Controle de La Qualite Analyti - Tadlaoui Habibi Houda

PROJET DE FIN DETUDES
Contrle de la qualit analytique des paramtres

bactriologiques
au laboratoire rgional de lONEP Et
Analyse bactriologique des eaux de lOued Sebou destines
la Consommation humaine
Prsente le 16/06/2011
Par: Houda Tadlaoui Habibi
Encadr par:
Fatima Fadil
Devant le jury compos de:

MM.Fatima Fadil
Mr.Saad Rachiq
Mr.Salm Diouri
Au terme de ce travail, jaime adresser mes plus sincres remerciements
A MONSIEUR SALEM DIOURI

CHEF DU LABORTOIRE DE LOFFICE NATIONAL DE LEAU
POTABLE davoir accept de maccueillir, afin de passer mon stage de fin
dtude.
Je souhaite que vous trouviez dans ce travail lexpression de ma considration et
mon profond respect.
A MADAME FATIMA FADIL

PROFESSEUR A LA FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES pour
laide, les conseils concernant les missions voques dans ce rapport et pour ses
orientations durant la rdaction du rapport.
A MM.FOUZIA ANNOUH, MM.KELTOUM ALAMI , MR.DRISS

HAMDANI, MR.RACHID ELFILALI et MR.FELLAH pour laide prcieuse,
lorientation, la grande comprhension, la disponibilit et le soutien durant la
priode du stage.
A TOUS LES MEMBRES DE JURY davoir bien voulu accepter de faire partie
de la commission dexaminateur.
A TOUTE PERSONNE qui a particip de prs ou de loin pour

laccomplissement de ce modeste travail.
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INTRODUCTION ....7
PRESENTATION DE LONEP...9
BIBLIOGRAPHIE...12
I. Pollution de leau......................................................................................13
II. Les diffrents types de pollution.............................................................13
1. Pollution chimique....................................................................................13
2. Pollution organique..................................................................................14
3. Pollution biologique..................................................................................14
4. Pollution physique....................................................................................14
III. Les maladies hydriques............................................................................15
IV. Le prtraitement et traitement de leau brute.......................................16
1. Prtraitement............................................................................................17
a. Dgrillage (traitement physique)................................................17
b. Dessablage.....................................................................................17
c. Dbourbage..................................................................................17
2. Traitement...............................................................................................17
a. Pr chloration.............................................................................18
b. Coagulation-floculation.............................................................18
c. Dcantation.................................................................................19
d. Filtration sur sable.....................................................................19
e. Dsinfection................................................................................19
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V. Contrle bactriologique de leau......................................................20
1. Bactries recherches..........................................................................20
a. Coliformes totaux..............................................................................21
b. Coliformes fcaux..............................................................................21
c. Clostriduims sulfito-rducteurs........................................................22
d. Bactries htrotrophes reviviables..................................................22
2. Prlvement et conservation des chantillons...................................23
VI. Mthodes danalyses bactriologiques des eaux................................23
1. Mthode de la membrane filtrante....................................................24
2. Mthode du nombre le plus probable................................................24
3. Mthode de lincorporation en glose................................................24
VII. Facteurs influants la fiabilit des analyses bactriologiques...........24
VIII. Analyses physico-chimiques................................................................25
1. Analyses physiques..............................................................................25
a. Turbidit..............................................................................................25
b. Temprature .......................................................................................26
c. Mesure du PH......................................................................................26
d. Conductivit.........................................................................................26
2. Analyses chimiques..............................................................................27
a. Dtermination de lalcalinit..................................................27
b. Oxydabilit...............................................................................27
c. Duret de leau.........................................................................28
IX. Normes de qualit de leau de consommation humaine...................28
MATERIELS ET METHODES..30
I. Contrle de la qualit des paramtres analytiques bactriologiques..31
1. Contrle de la salle bactriologie............................................................31
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a. Qualit de lair ambiant................................................................................31
b. Qualit de surface de travail.........................................................................32
2. Contrle de qualit du matriel du secteur de la bactriologie..................33
3. Contrle de la qualit des milieux de culture ........................................34
II. Analyses microbiologiques de leau..............................................................34
1. Analyse des coliformes totaux et fcaux.......................................................35
2. Analyse des streptocoques fcaux.................................................................38
3. Analyse des bactries htrotrophes arobies anarobies 22 et 37C....39
4. Analyse des Clostriduims......40
RESULTATS ET DISCUSSION. 41
I. Rsultat du contrle de qualit des paramtres analytiques.....................42
II. Rsultat des analyses microbiologiques de leau........................................43
CONCLUSION..........................................................................................................46
Rfrences Biographiques 47
Liste dabrviation ....51
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Nous vivons sur la plante bleue. Leau joue un rle dterminant dans la vie des
hommes, des animaux et des plantes. Mais seulement la plus petite partie, 0,3% des
rserves globales en eau, sont utilisables comme eau potable. Et cest juste cette petite
partie qui est en danger. Les scientifiques attirent notre attention sur laugmentation
inquitante de la pollution des rserves deau potable. Une rorientation radicale
concernant notre environnement est donc ncessaire de toute urgence.
Leau potable propre et non pollue devient de plus en plus rare. La pollution
chimique par des eaux uses de lindustrie et de lagriculture, les eaux dgout des
mnages charges de dtergents et de lessive ainsi que linfiltration de substances
toxiques ont dj atteint la nappe phratique. Les distributeurs deau sont par
consquent confronts des gros problmes concernant le respect des limites de
pollution.
Des scientifiques nous avertissent du danger de nouvelles bactries pathognes,

qui sont devenues rsistantes cause de lutilisation accrue des antibiotiques par la
mdecine et llevage. On constate aussi avec inquitude des rsistances contre les
produits, utiliss pour le traitement des eaux (chlore, ozone et rayons UV). Dou la
ncessit dun traitement des eaux.
A cause de cette pollution, lutilit de procder des contrles frquents et

dtablir des laboratoires pour effectuer ces contrles, devient ncessaire.
A lgard des autres pays, il existe au Maroc des laboratoires de contrle et de

surveillance de qualit de leau potable, o jai eu loccasion deffectuer mon stage de
fin dtudes.
Cest dans cette thmatique que nous avons ralis ce stage de projet de fin
dtudes lONEP, dans le but de mettre en valeur limportance et lefficacit des
diffrentes tapes de traitement, lONEP a mis en uvre des analyses physico-
chimiques et bactriologiques des eaux.
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Le travail de ce stage comporte de deux tapes :
Contrle de la qualit des paramtres analytiques du laboratoire

danalyses microbiologiques de lONEP.
Analyses bactriologiques des eaux brutes destines la production
deau dalimentation humaine (eau en sortie de station de
prtraitement), et des eaux traites destines lalimentation
humaine (eau traite en sortie de station de traitement).
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Loffice national de leau potable (ONEP) est un tablissement caractre

commercial et industriel, dot de la personnalit et de lautonomie financire
depuis 1995, place sous la tutelle du ministre des travaux publics et soumis au
contrle du ministre des finances :
La cration de LONEP par dahir a t en 1929 sous le nom de REIP (Rgie

dexploitation installation et planification), puis RFI (Rgie dexploitation et
planification), et en fin le nom ONEP en 1972. LONEP est charg de:
Planifier: Lapprovisionnement en eau potable du Royaume et la

programmation des projets.
Etudier: Lapprovisionnement en eau potable et assurer lexcution des

travaux des units de production et de distribution.
Grer: La production deau potable et assurer la distribution pour le

compte des communes qui le souhaitent.
Contrler: La qualit des eaux produites et distribues et la pollution des

eaux susceptibles dtre utilises pour lalimentation humaine.
Assister: En matire de surveillance de la qualit de leau.
Participer : Aux tudes, en liaison avec les ministres intresss, des

projets de textes lgislatifs et rglementaires ncessaires
laccomplissement de sa mission.
Pour les contrles, lONEP dispose dun laboratoire central et de 43

laboratoires dcentraliss rpartis sur lensemble du Royaume.
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Loffice national de leau potable-Fs
Lalimentation en eau potable de la ville de Fs est assure par lONEP et la

