La Ingeniería Genética (I.G.

), mejor llamada tecnología del ADN recombinante in vitro, se

caracteriza por su capacidad de cortar y empalmar genes o fragmentos de ADN de organismos
distintos, creando nuevas combinaciones no existentes en la Naturaleza, combinaciones que
ponemos a trabajar en el interior de una variedad de organismos hospederos, para nuestro
provecho. La manera de mejorar genéticamente los organismos industriales reposaba en:

La inducción de mutaciones (con mutágenos), seguida de selección o rastreo de los mejores

mutantes. La búsqueda de mejoras en la producción de proteínas (incluyendo enzimas) es más
fácil que la de la producción de otras moléculas (polisacáridos, antibióticos, aminoácidos, etc),
porque cada proteína depende normalmente de un solo gen, mientras que los metabolitos se
sintetizan por rutas complejas donde intervienen varias enzimas, cada una sintetizada por un
gen diferente, y con regulaciones a menudo complicadas.

En los protocolos de selección, se suele aplicar una presión selectiva que favorece el crecimiento
del tipo de mutantes buscados, en detrimento del resto de microorganismos

En los protocolos de rastreo crecen todos los microorganismos, pero se pueden identificar las
variantes deseadas sobre la base de que presentan ciertas características que las diferencian de
las demás

La mezcla de genomas mediante fenómenos de sexualidad, o parasexualidad (las bacterias no

tienen sexo, pero algunas tienen fenómenos parasexuales como la conjugación, que se pueden
aprovechar para transferir material genético de unas cepas a otras).

La Biotecnología se refiere a toda aplicación tecnológica que utilice sistemas biológicos y

organismos vivos o sus derivados para la creación o modificación de productos o procesos para
usos específicos. Su clasificación: Roja, Verde, Blanca y Azul

BIOTECNOLOGÍA ROJA
Agrupa todos aquellos usos de la biotecnología relacionados con la medicina. La biotecnología
roja incluye la obtención de vacunas y antibióticos, el desarrollo de nuevos fármacos, técnicas
moleculares de diagnóstico, las terapias regenerativas y el desarrollo de la ingeniería genética
para curar enfermedades a través de la manipulación genética.Terapia celular y medicina
regenerativa, Medicamentos a partir de moléculas biológicas y Anticuerpos terapéuticos

BIOTECNOLOGÍA VERDE
se centra en la agricultura como campo de explotación. Las aproximaciones y usos
biotecnológicos verdes incluyen la creación de nuevas variedades de plantas de interés
agropecuario, la producción de biofertilizantes y biopesticidas, el cultivo in vitro y la clonación
de vegetales.

BIOTECNOLOGÍA AZUL
Se basa en la explotación de los recursos del mar para la generación de productos y
aplicaciones de interés industrial: Acuicultura, Cuidados sanitarios y Cosmética
BIOTECNOLOGÍA BLANCA
Engloba a todos aquellos usos de la biotecnología relacionados con los procesos industriales,
sectores como químico, alimentación, energía medioambiente, etc.) y tiene como finalidad
sustituir tecnologías contaminantes por otras más limpias: Plásticos, Textiles y Biocombustibles

PLÁSMIDOS BACTERIÓFAGOS CÓSMIDOS

Los vectores híbridos, constituidos por parte del cromosoma del fago l y el ADN plasmídico,
permiten la clonación de fragmentos largos de ADN foráneo. Durante la clonación las
moléculas de ADN recombinante se empaquetan en la cubierta proteica del fago y una vez que
el cósmido entra en la célula huésped se replica como un plásmido.
Agrobacterium tumefaciens, posee un plásmido Ti que es el responsable de su virulencia. Al
transferirse al vegetal este segmento de ADN (T-ADN) puede contener el ADN a transferir
entre las secuencias de sus extremos (vector binario: contiene dos plásmidos, uno es el gen
implantado y el otro es el marcador de resistencia a un antibiótico –kanamicina- para
vegetales).

BIOCATALIZADORES
Es un catalizador de las reacciones bioquímicas de los seres vivos. Un biocatalizador reduce o
aumenta la energía de activación de una reacción química, haciendo que ésta sea más rápida o
más lenta. Cada reacción química en un ser vivo, ya sea unicelular o multicelular, requiere la
presencia de uno o más biocatalizadores (enzimas), pues si no existieran éstas ocurrirían en
desorden total.

ENZIMAS
Son proteínas globulares que hacen posibles las reacciones bioquímicas a una velocidad
adecuada, en las condiciones de temperatura habituales en el interior de los seres vivos.
Hidrolíticas como las proteasas, amilasas, celulasas y lipasas en las áreas de detergencia y
alimentos.

