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FACULTAD DE INGENIERIA
LA PAZ - BOLIVIA
TIPOS DE DETECTORES HPLC
La separacin real de cada componente en la muestra se realiza dentro de una columna, sin
embargo esta separacin tiene que ser registrada para que seamos capaces de verlo. Los
detectores se utilizan para este propsito. Los componentes separados se controlan y se expresan
electrnicamente. No hay detector universal que puede controlar todos los compuestos y hay
muchos detectores utilizados para el anlisis LC. Algunas se enumeran a continuacin:
Los detectores UV, VIS, y PDA se clasifican como detectores de absorbancia. Proporcionan una
buena sensibilidad para que compuestos que absorbe la luz a nivel ~ pg. Son fciles de operar y
proporcionar una buena estabilidad. Detectores de UV es un detector muy comnmente utilizado
para el anlisis HPLC. Durante el anlisis, la muestra pasa a travs de una celda de vidrio claro sin
color, llamada celda de flujo. Cuando la luz UV se irradia en la celda de flujo, la muestra absorbe
una parte de la luz UV. As, la intensidad de la luz UV observada para la fase mvil (sin muestra) y
la muestra que contiene eluyente ser diferente. Mediante la medicin de esta diferencia, la
cantidad de muestra se puede determinar. Puesto que la absorbancia de UV tambin difiere
depender de qu longitud de onda se utiliza, es importante elegir una longitud de onda
apropiada en funcin del tipo de analito. Un detector de UV estndar permite al usuario elegir la
longitud de onda entre 195 a 370 nm. Se usa ms comnmente de 254 nm. En comparacin con
un detector de UV, VIS utiliza un detector de longitud de onda ms larga (400 ~ 700 nm). Hay
detectores que proporcionan ms amplia seleccin de longitud de onda, cubriendo ambos rangos
de UV y VIS (195 ~ 700 nm), llamados UV / VIS detector. PDA detecta un espectro completo de
forma simultnea. Detectores UV y VIS visualizar el resultado obtenido en dos dimensiones
(intensidad de la luz y el tiempo), pero PDA aade la tercera dimensin (longitud de onda). Esto es
conveniente para determinar la longitud de onda ms adecuada sin repetir los anlisis.
Detector RI mide el cambio en el ndice de reflejo. Una celda de vidrio se divide en dos cmaras
(las clulas). El efluente de la columna LC flujo a travs de la clula de muestra, en tanto que
otra clula llamada clula de referencia est lleno de solo fase mvil. Cuando el efluente va a
travs de la celda de muestra no contiene ningn analito, el disolvente en el interior de ambas
clulas son los mismos (Figura 1A). Cuando un haz es irradian en las clulas, el haz observada ser
recta en este caso. Sin embargo, en un caso en el efluente contiene algn otro componente
que la fase mvil; flexin del haz incidente se produce debido a la diferencia de ndice de reflexin
entre los dos disolventes (Figura 1B). Mediante la medicin de este cambio, la presencia de
componentes se puede observar.
Detector RI tiene una menor sensibilidad en comparacin con detector UV, y esa es la razn
principal por la RI no es tan comn como los rayos UV. Sin embargo, hay algunas ventajas sobre
detector UV.
Es adecuado para la deteccin de todos los componentes. Por ejemplo, las muestras que no tienen
absorcin UV, tal como azcar, alcohol, o iones inorgnicos, obviamente, no puede ser medida por
un detector de UV. En contraste, el cambio en el ndice de reflexin se produce en todos los
analitos, por lo tanto un detector de RI que se puede utilizar para medir todos los analitos. Es
aplicable para el uso con el disolvente que tiene la absorbancia UV. Un detector de UV no se
pueden usar con el disolvente que tiene la absorbancia UV. A veces, el disolvente orgnico
utilizado para el anlisis GPC absorbe UV, y por lo tanto detector UV no se pueden usar. Se
proporciona una relacin directa entre la intensidad y la concentracin del analito. La cantidad de
UV absorbida depende de cada analito, por lo tanto la intensidad de pico detector UV no
proporciona informacin sobre la concentracin de analito. Mientras tanto la intensidad
observada por un detector RI es comparable a la concentracin del analito. Debido a estas
ventajas, RI se utiliza a menudo para la deteccin de azcares y para el anlisis SEC.
ELSD ofrece una buena sensibilidad para analitos no voltiles a nivel de ng. El eluyente de la
columna se nebuliza y despus se evapora para que formar partculas finas. El analito es entonces
irradiada con un haz de lser y la radiacin dispersada es detectada. El objetivo de la muestra
incluye lpidos, azcar y alto peso molecular analitos. Se utiliza de forma similar como un detector
RI, pero puede proporcionar una deteccin ms sensible con la lnea de base estable. Otra ventaja
es que ELSD se puede utilizar para el mtodo del gradiente mientras que RI no puede.
5. Espectrmetro de Masas
Los analitos se detectan basndose en su peso molecular. La informacin obtenida es
especialmente til para la identificacin de compuestos estructurales. Sin embargo, su uso no se
limita a la identificacin de la estructura y se puede utilizar para cuantificar lmite de deteccin
muy bajo de componentes elementales y moleculares.
6. Detector de conductividad
7. Detector de Fluorescencia
8. Detector de quimioluminiscencia
Similar a FL, pero en lugar de utilizar una fuente de luz para excitar los tomos de analito, la
excitacin se inicia por reaccin qumica. Puesto que no se bas en la fuente de excitacin externa,
el ruido es pequeo, resulta en elevada relacin de seal a ruido, es decir, que proporciona una
sensibilidad an mayor que FL.
Especfico para la medicin ismero ptico. La columna puede separar R-y de tipo L-ismeros
pticos, pero los detectores generales (por ejemplo, UV) no puede distinguir que es ni R L.
Detector Rotacin ptica proporciona esta informacin.
BIBLIOGRAFIA
https://shodexhplc.com/lessons/leccion-6-los-detectores-para-hplc/
http://www.journalisimo.com/NRVZLBJE/