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TESIS
para obtener el grado de Maestro en Ciencias Nucleares
PRESENTA:
Fernando Sanchez Lara
DIRECTOR DE TESIS:
Dr. Eduardo Manzanares Acuna
1. Introduccion 1
2. Marco Teorico 3
2.1. Diabetes Mellitus . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3
2.1.1. Diabetes tipo 1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3
2.1.2. Diabetes tipo 2 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4
2.1.3. Diabetes gestacional . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4
2.1.4. Diabetes autoinmune latente en adulto . . . . . . . . . . . . . . . . 4
2.1.5. Estructura y sntesis de la insulina . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
2.1.6. Etiologa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10
2.1.7. Fisipatologa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11
2.1.8. Homeostasis de la glucosa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11
2.1.9. Dislipidemia y diabetes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12
2.1.10. Metabolismo de Protenas y Diabetes . . . . . . . . . . . . . . . . . 12
2.1.11. Signos y sntomas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12
2.1.12. Diagnostico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13
2.1.13. Complicaciones derivadas de la enfermedad . . . . . . . . . . . . . . 13
2.1.14. Tratamiento integral . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15
2.2. Etnofarmacologa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17
2.2.1. Tratamiento etnobotanico para DM . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17
2.3. Principios activos de las plantas medicinales . . . . . . . . . . . . . . . . . 18
2.3.1. Heterosidos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19
2.3.2. Polifenoles . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19
2.3.3. Terpenoides . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20
2.3.4. Alcaloides . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20
2.4. Extractos de plantas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 21
2.5. Analisis Elemental . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22
2.5.1. Espectroscopa de rayos x . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23
2.6. Cromatografa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24
2.6.1. Tipos de cromatografa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24
3
4 INDICE GENERAL
3. Metodologa 27
3.1. Lugar de investigacion . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27
3.2. Extractos botanicos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27
3.2.1. Limpieza del material vegetal . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27
3.2.2. Material . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27
3.2.3. Obtencion de extractos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28
3.3. Analisis elemental . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28
3.3.1. Preparacion del material vegetal . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28
3.3.2. Material . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29
3.3.3. Medicion . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29
3.4. Determinacion de metabolitos secundarios . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29
3.4.1. Flavonoides . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29
3.4.2. Sesquiterpenlactonas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30
3.4.3. Esteroides y terpenos . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30
3.4.4. Quinoninas . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 30
4. Analisis de resultados 31
4.0.5. Composicion y metales pesados . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 31
Captulo 1
Introduccion
1
2 CAPITULO 1. INTRODUCCION
Marco Teorico
3
4 CAPITULO 2. MARCO TEORICO
Sntesis de la insulina
El gen que codifica para la insulina se encuentra localizado en el brazo corto del
cromosoma 11, locus 11p 15. El ADN aporta el patron para su trascripcion en ARN
mensajero (ARNm) con todas las instrucciones para la sntesis de la insulina, esto sucede
en el nucleo de la celula. Posteriormente el ARNm es exportado al citoplasma y en el
retculo endoplasmatico rugoso ocurre la traduccion de este a preproinsulina. El prefijo
pre de la preproinsulina hace referencia a un peptido senal de 16 aminoacidos que se