RADEEF, alors que la distribution est assure totalement par la
RADEEF.LONEP de Fs couvre 40% de la production actuelle de la de Fs.
Le complexe de production doued Sebou:
Ce complexe comprend:
La station de prtraitement situe sur loued Sebou: sa mise en uvre remonte

1989, le rle de la station est dextraire leau brute et de diminuer le taux de
matire en suspension jusqu une valeur infrieure 2g/l et de la refouler jusqu
la station de traitement.
La station de traitement Ain Noukbi. Edifie le 19mars 1987. La station assure:
Le traitement des eaux reues de la station de prtraitement selon une

srie dtapes.
Le contrle de la qualit des eaux traites (dans le laboratoire rgional).
Refoulement des eaux vers le rservoir bab hamera.
Le laboratoire rgional de Fs procde dans le cadre du contrle des eaux

potables aux 3 types danalyses dfinis par la norme marocaine, selon la
nature du point deau contrle
Analyse de type I: Comprend les paramtres bactriologiques et un

nombre rduit de paramtres physico-chimiques.
Analyse de type II: En plus de lanalyse de type I, dautres paramtres

physico-chimiques et bactriologiques pouvant tre lis la
contamination fcale des ressources en eau.
Analyse de type III : Comprend, en plus de lanalyse de type II, les

paramtres organoleptiques, les lments toxiques et indsirables et les
lments majeurs autres que ceux dtermins pour lanalyse de type II.
En plus de ces analyses normalises le laboratoire assure la surveillance du

rseau dapprovisionnement en eau potable tout entier, de la prise deau brute
jusquaux points de livraison aux consommateurs en passant par les ouvrages et
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les produits de traitement. Cette surveillance destine protger la sant du

consommateur est base sur des normes et rglements nationaux en vigueur
rgissant la qualit de leau potable avec recours, au besoin, aux directives
internationales.
Paralllement cette activit de contrle et de surveillance de la qualit des

eaux, le laboratoire rgional de Fs dveloppe dautres activits aussi importantes
que ncessaires notamment:
La mise en place dun systme de contrle de la qualit analytique
Le contrle des ractifs de traitement
Le contrle des matriaux en contact avec leau
MOYENS MATERIELS
Le laboratoire est dot dun quipement moderne qui lui permet de

procder la dtermination de plus de 200 paramtres. ces
dterminations sont ralises sur des chantillons deaux (traites,
brutes), produits de traitement, etc...
Figure 1 : Filire du traitement des eaux de surface
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I. POLLUTION DE LEAU
La pollution de l'eau est une altration qui rend son utilisation dangereuse et
(ou) perturbe l'cosystme aquatique. Elle peut concerner les eaux superficielles
(rivires, plans d'eau) et/ou les eaux souterraines. Elle se manifeste principalement,
dans les eaux de surface par une pollution chimique ou par des virus et des bactries
pathognes.
1- Les diffrents types de pollutions
a. La pollution chimique :
La pollution chimique est due des produits toxiques qui atteignent

directement un cours deau ou qui pntrent dans le sol pour atteindre les eaux
souterraines. Elle peut tre provoque par le rejet de mtaux lourds (cadmium,
mercure, plomb ) ou dautres substances rejets par lindustrie, lagriculture ou les
dcharges de dchets domestiques ou industriels. Les pesticides utiliss dans
l'agriculture, ont une place importante dans la pollution chimique, puisqu'on estime
que prs d'un quart des eaux juges impropres l'alimentation des populations sont
dues aux pesticides.
Certaines substances toxiques, dverses dans un cours d'eau, peuvent avoir des
consquences immdiates sur les tres vivants. Dautres peuvent pntrer dans les
chanes alimentaires, c'est le phnomne de la bioamplification. Une faible partie de
ces substances est vacue par excrtion, mais le reste s'accumule dans certains
organes (foie, muscles, graisse...) des poissons herbivores. Ceux-ci sont mangs par
les poissons et les oiseaux carnivores, qui sont contamins leur tour, concentrant
encore davantage les substances toxiques.
Les espces qui se trouvent l'extrmit suprieure de la chane alimentaire, y

compris l'homme, sont ainsi exposes des teneurs en substances toxiques beaucoup
plus leves que celles qui se trouvent au dpart dans l'eau.
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b- La pollution organique
La pollution organique est due aux rejets deaux uses ou deaux riches en
dchets provenant des industries agro-alimentaires. Ces matires peuvent tre
dgrades par des bactries qui, pour ce faire, vont consommer beaucoup doxygne.
La diminution de la concentration en oxygne occasionne, peut provoquer la mort de
nombreux animaux aquatiques. La prsence excessive de phosphates et de nitrates
dans leau (lie lactivit agricole) provoque un dveloppement intensif des plantes
aquatique. Le dveloppement de ces plantes ncessite galement beaucoup
doxygne. Ceci rend impossible la vie des autres organismes vivant dans leau. Ce
phnomne est appel eutrophisation.
c- La pollution biologique
Cette pollution est lie aux agents provoquant des maladies que sont les
bactries, les virus, les protozoaires et les vers parasites qui se dveloppent dans les
gouts et les eaux uses non traites. Les foyers domestiques, les hpitaux, les
levages et certaines industries agro-alimentaires sont lorigine des lments
dangereux pour la sant voqus prcdemment. On peut donc combattre cette
pollution, par le traitement des eaux uses via les stations dpuration.
d- La pollution physique
Il existe aussi des pollutions physiques de leau. Des matires en suspension

provenant des mines ou des cimenteries peuvent modifier la turbidit de leau, c'est--
dire rduire la transparence de leau, en masquant la lumire du soleil, elles
empchent la croissance des plantes aquatiques. Elles bouchent aussi les branchies des
mollusques et des poissons qui filtrent leau.
La pollution de leau avec la diversit de ses sources, menace la sant de lHomme,

en tant responsable de plusieurs problmes sanitaires et de maladies graves.
II. Les maladies hydriques:
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Les maladies hydriques sont celles causes par la consommation d'eau

contamine par des fces animales ou humaines, qui contiennent des microorganismes
pathognes.
L'eau de surface (pluie, ruisseaux, rivires, lacs etc.), qui peut tre contamine
par des personnes ou des animaux infects. L'coulement des dcharges, des eaux
uses, des eaux industrielles ou rsidentielles peut parfois contaminer les eaux de
surface. Ceci a t la cause de nombreuses manifestations dramatiques de maladies
fcale telles que le cholra et la typhode.
Cependant, il existe de nombreux chemins possibles par lesquels les matires

