Instrues de Uso
Os reagentes no abertos, quando armazenados nas
ALBUMINA
Cat. 19
ANVISA 10009010025
FINALIDADE
Sistema para a determinao da albumina em amostras de
soro por reao de ponto final.
Somente para uso diagnstico in vitro.
PRINCPIO
A albumina tem a propriedade de se ligar uma grande
variedade de nions orgnicos e molculas complexas de
corantes.
O sistema de medio se baseia no desvio do pico de
absortividade mxima de um corante complexo (verde de
bromocresol) quando este se liga albumina. A cor formada
medida colorimetricamente entre 620 e 640 nm, sendo
proporcional quantidade de albumina na amostra at a
concentrao de 6,0 g/dL.
CARACTERSTICAS DO SISTEMA
Os mtodos mais comumente utilizados para a dosagem da
albumina se baseiam na ligao com corantes. Esta ligao
que promove um desvio do pico de absortividade do corante,
permite que a cor resultante possa ser medida
colorimetricamente na presena de excesso do corante. A alta
afinidade de ligao da albumina permite que todas as suas
molculas presentes na amostra participem da reao. O
sistema contm um detergente no inico que reduz a
absorbncia do branco, previne o aparecimento de turvao e
aumenta a linearidade.
Vrios corantes como o metilorange, HABA, verde de
bromocresol (VBC) e prpura de bromocresol (PBC) tm sido
utilizados na dosagem da albumina srica, mas o VBC o
reagente mais utilizado tendo inclusive sido recomendado pela
3
AACC . Este tambm tem sido o mtodo de escolha dos
laboratrios, pois foi utilizado por 60% dos participantes do
programa de proficincia do Colgio Americano de
Patologistas no ano de 2002.
O verde de bromocresol possui especificidade para a albumina
e no sofre interferncia de valores elevados da bilirrubina e
hemoglobina, permitindo tambm que a interferncia de
valores elevados dos triglicrides possa ser corrigida
utilizando o branco da amostra.
O mtodo tem excelente correlao com o fracionamento
eletrofortico em acetato de celulose e facilmente aplicvel
maioria dos analisadores semi-automticos e automticos
capazes de medir uma reao de ponto final entre 625 e
640 nm.
METODOLOGIA
Verde de Bromocresol.
REAGENTES
1. Reagente de Cor - Armazenar entre 2 - 8 C.
Contm tampo 60 mmol/L, pH 3,8; verde de bromocresol
300 mmol/L e Brij 35 6,0 mmol/L.
2. Padro 3,8 g/dL - Armazenar entre 2 - 8 C.
Contm 3,8 g/dL de albumina bovina e azida sdica
0,1%.
Armazenar bem vedado para evitar evaporao.
condies indicadas, so estveis at a data de expirao
impressa no rtulo. Durante o manuseio, os reagentes esto
sujeitos a contaminaes de natureza qumica e microbiana
que podem provocar reduo da estabilidade.
PRECAUES E CUIDADOS ESPECIAIS
Os cuidados habituais de segurana devem ser aplicados na
manipulao do reagente.
O padro contm azida sdica que txica. Deve-se tomar
cuidado para evitar a ingesto e no caso de contato com os
olhos, deve-se lavar imediatamente com grande quantidade
de gua e procurar auxlio mdico. A azida pode formar
compostos altamente explosivos com tubulaes de chumbo e
cobre. Portanto, utilizar grandes volumes de gua para
descartar o reagente.
Um forte indcio de deteriorao indicado por uma
absorbncia maior que 0,300 quando o Reagente de Cor
medido em 630 nm contra gua.
MATERIAIS NECESSRIOS E NO FORNECIDOS
Fotmetro capaz de medir, com exatido, a absorbncia entre
600 e 640 nm.
Pipetas para medir amostras e reagentes.
Cronmetro.
AMOSTRA
Usar soro. A albumina estvel no soro 3 dias entre 2 - 8 C e
7 dias a 10 C negativos. No usar plasma.
Deve ser criado um Procedimento Operacional Padro (POP)
que estabelea procedimentos adequados para colheita,
preparao e armazenamento da amostra. Enfatizamos que
os erros devidos amostra podem ser muito maiores que os
erros ocorridos durante o procedimento analtico.
