Beruflich Dokumente
Kultur Dokumente
SUPERIORES DE ECATEPEC
INGENIERIA BIOQUIMICA
Tincin de Gram : Es denida como una tincin diferencial, ya que utiliza dos
colorantes y clasica a las bacterias en dos grandes grupos: bacterias Gram negativas
y bacterias Gram positivas.10 Fue desarrollada por el cientco dans Hans Christian
Gram en 1884; hoy en da, sigue siendo una de las tinciones ms utilizadas
universalmente debido a lo econmico, sencillo y ecaz que resulta. Los principios
de la tincin de Gram estn basados en las caractersticas de la pared celular de las
bacterias, la cual le conere propiedades determinantes a cada microorganismo. La
pared celular de las bacterias Gram negativas est constituida por una capa na de
peptidoglicano y una membrana celular externa, mientras que las bacterias Gram
positivas poseen una pared celular gruesa constituida por peptidoglicano, pero no
cuentan con membrana celular externa; as pues, la composicin qumica y el
contenido de peptidoglicano en la pared celular de las bacterias Gram negativas y
Gram positivas explica y determina las caractersticas tintoriales.
Para la prueba tincin de Gram se coloc una capa delgada de la bacteria Listeria
monocytogenes Scott A, se fijo la muestra con el mechero, seca la muestra se cubri
con cristal violeta se esperaron de 30-60 seg y se enjuago con agua destilada, se
cubri la muestra con yodo y se dej reposar 60 seg, para enjuagar con agua
destilada. Posteriormente se adiciono un decolorante acetona y etanol en proporcin
hasta que el color violeta no fuera notorio. Finalmente se coloco una gota de
safranina por 45 seg y se enjuago con agua destilada. Se dejo secar el portaobjetos.
Se tomo con el asa muestra de la bacteria Listeria monocytogenes Scott A, se coloco sobre
un portaobjetos y se agrego una gota de Perxido de hidrogeno al 30%,
posteriormente se observ la reaccin.
Prueba de movilidad:
Sirve para determinar si un organismo es mvil o inmvil. Las bacterias tienen movilidad
por medio de sus flagelos que se encuentran principalmente entre los bacilos aunque existen
algunas formas de cocos mviles.
El medio manitol movilidad permite la realizacin de esta prueba gracias a ser semislido
ya que presenta solamente 3,5 g/l de agar. En estas condiciones, las bacterias mviles
producirn un enturbiamiento homogneo del medio debido a la distribucin aleatoria de
los microorganismos. Por el contrario, las bacterias inmviles permanecern en la misma
lnea dela picadura en que se sembraron.
En tubos de ensayo con medio SIM, se tom la muestra de la colonia aislada de Listeria
monocytogenes Scott A, se tomo uno de los tubos y se esterilizo en el mechero, se pico
en lnea recta el tubo con la bacteria sin retirar el asa, a 2/3 del medio SIM.
Posteriormente se incubaron los tubos 24 hrs a 37 C para observar la movilidad del
fuera de la lnea recta del sembrado.
2.OBJETIVOS
TINCIN DE GRAM
Colocar sobre
portaobjetos
Observar formacin de
burbujas (es una prueba
positiva)
Desechar portaobjetos
PRUEBA MOVILIDAD
Medio SIM
Enfriar y solidificar
Tomar muestra de Abrir tubo y esterilizar en Picar con el asa 2/3 del
colonia aislada mechero tubo en medio SIM
Incubar 24 hrs, 37C Esterilizar el tubo y tapar En lnea recta retirar el asa
Observar
4. RESULTADOS:
http://www.scielo.cl/pdf/rci/v25n5/art05.pdf
http://microbitosblog.com/2011/09/27/pruebas-bioquimicas-primarias/
http://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf
http://www.buenastareas.com/ensayos/Prueba-De-Movilidad/7860426.html