fcales peuvent atteindre la bouche, par exemple sur les mains ou sur la nourriture
contamine. En gnral, la nourriture contamine est le chemin le plus courant par
lequel les personnes sont contamines.
Dans les pays en dveloppement, 4/5 de toutes les maladies sont causes par les
maladies hydriques, o la diarrhe est la principale cause de la mort des enfants.
L'eau propre est un pralable pour rduire la diffusion des maladies hydriques. On
reconnat bien que la prdominance des maladies hydriques peut tre
considrablement rduite par la fourniture d'eau potable propre et l'limination sre
des fces.
L'eau est dsinfecte pour tuer tous les pathognes pouvant tre prsent dans les
approvisionnements en eau et pour empcher leur dveloppement dans les systmes
de distribution. La dsinfection est alors utilise pour empcher la croissance des
organismes pathognes et pour protger la sant publique. Le choix du dsinfectant
dpend de la qualit de l'eau individuelle et du systme d'approvisionnement en eau.
Sans dsinfection, le risque des maladies hydriques augmente.
Les deux mthodes les plus courantes pour tuer les microorganismes dans
l'approvisionnement en eau sont : l'oxydation avec des produits chimiques tels que le
chlore, le dioxyde de chlore ou l'ozone, et l'irradiation par les UV.
Do la ncessite dun bon traitement.
III. Le prtraitement et traitement de leau brute :
On peut envisager plusieurs types de traitement de leau brute daprs sa

qualit :
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o Si la quantit des matires en suspension est suprieure 2g/l, leau brute

passe dabord par ltape de prtraitement ensuite il passe au traitement.
o Si la quantit des matires en suspension est infrieure 2g/l, leau brute

passe directement au traitement.
1. Prtraitement :
Cest un traitement prliminaire qui permet dallger les traitements ultrieurs,

en enlevant de leau brute la plus grande quantit des matires en suspension, des
matires organiques, des gaz ou autres lments.
Le prtraitement comporte les oprations suivantes :
a) Le dgrillage :
Premire vritable tape dans le prtraitement, a pour rle de faire passer leau
travers des grilles qui retiennent les gros objets du type tronc d'arbre, bidon et des
matires de taille plus faible (branches, feuilles, objets mtalliques).
Figure 2: opration de dgrillage dans la station de prtraitement
b) Le relevage :
Cest une opration qui consiste pomper leau du fleuve vers les dessableurs
(6,5m de hauteur) par lintermdiaire dun systme de trois vis dArchimde dont le
dbit normal de chacun est de 750 l/s.
Figure 3: opration de relevage dans la station de prtraitement
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c) Le dessablage :
Prtraitement physique qui consiste retenir les sables, entrans avec

lcoulement de leau.
Le dessablage concerne les particules de granulomtrie suprieure 200 m, si la

granulomtrie est infrieure 200 m, on parle de dbourbage.
Figure 4: opration de dessablage dans la station de prtraitement
d) Le dbourbage :
Cest une opration de pr-dcantation qui a pour but dliminer certaines

matires en suspension.
Cette technique est utilise quand la teneur en matires en suspension est suprieure
2 g/l.
Figure 5: opration de dbourbage dans la station de prtraitement
2. Traitement :
Aprs les prparations de prtraitement qui permettent leau dtre moins charg en
matire en suspension (MES2g/l), vient la phase de traitement qui permet de rendre
leau potable, cette phase se fait dans la station de traitement.
Le traitement comporte cinq tapes :
a. Pr-chloration:
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Cest une opration qui permet :
o Doxyder le fer et le manganse contenus dans leau brute. (En gnral

responsable de la couleur).
o De dtruire les matires organiques afin damliorer le got et lodeur de

leau.
o De dtruire les micro-organismes et dinhiber la croissance algale.
Le produit gnralement utilis est le chlore Cl2 (Jerome et al.2004).
b. Coagulation-floculation :
Cest un procd qui permet de rassembler les trs fines particules contenues
dans l'eau afin de crer des "flocs", plus grosses particules qui dcanteront ou
flotteront plus facilement.
Coagulation :
La coagulation est un traitement visant neutraliser les charges lectrostatiques

en surface des particules collodales. En effet, ces matires en suspension portent des
charges gnralement ngatives induisant des forces de rpulsion entre les particules.
La coagulation est un traitement produisant des flocs, dcantant beaucoup plus

rapidement que les particules individuelles.
Mais ces flocs sont fragiles, petits et se sparent encore lentement de leau.
Les coagulants les plus utiliss sont :
o Les sulfates dalumine Al2(SO4)3,18 H2O.
o Le chlorure ferrique FeCl3.
o Le sulfate ferreux FeSO4 oxyd par le chlore.
Floculation :
Une fois les flocs sont forms, on injecte un floculant ou adjuvant de floculation
qui aura pour effet d'agglomrer tous ces flocs forms.
Les floculants les plus utiliss sont :
o Les polymres.
o Lalginate.
BHSA FSTF Page 18

c. Dcantation :
La dcantation est une phase trs importante de traitement de leau pour

rcuprer tous ou une grande partie des flocs.
Il existe de nombreux types de dcanteurs, ceux utiliss la station sont au nombre de

six, chacun possde un dbit traiter de 900 m3/h.
La dcantation a pour but dliminer les particules en suspension.
Figure 5: opration de dcantation dans la station de traitement
d. La filtration sur sable :
Cest le type de filtration le plus rpandu. Leau filtrer passe donc travers le
lit de sable et se dbarrasse des particules en suspension non limins par la
dcantation
Figure 6:opration de filtration sur sable dans la station de traitement
e. Dsinfection :
La dsinfection permet dliminer ou de dsactiver des microorganismes

pathognes. On utilise pour cela soit des dsinfectants chimiques tels que le chlore,
lozone ou le permanganate de potassium, soit des dsinfectants physiques tels que les
rayonnements ultraviolets ou la chaleur. (REGNAULT et al.1990).
BHSA FSTF Page 19

IV. CONTROLE BACTERIOLOGIQUE DE LEAU
1) Les bactries recherches:
Les bactries recherches dans les eaux traites ne sont

quexceptionnellement celles qui ont un caractre pathogne. En dehors On
se contente de rechercher ce quil est convenu dappeler les germes
indicateurs de contamination fcale. Le raisonnement est le suivant: sil y a
prsence de germes pathognes dans une eau, ils seront peu nombreux car
hors pidmie, le nombre de sujets potentiellement infectant est trs faible.
En revanche, le nombre de bactries banales, hotes obligs de lintestin de
lhomme et des animaux, est considrablement plus lev car provenant de
la totalit de la population. La probabilit de trouver un germe pathogne
dans lchantillon analys est donc infiniment faible sil y a eu insuffisance
de dsinfection, alors que celle de rencontrer des germes banals est
infiniment plus leve.
Les germes recherchs sont:
Les coliformes totaux.
Les coliformes fcaux.
Les streptocoques fcaux.
Les clostridiums sulfito-rducteurs.
Lanalyse est complte gnralement par la recherche de BHR (ou

bactries htrotrophes reviviables).
BHSA FSTF Page 20

a) Les coliformes totaux
Figuer7 :les colifrmes totaux

Le terme coliformes totaux regroupe plusieurs espces bactriennes de la
famille des entrobactries.
Microorganismes arobies et anarobies facultatifs, en forme de btonnets, gram

ngatif, non sporognes, et ils sont capables de crotre en prsence de sels biliaires ou
autres agents de surface ayant des proprits inhibitrices de croissance analogues, ils
sont capables de crotre en arobiose 37C en milieu liquide bili lactos au vert
brillant avec production dacide et de gaz en 48h.
b) Les coliformes fcaux
Figrer8 :les coliformes fcaux
Ils ont la mme dfinition que les coliformes totaux. Ces coliformes sont
capables de se dvelopper 44C, alors quaucune croissance nest observe cette
temprature pour les souches non fcales. La principale bactrie coliforme
spcifiquement dorigine fcale est Escherichia coli (E.coli).
La prsence de coliformes fcaux indique le contact de leau avec des matires

fcales et peut gnrer des problmes de sant. Cette eau ne doit pas tre consomme
avant tre bouilli de 1 5minutes. (BENABDALLAH 2000).
BHSA FSTF Page 21

c) Les clostridium sulfito- rducteurs
Figure9 :les colostriduims sulfito-rducteurs