Como nenhum teste conhecido pode assegurar que amostras
de sangue no transmitem infeces, todas elas devem ser
consideradas como potencialmente infectantes. Portanto, ao
manuse-las deve-se seguir as normas estabelecidas para
biossegurana.
Para descartar os reagentes e o material biolgico sugerimos
aplicar as normas locais, estaduais ou federais de proteo
ambiental.
INTERFERNCIAS
Valores de bilirrubina at 38 mg/dL, hemoglobina at
180 mg/dL e triglicrides at 250 mg/dL no produzem
interferncias significativas.
Valores de triglicrides maiores que 250 mg/dL produzem
interferncias positivas que podem ser minimizadas utilizando
o branco de amostra.
Para avaliar a concentrao aproximada da hemoglobina em
uma amostra hemolisada, pode-se proceder do seguinte
modo: Diluir 0,05 mL da amostra em 2,0 mL de NaCl
150 mmol/L (0,85%) e medir a absorbncia em 405 ou 415 nm
acertando o zero com gua deionizada ou destilada.
Hemoglobina (mg/dL) @ Absorbncia405 X 601
Hemoglobina (mg/dL) @ Absorbncia415 X 467
Minimizao da Ao de Interferentes
Branco da amostra: Misturar 1,0 mL de NaCl 150 mmol/L
(0,85%) com 0,01 mL da amostra. Medir a absorbncia em
630 nm, acertando o zero com gua deionizada ou destilada. Exemplo:
Subtrair a absorbncia assim obtida da absorbncia do teste e
calcular a concentrao. Este sistema de correo aplicvel 3,8
apenas aos casos em que a amostra produz interferncia Fator = = 12,6
fotomtrica. 0,302

Influncias Pr- Analticas Albumina (g/dL) = 0,242 x 12,6 = 3,0

Em pacientes com depresso e pessoas obesas, o valor de
albumina tende a ser mais baixo. CALIBRAO
O uso de torniquete por mais de 3 minutos provoca o aumento O padro rastrevel ao Certified Reference Material -
do valor da albumina. CRM (BCR) 470 do Institute for Reference Materials and
Plasmas obtidos com heparina de ltio e oxalato de potssio Measurements/International Federation of Clinical Chemistry
combinado com fluoreto de sdio fornecem resultados (IRMM/IFCC).
falsamente diminudos.
Calibraes Manuais
PROCEDIMENTO " Obter semanalmente o fator de calibrao.
Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir:
Sistemas Automticos
Branco Teste Padro " Branco de reagentes: gua ou soluo de NaCl
150 mmol/L (0,85%);
Reagente de Cor (n 1) 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL " Padres: usar calibradores proticos. As concentraes
Amostra ---- 0,01 mL ---- de albumina nos calibradores da linha Calibra da Labtest
so rastreveis ao CRM (BCR) 470 do IRMM/IFCC.
Padro (n 2) ---- ---- 0,01 mL
Intervalo de calibraes
Misturar e aps 2 minutos, no mximo 10 minutos, determinar Deve-se recalibrar o sistema nas seguintes situaes:
as absorbncias do teste e padro em 630 nm ou filtro " Calibrao de 2 ou 3 pontos ao mudar de lote;
vermelho (600 a 640) acertando o zero com o branco. " Calibrao de 2 ou 3 pontos quando o controle interno
da qualidade indicar.
O procedimento sugerido para a medio adequado para
fotmetros cujo volume mnimo de soluo para leitura igual LINEARIDADE
ou menor que 1,0 mL. Deve ser feita uma verificao da O resultado da medio linear at 6,0 g/dL. Para valores
necessidade de ajuste do volume para o fotmetro utilizado. maiores, diluir a amostra com NaCl 150 mmol/L (0,85%),
Os volumes de amostra e reagente podem ser modificados realizar nova medio e multiplicar o resultado obtido pelo fator
proporcionalmente sem prejuzo para o desempenho do teste de diluio. Diluir a amostra de tal modo que o valor encontrado
e o procedimento de clculo se mantm inalterado. Em caso de se situe entre 3,0 e 4,5 g/dL. Sugerimos a verificao da
reduo dos volumes fundamental que se observe o volume linearidade metodolgica e fotomtrica, no mnimo
mnimo necessrio para a leitura fotomtrica. Volumes da semestralmente, utilizando amostras com valores at 6,0 g/dL.