BIOMATERIALES
Se trata de materiales aptos para diversas aplicaciones (desde construcción hasta la industria de
juguetes) que pueden sustituir los plásticos y otros materiales derivados del petróleo, y
mantener, y a menudo mejorar, las características y prestaciones. Los biomateriales más
desarrollados hasta el momento son polímeros producidos por microorganismos o plantas, o
derivados de estos microorganismos, como alternativa a los plásticos.
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es una técnica de laboratorio común utilizada para
hacer muchas copias (¡millones o miles de millones!) de una región particular de ADN. Esta
región de ADN puede ser cualquier cosa que le interese al experimentador. Por ejemplo, podría
ser un gen cuya función quiere entender un investigador o un marcador genético usado por
científicos forenses para relacionar el ADN de la escena del crimen con los sospechosos. Por lo
general, el objetivo de la PCR es producir suficiente ADN de la región blanco para que pueda
analizarse o usarse de alguna otra manera. Por ejemplo, el ADN amplificado por PCR se
puede secuenciar, visualizar por electroforesis en gel o clonar en un plásmido para otros
experimentos. La PCR se utiliza en muchas áreas de la biología y la medicina, como la
investigación en biología molecular, el diagnóstico médico e incluso algunas ramas de la
ecología.

La Taq polimerasa

Al igual que la replicación de ADN en un organismo, la PCR requiere de una enzima ADN
polimerasa que produzca nuevas cadenas de ADN mediante el uso de las cadenas existentes
como molde. La ADN polimerasa que normalmente se utiliza en la PCR se llama Taq polimerasa,
por la bacteria tolerante al calor de la que se aisló. T. aquaticus vive en aguas termales y fuentes
hidrotermales. Su ADN polimerasa es muy termoestable y su mayor actividad se presenta cerca
de los 70°C (temperatura a la que la ADN polimerasa de ser humano o de E. colino funcionaría).
La Taq polimerasa es ideal para la PCR gracias a esta estabilidad térmica. Como veremos, la PCR
utiliza altas temperaturas repetidamente para desnaturalizar el molde de ADN o separar sus
cadenas.

Cebadores para PCR

Al igual que otras ADN polimerasas, la Taq polimerasa solo puede hacer ADN si hay un cebador,
una corta secuencia de nucleótidos que proporciona un punto de partida para la síntesis de ADN.
En una reacción de PCR, la región de ADN que será copiada, o amplificada, se determina por los
cebadores que él o la investigadora elijan. Los cebadores para PCR son pedazos cortos de ADN
de cadena sencilla, generalmente de unos 20 nucleótidos de longitud. En cada reacción de PCR
se utilizan dos cebadores que están diseñados para flanquear la región blanca (la región que
debe ser copiada). Es decir, les agregan secuencias que harán que se unan a cadenas opuestas
del molde de ADN solo en los extremos de la región a copiar. Los cebadores se unen al molde
mediante complementariedad de bases.

Los pasos de la PCR

Los ingredientes clave para una reacción de PCR son Taq polimerasa, cebadores, ADN molde y
nucleótidos (los bloques básicos del ADN). Los ingredientes se colocan en un tubo, junto con los
cofactores que necesite la enzima, y se someten a ciclos repetidos de calentamiento y
enfriamiento que permiten la síntesis del ADN. Los pasos básicos son:

- Desnaturalización (96°C): la reacción se calienta bastante para separar, o desnaturalizar,

las cadenas de ADN. Esto proporciona los moldes de cadena sencilla para el siguiente
paso.
- Templado (55 - 65°C): la reacción se enfría para que los cebadores puedan unirse a sus
secuencias complementarias en el molde de ADN de cadena sencilla.
 - Extensión (72°C): la temperatura de la reacción se eleva para que la Taq polimerasa
extienda los cebadores y sintetice así nuevas cadenas de ADN.

Este ciclo se repite 25 - 35 veces en una reacción de PCR típica, que generalmente
tarda 2 - 4 horas, según la longitud de la región de ADN que se copia. Si la reacción es eficiente
(funciona bien), puede producir miles de millones de copias a partir de una o unas cuantas copias
de la región blanco.

Eso es porque no solo se usa el ADN original como molde en cada ciclo. En realidad, el nuevo
ADN que se produce en una ronda puede servir como molde en la siguiente ronda de síntesis de
ADN. Hay muchas copias de los cebadores y muchas moléculas de Taq polimerasa flotando en
la reacción, por lo que el número de moléculas de ADN casi puede duplicarse en cada ciclo. La
siguiente imagen muestra este patrón de crecimiento exponencial.

Habitualmente, los resultados de una reacción de PCR se visualizan (se hacen visibles) al
usar electroforesis en gel. La electroforesis en gel es una técnica en la que una corriente eléctrica
impulsa fragmentos de ADN a través de una matriz de gel y los fragmentos de ADN se separan
según su tamaño. Típicamente se incluye un estándar, o marcador de peso molecular, para que
pueda determinarse el tamaño de los fragmentos en la muestra de PCR. Los fragmentos de ADN
de la misma longitud forman una "banda" en el gel que se puede identificar a simple vista si el
gel se tiñe con un pigmento que se una al ADN.
UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTÍN DE
AREQUIPA

FACULTAD DE PROCESOS
ESCUELA DE INGENIERIA QUIMICA

PRESENTACION DE TRABAJO
INVESTIGACION

DOCENTE
QUEQUEZANA MARCIA

ALUMNA
SANTOS ANAMPA MARIELA

Arequipa – Perú
2017