Investigación y Amazonía.

2016; 1 (1): 1 – 7 ISSN 2224 - 8429

Artículo científico
Efecto antagónico in vitro de Trichoderma harzianum
frente a Asperisporium caricae (Speg.) Maubl. y
Sclerotium rolfsii Sacc.
Jorge E. Turpo1, Felicano Solano1
Recepcionado: 23 agosto 2016 Aceptado: 25 octubre 2016

Resumen
Se evaluó la efectividad de Trichoderma harzianum obtenido del fungicida
biológico “Tricho D”, utilizando la técnica de cultivo dual, comparando el
crecimiento de las colonias de Asperisporium caricae y Sclerotium rolfsii para
determinar los modos de acción tanto de antibiosis y competencia. Además,
se realizó la siembra del antagonista en placa precolonizada de ambos
patógenos para observar el nivel de parasitismo que ejerce sobre ellos. T.
harzianum ejerce un control de antibiosis y competencia de 64.89% y 59.3%
sobre A. caricae y S. rolfsii respectivamente. En el caso de parasitismo, T.
harzianum no afecta macroscópicamente al micelio de ambos hongos
fitopatógenos.
Palabras claves: Trichoderma harzianum, Asperisporium caricae, Sclerotium
rolfsii, antagonismo, antibiosis, competencia, parasitismo.

Abstract
The effectiveness of Trichoderma harzianum obtained from the biological
fungicide "Tricho D" was evaluated using the dual culture technique,
comparing the growth of the colonies of Asperisporium caricae and Sclerotium
rolfsii to determine the modes of action of both antibiosis and competition. In
addition, sowing of the precolonized plaque antagonist of both pathogens was
performed to observe the level of parasitism exerted on them. T. harzianum
exerts a control of antibiosis and competition of 64.89% and 59.3% on A.
caricae and S. rolfsii respectively. In the case of parasitism, T. harzianum does
not macroscopically affect the mycelium of both phytopathogenic fungi.
Key words: Trichoderma harzianum, Asperisporium caricae, Sclerotium rolfsii,
antagonism, antibiosis, competition, parasitism.

1 Estudiante
de la Facultad de Agronomía, Universidad Nacional Agraria de la Selva (UNAS).
Apartado postal 156. Tingo María, Perú.
 Introducción

El género Trichoderma es hongo antagonista conocido mundialmente por

poseer buena cualidades para el control de enfermedades en plantas
causadas por patógenos fúngicos del suelo, principalmente de los géneros
Phythophthora, Rhizoctonia, Sclerotium, Pythium y Fusarium, entre otros. La
cual ejercen varios mecanismos de acción, entre ellos están la antibiosis,
competencia por espacio y nutrientes, y el parasitismo. Además, tienen la
propiedad de ser aisladas y cultivadas fácilmente, su crecimiento micelial es
rápido en un gran número de sustratos, no atacan a plantas superiores y
poseen gran ubicuidad (1).

Sclerotium roflsii Sacc., es un hongo fitopatógeno, habitante del suelo, con un

amplio rango de hospedantes, concretamente alrededor de 500 hospedantes
en los que causa podredumbres de raíz y cuello. La enfermedad que produce
recibe muchas denominaciones diferentes en la literatura: pudrición basal de
tallo y raíz, mal del esclerocio, añublo sureño o tizón sureño, son algunas de
ellas (2). Asimismo, la viruela del papayo Asperisporium caricae (Speg.) Maubl
es la enfermedad más común en este cultivo, su importancia está relacionada
a la infección que ocurre en las hojas y frutos, generando una reducción de la
tasa fotosintética de la planta y depreciación de la calidad comercial de los
frutos (3). A pesar de ocurrir con gran frecuencia, es una enfermedad aún
poco estudiada se ha reportaron pérdidas de hasta un 30% en la
comercialización de la papaya a nivel mundial debido a esta enfermedad; sin
embargo, sólo recientemente, se iniciaron estudios epidemiológicos sobre la
enfermedad y comenzaron a ser probadas estrategias de control con
fungicidas (4).