Les clostriduim sulfito-rducteurs sont des germes capables de sporuler et de se
maintenir longtemps dans leau sous une forme vgtative. Ils sont donc les tmoins
dune pollution ancienne. Plus difficilement tus que les coliformes par les
dsinfectants, ils constituent aussi un bon indicateur de lefficacit de la dsinfection
d) Les bactries htrotrophes reviviables:
Ils sont des bactries arobies anarobies facultatives, elles requirent

essentiellement de la matire organique comme source de carbone et une temprature
optimale situe entre 20 et 45 C avec ou sans oxygne.
Le dnombrement des BHAA, vise estimer la densit de la population bactrienne

gnrale dans leau potable. Il permet ainsi une apprciation globale de la salubrit
gnrale dune eau, sans toutefois prciser les sources. De manire gnrale, la
prsence de BHAA en quantit anormalement leve peut tre indicatrice de
difficults de traitement ou dun entretien inadquat du rseau. (BENABDALLAH
2000).
e) Les Streptocoques fcaux:
Figure9 : les streptocoques fcaux
BHSA FSTF Page 22

Le terme streptocoques fcaux dsigne dans ce document lensemble des

bactries de forme sphrique au coccoide; gram+, disposs en pair ou en chanette, ne
possdant pas de catalase capable de crotre 37 c en 48h et faisant partie de la flore
intestinale normale de lhomme ou dautres animaux sang chaud.
(BENABDALLAH 2000).
V. Le prlvement et conservation des chantillons
Le prlvement doit tre effectu dans des conditions dasepsie Satisfaisantes

par un agent qualifi .il se fait en flacon de verre strile de 500 ml. Il est donc
ncessaire de respecter certaines conditions pour un diagnostic prcis et exact. Pour
les eaux de distribution, il est parfois ncessaire dliminer la contamination due aux
conduits :
Le robinet doit tre dsinfect et flamb, leau doit scouler un certain temps avant
le prlvement
Lchantillon doit tre achemin rapidement au laboratoire, et rfrigr si la

temprature excde 10C. Lanalyse doit tre effectue dans les 12 h qui suivent le
prlvement
Lagent responsable du prlvement devra recueillir un maximum de renseignements

en relation avec la qualit bactriologique de leau: origine de leau, nature du
captage, nature du traitement ventuel, causes probables de contamination,
importance des pluies avant le prlvement, temprature lors du prlvement.
VI. Mthodes danalyses bactriologiques des eaux
Un jugement sur la qualit bactriologique dune eau ne peut tre port une fois
pour toute, la suite dune analyse initiale; il doit au contraire dpendre dune
surveillance analytique qui doit comporter une frquence souvent importante
dexamens. Les mthodes danalyse et du dnombrement des indicateurs de
contamination de leau sont:
La mthode dite de la membrane filtrante
La mthode du nombre le plus probable
La mthode de lincorporation en glose
BHSA FSTF Page 23

1) La mthode de la membrane filtrante
Cest la technique la plus utilise au laboratoire, elle est applicable toutes les
eaux et en particulier celles ne contenant quune faible quantit de matire en
suspension et un nombre relativement faible de germes (eaux traites).
La plus utilise au laboratoire, elle est applicable toutes les eaux et en particulier
celles ne contenant quune faible quantit de matire en suspension et un nombre
relativement faible de germes (eaux traites).
Le plus gnrale, on procde une filtration par un appareil de filtration sur

membrane cette dernire est en esters de cellulose, de porosit 0,45 m, susceptible
de retenir les bactries. (RODIER et al.1997).
2) La mthode du nombre le plus probable
Cette mthode est une valuation par calcul statistique du nombre le plus
probable dunit infectieuse, aprs rpartition de linoculum dans un certain nombre
de tubes de milieu de culture liquide, et en tenant compte du nombre respectif de
culture positive ou ngative obtenue. Elle est applicable toutes les eaux et en
particulier les eaux brutes, riches en matire en suspension et en nombre lev de
germes. (RODIER et al.1997).
3) La mthode de lincorporation en glose
La mthode est frquemment utilise pour la recherche des bactries arobies

reviviables, elle consiste mlanger dans une boite de Ptri 1 ml dchantillon (ou ses
dilution) et un volume de milieu glos, fondu et ramen une temprature de 45C
environ. (RODIER et al.1997).
VII. Facteurs influants la fiabilit des analyses bactriologiques
Plusieurs facteurs peuvent influencer lanalyse bactriologique,

parmi lesquels:
Equipements: devraient rpondre aux normes.
Matriel de laboratoire: Qualit des ractifs, qualit des milieux de culture,

verrerie, flacons lavs....
Prlvements : doit tre adquat, bien conserv, bien identifi et bien

transport...
BHSA FSTF Page 24
Le contrle de la qualit de ces facteurs constituera lobjectif de la deuxime partie de

ce travail.
VIII. Les analyses physicochimiques :
Les analyses physicochimiques sont effectues quotidiennement

sur des prlvements au niveau de leau brute, leau dcante, leau filtre
ainsi que leau traite.
Les analyses pratiques sont les suivantes :
- L'analyse physique consiste mesurer la temprature, la turbidit, le pH et la

conductivit.
- L'analyse chimique consiste mesurer le TA, TAC, loxydabilit, duret de

leau, le chlore rsiduel et loxygne dissous.
1. Analyses physiques
a) La turbidit :
La turbidit dsigne l'tat d'un fluide trouble, opaque la lumire et/ou la

teneur des matires en suspension qui absorbent, diffusent et/ou rflchissent la
lumire.Son principe est bas sur la comparaison de lintensit de la lumire diffracte
(effet de tyndall) par lchantillon celle de rfrence dans les mme conditions
(longueur donde, angle entre le rayon incident et le rayon diffract)
La mesure de la turbidit se fait laide dun turbidimtre, elle est exprime en NTU
(nephlometric turbidity unit).
Figure 7 : turbidimtre.
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b) Temprature :
La temprature joue un rle important dans la solubilit des sels et surtout des gaz, elle
conditionne les quilibres de dissociations.
Elle agit sur la conductivit lectrique et le pH, elle influe sur la densit, la viscosit, la tension de
vapeur saturante la surface, la solubilit de gaz, les ractions chimiques et biochimiques, l'effet
catalytique des enzymes, la teneur en oxygne dissout
La temprature doit tre mesure in situ. Les appareils de mesure de la conductivit ou du pH

possdent gnralement une Sonde de temprature intgre.
c) Mesure de pH :
La mesure du pH dune eau se fait par mesure potentiomtrique laide dun ph-mtre, en
dterminant lactivit des ions hydrognes par utilisation dune lectrode de verre et dune lectrode
de rfrence au calomel plongeant dans un mme chantillon. La diffrence de potentiel existant
entre les deux lectrodes, est une fonction linaire du pH. +
On peut classer les eaux selon leurs pH suivant le tableau suivant :
Tableau1 : classification des eaux daprs leur pH
pH < 5 Acidit forte => prsence dacides minraux ou

organiques dans les eaux naturelles
pH = 7 pH neutre
7 < pH < 8 Neutralit approche => majorit des eaux de surface
5,5 < pH < 8 Majorit des eaux souterraines
pH = 8 Alcalinit forte, vaporation intense
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d) Conductivit :
Dfinition
La conductivit lectrique dune eau est la conductance dune colonne deau

comprise entre deux lectrodes mtalliques. Elle est fonction de la concentration
totale en ions, de leur mobilit, de leur valence, de leur concentration relative et de la
temprature. Lunit de conductivit est le siemens par mtre(s/m), mais dans le cas
de leau on utilise gnralement le micro siemens par centimtre (s/cm)
2. Analyses chimiques :
a. Dtermination de l'alcalinit : Dosage de TA et TAC :
L'alcalinit des eaux est essentiellement due la prsence des hydroxydes

