Instituto Politcnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas

Prctica: Determinacin de colesterol en la yema de huevo.

Diego Vargas Gloria Paola.
Lpez Portillo Felipe de Jess.
Laboratorio de Bioqumica de Q.B.P. Seccin 3, Semestre 2/17; Grupo: 4QM1
Prolongacin Manuel Carpio y Plan de Ayala s/n, Miguel Hidalgo, Santo Toms, 11350 Ciudad de Mxico.
Objetivo.

Determinar la concentracin de colesterol en la yema Por lo tanto, 99.33 g de cholesterol hay en 5 L, sin
de huevo, por el mtodo de Lierberman-Burchard. embargo, el volumen extrado total de la yema de
huevo fue de 3 mL = 3000 L, por lo tanto:
Resultados.

Clculos para sacar g de colesterol de cada tubo (del

1 al 5). Ejemplo. 99.33 5 L

3000 L
80g 1
X 0.25 mL X = 59,599.99 g de colesterol en yema de
X = 20 g
huevo, por lo tanto:
Si hay 80 g por cada 1 mL de solucin, entonces, por X = (59,599.99 g de colesterol) (2) = 119,199.98
cada 0.25, 0.50, 0.75, 1.00, 1.25 mL de solucin de g de colesterol en yema entera.
colesterol estndar hay 20, 40, 60, 80 y 100 g
respectivamente, por lo tanto:

Tabla 1. Resultados obtenidos Conversin de microgramos a miligramos.

Tubo [g de colesterol] Absorbancia 1 0.001 mg

B 0 0 119,199.98 119.19998 mg
1 20 0.052
2 40 0.106
3 60 0.139 Grafica 1. Curva tipo de colesterol.
4 80 0.177
5 100 0.207
Pb 0 0.219

Obtencin de g en yema entera, mediante la

obtencin de la lnea de tendencia.

= 0.0021 + 0.0104

640 = b +

640 / b =

0.219 0.0104
=
0.0021
Discusin.

pasado por una agregacin en ml de cloroformo y

anhdrido actico para despus agregarles cido
sulfrico; todo esto para cumplir con el mtodo de
Lieberman-Burchard el cual consiste en que la reaccin
se realiza en general en un medio acido fuertemente
constituido por cido sulfrico, cido actico y
anhdrido actico. En la reaccin, el colesterol sufre una
oxidacin gradual formndose en cada capa una
molcula de colestapolieno que posee un doble enlace
adicional con respecto al compuesto del cual deriva. La
etapa inicial de la reaccin consiste en la protonacin
del grupo OH del colesterol, con la siguiente perdida de
agua obtenindose el ion carbonio 3,5-colestadieno que
constituye el primer paso de la reaccin de color. La
oxidacin secuencia de este ion carbonio alilico por el
SO2- produce un cido colesta-hexano-sulfrico
cromoforo con mximos de absorbancia, que en la
mayora de la literatura dice 620 nm, sin embargo en
este caso se realiz a 640nm.

Este mximo de absorcin se torna de color verde, que

es el intermediario que medimos, si bien no parece ser
el producto final de la reaccin. La formacin del
intermediario tiene un bajo rendimiento en el tiempo
que se considera ptimo para la medicin
espectromtrica del colesterol.

Conclusin.

Se caracteriz a la glucosa y fructosa

(azucares reductores) que al oxidarse
constituyen un color rojizo.
Se realiz la curva tipo de azcares reductores.

Bibliografa.

Klein, D. (2013). Qumica orgnica. Madrid:

Medica Panamericana. Pg(s). 1166.
Plummer, D. (1994). Introduccin a la
bioqumica prctica. Madrid: Universidad de
Barcelona. Pg(s). 134-144