escinde de la cadena, por una reaccion proteoltica que ocurre en las cisternas del retculo
endoplasmatico. La molecula resultante recibe el nombre de proinsulina, que es realmente
la molecula precursora de la insulina. La proinsulina se libera a traves de la membrana del
retculo endoplasmatico al Aparato de Golgi, pero antes de su liberacion, la pro-insulina se
pliega para formar los enlaces disulfuros que estan presentes en el dmero de la insulina. El
termino pre se refiere a un peptido de conexion o peptido C que une las cadenas A y
B del dmero de la insulina. La membrana del Golgi se engloba y encapsula la molecula de
proinsulina en una vescula o granulo secretor que recorre los discos aplanados del complejo
de Golgi, en este recorrido se evalua que la molecula este correctamente sintetizada y
que su juego de aminoacidos sea el dictado por el codigo genetico del ARNm. Una vez
verificada la secuencia de la molecula, la proinsulina se almacena en granulos secretores
sobre el Aparato de Golgi. Durante este proceso de concentracion, dos tipos de enzimas
desdoblan el peptido C: una endoproteasa dependiente de Ca2+ con actividad similar a
6 CAPITULO 2. MARCO TEORICO
Secrecion de la insulina
Interrelaciones metabolicas en la DM
En la digestion, los carbohidratos que provienen de la dieta son transformados en
glucidos de seis atomos de carbono (principalmente glucosa) mediante procesos mecani-
2.1. DIABETES MELLITUS 9
cos y qumicos; estos ultimos corresponden a reacciones de hidrolisis catalizadas por las
amilasas (salival y pancreatica) y la amilo 1,6-glucosidasa. La elevacion de la glicemia,
despues de la digestion de alimentos ricos en carbohidratos, estimula la secrecion de in-
sulina en el pancreas, la cual al unirse a su receptor en las celulas adiposas y de musculo
esqueletico activa la cascada de senalizaciones que permite la entrada de glucosa a estas
celulas, normalizando los niveles en sangre.
En el individuo no diabetico, la glucosa es utilizada para la sntesis de glicogeno hepati-
co y muscular mediante un proceso es denominado glicogenesis, una de las enzimas claves
de esta ruta es la glicogeno sintetasa, la cual es regulada positivamente por la insulina.
Cuando los niveles de glucosa disminuyen a nivel plasmatico, el glicogeno es utilizado
para la sntesis hepatica de glucosa, la cual es liberada a la circulacion para restablecer la
glicemia. Este proceso se denomina glicogenolisis y es activado por la hormona glucagon,
secretada por las celulas a del pancreas. El glucagon, a traves del cAMP activa al enzima
glicogeno fosforilasa e inhibe al glicogeno sintetasa, lo que promueve la glicogenolisis. En
los estados de ayuno temprano la glucosa proveniente de la glicogenolisis hepatica ingresa
a las celulas que la requieren como fuente primaria de energa. Una de estas celulas son los
eritrocitos, a ellos ingresa la glucosa a traves del transportador Glut 1 y es utilizada para
la sntesis de ATP mediante la glicolisis, en este proceso se genera lactato y NAD+. El
lactato es liberado a la circulacion sangunea e ingresa a los hepatocitos donde puede ser
transformado nuevamenteen glucosa por medio de gliconeogenesis. Esta glucosa puede ser
almacenada en forma de glicogeno, utilizada en la sntesis de aminoacidos glucogenicos o
para la sntesis de lpidos por medio de la lipogenesis.
En los individuos que padecen diabetes mellitus tipo I, la insulina es deficiente co-
mo consecuencia de la destruccion de las celulas beta. Debido a que las celulas alfa del
pancreas son funcionales en estos pacientes, ellos pueden producir el glucagon y por tanto
realizar glicogenolisis. Los pacientes no presentan problemas para hacer sntesis de glu-
cosa por medio de la gliconeogenesis. Sin embargo, la baja produccion de insulina trae
como consecuencia una disminucion del numero de transportadores de glucosa Glut 4 en
el musculo esqueletico y en las celulas adiposas. El resultado es entonces una hiperglice-
mia persistente despues de la ingestion de alimentos ricos en carbohidratos. El organismo
del diabetico responde ante los bajos niveles de glucosa en las celulas dependientes de
insulina, como si estuviera en un estado de ayuno prolongado o inanicion, movilizando
sus reservas de lpidos y protenas para obtener la glucosa, lo cual agrava la hiperglicemia.