OH-, des bicarbonates (CO32-) et des hydrognocarbonates (HCO3 --).
La dtermination du TAC permet d'valuer les teneurs en bicarbonates, en carbonates et en

hydroxydes alcalins et alcalino-terreux, la connaissance des titres alcalimtriques est essentielle pour
l'tude d'une eau et spcialement de son agressivit ou de sa tendance tre incrustante, puisque ces
deux phnomnes dpendent de l'quilibre entre l'acide carbonique et les carbonates.
b. Oxydabilit :
Oxydabilit au permanganate de potassium dit indice permanganate.
dfinition
Lindice permanganate dune eau correspond la quantit doxygne exprime en mg/l

cde par lion permanganate (MnO) et consomme par les matires oxydables contenues dans un
litre deau.
principe
Oxydation, par un excs de permanganate de potassium en milieu acide et bullition

(13min), des matires oxydables contenues dans lchantillon.
Rduction du permanganate de potassium par de loxalate de sodium et titrage en retour de lexcs

doxalate de sodium par le permanganate de potassium.
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c. Duret de leau :
dfinition
La duret totale est la concentration en ions Ca2+,Mg2+ et autres ions bivalents et

trivalents.
La duret calcique est la concentration en ion Ca2+ dune eau.
principe
Le calcium et le magnsium prsents dans leau sont complexs par lthylne

diamine ttra actique(EDTA).le noir riochromeT qui donne une couleur rouge
fonce ou violette en prsence des ions calcium et magnsium est utilis comme
indicateur pour la dtermination de la duret totale.
IX. Normes de qualit de leau de consommation humaine
Leau dalimentation humaine ne doit contenir en quantits dangereuses ni

microorganismes, ni substances chimiques nocives pour la sant; en outre, elle doit
tre aussi agrable boire que les circonstances le permettent. Les eaux
dalimentation humaine doivent satisfaire aux exigences de qualits spcifies dans le
tableau suivant:
Tableau 2: les normes de qualit de leau de consommation humaine
Paramtres Units Valeurs maximales
admissibles
Potentiel pH 6.5pH8.5
dhydrogne
Conductivit S/cm 20C 2700
Turbidit Nphlomtrique (NTU) 5
Odeur Seuil de perception 3
25C
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Saveur Seuil de perception 3
25C
Couleur relle Pt mg/l 20
Chlorure mg/l 750
Oxydabilit au KMNO4 mg O2 /l 5
Cuivre mg/l 1
Fer mg/l 0.3
Zinc mg/l 3
Potassium mg/l 12
Sodium mg/l 200
Sulfates mg /l 400
Nitrates mg/l 50
Nitrite mg/l 0,5
Ammonium mg /l 0,5
Fluorures mg /l 1,5
Plomb g/l 10
Mercure g/l 1
Cyanure g/l 70
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I. CONTROLE DE QUALITE DES PARAMETRES

ANALYTIQUES BACTERIOLOGIQUES:
Le contrle de la qualit analytique est un ensemble dactivits et de
vrification intra laboratoires qui sappliquent dune faon rgulire lensemble des
oprations dun laboratoire et qui visent sassurer que les donnes produites soient
le plus fiables possibles.
Ce contrle comporte une srie de vrification et contrle qui concernent:
contrle de lasepsie des salles de travail (qualit de lair ambiant)
contrle des appareils
contrle de la qualit des milieux de culture
contrle de lefficacit du lavage et de la strilisation de la verrerie.
RQ: les procdures de contrle analytique sont applicables avec une frquence
variable, soit quotidienne ou hebdomadaire.
1. Contrle de la salle de bactriologie:
a) Qualit de lair ambiant:
Prlvement:
Les endroits choisis pour cette valuation sont:
Rfrigrateur
Incubateurs
Surfaces de travail
Protocole analytique:
Vrification mensuelle de la qualit bactriologique de lair ambiant lors des

activits analytiques. Un rsultat infrieur 15UFC/1000cm2 est jug satisfaisant.
La mthode consiste exposer lair une boite de ptri sans couvercle et contenant le
milieu appropri, pendant une priode de temps dtermin, permettant de calculer les
bactries de lair se dposant sur une surface prcise.
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b) Qualit de surface de travail:
L entretien des surfaces de travail seffectue par un nettoyage humide. Les

surfaces de travail sont aseptises laide de solution dsinfectante avant et aprs
chaque manipulation.
La mthode dcouvillonnage:
Consiste frotter les surfaces sur une dimension donne avec un couvillon
humide et dinoculer celui-ci sur un milieu propice au dveloppement des
microorganismes
Figure 8: couvillons
Mode opratoire:
On identifie un tube pour chaque point de prlvement, on couvillonne laide

dun couvillon strile dans la solution de rinage, 4 autres surfaces de 25cm2 du
mme endroit de prlvement, en ayant soin de rincer lcouvillon dans le tube de
solution de rinage entre chaque prlvement, puis on remet lcouvillon dans la
solution de rinage et on lui coupe le tige avec des ciseaux striles.
On referme le tube et on le conserve 4C.
Pour lanalyse, on agite vigoureusement le tube contenant lcouvillon et on prlve

aseptiquement 1ml et 0,1ml de la solution de rinage afin de faire le dnombrement
par incorporation la glose MTC
2. Contrle de qualit du matriel du secteur de la bactriologie
a) Vrification des membranes filtrantes:
Vrification des caractristiques suivantes:
Bonne diffusion du milieu de culture (filtre doit tre humect aprs 15s de
contact avec le milieu de culture)
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Non diffusion du lencre du quadrill
Absence de rgion hydrophobe
b) Vrification des entonnoirs:
Les entonnoirs gradus jetables utiliss doivent tre vrifis laide dune fiole
jaug de 100ml.
Si le niveau de leau nest pas gal au trait prdtermin de lentonnoir, on rejette tout
le lot dont les entonnoirs ne sont pas conformes
c) Contrle de strilit des boites de ptri:
Les boites de ptri doivent tre striles au moment de leur utilisation au labo,
lvaluation de la strilit se fait dans le milieu de culture Plate Count Agar
Mode opratoire:
On introduit dans chaque boite de ptri de la glose Plate Count Agar, puis on
incube ces boites de ptri pendant 3jours 37C et 22C.
Sil y a une apparition des colonies, cest--dire que les boites de petit sont striles
Si non il faut prvenir le fournisseur et/ou rejeter le lot.
d) Vrification de la verrerie et des flacons de prlvement:
La verrerie (tube, erlenmeyers, flacon de prlvement...), utilise en

microbiologie doit tre exempte de tout produit bactricide aprs son lavage. On doit
sassurer quelle ne contient pas de rsidu acide ou alcalin, cause ventuelle
dinhibition de la croissance bactrienne.
Mode opratoire:
On utilise un volume dtermin de bouillon trypticase soya avec lequel, on

mouille les parois intrieures du flacon ou de la verrerie, puis on incuber 37C et
22C pendant 3jours.
Sil y a apparition de turbidit, cest--dire que le flacon est strile, sinon le flacon est
non strile, donc il faut prvenir le fournisseur ou/et jeter le lot.
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3. Contrle de qualit des milieux de culture:
Milieux dshydrats:
A chaque rception dun nouveau lot de milieu de culture, vrification
Etat physique du contenant (bien ferm, absence de dformation et prsence

