Universidad Autnoma de Quertaro

Facultad de Qumica

Laboratorio de Bacteriologa

Reporte 5. Neisseria y Moraxella e Infecciones de vas

respiratorias (Cultivo farngeo)

Grecia Alejandra Ortiz Cano/ Arturo Torres Zamora/ Jos Manuel

Alvarez Baltazar.

Fecha de realizacin: 25/09/2017 Fecha de entrega: 02/10/2017

NDICE

l. RESUMEN.. 2

II. INTRODUCCIN 2

III. OBJETIVOS.... 3

IV. METODOLOGA. 4

V. RESULTADOS Y DISCUSIN.. 6

Vl. CONCLUSIN.. 7

Vll. BIBLIOGRAFA.. 8

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 I. RESUMEN
Este reporte incluye las dos prcticas realizadas en la misma sesin de laboratorio:
Neisseria y Moraxella e Infecciones de vas respiratorias (Cultivo farngeo). Se estudiaron
las caractersticas microscpicas y macroscpicas de los organismos que componen los
gneros Neisseria y Moraxella.

II. INTRODUCCIN
A. Neisseria y Moraxella
La familia Neisseriaceae est compuesta
por cuatro gneros: Neisseria, Moraxella,
Kingella y Acinetobacter. Todos los
miembros de la familia excepto
Acinetobacter, habitan en la superficie de
las mucosas de animales de sangre
caliente. Con tincin de Gram aparecen
como diplococos gramnegativos, todas las
especies son citocromo oxidasa positivos y
catalasa positivos e inmviles. Algunas
especies de microorganismos son
exigentes se inhiben en presencia de
cidos grasos y sales. No resisten la desecacin, ni la exposicin a la luz. Muchas especies
de Neisseria requieren de humedad elevada y presencia de CO2, se consideran aerobios
estrictos. Algunas Neisserias producen pigmento amarillo de naturaleza carotenoide.
Contienen una capa de peptidoglicano y una membrana externa que contiene polisacridos,
tambin contiene protenas llamadas porinas que permiten el paso de pequeas molculas,
existen otras protenas membranales que se presentan en las especies y sirven para
realizar pruebas de aglutinacin, serotipificacin y desarrollo de vacunas. Algunas especies,
como Neisseria meningitidis tienen cpsula que les confieren cierta serotipificacin y
susceptibilidad a vacunas. Las especies N. gonorrhoeae y N. meningitidis se consideran
patgenas e infectan exclusivamente al hombre. N. meningitidis (meningococo) causa
meningitis, mientras que N. gonorrhoeae causa gonorrea una enfermedad del tracto genital.
Ambas especies poseen pili, que media la unin entre el microorganismo y las clulas
susceptibles, facilitando de esta forma la adhesin e infeccin. Se cree que el pili evita la
fagocitosis y destruccin por parte de los neutrfilos. Es importante realizar un frotis directo
de la muestra ya que estos microorganismos pueden no crecer en los medios selectivos.

B. Infecciones de vas respiratorias

Las vas respiratorias inician con la nariz y boca y se extienden a travs de la nasofaringe y
orofarnge respectivamente, siguiendo con la trquea y terminando en los pulmones. La
trquea se divide en bronquios que a su vez se dividen en bronquiolos, cuyas
ramificaciones terminan en los alveolos.

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 Fig 1. Aparato respiratorio

Un mecanismo no especifico es el que protege al tracto respiratorio de las infecciones, entre

ellos se encuentran los pelos, las mucosas y pasajes contorneados, tambin hay diversas
sustancias antibacterianas como la lizosima y anticuerpos. En esta actividad de proteccin
tambin se incluye a la flora normal, la cual previene la colonizacin de bacterias
patgenas.

El estudio del exudado farngeo es de gran importancia para el diagnstico de ciertas

enfermedades o infecciones, entre ellas la estafiloccica, la difteria, tos ferina, as como
establecer un foco de infeccin de enfermedades como la fiebre escarlatina, fiebre
reumtica, glomerulonefritis, y la demostracin de portadores sanos de estreptococos -
hemolticos, Neisseria y Corynebacterium. Las muestras de exudado farngeo constituyen
uno de los estudios ms solicitados en la comunidad, especialmente en nios, debido en
gran medida a la facilidad de su obtencin.

Criterios epidemiolgicos importantes en la realizacin de cultivo de exudado farngeo:

La edad del paciente es un elemento importante de apoyo.
En los nios menores de 3 aos, la gran mayora de las faringitis agudas con vricas.
Entre los 6 y los 15 aos la etiologa estreptoccica puede llegar hasta el 50%.
En mayores de 18 aos, entre el 15 y el 25% es estreptoccica.
El cultivo tiene una sensibilidad del 95% y la especificidad del 95 al 99%.
El resultado preliminar se obtiene entre 24 y 48 horas.