En el caso del tejido adiposo este empieza a movilizar sus lpidos, los acidos grasos y
el glicerol liberados se unen a lipoprotenas plasmaticas y son transportados al hgado. El
metabolismo incrementado de los acidos grasos y la disminucion de la lipogenesis, como
producto del deficit de NADPH, da origen al incremento de la sntesis de los cuerpos
cetonicos acido a-Hidroxibutirato, acetoacetato y acetona, a partir del Acetil CoA. Las
altas concentraciones de cuerpos cetonicos consumen progresivamente las reservas alcali-
nas, desencadenando una acidosis metabolica. Debido a que la insulina interviene en la
10 CAPITULO 2. MARCO TEORICO
captacion de los trigliceridos en las celulas, una secrecion deficiente de esta hormona se
relaciona con la hipertrigliceridema caracterstica en estos pacientes.
Adicionalmente, la ausencia de insulina disminuye la entrada de los aminoacidos a
las celulas musculares, lo que incrementa el catabolismo de sus protenas. Los aminoaci-
dos glucogenicos liberados por la proteolisis quedan disponibles para la gluconeogenesis
hepatica lo que genera un balance negativo del nitrogeno, que conduce al agotamiento de
las protenas y al desgaste tisular.
2.1.6. Etiologa
Entre los principales factores de riesgo para la diabetes se encuentran la obesidad, mala
alimentacion, falta de actividad fsica, edad avanzada, historia familiar de diabetes, origen
etnico, nutricion inadecuada en el embarazo, etc. Es una enfermedad multifactorial cuyos
factores de riesgo se clasifican en modificables y no modificables. Los factores modificables
o ambientales son la obesidad, el sedentarismo, manejo inadecuado del estres, habitos
inadecuados de alimentacion, presion arterial alta, trigliceridos elevados, etc., Esto indica
que a traves de cambios en el estilo de vida o por intervencion farmacologica, se puede
disminuir la probabilidad de que la enfermedad se manifieste o bien se retarde su aparicion
y se modifique la evolucion desfavorable hacia complicaciones. Entre los facto- res no
modificables, geneticos o hereditarios se puede mencionar la ascendencia hispanica, edad
2.1. DIABETES MELLITUS 11
2.1.7. Fisipatologa
La obesidad morbida se asocia con el desarrollo de diferentes enfermedades, entre las
que destacan la diabetes y la hipertension. La obesidad es una consecuencia de la ingesta
continua y desregulada de alimento rico en contenido energetico que no es aprovechado
como consecuencia de una baja actividad metabolica y/o sedentarismo, por lo tanto, se
almacena y acumula en tejido graso. Durante esta situacion, el pancreas tiene una hiper-
actividad por la concentracion alta y constante de glucosa en sangre, con una secrecion
de insulina elevada para conservar la glucemia en niveles normales. Las causas que des-
encadenan la diabetes tipo 2 se desconocen en el 70-85 % de los pacientes; al parecer,
influyen diversos factores como la herencia poligenica (en la que participa un numero in-
determinado de genes), junto con factores de riesgo que incluyen la obesidad, dislipidemia,
hipertension arterial, historia familiar de diabetes, dieta rica en carbohidratos, factores
hormonales y una vida sedentaria. Los pacientes presentan niveles elevados de glucosa y
resistencia a la accion de la insulina en los tejidos perifericos. Del 80 al 90 % de las per-
sonas tienen celulas beta sanas con capacidad de adaptarse a altas demandas de insulina
(obesidad, embarazo y cortisol) mediante el incremento en su funcion secretora y en la
masa celular. Sin embargo, en el 10 al 20 % de las personas se presenta una deficiencia
de las celulas beta en adaptarse, lo cual produce un agotamiento celular, con reduccion
en la liberacion y almacenamiento de insulina. La diabetes tipo 2 se asocia con una falta
de adaptacion al incremento en la demanda de insulina, ademas de perdida de la masa
celular por la glucotoxicidad. Sin embargo, el receptor a insulina presenta alteraciones
en su funcion. Cuando la insulina se une a su receptor en celulas del musculo, inicia las
vas de senalizacion complejas que permiten la translocacion del transportador GLUT4
localizado en vesculas hacia la membrana plasmatica para llevar a cabo su funcion de
transportar la glucosa de la sangre al interior de la celula.