amostra menores que 0,01 mL so crticos em aplicaes
manuais e devem ser usados com cautela porque aumentam a CONTROLE INTERNO DA QUALIDADE
impreciso da medio. O laboratrio deve manter um programa de controle interno da
qualidade que defina claramente os regulamentos aplicveis,
CLCULOS objetivos, procedimentos, critrios para especificaes da
qualidade e limites de tolerncia, aes corretivas e registro
Absorbncia do teste das atividades. Materiais de controle devem ser utilizados para
Albumina (g/dL) = x 3,8 avaliar a impreciso e desvios da calibrao. Sugere-se que as
Absorbncia do padro especificaes para o coeficiente de variao e o erro total
sejam baseadas nos componentes da variao biolgica
5, 6,7
Exemplo: (VB) .

Absorbncia do teste = 0,242 Sugere-se utilizar as preparaes estabilizadas da linha

Absorbncia do padro = 0,302 Qualitol da Labtest para controle interno da qualidade em
ensaios de qumica clnica.
0,242 INTERVALO DE REFERNCIA
Albumina (g/dL) = x 3,8= 3,0 Os intervalos devem ser usados apenas como orientao.
0,302 Recomenda-se que cada laboratrio estabelea, na
populao atendida, seus prprios intervalos de referncia.
Devido a grande reprodutibilidade que pode ser obtida com a
metodologia, pode-se utilizar o mtodo do fator. 8
Crianas e Adolescentes (g/dL)
3,8 1 a 30 dias 2,6 a 4,3
Fator de Calibrao =
Absorbncia do padro 31 a 182 dias 2,8 a 4,6
183 a 365 dias 2,8 a 4,8
Albumina (g/dL) = Absorbncia do teste x Fator
1 a 18 anos 2,9 a 4,7
Adultos: 3,5 a 5,5 g/dL enteropatias com perda protica (doena de Chron, colite
ulcerativa), doenas inflamatrias como as doenas
Converso: Unidades Convencionais (g/dL) x 144,9 = autoimunes, imobilizao prolongada, falncia cardaca e
Unidades SI (mol/L) outros estados catablicos crnicos. A elevao da albumina
srica encontrada somente na desidratao.
6
CARACTERSTICAS DO DESEMPENHO
Exatido OBSERVAES
Em duas amostras com concentraes de albumina iguais a 1. A limpeza e secagem adequadas do material utilizado so
2,7 e 4,2 g/dL foram adicionadas quantidades diferentes do fatores fundamentais para a estabilidade dos reagentes e
analito, obtendo-se recuperaes entre 97 e 103%. O erro obteno de resultados corretos.
sistemtico proporcional mdio obtido em um valor de 3,5 g/dL
foi igual a 0,04 g/dL ou 1,1%. 2. A gua utilizada no laboratrio deve ter a qualidade
adequada a cada aplicao. Assim, para preparar reagentes e
Especificidade usar nas medies, deve ter resistividade 1 megaohm ou
O mtodo proposto foi comparado com um mtodo similar condutividade 1 microsiemens e concentrao de silicatos
utilizando 80 amostras com valores situados entre <0,1 mg/L (gua tipo II). Para o enxge da vidraria a gua
2,5 e 5,3 g/dL. A comparao resultou na equao da pode ser do tipo III, com resistividade 0,1 megaohms ou
regresso: y = 0,09 + 0,98x e um coeficiente de correlao (r) condutividade 10 microsiemens. No enxge final utilizar
igual a 0,994. O erro sistemtico total (constante e gua tipo II. Quando a coluna deionizadora est com sua
proporcional) verificado no nvel de deciso (3,5 g/dL) foi igual capacidade saturada ocorre a produo de gua alcalina com
a 0,02 g/dL ou 0,6%. Como as amostras foram selecionadas liberao de vrios ons, silicatos e substncias com grande
aleatoriamente em pacientes de ambulatrio e pacientes poder de oxidao ou reduo, que deterioram os reagentes
hospitalizados, pode-se inferir que o mtodo tem uma em poucos dias ou mesmo horas alterando os resultados de
especificidade metodolgica adequada. modo imprevisvel. Assim, fundamental estabelecer um
programa de controle da qualidade da gua.
