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O
bros da superfamlia Ras de pequenas GTPases: a Ras que atua na
ativao de vrias vias de sinalizao, como aquelas relacionadas s
rganismos pluricelulares complexos (como os se protenas ERK1/2 e PI3K; e a Rho, relacionada com a ativao de
res humanos) so constitudos por um conjunto molculas efetoras como a Rho quinase (ROCK, Rho Kinase) (1;2).
de rgos, formados por tecidos, os quais renem A desregulao das vias de sinalizao celular, causada geralmente
um conjunto de clulas especializadas para desem por aumento/diminuio da atividade ou expresso de seus consti
penharem funes especficas. O desenvolvimento tuintes proteicos, pode levar ao descontrole de eventos fisiolgicos e
desses organismos e a manuteno de suas funes vitais dependem desencadear variados tipos de doenas, incluindo o cncer.
de uma cooperao das clulas que os constituem, na medida em que Cncer um termo genrico usado para designar um grande
os processos realizados por essas clulas tm que ser desempenhados grupo de doenas que pode afetar diferentes partes do organis
de maneira coordenada. Para que isso ocorra, as clulas necessitam mo. Apesar da sua diversidade, o cncer apresenta caractersticas
se comunicar umas com as outras e, a partir desta comunicao, comuns: clulas cancergenas (ou tumorais) apresentam desregu
coordenar as funes desempenhadas por cada tipo celular. Esse o lao nos mecanismos de controle do crescimento e proliferao,
princpio da sinalizao celular, onde clulas se comunicam atravs permitindo a formao de um agregado de clulas anormais (tumor)
de molculassinal, secretadas ou expostas em sua superfcie. (3;4). Esse descontrole normalmente est associado a alteraes no
As molculassinal so reconhecidas por receptores, geralmente material gentico das clulas, o cido desoxirribonucleico (DNA,
protenas que podem estar expostas na superfcie celular ou presen DeoxyriboNucleic Acid), podendo levar desregulao da expres
tes no interior das clulas. Esses receptores, aps se ligarem s mol so de genes, os quais contm informao para a sntese de pro
culassinal, transmitem a informao para outras protenas presen tenas encontradas nas clulas. Dessa forma, as alteraes podem
tes no interior da clula, mecanismo conhecido como transduo de ser passadas para clulas filhas, atravs da diviso celular, gerando
sinal. Esse mecanismo pode desencadear diferentes respostas, como vrias clulas anormais que formaro o tumor. As principais causas
alterao da funo de uma protena (resposta rpida e passageira) do cncer esto relacionadas exposio a agentes externos, os cha
ou modificao de expresso gnica, levando a uma alterao na mados carcingenos. Eles podem ser de origem fsica (como os raios
quantidade de protena dentro da clula (resposta lenta e mais pro ultravioleta da radiao solar), qumica (como os componentes do
longada). Essas modificaes levam a alteraes no comportamento cigarro de tabaco) ou biolgica (como a infeco de certos vrus).
da clula, visto que as protenas so as responsveis por dirigir as Durante o desenvolvimento do tumor, vrios eventos celulares po
funes celulares (Figura 1). dem ser desregulados. Dentre eles podemos citar o aumento do cresci
A transduo de sinal ocorre atravs de vias de sinalizao, as mento e proliferao, uma maior resistncia ao mecanismo de morte
quais geralmente so constitudas por protenas comprometidas celular e maior suscetibilidade a instabilidade genmica e mutaes,
com a regulao de eventos da fisiologia celular, como proliferao, possibilitando s clulas tumorais acumular alteraes em seu DNA (5).
migrao, diferenciao celular etc. A maior parte das protenas que Essa desregulao um reflexo principalmente de alteraes na ativida
participam das vias de sinalizao so enzimas, biocatalizadores que de ou expresso das protenas constituintes das vias de sinalizao celu
atuam na acelerao das reaes bioqumicas que ocorrem dentro lar. Dessa forma, um melhor entendimento da participao das vias de
da clula. Dentre elas encontramse as quinases, que constituem sinalizao celular na progresso do cncer um passo primordial para
uma das principais famlias de protenas em mamferos. Elas so en o desenvolvimento de metodologias teraputicas e de diagnstico para
zimas que catalisam a transferncia de grupos fosfatos de molculas essa doena, em particular do cncer colorretal, que ocupa o terceiro
do nucleotdeo adenosina trifosfato (ATP) para outras molculas lugar em ndice de incidncia na populao brasileira (6).