umbral renal de filtracion, incrementa la excrecion de glucosa por orina (glucosuria), junto
con la glucosa se pierde agua y se arrastra sales, lo que promueve el exceso del volumen
de orina dando lugar a la poliuria. Como consecuencia de estas perdidas el paciente sufre
deshidratacion, el organismo trata de compensar esto por medio de reflejos fisiologicos
como la sed. Al incremento excesivo de la sed se le denomina polidipsia. La percepcion
celular en los pacientes diabeticos es muy similar a la de un individuo en ayuno, estan
activadas las vas catabolicas, lo que promueve la perdida de peso, pero a la vez se activa
la senal de apetito en el hipotalamo, por esta razon el paciente diabetico suele presentar
apetito excesivo conocido como polifagia. Hay pacientes que pueden presentar otros tipos
de signos y sntomas como vision borrosa, fatiga, infecciones, vaginitis, infecciones de vas
urinarias, heridas que no cicatrizan, etc.
2.1.12. Diagnostico
Para el diagnostico se puede utilizar cualquiera de los siguientes criterios [6]:
Sntomas clasicos de diabetes sin causa aparente mas una glucemia casual medida
en plasma venoso que sea igual o mayor a 200 mg/dL. Casual se refiere a cualquier
hora del daa sin importar la hora en que realizo la ultima comida.
Glucemia de ayuno medida en plasma venoso que sea igual o mayor a 126 mg/dL.
El ayuno debe ser por lo menos de ocho horas.
Glucemia medida en plasma venoso mayor o igual a 200 mg/dL dos horas despues de
haber recibido una carga de 75g de glucosa (prueba de tolerancia oral a la glucosa)
Complicaciones cronicas
Microvasculares: Estan relacionadas con el dano endotelial en la microcirculacion,
los trastornos se presentan en forma de neuropata, nefropata y retinopata. El
dano celular ocasionado por estas alteraciones puede dar lugar a insuficiencia renal
cronica hasta en un 40 % de los pacientes as como a ceguera. Se estima que hasta
70 % de los diabeticos sufre alguna forma clnica de neuropata [7].
Tratamiento nutricional
No existe una dieta ideal , ni unica para la DM, para otorgarse un plan de alimentacion
deben considerarse las caractersticas personales y las circunstancias de salud, trabajo,
familia, etc. Las metas del cuidado nutricional para las personas con DM son controlar
y prevenir complicaciones, estas metas deben determinarse de forma individual, aunque
van dirigidas hacia el control de glucosa sangunea y lpidos. No existe una dieta para
16 CAPITULO 2. MARCO TEORICO
diabetico, pero existen recomendaciones para la planeacion de las comidas avalados por
la Asociacion Americana de Diabetes [10].
Ejercicio
Antes de recomendar la realizacion de cualquier ejercicio a un paciente con DM, se
debe considerar el tipo de actividad fsica que realiza habitualmente, las limitaciones que
pudiera tener para la realizacion de este, incluyendo la edad y las enfermedades secunda-
rias a DM. El ejercicio estructurado proporciona importantes beneficios a las personas con
DM ya que mejora la captacion de glucosa por parte de los tejidos y aumenta la reserva
de glucogeno muscular y hepatico, controlando as los dos mecanismos inductores de la
hiperglucemia.
Medicamentos
Actualmente existen diferentes clases de medicamentos orales: secretagogos de insulina,
sensibilizadores de insulina e inhibidores de -glucosidasa, cada uno con mecanismo de
accion diferente. La eleccion del medicamento debe individualizarse y depende de factores
como la edad, peso, de los niveles de hiperglucemia, presencia de otras enfermedades,
aceptacion y educacion del paciente.