Sabiendo que los agroquímicos, actúan de manera negativa en el medio

ambiente, se ejecuta este trabajo de investigación el cual trata de analizar la
efectividad de Trichoderma harzianum de un fungicida biológico comercial,
frente a Asperisporium caricae (Speg.) Maubl. y Sclerotium rolfsii Sacc.
 Materiales y métodos

El presente trabajo de investigación tuvo lugar en el Laboratorio de

Fitopatología de la Universidad Nacional Agraria de la Selva (UNAS) en Tingo
María, provincia de Leoncio Prado, departamento de Huánuco. Se realizó la
colecta de las muestras en hojas de papaya (Carica papaya L.), infestadas
con la viruela (Asperisporium caricae) y plantas de frijol (Phaseolus vulgaris
L.) con podredumbre en el tallo (Sclerotium rolfsii Sacc.) para su posterior
aislamiento de ambos hongos fitopatógenos, teniendo los siguientes
tratamientos:

Cuadro 1. Descripción de los tratamientos en estudio.

Tratamientos Descripción
T1 Trichoderma harzianum
T2 Asperisporium caricae
T3 Sclerotium rolfsii
T4 Asperisporium caricae + Trichoderma harzianum
T5 Sclerotium rolfsii + Trichoderma harzianum

El antagonista se obtuvo del fungicida biológico “Tricho – D”, la cual contiene

a Trichoderma harzianum con 1 x 108 esporas/gramo de sustrato comercial.,
donde se realizó la siembra de una muestra en un placa Petri.

La siembra en disco ( = 6 mm) tanto del fitopatógeno y el hongo antagónico

se ejecutó en placas ( = 9mm) individuales con dos repeticiones y el
enfrentamiento en cultivo dual en medio PDA con tres replicas, realizando
medidas del crecimiento radial por día con una regla milimetrada, hasta
observar el contacto entre ambos hongos.

La antibiosis se estableció al comparar el crecimiento del fitopatógeno en la

última evaluación antes del contacto hifal (fitopatógeno –Trichoderma
harzianum) y con el del testigo (fitopatógeno sin Trichoderma) para igual
período de tiempo, utilizando la fórmula: L = (C – T)/C x 100, donde L es la
inhibición radial de crecimiento micelial, C es la medición del crecimiento radial
del patógeno en control y T es la medición del crecimiento radial del patógeno
en presencia del antagonista.
La prueba de parasitismo, se realizó mediante la siembra del antagonista
sobre placas precolonizadas del fitopatógeno, donde solo se evaluaron
macroscópicamente (observación visual), en rangos de nula, bajo, medio y
alto nivel de parasitismo.
 Resultados y discusión

Cuadro 2. Radio promedio micelial de crecimiento de los hongos en estudio

por tratamientos

T1 T2 T3 T4 T5
Día (T.harzianum) (A.caricae) (S.rolfsii)
A. caricae T. harzianum S. rolfsii T. harzianum
1 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30
2 1.20 0.80 0.95 0.70 1.45 0.95 0.93
3 2.90 2.05 2.44 1.33 3.55 1.80 2.72
4 4.50 3.40 4.50 1.57 4.33 1.83 2.82
5 4.50 4.40 4.50 1.58 4.33 1.83 2.82
6 4.50 4.50 4.50 1.58 4.33 1.83 2.82

6.00
y = 0.2657x + 0.2478
y = 0.8457x + 0.09 y = 0.9471x - 0.74
5.00

4.00 y = 0.9286x - 0.2667

3.00

2.00

1.00

0.00
1 2 3 4 5 6

T1 T2 T4 Patogeno T4 Antagonista

Figura 1. Crecimiento radial de los tratamientos con respecto a

Asperisporium caricae

De acuerdo con la Figura 1, la viruela del papayo (Asperisporium caricae) tiene

un crecimiento promedio radial de 0.947 cm/día, el cual es muy significado en
la agresividad de este hongo. En cuanto al desarrollo del Trichoderma
harzianum, se tiene un crecimiento promedio radial de 0.887 cm/día, el cual
es muy significado en la capacitada antagónica de este hongo. Pero éste
mismo al ser sometido a prueba, reduce relativamente su crecimiento
promedio radial en 0.845 cm/día. Por otro lado tenemos un crecimiento
promedio radial de 0.265 cm/día del hongo Asperisporium caricae cuando está
en presencia del hongo Tichoderma harzianum, reduciéndose su poder
patogénico.
Figura 2. Antibiosis del Tichoderma harzianum sobre Asperisporium caricae
Teniendo un control muy favorable del Tichoderma harzianum sobre
Asperisporium caricae a nivel de laboratorio tal como indica (1) que ejercen
varios mecanismos de acción, entre ellos están la antibiosis, competencia por
espacio y nutrientes.