Repetitividade - Impreciso intra-ensaio
3. Para uma reviso das fontes medicamentosas de
N MDIA DP CV% interferncia nos resultados e na metodologia sugere-se
Amostra 1 20 3,5 0,03 0,9 consultar: <www.fxol.org/>.
Amostra 2 20 5,2 0,06 1,2 REFERNCIAS
1. Bartholomew RJ, Delaney AM. Proc Austral Assoc Clin
Biochem 1966;1:214.
Reprodutibilidade - Impreciso total
2. Basques JCA, Cabral GL, Cruz RS. Com II Congr Bras Anal
N MDIA DP CV% Clin. Janeiro, 1972.
Amostra 1 20 3,4 0,07 2,0
3. Tonks DB. Quality Control in Clinical Laboratories, Wamer-
Amostra 2 20 5,1 0,06 1,2 Chilcott Laboratories, Diagnostic Reagents Division,
Scarborough, Canada, 1972.
Sensibilidade metodolgica 4. Peters T, Biamont GT, Doumas BT. Albumin in serum. Em
Uma amostra protica no contendo albumina foi utilizada Faulkner WR. Meites S, eds. Selected methods of clinical
para calcular o limite de deteco do ensaio tendo sido chemistry, volume 9, Washington: AACC Press, 1982:319.
encontrado um valor igual a 0,015 g/dL, equivalente a mdia de
20 ensaios mais dois desvios padro. Utilizando-se a 5. Westgard JO, Groth T. Clin Chem 1981;27:493-501.
absorbncia do padro como parmetro, verificou-se que
o limite de deteco fotomtrica de 0,013 g/dL, 6. Sociedad Espaola de Bioqumica Clnica y Patologa
correspondendo a uma absorbncia igual a 0,001. Molecular, Base de Datos de Variacin Biolgica.
Disponvelem:<http://www.seqc.es/article/articleview/330/1
Efeitos da diluio da matriz /170> (acesso em 04/2006).
Duas amostras com valores iguais a 6,3 e 6,7 g/dL foram
utilizadas para avaliar a resposta do sistema nas diluies da 7. Basques JC. Especificaes da Qualidade Analtica. Labtest
matriz com NaCl 150 mmol/L (0,85%). Usando fatores de Diagnstica 2005.
diluio que variaram de 2 a 8 foram encontradas
recuperaes entre 95 e 103%. 8. Soldin SJ, Brugnara C, Wong EC: Pediatric Reference
Ranges, 5a. edio, Washington: AACC Press, 2005:5-6.
SIGNIFICADO CLNICO
A albumina a protena mais importante do plasma humano, 9. Labtest: Dados de Arquivo.
representando 40 a 60% do total de protena. Os nveis
plasmticos de albumina, devido sua relao com o aporte APRESENTAO
de protena e produo no fgado, so freqentemente Catlogo 19-100 19-250
usados como parmetro para avaliao do estado nutricional e
funo heptica. Reagente de Cor 1 x 100 mL 1 x 250 mL
Padro 1 x 1 mL 1 x 1 mL
Diminuies da albumina ocorrem na cirrose e outras doenas
hepticas incluindo o alcoolismo crnico, na gravidez Esto disponveis aplicaes para sistemas automticos.
associado ao uso de contraceptivos orais, em muitas doenas
crnicas incluindo neoplasias, sndrome nefrtica,
O nmero de testes em aplicaes automticas depende
dos parmetros de programao.

INFORMAES AO CONSUMIDOR
Termos e Condies de Garantia
A Labtest Diagnstica garante o desempenho deste produto
dentro das especificaes at a data de expirao indicada
nos rtulos, desde que os cuidados de utilizao e
armazenamento indicados nos rtulos e nestas instrues
sejam seguidos corretamente.

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