III. OBJETIVOS
A. Neisseria y Moraxella
Conocer las especies ms importantes que forman la familia Neisseriaceae
Realizar las pruebas bioqumicas para identificar a la Neisseria y Moraxella
catarrhalis
Conocer la situacin taxonoma de Moraxella Catarrhalis

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 B. Infecciones de vas respiratorias
Conocer la importancia del exudado farngeo como estudio de un laboratorio clnico
Establecer las metodologas para realizar una buena toma de muestra
Conocer los microorganismos presentes como flora habitual en las vas respiratorias
altas.
Conocer e identificar las bacterias patgenas en las vas respiratorias.

IV. METODOLOGA

A. Material
1. Asas bacteriolgicas
2. Asas bacteriolgicas rectas.
3. Portaobjetos
4. Mechero
5. Cajas petri
6. Hisopos para exudado
B. Reactivos
1. Medio de transporte Stuart
2. Reactivo de oxidasa
3. Equipo de tincin Gram
4. Reactivo para prueba de catalasa
5. Discos de optoquina
6. Discos de bacitracina
7. Discos de Trimetoprim/sulfametoxazol
8. Agar chocolate
9. Agar Mueller-Hinton sangre 5%
10. 5 tubos con Agar Cistina Tripticasa adicionados con Glu, Mal, Lac,
Sac y Fruc.
C. Procedimiento
1. Toma de muestra
a) Los pacientes necesitan estar en ayuno y con aseo de boca
b) Con la ayuda de un abatelenguas y un hisopo realizar la toma
de muestra de la cavidad farngea
c) Sumergir los hisopos con la muestra en tubos de ensayo con
medio de transporte Stuart
d) Almacenar hasta el cultivo
2. Cajas con agar
a) Por cada uno de los agares preparar dos cajas petri
b) Sembrar cada muestra en el agar chocolate
c) Incubar a 37C por 24 h
d) Notar crecimiento, morfologa de colonias y cambios de
coloracin
3. Antibiograma
a) Sembrar las distintas colinas que hayan crecido en el agar
chocolate en cajas con agar Mueller-Hinton sangre 5%

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 b) Colocar discos de optoquina, bacitracina, SXT y/o
novobiocina, segn sea el caso
4. Tincin de Gram
a) Realizar el procedimiento estndar para tincin de Gram en
todas las cepas proporcionadas.
b) Observar al microscopio e identificar si la prueba resulta
negativa o positiva.
5. Catalasa
a) Realizar el frotis de las dos cepas en un portaobjetos
b) Agregar una gota de H2O2 a cada frotis
c) Notar si hay efervescencia o no
6. Oxidasa
a) Con aplicadores de madera tomar una colonia de cada cepa
b) Colocar las muestras en una tira reactiva y notar si hay cambio
de coloracin o no.

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 V. RESULTADOS Y DISCUSIN

Tabla 1. Resultados de las distintas colonias de la cepa del paciente 1.

Cepa Paciente 1 Tincin Gram Catalasa Oxidasa

Colonias cafs Diplococos Gram (-) (+) (+)

(agar chocolate)

Colonias verdes Cocos Gram(-) (-) No se realiz

(agar chocolate)

Colonias cafs Cocos Gram(-) (-) No se realiz

(agar sangre)

Tabla 2. Resultados de las distintas colonias de la cepa del paciente 2.

Cepa Paciente 2 Tincin Gram Catalasa Oxidasa

Colonias verdes Cocos Gram(+) (-) No se realiz

(agar chocolate)

Colonias caf-amarillas Cocos Gram (-) (-) No se realiz

(agar sangre)

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Fig 1. Antibiograma cepa caf (agar chocolate) F ig 2. Antibiograma paciente 2
paciente 1. cepa caf (agar sangre).

La cepa del paciente 1 mostr resistencia a Trimetoprim/sulfametoxazol y sensibilidad a

Optoquina y Bacitracina, mientras que en el paciente 2 fue sensible en los tres casos.

Teniendo en cuenta las caractersticas de la cepa de diplococos Gram (-) del paciente uno,
estes se someti a una prueba de fermentacin de carbohidratos.

Tabla 3. Pruebas de fermentacin de carbohidratos de las colonia caf encontrada en

el paciente 1.
Lactosa Maltosa Sacarosa Fructosa Dextrosa

No hubo fermentacin de carbohidratos, lo cual junto con las otras pruebas indican que la
cepa encontrada en el paciente 1 es una Moraxella.

VI. CONCLUSIN
Se identificaron las cepas obtenidas de la muestra de exudado farngeo en ambos
pacientes, se conocieron las especies ms importantes que forman la familia Neisseriaceae
y se conocieron los microorganismos presentes como flora habitual en las vas respiratorias
altas.

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VII. BIBLIOGRAFA
Patrick R. M. (2014). Microbiologa Medica 7. Edicin. Editorial Elsevier. 8.
Romero C . R. (2007) Microbiologa y parasitologa humana. 3a. Edicin. Editorial
Mdica Panamericana. 9.
Stephen J.C. (2005). Manual de pruebas de susceptibilidad