fabricado e liberado para venda aps testes de controle de
qualidade para cada lote, conforme normas das Boas Prticas de Fabricao e
Controle de produtos para diagnstico de uso in vitro.
Para eficcia do produto necessrio:
- Utilizar amostras clnicas coletadas, transportadas e armazenadas de acordo com
a indicao da literatura especializada;
- Seguir rigorosamente todas as etapas descritas nesta instruo de uso.
- Utilizar acessrios e equipamentos adequados e em boa conservao.
- Transportar e armazenar o produto de acordo com as condies indicadas.
- Nunca utilizar produtos com a embalagem original danificada.
- Nunca utilizar produto com prazo de validade expirado.
Caso ocorra qualquer problema na utilizao do produto relativo qualidade
intrnseca do mesmo, que tenha ocorrido por falha de fabricao comprovada, a
Newprov resolver a questo sem nus ao cliente, conforme determinado na Lei
8.078/90 Cdigo de Defesa do Consumidor.
A Newprov disponibiliza aos seus clientes assessoria tcnica para quaisquer
esclarecimentos necessrios quanto a utilizao deste produto que no estejam
contemplados nesta instruo de uso, atravs de contato com o SAC - Servio de
Atendimento ao Consumidor.
Certificados de anlise de cada lote esto disponveis na empresa e podem ser
encaminhados ao cliente sempre que solicitados ao SAC.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
IVINE, E . et all, El Laboratorio en La Clinica , Panamericana, Buenos
Aires,1975.
LIMA,O.A et all., Mtodos de Laboratrio Aplicados Clinica ,7a Ed.,
Guanabara,Rio de Janeiro, 1992
LILLIE,R.D; CONNL,H,J, Biological Stain, 9 Ed., Willians and Wilkins, Baltimore,
1977.
Farmacopia dos Estados Unidos do Brasil , 2a Ed., Grfica Siqueira, So
Paulo, 1959.
MIALE, JOHN B., Laboratory Medicine Hematology, 6 Ed., Mosby Company,
London, 1982

Data de fabricao, data de validade, lote e responsvel tcnico

VIDE EMBALAGEM

PRODUTO PARA DIAGNSTICO DE USO IN VITRO

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Editada em abril de 2005

Revisada em maro de 2010