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Prctica I.

Estudio de una ruta metablica: gluclisis

Nombre del estudiante: Anah Bermdez

Grupo: 56B

Da de realizacin del practico: 13-10-2017

Docente de prctico: Sebastin Carballal

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1- Tabla de datos y grfica correspondiente a la
Curva de calibracin:

TUBO [Glucosa] Abs570nm


mM (U.A)

B 0 0

1 2 0,027

2 4 0,070

3 6 0,128

4 8 0,167

5 10 0,761

Curva de calibracin

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2- Clculo de Coeficiente de extincin molar () para el
DNS reducido a partir de ecuacin de curva de
calibracin.

Ecuacin de la curva de calibracin:


f(x) = 0,061185714285714x - 0,113761904761905

Valor de psilon con unidades:


0,0612 1/mM.cm

3- Tabla de datos de la determinacin de glucosa en


cultivo control y cultivo con inhibidor.
T Abs570nm [Glucosa] Abs570nm [Glucosa]
(min) (U.A) Sin mM (U.A) Con mM
inhibidor inhibidor

0 0,254 4,15 --------- --------

10 0,227 3,71 0,319 19,6

20 0,129 2,11 0,355 21,8

30 0,078 1,27 0,347 21,3

40 0,051 0,833 0,311 19,1

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4- Grafique [Glucosa]= f (tiempo) para las dos
condiciones evaluadas en el prctico (cultivo control y
cultivo con inhibidor)

5- Tabla para evaluar la produccin de CO2 en ambos


cultivos
Condicin Color solucin Rojo Globo
Fenol
Matraz A (sin inhibidor) Amarillo Inflado
Matraz B (con inhibidor) Anaranjado Desinflado
Matraz C (sin inhibidor, con Rojo Inflado
buffer)

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6- Conclusiones
Con la prctica pudimos evidenciar la gluclisis en un cultivo de
levaduras, tambin pudimos analizar lo que ocurre en presencia de un
inhibidor.

Con la grfica de concentracin en funcin de tiempo podemos


demostrar que la gluclisis se inhibe en presencia de un inhibidor, ya
que las concentraciones de glucosa no variaron. En cambio, en el caso
sin inhibidor, la concentracin de glucosa va disminuyendo ya que se
est consumiendo, producto de la gluclisis.

La levadura lleva a cabo la fermentacin alcohlica, que a partir del


piruvato de la gluclisis forma etanol y libera CO2 que al combinarse con
el agua forma H2CO3 , este se disocia en H+ y HCO3. Esto se puede
evidenciar en el matraz A, donde el rojo fenol cambia a amarillo, debido
a la formacin de H+ que baja el pH acidificndolo (menor a 7). El globo
se infla gracias a la formacin de CO2.

En el matraz B, se le coloca cloruro de mercurio, un inhibidor de la


enzima gliceraldehdo3-fosfato deshidrogenasa, que forma parte del
paso 6 de la gluclisis. Debido a esto la gluclisis no se puede llevar a
cabo en su totalidad, no se forma CO2 que infle al globo y no se produce
H+, dejando el pH ms elevado, de 7 a 8.

Sin colocarle un inhibidor, pero utilizando un buffer, pudimos ver la


produccin de etanol porque el globo se inflo, pero por ms que la
gluclisis se llevo a cabo y se produjo H+ y HCO3, el buffer amortiguaba
al H+ para que el pH de la solucin no variara.

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