danneau de scurit
Milieu non pris en masse
Date de prremption
N du lot
N du code
Milieux prpars:
Une mesure de pH et un contrle de strilit doivent tre effectu chaque

prparation de milieu de culture et inscrit dans un registre, nous valuons galement la
slectivit des milieux laide des souches de contrle positives et ngatives.
II. ANALYSE MICROBIOLOGIQUE DE LEAU
Nous avons recherch et dnombr les bactries indicatrices de contamination

au niveau des:
-Eaux brutes destines la production deau dalimentation humaine (eau la sortie

de station de prtraitement).
-Eaux traites pour lalimentation humaine (eau traite la sortie de la station de

traitement).
Leau brute est analyse en utilisant la mthode du nombre le plus probable, leau
traite est analyse en utilisant la mthode de la membrane filtrante et la mthode par
incorporation dans la glose.
1. Analyse des coliformes totaux et fcaux
Mthode de la membrane filtrante
La technique normalise pour lanalyse des eaux destines la consommation

humaine est la filtration sur membrane. 100ml deau bien homognise sont filtres
aseptiquement sur une membrane de nitrocellulose de porosit 0,45um. Cette
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membrane est mise incuber sur un milieu slectif des coliformes. Le milieu utilis
est le tergitol7 TTC
Lincubation de ce milieu 37Cependant 24h permet le dnombrement des

coliformes
L incubation 44C0,5C conduit au dnombrement des coliformes fcaux.
Figure 9 : technique de la membrane filtrante
Milieu de culture:
Le tergitol 7 inhibe la croissance des microorganismes Gram+, limite

lenvahissement par les proteus et favorise la rcupration des coliformes.
Lacidification due au mtabolisme du lactose, en prsence de lindicateur color le
bleu de bromothymol permet dnumrer et didentifier les coliformes caractristiques
de couleur jaune et dun halo jaune.
Le TTC ajout (chlorure de 2-3-5 Triphnyl- Tetrazolium), permet la reconnaissance

rapide dE.coli.
Figure12 :tergitol 7
Incubation:
Pour les coliformes fcaux, lincubation se fait une temprature de 44C

pendant 24h.
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Les boites des coliformes totaux sont incubes 37C pendant 48h.
Lecture des rsultats:
Aprs incubation, sont considres comme positives, les boites ayant des
colonies caractristiques de couleur jaune avec un halo jaune.
Par convention, chaque colonie est considre comme ayant t engendre par un
microorganisme.
Figure13 : rsultats aprs incubation
RQ: les membranes dnombres sont ceux qui sont compris entre 20 et 80 colonies.
Mthode du nombre le plus probable:
Pour leau brute, il sagit densemencer une prise dessai de lchantillon dans
une srie de tube de bouillon lauryl et dincuber ensuite ces tubes pendant 48h
37C.
Mode opratoire:
Prparation des dilutions
On prpare sur un portoir le nombre de tubes striles correspondant au nombre

de dilutions choisies, on introduit dans chacun deux 9ml deau distill, ou eau
distille strile. Puis on agite lchantillon afin dobtenir une rpartition homogne
des microorganismes et on transfre immdiatement a laide dune pipette strile
1ml de cet chantillon homognis dans le premier des tubes contenant 9ml deau
distill. Cette dilution reprsente la dilution 10-1 avec une nouvelle pipette strile, on
transfre 1ml de cette dilution, homognis, dans le deuxime tube10-2. Et ainsi de
suite.
a-Test prsomptif
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Mode opratoire
Dans 9 tubes contenants le milieu de culture, on transfre avec une pipette

strile, respectivement 10ml, 1ml, 0,1ml de lchantillon bien homognis, et on
mlange le contenu de ces 9 tubes de faon obtenir une rpartition homogne de
linoculum et du milieu. Finalement les tubes sont incubs 37C pendant 48 h. Les
tubes prsentant un trouble avec du gaz dans la cloche sont positifs.
b-Test confirmatif
On procde la confirmation de chaque culture provenant des tubes ayant

donn une raction positive, en ensemenant laide dune anse boucle le bouillon
lactos au vert brillant pour les coliformes totaux et lECmedium pour les coliformes
fcaux.
Les coliformes totaux sont incubs 37C pendant 48h
Les coliformes fcaux sont incubs 44C pendant 24h
Rsultats
Les tubes prsentant un trouble avec dgagement du gaz dans la cloche sont
positifs;
Toutes les bactries ventuellement prsentes sont rvles par des proprits
caractristiques qui leur sont propres. (Exemple pour les coliformes leur prsence est
rvle par du trouble du milieu et la prsence de gaz dans la cloche). On compte
ensuite le nombre de sries de tubes positifs et le nombre de tubes ngatifs et on
obtient les rsultats en extrapolant sur une table statistique appele: table de MAC
CRADY (voir annexe)
Ces microorganismes sont recherchs dans leau brute en utilisant la mthode du NPP
Le nombre de coliformes totaux ou fcaux par 100ml dchantillon est donn par
lexpression suivante:
N=NPP/t
Avec: NPP:nombre le plus probable dans la table de MAC CRAY
t: taux de dilution correspondant la dilution la plus forte retenue
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2. Analyse des streptocoques fcaux
La filtration sur membrane 100mL deau est la plus gnralement pratique

pour leau traite. Le milieu le plus utilis est la glose de slanetz (voir annexe),
utilisant le TTC pour la caractrisation des colonies. Lincubation a lieu 37C
pendant 48h.
Mthode de la membrane filtrante:
Mode opratoire:
Le mode opratoire est le mme que celui des coliformes. Un volume de

100ml est filtr aseptiquement sur une membrane filtrante strile.
Milieu de culture
Le slanetz permet dinhiber la croissance des microorganismes Gram-.
Le TTC ajout permet de mettre en valeur des colonies de couleur rouge marron.
Lecture des rsultats
Toutes les colonies prsentant une couleur rouge, rose marron sont
considres positives, don il est indispensable de confirmer la prsence des
streptocoques fcaux par un test confirmatif.
Mthode du nombre le plus probable:
Milieu de culture
On utilise le bouillon de Roth pour le test prsomptif et le bouillon Litsky pour le test
confirmatif.
a-test prsomptif
Incubation
Les tubes sont incubs 37C pendant 48h
Rsultat
Les tubes prsentant un trouble avec dpt violet au fond sont positifs.
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3. Analyse des bactries htrotrophes arobies anarobies 22 et 37C

(BHAA)
La recherche se fait par inclusion en glose standard plate count agar (PCA)
(voir annexe). Pour lnumration des micro-organismes reviviables 37C, on
ensemence 1ml deau. Sil ya prsomption de forte contamination, il est possible
densemencer des volumes plus rduits.
Pour le dnombrement 20C (micro-organismes msophiles), on incorpore les

mmes volumes que prcdemment en milieu PCA
Milieu de culture
La glose PCA est utilise pour le dnombrement des germes arobies

anarobies totaux dans les eaux.
Mode opratoire
On liqufie la glose vers 45-50C, on place 1ml de leau tester dans des
boites de ptri striles, puis on coule la glose fondue sur ces dernires, et on les laisse
solidifier, aprs une bonne agitation. Lincubation se fait :
22C pendant 72h.
37C pendant 24h.
Le dnombrement des colonies est effectu par un compteur des colonies

affichage numrique. Seules les boites prsentant entre 30 et 300 colonies sont prises
en compte.
Le rsultat est exprim en unit formant colonie (UFC)/ml
N=nombre de colonies dnombres/volume dchantillon analyse en ml
4. Mthode de recherche de clostridiums:
Aprs destruction des formes vgtatives par chauffage 80C, lchantillon est
ensemenc sur la glose TTc (voir annexe), et on incube dans des conditions
danarobiose. La prsence de clostriduim se traduit par la formation de sulfure de fer
donnant des colonies noires aprs incubation.
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Mode opratoire
On introduit 100ml dchantillon deau traite dans un flacon strile, on place