orgnicas, como lipdeos e protenas. Como exemplo, podemos
citar as quinases reguladas por sinal extracelular 1/2 (ERK1/2, Ex Vias de sinalizao celular que regulam a progresso do
tracellular SignalRegulated Kinase 1/2), protenas serina/treonina cncer colorretal O cncer colorretal (CCR) se desenvolve
quinase que atuam na fosforilao de aminocidos serina e treonina atravs de uma acumulao gradual de alteraes genticas que
presentes em seus alvos proteicos; e a fosfatidilinositol 3quinase conduzem transformao do epitlio normal colnico para o
(PI3K, PhosphatidylInositide 3Kinase), que atua na fosforilao fentipo maligno e invasivo. Essas alteraes genticas no epit
do fosfolipdio fosfatidilinositol presente nas membranas celulares. lio intestinal podem causar mudanas histolgicas e moleculares
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regulando negativamente a ao de PI3K, portanto assumindo um superfcie celular, evitando a ativao ou reconhecimento desses
papel de supressor tumoral. A presena de PTEN mantm os nveis receptores por outras molculas. Como exemplo, podemos citar
de PIP3 baixo, enquanto que sua ausncia aumenta a concentrao alguns dos anticorpos monoclonais aprovados pelo FDA (Federal
de PIP3, elevando a atividade de Akt. Nessa perspectiva, a ativao de Drug Administration), rgo de vigilncia sanitria dos Estados
PI3K por sinalizao dependente de fatores de crescimento, acarreta a Unidos, para tratamento do CCR metasttico: o Cetuximab e o
sntese de PIP3, que desfosforilado por PTEN a PIP2. Na ausncia Panitumumab, ambos tendo como alvo o receptor do fator de cres
de PTEN, Akt tornase constantemente fosforilada e, portanto, mais cimento epidrmico (EGFR, Epidermal Growth Factor Receptor).
ativa, podendo mediar a ativao de diversas protenas que regulam a A combinao desses anticorpos antiEGFR com esquemas tera
sobrevivncia e o crescimento tumoral (15). puticos tradicionais, que atuam no DNA das clulas, tem gerado
Outro grupo de protenas que participam ativamente da pro bons resultados. Porm, os melhores benefcios so alcanados por
gresso do CCR o das Rho GTPases, as quais esto relacionadas uma prvia investigao acerca do status mutacional do gene KRAS,
com a sinalizao que regula a reorganizao do citoesqueleto de ac o qual codifica a protena KRAS, uma das efetoras ativadas pelo
tina (16). As formas ativas de Rho adquirem uma mudana confor EGFR: caso a protena KRAS esteja ativada de forma constituti
macional que permite interagir com protenas efetoras, que na ver va, devido mutao em seu gene, a ativao da via de sinalizao
dade desempenham a funo de Rho propriamente dita. A primeira efetora continuar mesmo aps a ligao do anticorpo ao EGFR.
protena efetora de Rho identificada foi a ROCK, a qual atua na Assim, os principais rgos de vigilncia sanitria no mundo tm
induo da formao de fibras de estresse e adeso focal, atravs das recomendado a investigao de mutao em KRAS antes do empre
protenas que organizam o citoesqueleto de actina, alm do controle go da terapia com anticorpos antiEGFR em pacientes com cncer
da contratilidade celular pela miosina. Conforme j mencionado, as colorretal metasttico (21;22).