Secretagogos de insulina
Sulfonilureas: Ayudan a reducir la hiperglucemia al mejorar la sensibilidad de las
celulas beta pancreaticas a los niveles de glucosa en sangre, con lo cual aumenta
la secrecion de insulina. Se absorben va gastrointestinal y alcanzan un nivel ade-
cuado en plasma aproximadamente entre 2 y 4 horas despues de tomarla. A este
grupo pertenecen la Tolbutamida, Clorpropamida, Glibenclamida, Glipicida, Gli-
mepirida y tienen como efectos adversos la hipoglucemia y el aumento de peso de
aproximadamente de 2 a 5 kg.
Sensibilizadores de la Insulina
Biguanidas: Estos medicamentos no se unen a protenas plasmaticas, no requieren
biotransformacion y se eliminan por va renal. La metformina forma parte de este
grupo y se considera el medicamento de eleccion para pacientes con DM 2 que
muestran el sndrome de resistencia a la insulina.
2.2. ETNOFARMACOLOGIA 17
Inhibidores de la -glucosidasa
Los inhibidores de la -glucosidasa deben administrarse con los alimentos, ya que
retrasan la digestion de oligosacaridos y disacaridos en un proceso lento.
2.2. Etnofarmacologa
La etnofarmacologa surgio en la decada de los 60s en el ambito de los agentes psicoac-
tivos. En 1983 Holmstedt y Brunh definen a la etnofarmacologa como La exploracion
interdisciplinaria de los agentes biologicamente activos tradicionalmente empleados por el
hombre. Schultes (1991) vierte una nueva definicion como: La observacion, identifica-
cion, descripcion e investigacion experimental de los efectos de las drogas utilizadas en la
medicina tradicional. Con este enunciado se puntualizo el estudio de la etnofarmacologa,
as como cada uno de los aspectos que debe comprender un estudio completo. La Etno-
farmacologa es una ciencia interdisciplinaria, ya que abarca las observaciones en campo,
as como tambien la descripcion del uso y preparacion de los remedios, la determinacion
botanica del material obtenido, tambien engloba los estudios fitoqumicos que son muy
importantes para aislar los compuestos presentes en las plantas, as como los estudios
farmacologicos. Algunos de los productos botanicos altamente utilizados incluyen canela,
Gymnema sylvestre, alholva, melon amargo, ginseng, nopal y aloe vera.
2.3.1. Heterosidos
Los glucosidos o heterosidos son compuestos que estan formadas por 2 partes: una es
un azucar (p.e. glucosa) y la otra de no-azucar o aglucona, aglicon o genina. El enlace
entre ambas es hidrolizable y debe romperse para que se active el compuesto; esta ruptura
es catalizada por fermentos que contiene la misma planta. Se clasifican de acuerdo a las
caractersticas estructurales de la parte aglicon. Los mas importantes son los antraquinoni-
cos, los cianogenicos, los cardiotonicos y los cumarnicos. Tambien los fenolicos, ya que es
en este grupo en el que se encuentra la salicilina, precursora del acido acetilsaliclico, o
aspirina.
Cardiotonicos: A este grupo pertenecen una serie de principios activos que actuan
directamente sobre el musculo cardaco y por tanto ejercen su accion terapeutica
en la insuficiencia cardaca congestiva o en las alteraciones del ritmo cardaco. Su
caracterstica comun es que tienen accion especfica sobre el corazon, y algunos
de ellos no han podido ser sustituidos por farmacos de sntesis. Las drogas con
cardiotonicos son muy toxica.
2.3.2. Polifenoles
Son sustancias que tienen un nucleo bencenico que soporta un grupo hidroxilo. Se
suelen unir a azucares para formar heterosidos pero tambien se pueden encontrar libres.