ce flacon dans un bain marie bouillant (80C) pendant 10 min, puis on le refroidit
47C.
On filtre sur une membrane strile (de 0,2m de porosit) 100ml chantillon deau
traite dont on a prpar et on dpose la membrane sur la boite de ptri, face retourne
sur la glose, en vitant toute incorporation dair.
On place la boite prpare dans la jarre danarobiose. Puis on lincube 37C

pendant 48h.
On fait la lecture aprs 48h, en considrant toute colonie noire comme rsultat
dune spore de bactrie anarobie sulfito-rductrice.
III. Evolution du nombre de bactries indicatrices de

contamination au cours des tapes de traitement
Pour sassurer de lefficacit du traitement effectu lONEP, nous avons
ralis des analyses microbiologiques de leau durant les diffrentes tapes de
traitement.
Donc nous avons prlev 2 chantillons, en respectant les conditions

dchantillonnage:
chantillon deau brute (entre de la station de

traitement)
chantillon deau traite (sortie de la station de

traitement)
Ensuite nous les avons analyss selon les mthodes dcrites prcdemment
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I. RESULTATS DU CONTROLE DE QUALITE DES

PARAMETRES ANALYTIQUES:
1. Rsultat du Contrle de la salle de bactriologie
a) Contrle des surfaces de travail (1fois/mois/place)
Tableau 4: rsultat du contrle de la salle de bactriologie
Lieux Point de Date de Heure Rsultats Mthodes Conformit

contrle contrle de bactriologiques utiliss
contrle en UFC/25cm2
Paillase1 17/04/11 11H00 1 Ecouvillonnage C
Paillase2 17/04/11 11H00 1 Ecouvillonnage C
Rfrigrateur 17/04/11 12H00 2 Ecouvillonnage C
Etuve 37C 17/04/11 12H07 0 Ecouvillonage C
Etuve 44C 17/04/11 12H13 6 Ecouviillonage C
Rsultats attendus:
<25UFC/25cm2 conforme
>25UFC/25cm2 non conforme
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b) Contrle de lair ambiant;(1fois/mois par point)
Tableau 5: rsultat du contrle de lair ambiant
Lieux Point de Date de Heure de Rsultats en Conformit

contrle contrle contrle UFC
/100cm2
Salle P1 23/04/11 11H00 11 c

bactriologique
Rsultats attendus:
<15UFC/1000cm2 conforme
>15UFC/1000cm2 non conforme
c) Contrle de la strilit de la verrerie et des flacons:
Les conditions aseptiques sont fortement demandes dans la bactriologie, on

est donc oblig dutiliser des flacons, verrerie.... striles.
La lecture aprs incubation, de la verrerie contenant de la glose MTC, montre

quelles sont toutes ngatives et cela indique que la verrerie a t strilise
correctement
d) Contrle de strilit des milieux de culture:
Les boites de ptri et les tubes contenant les milieux de culture tests, ne
prsentent ni trouble ni changement de couleur, cela montre que la distribution des
milieux de culture dans les boites a t faite dans des conditions aseptiques.
e) Contrle de temprature des appareils:
Daprs le tableau (voir annexe), la temprature varie dans lintervalle de la

norme, ce qui nous assure des conditions thermiques convenables pour lincubation.
II. Rsultat des analyses microbiologiques de leau:
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1. Bactries indicatrices de la contamination microbienne dans leau brute
Coliformes totaux, fcaux et streptocoques fcaux:
Au niveau de leau brute, nous avons obtenu :
Les Coliformes totaux: 75 colonies.
Les Coliformes fcaux: 150 colonies.
Les Streptocoques fcaux: 75colonies.
Tableau 6: rsultats des tests prsomptifs et confirmatifs pour les coliformes totaux, fcaux et
les strepto fcaux
Nombre des tubes positifs Rsultats
Test prsomptif Test confirmatif
10 1 10-1 10 1 10-1 dilution Npp Rsultats
CT 3 3 2 3 1 1 1 75 75
CF 3 3 2 3 2 1 1 150 150
SF 3 3 2 3 1 1 1 75 75
2. Bactries indicatrices de la contamination microbienne dans leau traite:
Coliformes totaux, fcaux; strepto fcaux et les clostridiums
Les rsultats obtenus sont ngatifs; il ny a aucune colonie que ce soit dans les
boites des CF et SF ou celles des CT et clostridiums.
Tableau 7: rsultats de la recherche des CT, CF, SF et C dans leau traite par la mthode de
la membrane filtrante
Germes Le nombre des germes
CT 0 CT/100ml
CF 0 CF/100ml
SF 0 SF/100ml
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CLOSTRIDUIM 0 C/100ml
Les bactries reviviables (BHAA):
Les rsultats obtenus sont ngatifs; il ny a aucune colonie que ce soit dans les
boites incubes 22C ou 37C.
Tableau 8: rsultats obtenus lors de la mthode dincorporation en glose
Eau traite tmoin
BHAA 22C 0UFC/ml 0UFC/ml
BHAA 37C 0UFC/ml 0UFC/ml
Selon les rsultats obtenus, on constate une chute du nombre de bactries indicatrices
de la contamination des eaux, au cours des tapes de traitement.
Le nombre des CF, CT et SF passe respectivement 75, 150 et 75 colonies dans leau
brute et un nombre nul dans leau traite
Cette importante diminution remarque, grce au processus de chloration, est tmoin

du rendement lev du traitement.
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Le contrle de la qualit analytique, effectu au laboratoire de lONEP, est trs

satisfaisant. La ralisation de ce contrle au cours de lanalyse bactriologique, tait
indispensable pour nous garantir la fiabilit des rsultats de lanalyse.
Lvaluation de la charge bactriologique des eaux brutes par lanalyse

bactriologique permet dapprcier le type de traitement quil faut mettre en uvre.
Les rsultats que nous avons obtenus montrent que leau brute, en sortie de la station
de prtraitement de oued Sebou, une concentration en CF, CT et SF
respectivement de 75 ,150 et 75 germes par 100ml. Donc il sagit dune eau
contamine par les germes de pollution.
En effet, il ne sagit pas dun signal dalarme, mais plutt, dune valuation de
limportance de la pollution fcale, dans le but dapprcier le traitement quil faut
mettre en uvre. En effet, quand une eau nest pas apte tre distribue comme eau
potable, on doit y remdier par un traitement, le type de traitement appliquer dpend
de la charge bactrienne de cette eau.
Leau brute doit subir un traitement pour la rendre potable. Ce type de

traitement consiste passer leau via une chane de traitements au niveau de la station
de traitement ain noukbi, dans laquelle plusieurs tapes sont mises en uvre pour
liminer dabord mcaniquement la matire en suspension dans leau laide dun
BHSA FSTF Page 46

procd physico-chimique, puis dtruire ou inactiver les microorganismes par un

autre procd de dsinfection
Enfin, on peut dire que lanalyse bactriologique constitue un contrle prventif

du danger mais, elle reste encore une analyse dindicateurs, dont il convient de mettre
en uvre dautres procds chimiques, physiques et microbiologiques pour sassurer
de la potabilit des eaux avant sa distribution, pour quelles soient bonnes et
incapables de nuire la sant du consommateur.
BENABDALLAH S., 2000. Evaluation de qualit bactrienne des eaux. Germes

rechercher selon le type et lusage de leau. ONEP. Rabat, 3-21.
JEROME J.P., JAMES T.S., STEPHEN L.2004 : MICROBIOLOGIE. DUNOD,