Rho GTPases modulam o citoesqueleto de actina, causando proje Devido importncia das protenas intracelulares participantes
es de membrana que aumentam o potencial migratrio, invasivo das vias de sinalizao, o emprego de inibidores farmacolgicos destas
e metasttico das clulas tumorais. tem sido utilizado em ensaios clnicos. Os inibidores farmacolgicos
Nosso grupo de pesquisa no Instituto Nacional de Cncer (INCa) so molculas purificadas de compostos naturais ou sintetizadas em
tem trabalhado ativamente para melhor caracterizar as vias de sinaliza laboratrios que impedem a atividade de protenas por alterar sua
o celular que regulam a progresso do CCR. Em trabalhos recentes, conformao ou competir por um substrato. A inibio da prote
relatamos a participao das vias da PI3K/Akt, ERK1/2 e Rho GTPa na quinase MEK (Mitogenactivated protein Kinase), pelo inibidor
ses regulando eventos da progresso deste tipo de cncer (1719). Um GSK1120212, tem contribudo para estabilizao da sndrome mie
resumo de nossos resultados est esquematizado na figura 2. lodisplsica em aproximadamente 54% dos pacientes tratados, os
quais apresentavam mutaes nos genes KRAS ou NRAS (23). Alm
Sinalizao na terapia do cncer: o tratamento racional disso, estudos em laboratrio tm mostrado recentemente que o ini
As estratgias teraputicas tradicionais utilizadas no tratamento do bidor TIC10, o qual inibe ambas as vias de sinalizao Akt e ERK1/2,
cncer empregam a cirurgia, quimioterapia e radioterapia. A escolha atua como potente agente antitumoral, sendo uma molcula promis
do tratamento ideal para um tipo de cncer geralmente se baseia em sora para anlise em futuros ensaios clnicos (24). Poucos estudos tm
ensaios clnicos com uma grande populao de pacientes, os quais relacionado a inibio da via de sinalizao regulada pela Rho GTPase
apontam o melhor esquema teraputico a ser utilizado. Contudo, com o tratamento antitumoral. Porm, o inibidor de ROCK, Fasudil,
durantes os ensaios clnicos podemos encontrar uma grande variao tem sido usado no tratamento de pacientes com vasoespamos no c
de resposta entre os pacientes, indicando que uma melhor estrati rebro sem causar srios efeitos colaterais. Em estudos no laboratrio,
ficao em subgrupos poderia apontar diferentes nveis de resposta clulas tratadas com Fasudil apresentaram reduo na sua migrao
a um esquema teraputico empregado (20). A identificao de um e na capacidade de formar colnias no aderidas ao substrato, carac
subgrupo de pacientes com cncer que respondem melhor a um tersticas indicativas de reduo do potencial maligno dessas clulas,
dado esquema teraputico pode refletir na diminuio dos custos do sugerindo que este inibidor pode ser uma ferramenta potencial para o
tratamento e aumentar os benefcios para o bemestar dos pacientes, tratamento antitumoral (2).
na medida em que se diminuem os efeitos colaterais. Nesse senti Esse conjunto de dados aponta a importncia da caracterizao das
do, os estudos que visam caracterizar os biomarcadores envolvidos alteraes moleculares no tumor para um melhor direcionamento do
na progresso do cncer e os processos por eles regulados ajudam tratamento. Nesse sentido, o emprego de tcnicas de anlise em lar
no melhor direcionamento do tratamento, na medida em que so ga escala, como o microarranjo de DNA, permite avaliar alteraes na
utilizados como base para o desenvolvimento de ferramentas para expresso gnica de um grande nmero de amostras. Apesar de ainda
o bloqueio molecular desses processos. Dentre essas ferramentas apresentar um alto custo, essa ferramenta permite a identificao de
destacamos o uso dos anticorpos monoclonais e os inibidores far possveis biomarcadores. A partir dessa identificao, podemos direcio
macolgicos, ambos atuando na inibio da atividade de protenas nar melhor o tratamento do cncer, utilizando, por exemplo, anticorpos
especficas presentes em vias de sinalizao. monoclonais e/ou inibidores farmacolgicos para alvos proteicos espe
Os anticorpos monoclonais so biomolculas que se ligam cficos, os quais podem ser combinados com os esquemas teraputicos
a alvos especficos, geralmente receptores proteicos presentes na tradicionais, objetivando uma maior eficcia do tratamento e dimi
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