Van desde sustancias muy simples, hasta muy complejas como las ligninas y taninos. Los
grupos mas importantes de este grupo son los acidos fenolicos o fenoles, las cumarinas,
los flavonoides, los lignanos, los taninos y las quinonas.
20 CAPITULO 2. MARCO TEORICO
Flavonoides: Tienen accion sobre el sistema vascular, ademas tienen actividad cap-
tadora de radicales libres.
2.3.3. Terpenoides
Los terpenoides estan formados por la union de un numero entero de unidades de
isopreno. Comprenden los aceites esenciales, los iridoides, lactonas sesquiterpenicas, sa-
poninas y hetersidos cardotnicos.
Saponinas: Son sustancias que tienen poder espumante en soluciones acuosas, y son
tensoactivos naturales.
2.3.4. Alcaloides
Dentro de este grupo se encuentran sustancias toxicas incluso a bajas dosis. El primer
alcaloide aislado fue la morfina (Serturner 1805). En 1819 se le dio el nombre de alcaloides
debido a su naturaleza basica. Son sensibles a la luz y el calor, se estabilizan con acidos
inorganicos. En la naturaleza se encuentran en forma de sales aunque tambien libres. En
las plantas se consideraba que eran productos obtenidos durante la extraccion y poco
solubles en los disolventes topicos de extraccion por su polaridad. Existen varios tipos
segun la molecula de la que deriven (tropano, quinolena e isoquinolena)
otros disolventes tambien empleados. Uno de ellos y el mas usado es el alcohol etlico en
diversas graduaciones. Muchas de las preparaciones extractivas se realizan con este disol-
vente. Otros disolventes utilizados pueden ser: eter, cloroformo, acetona o propilenglicol.
La destilacion se emplea cuando los principios activos que se quiere obtener sean particu-
larmente volatiles ya que en los metodos anteriores gran parte de estas esencias se pierden
por ser evaporadas al aplicar calor. Existe una destilacion seca, empleada para obtener
sustancias como el metanol o acido acetico, en la cual no se moja en ningun lquido la
materia de la cual se van a extraer esas sustancias. La destilacion tpica es llamada desti-
lacion humeda, en la cual se anade a la planta agua o alcohol como proceso previo antes
de la propia destilacion. Algunas destilaciones se hacen en un medio donde previamente
se hace el vaco, con lo cual las esencias se evaporan a temperaturas inferiores, evitandose
oxidaciones y la descomposicion de la esencia. Se puede elevar la concentracion de prin-
cipios activos por medio de la evaporacion del disolvente, sea alcohol o sea agua. Dado
que esta evaporacion danara y alterara los principios activos, debera siempre hacerse
al vaco. Existen diversos aparatos para tal efecto, segun sea el resultado que se quiera
conseguir:
Concentraciones a vaco.
Nebulizadores.
Liofilizadores.
Gravimetra.
Espectroscopa.
Analisis por activacion de neutrones.
Algunos fotones del haz incidente son desviados sin perdida de energa, constituyen
la radiacion dispersada exactamente con la misma longitud de onda que la radiacion
incidente(origina el fenomeno de la difraccion).
Los fotones pueden sufrir una serie de choques inelasticos al incidir sobre un blanco
y su energa incrementa la temperatura de la muestra o da lugar al fenomeno de
fluorescencia.
Los rayos dispersados estaran completamente en fase si esa diferencia de fase es igual
a un numero entero n de longitudes de onda esta relacion se conoce como Ley de Bragg y
establece la condicion esencial que debe cumplirse para que ocurra la difraccion. Aunque
fsicamente no es un proceso de reflexion los terminos planos de reflexion y rayo reflejado
se usan con frecuencia para referirse a los planos de difraccion o rayos difractados respecti-
vamente. La difraccion es esencialmente un fenomeno de dispersion en el que cooperan un
gran numero de atomos. Puesto que los atomos estan dispuestos periodicamente en una
red los rayos dispersados por ellos tienen unas relaciones de fase definidas entre ellos; estas
relaciones de fase son tales que en la mayora de las direcciones se produce una interferen-
cia destructiva pero en unas pocas direcciones se produce una interferencia constructiva
y se forman rayos difractados.