5.00
y = 0.935x - 0.645
y = 1.43x - 1.35 y = 1.409x - 1.475
4.00

3.00

2.00

y = 0.544x - 0.14
1.00

0.00
1 2 3 4
-1.00

T1 T3 T5 Patogeno T5 Antagonista

Figura 3. Crecimiento radial de los tratamientos con respecto a Sclerotium

rolfsi
Como se observa en la Figura 2, en el enfrentamiento de fitopatógeno y el
antagonista, Trichoderma harzianum ejerce un control antibiótico sobre
Sclerotium rolfsii, reduciendo su tasa de crecimiento micelial
significativamente de 1.409 a 0.554 cm/día, y que mediante la fórmula
presentada anteriormente determina un 59.3% de control de antibiosis. Esto
se explica, como T. harzianum, es habitante común del suelo, por lo tanto, un
enemigo natural por excelencia de hongos fitopatógenos del suelo como es el
caso de S. rolfsii.
 Figura 4. Antibiosis del Trichoderma harzianum sobre Sclerotium rolfsii
Por otro lado, en la prueba de parasitismo, no se logró observar tal mecanismo
de acción por parte de T. harzianum sobre ambos hongos fitopatógenos en
estudio, lo que se considera como nula o muy bajo nivel de parasitismo.

Conclusiones
Trichoderma harzianum del fungicida biologico “Tricho – D”, ejerce un control
de antibiosis de 64.89% y 59.3% sobre A. caricae y S. rolfsii respectivamente.
Sin embargo, no presenta parasitismo macroscópicamente en sobre ningún
fitopatógeno.
Sin duda alguna, T. harzianum control
 Bibliografía

1. EZZIYYANI, M.; PÉREZ, C.; SID, A.; REQUENA, M. y CANDELA, M.

2004. Trichoderma harzianum como biofungicida para el biocontrol de
Phytophthora capsici en plantas de pimiento (Capsicum annuum L.).
Anales de Biología. España. 26 (1): 35 - 45
2. GONZALES, A. 2012. Sclerotium rolfsii, un patógenos de judía que
produce daños en forma ocasional. Servicio Regional de Investigación
y Desarrollo Alimentario. Asturias, España.
3. REZENDE y MARTIN. 2005. Enfermedades en papayo: KIMATI, H.;
AMORIM, L.; REZENDE, J.A.M.; BERGAMIN FILHO, A.; CAMARGO,
L.E.A. Manual de fitopatología: enfermedades de plantas cultivadas.
São Paulo: Agronómica Ceres. v.2, cap.49, p.436 – 443.
4. UENO, B.; FERREIRA, M.A.S.V.; UESUGI, C.H.L. 2001. Evaluación de
las principales enfermedades del papayo (Carica papaya L.) en la
región de Barreiras-BA. Fitopatología Brasilera, Brasil, v. 26, p. 386.
 ANEXO

Figura 5. Antibiosis del Trichoderma harzianum sobre Asperisporium caricae.

Figura 6. Crecimiento micelial en placas individuales de Asperisporium caricae

Figura 5. Crecimiento micelial de Sclerotium rolfsii al primer día

Figura 6. Crecimiento micelial de Sclerotium rolfsii al segundo día

 Figura 7. Crecimiento micelial de Sclerotium rolfsii al tercer día

Figura 8. Prueba de parasitismo de Trichoderma harzianum sobre Sclerotium rolfsii

Figura 8. Prueba de parasitismo de Trichoderma harzianum sobre Sclerotium rolfsii

a los 7 días después de la siembra.