Universidad del Valle de Guatemala Diego A.

Robles
Anlisis Instrumental Carn: 13085
Ingrid Yurrita Seccin 23
Auxiliar: Abdi Orellana Fecha: 6 de octubre del 2014

Prctica No. 12
CROMATOGRAFA LQUIDA DE ALTA RESOLUCIN:
DETERMINACIN DE AZCARES EN MIELES

Investigue sobre los equipos de HPLC, el detector de ndice de refraccin y las aplicaciones.

En la cromatografa lquida de alta resolucin los analitos de inters no requieren ser vaporizados
antes de su anlisis y permite el estudio de cualquier tipo de sustancia. Se desarroll este mtodo
despus de la cromatografa de gases debido a que era muy difcil lograr un flujo estable en el
eluyente. La muestra en estado lquido es arrastrada por una corriente lquida llamada eluyente, la
fase estacionaria es un slido finamente dividida o una pelcula. Este tipo de cromatografa es
selectiva, reproducible, sensible y rpida; tambin trabaja con cuatro mecanismos de interaccin
los cuales son: adsorcin superficial, particin, intercambio inico y exclusin molecular. Los
detectores en la cromatografa lquida no son destructores de la muestra, son rpidos, sensibles,
reproducibles, lineales y estables; se pueden clasificar en los que miden una propiedad de la fase
mvil y otros que miden una propiedad del analito (Fernndez).

El detector del ndice de refraccin posee un lmite de deteccin de 100 1000 ng y no permite un
gradiente. Miden la variacin en el ndice de refraccin del eluato con respecto al disolvente puro,
casi todos los solutos responden a esto pero con una baja sensibilidad, tambin estos son muy
sensibles a la temperatura por lo que se requiere que estn termostatizados (Skoog, 2010).

La cromatografa lquida tiene un gran campo de aplicaciones para poder llevar a cabo la
determinacin de distintos compuestos qumicos (Barquero, 2004):

- Frmacos: antibiticos, sedantes esteroides y analgsicos.

- Bioqumica: aminocidos, carbohidratos y lpidos.
- Productos de alimentacin: antioxidantes, edulcorantes artificiales y aflatoxinas
- Qumica forense: drogas, venenos, alcohol.
- Medicina clnica: extractos de orina, estrgenos.

Investigue la importancia de la separacin, identificacin y cuantificacin de azucares.

Es importante que se lleve a cabo la determinacin de diferentes tipos de azcares en diferentes

mbitos de la vida. En la medicina es importante poder determinar la cantidad de glucosa en la
sangre porque de esta manera se pueden evitar problemas en la salud como la diabetes, otras
descompensaciones por falta de la misma porque no se produce suficiente energa en el cuerpo y
carece de ATP. Por otra parte en la industria de los alimentos es importante identificar y cuantificar
estos compuestos ya que de esta forma se puede evitar brindar un producto que sea daino a la
salud del cliente. Por ltimo es importante porque permite diferenciar distintos tipos de azcares
presentes en cualquier solucin, porque no todos actan de la misma manera en un organismo que
lleva a cabo una reaccin en su interior.

Literatura consultada

Fernndez, J. Fundamentos del anlisis cromatogrfico, cromatografa lquida de alta

resolucin. UCPT. 18 pp.

Skoog, D.; West, D.; Holler, J. y S. Crouch. (2005). Fundamentos de qumica analtica.
8va edicin. Thomson, Mxico D. F. 1173 pp.

Barquero, M. (2004). Mecanismos y aplicaciones de la cromatografa lquida de alto

desempeo. Editorial Universidad de Costa Rica, San Jos. 59 pp.