24 CAPITULO 2. MARCO TEORICO
2.6. Cromatografa
La cromatografa es esencialmente un metodo fsico de separacion en el que los com-
ponentes a separar se distribuyen entre dos fases, una inmovil y otra movil. El proceso
cromatografico se da como resultado de repetidos procesos de sorcion-desorcion durante
el movimiento de los componentes de la mezcla arrastrados por la fase movil a lo largo del
lecho estacionario (elucion), produciendose la separacion debido a las diferencias en las
constantes de distribucion de los componentes de la mezcla entre la fase estacionaria y la
movil. A la distribucion final de los componentes en funcion de su posicion sobre el lecho
estacionario, o del tiempo en que eluyen se le denomina cromatograma. Practicamente
no existen restricciones sobre la naturaleza de las fases a utilizar, siempre que la fase
estacionaria sea solida o lquida y la fase movil lquida o gaseosa, por lo que es posible,
en principio, realizar por medio de estas tecnicas la separacion de los componentes de
cualquier mezcla. Por otra parte, la utilizacion de las tecnicas cromatograficas no esta
exenta de dificultades, debido fundamentalmente a la gran cantidad de parametros que
pueden influir en el proceso de separacion, lo cual dificulta la eleccion de las condiciones
optimas de separacion.
Metodologa
3.2.2. Material
3 Matraces de 1 lt.
1 Embudo
Bano Mara.
27
28 CAPITULO 3. METODOLOGIA
3.3.2. Material
Porta muestras.
3.3.3. Medicion
Las muestras molidas de cada planta se depositaron en porta muestras y a continuacion
se colocaron dentro del aparato. Se prendio el equipo de computo previo a encender el
espectrometro. Una vez activo el software se abrio la llave que permitio el paso de los
rayos x. Con ayuda del software se monitoreo la composicion elemental de las plantas y
el contenido de metales pesados (Hg, Cu, As, Ni y Pb).
3.4.1. Flavonoides
Prueba de Salkowski
Una pequena cantidad de muestra (1 a 2 mg en un mL de cloroformo) se disolvio en 1
mL de acido sulfurico concentrado, la prueba es positiva para flavonas y flavonoles si se ob-
servaron coloraciones amarillas; para flavonas coloraciones naranja-guinda, para chalconas
rojo-azuloso, y la presencia de quinonas se detecta con coloraciones rojo-purpura.
30 CAPITULO 3. METODOLOGIA
3.4.2. Sesquiterpenlactonas
Prueba de Baljet
Se utilizan dos soluciones que se mezclan en iguales volumenes antes de usarse. Solucion
A: Se coloca 1 g de acido prico en 100 mL de etanol. Solucion B: Se agregan 10 g de
NaOH en 100 mL de agua. Para la prueba se agregan 100 L de la muestra y 3 a 4 gotas
gotas del reactivo, siendo la prueba positiva si adquiere una coloracion naranja o rojo
oscuro.
3.4.4. Quinoninas
Prueba de Borntrager
Se hierve por 10 minutos un poco del material con hidroxido de potasio al 2-5 %, se
enfra la solucion, se acidula y se extrae con benceno. La capa se separa y se sacude con
un poco de la solucion de hidroxido de potasio. Si la fase de benceno se decolora y la
alcalina se torna roja, hay quinoninas.
Captulo 4
Analisis de resultados
31
32 CAPITULO 4. ANALISIS DE RESULTADOS
La planta Mata pulga tiene una composicion de oxido de potasio, oxido de calcio y
oxido de hierro (Fig.4.3).
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