FERIA DE
Efecto de la Carragenina de productos lcteos, en expresin de
ZAMACOLA
citokinas proinmatorios IL 1 y TNF en clulas intestinales de Rattus norvegicus
Meza, Nikol; Hinojosa Mayli; Chora, Paola; Panca Tatiana; Ucsa Christian; Surco, Ana; Mayta Dennys
INTRODUCCION
Carragenina (CGN) es un polisacrido aislado de
varias especies de algas rojas de la familia
rodofceas. Este hidrocoloide nico consiste en
alternar azcares galactosa y 3,6-anhidrogalactosa
vinculados por la alternancia de -1,3 y -1,4 enlaces
glicosdicos. Esta gran polmero no es nutritivo y
cuando se ingiere en altas concentraciones puede
tener un efecto similar a la de alto contenido de bra
en la dieta. En el tracto digestivo, CGN es altamente
resistente degradacin enzimtica por la microbionta
y, por lo tanto, pasa a travs del sistema
gastrointestinal sin alteracin.
Hoy en dia todava existe demasiada controversia
sobre este aditivo alimenticio denominado tambin
como E 407 o SIN 407, incluido en productos lcteos
como leches descremadas, evaporadas, evaporadas
descremadas, condensadas, grasas lcteas parta
untar, queso no madurado y fresco, queso cottage,
queso crema y leche fermentada. Las cantidades
permitidas varan, pero suelen ser 150 mg/kg. La
Asociacin Peruana de Consumidores y Usuarios
(Aspec) denunci que el 74% de un total de 20
productos lcteos vendidos en el mercado nacional
tiene en su composicin carragenina, una sustancia
qumica que sirve para generar inamacin en
animales de laboratorio y que causara malestares
intestinales e incluso lceras en las personas.
CIENCIAS
ASUNTINAS
2017
METODOLOGIA
Acondicionamiento de animales de laboratorio.
Se utilizaran ratones BALB/c de de 40 dias con un
peso de 35g, con el siguiente diseo experimental: 3
animales se le suministrara el producto lcteo, 3
carragenian grado analtico, 3 Micofenolato como
control positivo, y dos se les administrara suero salino
como control negativo
.
Determinacin de le citotoxicidad por Ensayo de
reduccin del MTT.
Se usara para determinar la viabilidad celular, dada
por el nmero de clulas intestinales. Los ratones se
les sacricaran por decapitacin para obtener tejido
intestinal.
Viabilidad Celular por Azul de Tripan
Se estimara el volumen de la suspensin celular de la
cual se toma la alcuota para evaluar. Agregando 90
L de azul tripn al 0.4% en un microtubo
homogenizando la suspensin celular (en medio de
cultivo o PBS), de esta suspensin se tomara 10 L
de la mezcla en cada cmara de Newbauer y se
contaran las clulas viables
Determinacin de la expresin de genes de
citoquinas por PCR
Los tejidos intestinales de ratn se digerirn con
tripsina y se extraer su ADN por el mtodo de fenol
cloroformo, en seguida se tomaran 2 ul de ADN en
suspensin y se aadir 100ul de Supermix blue PCR
con 0.2 ul de cada cebador (primers forward,
reverse) a continuacin se llevara a un termociclador
por 30 ciclos, una vez terminada la amplicacin, se
prepara un gel de agarosa al 1.8% y se corrern a
100mv por 45 min, posteriormente se revelara el gel
en un transiluminador UV. Vis.
Histologa por microcopia.
EL Tejido Intestinal ser embebido en parana con
cortes de 2 um con un micrtomo y jndolo con el
colorante Hematoxilina Eosina