Sinauer associate, 850-853.
REGNAULT J.P. 1990 : MICOBIOLOGIE GENERALE. Dacarie Vigot, 599-

601.
RODIER T., BAZIN C. , BROUTIN JP., CHAMPSAUR H., RODI L. 1997 :

Analyse de leau : Eaux naturelles , Eaux Rsiduaires ,Eaux de mer. Dunod.
Paris, 753-771 ; 1107-1117.
www.onep.org.ma.
Documents et archives de lONEP.
BHSA FSTF Page 47

Tergitol-7 agar
Peptone pancratique de viande.....................................................................10g/l
Extrait de viande.............................................................................................5g/l
Extrait autolytique de levure............................................................................6g/l
Lactose.............................................................................................................20g/l
Tergitol -7........................................................................................................0,1g/l
Bleu de bromothymol.....................................................................................0,05g/l
Agar agar bactriologique..............................................................................10g/l
Glose Slanetz:
Tryptose.........................................................................................................20g/l
Extrait autolytique de levure............................................................................6g/l
glucose.............................................................................................................2g/l
Phosphate di potassique....................................................................................4g/l
Azide de sodium...........................................................................................0,4g/l
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Glose PCA
Tryptose.........................................................................................................5g/l
Extrait de levure..........................................................................................2,5g/l
Glucose.............................................................................................................1g/l
E.C.Mdium
Tryptose.........................................................................................................20g/l
lactose.............................................................................................................5g/l
Sels biliaires n3..............................................................................................1,5g/l
Phosphate dipotassique....................................................................................4g/l
Phosphate monopotassique...................................................................................1,5g/l
Chlorure de sodium.................................................................................................5g/l
Lauryl sulfate de sodium
Tryptose................................................................................................................20g/l
lactose....................................................................................................................5g/l
Phosphate dipotassique.........................................................................................1,5g/l
Phosphate monopotassique...................................................................................4g/l
Chlorure de sodium..............................................................................................1,5g/l
Lauryl sulfate de sodium........................................................................................5g/l
Bouillon lactos bili au vert brillant
Tryptone................................................................................................................10g/l
Bile de boeuf bactriologique...............................................................................20g/l
Lactose..................................................................................................................10g/l
Vert brillant....................................................................................................0,0133g/l
Milieu de Rothe
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Tryptone................................................................................................................45g/l
Extrait de viande..................................................................................................7,5g/l
Glucose de soduim..............................................................................................7,5g/l
Azide de sodium.................................................................................................0,2g/l
Milieu litsky
Poly peptone........................................................................................................20g/l
Glucose................................................................................................................5g/l
Phosphate dipotassique......................................................................................2,7g/l
Phosphate monopotassique................................................................................2,7g/l
Azide de sodium..........................................................;....................................0,3g/l
Ethyl-violet..................................................................................................0,0005g/l
Tableau: rsultats du contrle de la temprature des tuves et des rfrigrateurs
Mois Jours Etuve Etuve 37C Etuve 44C

22C
(37 1C) (441C)
(221C)
TC TC TC TC Rfrigrateur1 Rfrigrateur II
1 2 1 2 (41C) (41C)
Avril 20 23 35 37 44 43 4 3
Avril 21 22,5 36 35,5 44 44 4 3
Avril 22 22 35,5 36 44,5 43,5 4 3
Avril 23 22 36 36,5 45 44,5 3,5 4
Avril 24 22,5 35,5 36,5 44 43,5 3 4
Avril 25 23,5 36 36 44 45 3 4
BHSA FSTF Page 50

Avril 26 22,5 36 37 43,5 44 3 4
Avril 27 22 36 36,5 44 44 4 4
Avril 28 23 35 37 44,5 44 4,5 4
CF : coliformes fcaux
CT : coliformes totaux
SF : streptocoques fcaux
UFC : unit formant colonies
BHAA : bactrie htrotrophe arobie anarobie
C : conforme
PCA : Plat count agar
BHSA FSTF Page 51

Controle de La Qualite Analyti - Tadlaoui Habibi Houda

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PROJET DE FIN DETUDES

Contrle de la qualit analytique des paramtres

Devant le jury compos de:

Au terme de ce travail, jaime adresser mes plus sincres remerciements

A MONSIEUR SALEM DIOURI

A MADAME FATIMA FADIL

A MM.FOUZIA ANNOUH, MM.KELTOUM ALAMI , MR.DRISS

A TOUTE PERSONNE qui a particip de prs ou de loin pour

BHSA FSTF Page 2

II. Les diffrents types de pollution.............................................................13

III. Les maladies hydriques............................................................................15

IV. Le prtraitement et traitement de leau brute.......................................16

a. Dgrillage (traitement physique)................................................17

d. Filtration sur sable.....................................................................19

BHSA FSTF Page 3

V. Contrle bactriologique de leau......................................................20

d. Bactries htrotrophes reviviables..................................................22

2. Prlvement et conservation des chantillons...................................23

VI. Mthodes danalyses bactriologiques des eaux................................23

1. Mthode de la membrane filtrante....................................................24

2. Mthode du nombre le plus probable................................................24

3. Mthode de lincorporation en glose................................................24

VII. Facteurs influants la fiabilit des analyses bactriologiques...........24

VIII. Analyses physico-chimiques................................................................25

IX. Normes de qualit de leau de consommation humaine...................28

I. Contrle de la qualit des paramtres analytiques bactriologiques..31

1. Contrle de la salle bactriologie............................................................31

BHSA FSTF Page 4

a. Qualit de lair ambiant................................................................................31

b. Qualit de surface de travail.........................................................................32

2. Contrle de qualit du matriel du secteur de la bactriologie..................33

3. Contrle de la qualit des milieux de culture ........................................34

II. Analyses microbiologiques de leau..............................................................34

1. Analyse des coliformes totaux et fcaux.......................................................35

2. Analyse des streptocoques fcaux.................................................................38

3. Analyse des bactries htrotrophes arobies anarobies 22 et 37C....39

4. Analyse des Clostriduims......40

I. Rsultat du contrle de qualit des paramtres analytiques.....................42

II. Rsultat des analyses microbiologiques de leau........................................43

Liste dabrviation ....51

BHSA FSTF Page 5

BHSA FSTF Page 6

Des scientifiques nous avertissent du danger de nouvelles bactries pathognes,

A cause de cette pollution, lutilit de procder des contrles frquents et

A lgard des autres pays, il existe au Maroc des laboratoires de contrle et de

BHSA FSTF Page 7

Le travail de ce stage comporte de deux tapes :

Contrle de la qualit des paramtres analytiques du laboratoire

BHSA FSTF Page 8

Loffice national de leau potable (ONEP) est un tablissement caractre

La cration de LONEP par dahir a t en 1929 sous le nom de REIP (Rgie

Planifier: Lapprovisionnement en eau potable du Royaume et la

Etudier: Lapprovisionnement en eau potable et assurer lexcution des

Grer: La production deau potable et assurer la distribution pour le

Contrler: La qualit des eaux produites et distribues et la pollution des

Assister: En matire de surveillance de la qualit de leau.

Participer : Aux tudes, en liaison avec les ministres intresss, des

Pour les contrles, lONEP dispose dun laboratoire central et de 43

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Loffice national de leau potable-Fs

Lalimentation en eau potable de la ville de Fs est assure par lONEP et la

Le complexe de production doued Sebou:

La station de prtraitement situe sur loued Sebou: sa mise en uvre remonte

La station de traitement Ain Noukbi. Edifie le 19mars 1987. La station assure: