“UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTOBAL DE HUAMANGA”

FACULTAD DE INGENIERIA QUIMICA Y METALURGIA

ESCUELA FORMACION PROFESIONAL DE INGENIERIA
AGROINDUSTRIAL

TRABAJO SEMESTRAL
METABOLISMO DE XENOBIOTICOS

ASIGNATURA:
BIOQUÍMICA
DOCENTE:
ALUMNOS:
 MALLQUI PABLO, Jaime Omar
 MENDEZ CAHUANA, Augusto
 PALACIOS QUISPE, Juana María
 TORRE MARTINEZ, Karen Rosario
AYACUCHO – PERÚ
2015

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 METABOLISMO DE XENOBIÓTICOS

I. OBJETIVOS
 Conocer el ciclo intraorgánico de los xenobióticos.
 Conocer cómo funciona el metabolismo en los xenobióticos, y el papel que ocupa en
nuestro organismo.

II.FUNDAMENTO TEÓRICO
¿Qué son los xenobióticos?

Originalmente se denominaba compuestos xenobióticos (“xeno” extraño, “bio” vida), a

los compuestos sintetizados en los laboratorios y que no se encontraban en la naturaleza.
Estos compuestos en general muy estables y apolares, tienden a acumularse en los tejidos
de los seres vivos. Tardan largo tiempo en degradarse en los sistemas naturales y pueden
actuar como contaminantes.

EL Bisfenol A, un xenobiótico que mimetiza la acción de los estrógenos.

El bisfenol A (BPA, por su sigla en inglés) es un componente que podemos encontrar en

todos los plásticos. Sintetizado inicialmente en 1891, se ha vuelo un componente clave en
la síntesis de plásticos, desde el policarbonato al poliéster. Solo en E.E.U.U. se produce
más de un millón de toneladas al año de este compuesto.

Desde 1936 se sabe que el BPA mimetiza a los estrógenos uniéndose a los mismos
receptores que la hormona esteroidea femenina. Los experimentos han demostrado que
este compuesto puede promover el crecimiento de las células tumorales del cáncer de
mama y disminuir la cantidad de espermatozoides.

Estos hallazgos han hecho que muchos investigadores se preguntaran por los riesgos que
entrañan para la salud la utilización masiva de estos plásticos que liberan BPA,
especialmente cuando son utilizados a altas temperaturas ( microondas, lavados con agua
caliente), o sometidos a un uso muy intenso.

El Centro de Control de Enfermedades (CDC) de E.E.U.U. encontró muestras de BPA en

prácticamente todas las muestras de orina recolectadas en el año 2004, en un esfuerzo por
medir la prevalecía (cantidad de individuos en un grupo o población que presentan una
característica o evento determinado) de varios compuestos químicos en el cuerpo
humano.

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Los estudios sugieren que el BPA no permanece en el cuerpo más que unos pocos días ya
que es detoxificado como un glucurónido (el BPA es asociado al ácido glucurónico, un
derivado ácido de la glucosa), un producto soluble y fácilmente excretado. A pesar de esto
la CDC ha encontrado BPA-glucurónidos en la mayoría de las muestras de orina, lo que
sugiere una exposición constante al BPA.

El BPA es utilizado en las latas de conservas como revestimiento, para prevenir la corrosión
y la contaminación de la comida. También es utilizado en frascos plásticos y mamaderas,
de esta forma el policarbono es transparente e irrompible. Cuando a estos frascos y
mamaderas se les agrega agua caliente y luego se les permite enfriarse la tasa de
liberación de BPA de estos envases aumenta 55 veces.

Estudios recientes en la revista REPRODUCTIVE TOXICOLOGY, sugieren que los seres

humanos pueden haber estado expuestos a diez veces los niveles de BPA, considerados
seguros por las agencias de seguridad ambiental. Si es cierto que los seres humanos
metabolizan el BPA a mayor velocidad que los roedores, como sugieren recientes estudios,
entonces el nivel de exposición diaria debe ser mayor para alcanzar los niveles detectados
en las muestras de suero humano.

Los datos de la CDC han demostrado que el 93% de 2.157 personas de entre seis hasta
ochenta y cinco años, muestran productos metabólicos detectables de BPA en la orina. Los
niveles son más altos en los niños que en los adolescentes y en los adolescentes más altos
que en los adultos. Se ha demostrado también que el BPA disminuye la fertilidad en
ratones hembra, siendo los efectos del BPA permanentes, aún luego de pequeños
períodos de exposición. Además, no necesita permanecer en el cuerpo para tener efecto.

Los niños y los bebés son los más expuestos al BPA. Es con los bebes en gestación y los
recién nacidos, donde los investigadores se muestran más preocupados, ya que el BPA ha
sido relacionado con cáncer de mamas y de próstata, así como con diabetes y ciclos
menstruales alterados en ratones de laboratorio que aún estaban en desarrollo.

Los biólogos como Fred vom Saal, advierten que los niños están expuestos a niveles de
BPA diez veces mayores a los necesarios para producir trastornos en los animales. Sobre
todo, porque las mamaderas de policarbonato y las latas de leche infantil liberan BPA.

La FDA (La Administración Federal de Drogas de E.E.U.U.), aprobó por primera vez el BPA
en 1963, ya que no se demostraron efectos peligrosos para la salud. Cuando el Congreso
de E.E.U.U. aprobó una nueva ley en 1976 – El Acta de Control de Substancias Tóxicas-
mandando que la EPA (Agencia de Protección Ambiental), realizara o verificara estudios de
seguridad sobre cada nuevo compuesto químico antes de aprobarlos para su uso,
substancias como el BPA ya estaban en el mercado. A pesar de esto, si surgieran nuevos
indicios sobre la peligrosidad del BPA u otros químicos, podrán realizarse nuevas pruebas.

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El problema es que la FDA sostiene que el BPA es seguro. No solo eso, para la industria
química, el BPA no solo es seguro, sino también muy difícil de reemplazar por todas sus
propiedades: ligero, irrompible, barato, así como otras características difíciles de igualar.

Para complicar más aún el tema, el BPA no es el único compuesto químico que mimetiza la
acción de los estrógenos. Por ejemplo, ciertos compuestos presentes en los jabones
antibacteriales, también interfieren con la señalización hormonal. La forma en que podrían
interactuar el BPA y el resto de los químicos estrogenomiméticos no es conocida.

Japón y Canadá toman medidas contra la utilización del BPA. La preocupación por el BPA
es mundial y algunos países han tomado medidas hace ya tiempo. En Japón la industria
comenzó a utilizar resinas naturales en reemplazo del BPA, sobre todo desde que desde
1997 científicos japoneses demostraron que el BPA era liberado de las mamaderas de
policarbonato. Un estudio subsecuente en 1999 demostró que los niveles de BPA en orina
habían disminuido notablemente.

¿Qué medidas de seguridad podemos tomar para proteger a nuestra familia?

No utilizar frascos o envases realizados en policarbonato, generalmente son transparentes

o coloreados y están marcados con el número 7, en la base. También limitar o suprimir los
alimentos enlatados: conservas, alimentos, sopas y formulas infantiles. Pueden ser
reemplazados por productos similares en otro tipo de envases.

Si no pueden ser reemplazados, nunca deben utilizarse en el microondas, ni almacenar

líquidos o comidas calientes, ni lavados con agua caliente a mano ni en lavavajillas.

Ustedes eligen si usar mamaderas de policarbonato, o las viejas mamaderas de vidrio.

Pero recuerden que el Bisfenol A está presente en esas mamaderas plásticas, y que es un
compuesto potencialmente muy peligroso para la salud y el desarrollo de los bebés.

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III. MARCO TEÓRICO

Es toda sustancia extraña o ajena que procedes de la composición o metabolismos de los

organismos vivos. Se aplica a los compuestos cuya estructura química en la naturaleza es
poco frecuente o inexistente debido a que son compuestos sintetizados por el ser humano
en el laboratorio.

Son compuestos ajenos al cuerpo:

Los principales son los fármacos carcinógenos químicos, aditivos alimenticios,

contaminantes ambientales, compuestos como el bifenilos policlorinados (PCB) y ciertos
insecticidas.

Son compuestos lipofílicos:

El hígado facilita la eliminación de los xenobióticos lipófilos, mediante un conjunto de

reacciones, globalmente denominadas de biotransformación, en las que se modifica más o
menos compleja la estructura química de los xenobióticos para aumentar su
hidrosolubilidad y así facilitar su eliminación.

Los xenobióticos por lo general son compuestos lipofílicos, por lo atraviesan con facilidad
las membranas biológicas, por lo que tienden a acumularse en compartimientos
hidrológicos.

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La entrada de un xenobiótico al organismo induce procesos bioquímicos, en los tejidos
(especialmente hepáticos) de todo el cuerpo, que conducen hacia su excreción, con el
objetivo de evitar su toxicidad.

La mayoría de los xenobióticos son metabolizados principalmente en el hígado y algunos

pocos con excretados sin sufrir modificaciones.

Los xenobióticos son metabolizados en 2 fases, la primera de transformación, que

transforma al xenobiótico en un compuesto un poco más polar, la segunda de
solubilización o conjugación que convierte al xenobiótico transformado en un compuesto
soluble listo para su excreción.

Para la mayoría de los casos de metabolización de xenobióticos en especial de

hidroxilación de primera fase, se hace indispensable la presencia y actividad en un grupo
de hemoproteínas llamadas CITOCROMO P450, de la cual depende casi enteramente la
metabolización del xenobiótico en cuestión.

Algunos ejemplos son:

• Por acción intrínseca:

 Fármacos
 Plaguicidas
 Por su aplicación:
 Medicamentos
 Productos de uso doméstico

• Por su origen
 Desechos urbanos
 Desechos variados
• Por su acción bilógica
 Biocidas
 mutagenicos
• Carcinógenos químicos
• OCB bifenilos poli colorados
• Toxinas
• Drogas de abuso

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 IMPORTANCIA BIOMÉDICA
El humano está expuesto a una amplia variedad de sustancias químicas extrañas (xenobióticos),
tanto compuestos naturales en alimentos vegetales, como compuestos sintéticos en medicinas,
aditivos de alimentos, y contaminantes ambientales. El conocimiento del metabolismo de los
xenobióticos es esencial para un entendimiento de la farmacología y la terapéutica, la
toxicología, y el manejo de enfermedades. Todas estas áreas comprenden la administración de
xenobióticos, o la exposición a los mismos.

Muchos de los xenobióticos en alimentos vegetales tienen efectos en potencia beneficiosos

(por ejemplo, al actuar como antioxidantes, capítulo 45), y el conocimiento de su metabolismo
permitirá la extrapolación desde la medición in vitro de la actividad antioxidante, a la acción
protectora in vivo.

El entendimiento de los mecanismos involucrados en el metabolismo de xenobióticos permitirá

el desarrollo de microorganismos y plantas transgénicos que contienen genes que codifican
para enzimas para el metabolismo de compuestos específicos que pueden usarse para convertir
contaminantes en potencia peligrosos en compuestos inocuos. De modo similar, los organismos
transgénicos pueden usarse para la biosíntesis de fármacos y otras sustancias químicas.

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BISFENOL A

Actualmente se designa xenobióticos a los compuestos tanto los naturales como los
sintéticos, a los que estamos expuestos y que nuestro organismo metaboliza y acumula,
pudiendo ser sus efectos muy peligrosos para la salud. Los xenobióticos son utilizados en
química orgánica, generalmente en la industria, en plásticos, pinturas, alimentos,
medicamentos, combustibles, cosméticos, cigarrillos, envases, etc. Es decir, estamos
constantemente expuestos a ellos.

Generalmente son compuestos apolares por lo tanto lipofílicos, así atraviesan las
membranas biológicas con facilidad. De esta forma son difícilmente excretables ya que
tienden a acumularse en las grasas. En cambio, los compuestos polares, pueden ser
filtrados por los riñones y excretados mucho más rápidamente.

Estos compuestos xenobióticos, no pueden ser excretados en su forma apolar, por lo

tanto, para su eliminación se requiere una transformación previa en metabolitos más
hidrosolubles (biotransformación o metabolización). Estas reacciones de “detoxificación”
ocurren principalmente en el REL, peroxisomas y mitocondrias. En general las reacciones
de detoxificación ocurren en dos etapas:

1.Oxidaciones:

Reducciones e hidrólisis convierten el xenobiótico en un metabolito más polar.

2. Conjugación:

Unión covalente, del xenobiótico o su metabolito con una molécula endógena polar, para
facilitar su eliminación del cuerpo.

CITOCROMO P450.

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Son llamadas así porque la enzima fue descubierta en preparaciones de microsomas que
habían sido reducidas químicamente y expuestos después a monóxido de carbono,
mostrando un pico de absorción característico a 450nm.

Los CITOCROMOS P450 son hemoproteínas que están distribuidas ampliamente en la

naturaleza de los organismos vivos, peculiarmente en bacterias que participan en el
metabolismo del alcanfor, como pseudomona putida.

Los citocromos P450 son una gran familia de proteínas, que catalizan reacciones
principalmente de hidroxilación, para darles nombres determinados y específicos se les ha
dado una nomenclatura especial:

CYP: Que se refiere a cualquier Citocromo P450 CYP3A4

Familia subfamilia miembro N° de la subfamilia

Esto quiere significar a un CITOCROMO de la FAMILIA 3 , de SUBFAMILIA A, que es el 4°

MIEMBRO DE LA SUBFAMILA A.

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REACCIONES DE FASE 1

Las reacciones de la FASE 1 están en su mayoría gobernadas por hidroxilación, en una

reacción donde actúan las CITOCROMO P450, donde la citocromo P450 reductasa con
ayuda de NADPH +H, como agente reductor proveniente de la vía de los fosfatos de
pentosa, y utilización de oxigeno molecular, primero el sustrato(xenobiótico) que lleva
hidrogeno en su molécula, se liga a la CITOCROMO P450, inmediatamente el hierro férrico
(Fe3+) de su núcleo hem se reduce a hierro ferroso(Fe2+) tomando un electrón del
NADPH+H, con lo que queda un protón de hidrogeno libre en la coenzima, luego ingresan 2
átomos de oxígeno (oxígeno molecular), que se unen al hem, luego ingresa un átomo de
hidrogeno (protón de hidrogeno + electrón) provenientes de NADPH+H que se combina
con uno de los dos oxígenos que están ligados al hem de la hemoproteína, entonces
ingresa el protón de hidrogeno que estaba libre, este protón desplaza al electrón que se
encuentra reduciendo al hierro, (por lo consiguiente el hierro se oxida de Fe2+ a Fe3+), y se
forma un hidrogeno completo, la CITOCROMO P450 une ese hidrógeno con un OH-
tomado del “OOH”, que está ligado al hem, dejando un átomo de oxigeno ligado al hem, y
por la reacción que surgió también deja como residuo una molécula de agua, luego la
CITOCROMO P450 entrega el átomo de oxígeno al sustrato que ya tenía un hidrógeno,
para formar finalmente el OH del sustrato de y luego sigue la liberación del sustrato
hidroxilado, XENOBIOTICO HIDROXILADO.

RH + O2 + NADPH + H+  ROH + H2O + NADPH+

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Las reacciones de la FASE 1 no solamente se dan por hidroxilación donde actúa la CITOCROMO
P450, sino también por:

 Oxidación Citocromo P-450

 Flavin monooxigenasa.

 Alcohol deshidrogenasa.

 Aldehido deshidrogenasa.

 Xantina oxidasa.

 Reducción Citocromo P-450.

 Hidrólisis Esterasas.
 Hidratación Epóxido hidratasa.
 Isomerización Isomerasas.

Monooxigenasa: RH + NADPH + O2 + H+  ROH + NADP+ + H2O

Oxidasa: NADPH + O2 + H+  NADP+ + H2O2

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Peroxidasa: RH + LOOH  ROH + LOH

REACCIONES FASE II

Conjugación de los xenobioticos, osus metabolismos como endógenos po

IV. RESULTADOS:

DETOXIFICACIÓN HEPÁTICA Y DEFENSA ANTIOXIDANTE POR EFECTO DE

XENOBIÓTICOS ALIMENTARIOS

Xenobiótico es un término genérico que se asigna a toda sustancia que ingresa a

nuestro organismo a través de diferentes vías o que entra en contacto con nuestro

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cuerpo y es capaz de ocasionar alteraciones en diferentes rutas metabólicas, sea en
forma inmediata o a mediano o largo plazo. Ante esta agresión, el organismo recurre a
un complejo sistema que realiza la biotransformación de xenobióticos que comprende
reacciones de oxidación, reducción, hidrólisis, conjugaciones con metabolitos celulares,
etc. cuya finalidad es la formación de productos no tóxicos o de baja toxicidad celular y
que además sean de fácil excreción.

El modo como un xenobiótico ejerce sus efectos es cuestión fundamental en todo

estudio d toxicidad, sin embargo muchos de ellos sconl vastas investigaciones aún
quedan en el terreno especulativo. Dos de las teorías más importantes son la
modificación covalente y el estrés oxidativo. Hace cinco décadas Miller y Miller en sus
estudios de colorantes cancerígenos, observaron la unión covalente de compuestos
químicos a macromoléculas tisulares. Actualmente existe una larga lista de compuestos
que suponen este tipo de toxicidad.

El estrés oxidativo se expresa principalmente por la lipoperoxidación y la oxidación

celular del tripéptido glutatión. Para este caso existen diversos sistemas enzimáticos
capaces de reducir los niveles celulares de los intermediarios reactivos del oxígeno o
hidroperóxidos orgánicos producidos por un ciclo rédox.

El papel del oxígeno es clave en este proceso. Este elemento es una especie única que
no se comporta en algunos casos como una molécula sino como dos radicales libres
ligados, y juega en todo el ambiente biológico, un rol decisivo, para iniciar y propagar
el estrés oxidativo.

La reaccin central en la cascada para la producción de metabolitos reactivos del

oxígeno es la reducción del oxígeno molecular al radicaarl superóxido, reacción que
puede ser catalizada por diversas oxidasas. Este proceso denominado ciclo rédox es
corto pero es acelerado por la interacción con especies prooxidantes como las
quinonas.

En el medio acuoso a pH neutro, las soluciones de superóxido decaen a peróxido de

hidrógeno. La protonación del superóxido produce un radical hidroperoxilo, de mayor
reactividad comportándose como un oxidante más fuerte.

O2 + H+ ------> HOO

La química del superóxido en un medio aprótico sirve de modelo en el ambiente

químico de las membranas biológicas y acompaña a cuatro modos básicos de acción:

 Transferencia de un electrón (el más común)

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  Sustitución nucleofílica.

 Deprotonación.

 Abstracción de un átomo de hidrógeno.

Una vez formado en el medio biológico sufre una variedad de reacciones químicas y
metabólicas que lleva a otros metabolitos reactivos:

Químicamente los metabolitos reactivos del oxígeno (MRO) poseen diferentes

reactividades y vidas medias. El peróxido de hidrógeno se comporta como un agente
oxidante débil, es más liposoluble que el superóxido lo que le permite moverse más
rápidamente entre los compartimentos biológicos.

Los metabolitos OH, 1O2 y RO- son tan reactivos y de vidas medias tan efímeras (10 -9 s)
que reaccionan con constantes de velocidad cercanas a las limitadas por difusión y
pueden reaccionar potencialmente con cualquier molécula biológica.

El oxígeno singlete puede reaccionar como nucleofílico o electrofílico. La formación de

este oxígeno incrementa la reactividad de la molécula debido a que alivia la restricción
del spín.

El radical hidroxilo es único, porque constituye el único radical oxi que formado cerca
del DNA puede añadirse a sus bases y abstraer átomos de hidrógeno de la hélice del
DNA, debido a una combinación de alta electrofilicidad y alta reactividad
termodinámica.

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La lipoperoxidación, es un proceso que se produce normalmente a bajos niveles en
todas las células y tejidos. Implica conversión oxidativa de ácidos grasos insaturados a
productos principales conocidos como hidroperóxidos lipídicos o lipoperóxidos y una
variedad de productos secundarios.

La lipoperoxidación también ocurre por procesos controlados enzimáticamente

(lipooxigenasa, cicloxigenasa). Bajos niveles de este proceso peroxidativo son
esenciales a muchos procesos celulares normales en que pequeñas cantidades de
lipoperóxidos y productos de escisión semiestables actúan, como mensajeros intra y
extracelulares. Cualquier desbalance o desequilibrio entre fuerzas prooxidantes y
antioxidantes en el que predominan las primeras, puede ampliamente definirse como
estrés oxidativo.

Los sitios primarios de reacción de la lipoperoxidación implican la participación de los

ácidos grasos poliinsaturados y colesterol asociados a membranas y tioles de proteínas
integrales. Esto altera la fluidez y las características de permeabilidad de la membrana
celular e inducen eventualmente a extensas zonas de daño en membranas.

Esta injuria puede propagarse localmente o a lugares distales al sitio de inicio, que se
refleja mediante incremento de la lipoperoxidación a nivel sanguíneo, en los niveles de
LDL circulante, etc.

De lo anteriormente descrito es indudable que toda célula viva posee los

requerimientos y condiciones necesarios para que el proceso de estrés oxidativo
ocurra, los cuales son: abundancia de lípidos, aún más los insaturados, el ambiente
inundado de oxígeno, catalizadores como metales de transición, temperatura,
humedad, movimiento, de modo que nada impide que ello suceda; sin embargo si todo
lo expuesto ocurriera de manera dramática como se ha descrito, probablemente no
existiría ser viviente aeróbico; para superar estas condiciones desfavorables, todo
organismo cuenta con un complejo mecanismo antioxidante de defensa
interrelacionando a nivel celular y molecular que actúa permanentemente para
garantizar la integridad estructural.

Salvaguardando el complejo sistema de defensa antioxidante, pero con el fin de

conocer en forma más sencilla las principales defensas con que cuenta una célula se
identificará algunos de los principales.

DEFENSA ANTIOXIDANTES PRIMARIAS

SUPERÓXIDO DISMUTASA (SOD): constituye una familia de metaloenzimas que catalizan la

dismutación del radical superóxido

2O2 + 2H+ ------> H2O2 + O2-

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Operan efectivamente con constantes de velocidad cercanas a 2 X 109 M-1s-1. A pH
7,8 en un medio acuoso, la constante de la dismutación espontánea es 8 X 104 M-1s-
1. Esta reacción es de segundo orden para el superóxido, y su primera vida media es
una función inversa a la concentración inicial del superóxido. A una concentración de 1
X 10-4 M de superóxido la vida media, en ausencia de captadores, sería
aproximadamente 0,05 s mientras que a 1 X 10-10 M de superóxido sería de 14 horas.

La reacción entre el radical y la enzima es de primer orden para el superóxido y la vida

media sería independiente de la concentración del superóxido. Dada una concentración
aproximada de 1 X 10-5 M de SOD y una concentración razonable de superóxido de 1
X 10-11, entonces la dismutación enzimática sería 106 más rápida que el proceso
espontáneo. Además la reacción del superóxido con la enzima es 2 X 109 M-1s-1 la
cual es 104 más rápida que la reacción espontánea.

La dismutación del superóxido a peróxido de hidrógeno es fuertemente favorecida y

consume protones, por lo que en un ambiente aprótico se comporta corno una
poderosa base. Puede sustraer un protón y generar carbaniones que reaccionan
rápidamente con el oxígeno. Muchas de las oxidaciones en solventes no próticos que se
han atribuido al superóxido, parecen proceder de esta manera, probablemente por el
microambiente de baja constante dieléctrica dentro de la célula.

Las SODs tienen una variedad de grupos prostéticos, que dan lugar a grupos distintos.
La enzima prevalente en células eucariotas es SOD-CuZn, una proteína estable
dimérica (32 000 dalt.) El cobre es esencial para la actividad catalítica de la enzima,
mientras que el zinc imparte estabilidad. Se halla principalmente en el citosol.

Una segunda enzima es la SOD-Mn presente en eucariotes y procariotes. La hallada en

células eucariotes es tetramérica y se localiza principalmente en mitocondrias.

Otra enzima también identificada en tejidos animales es la SOD-Cu, glicoproteína

hidrofóbica, tetramérica (135 000 dalt.), de distribución heterogénea, pero sobre todo
en plasma sanguíneo; se le denomina también SOD extracelular.

DEFENSAS SECUNDARIAS

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VITAMINA E: O alfa tocoferol, reacciona con una variedad de radicales libres a
velocidades relativamente altas, produciéndose el radical cromanoxil (VIT.E-O). La
reacción es considerada formalmente como una transferencia de un átomo de
hidrógeno.

Vit E-OH + ROO ------> Vit E-O + ROOH

Sin embargo existe otra posibilidad considerada como transferencia de electrones

Vit E-OH + ROO ------> Vit E-OH+ + ROO-

Particularmente en un medio apolar como en las membranas y lípidos, luego ocurre la

deprotonación del radical antioxidante en la reacción con el agua inmersa en la fase
lipídica.

Vit E-OH+ + H2O ------> Vit E-O + H3O+

Estas reacciones, sin embargo, no explican satisfactoriamente porque la inhibición de

la lipoperoxidacíón de membranas por el alfa tocoferol no está acompañada por la
esperada acumulación de hidroperóxidos lipídicos.

El contenido de esta vitamina determina la susceptibilidad a la injuria por agentes

peroxidantes de las membranas microsomales, mitocondriales, LDL, hepatocitos, etc.

GLUTATION S-TRANSFERASA:

Constituido por un grupo de enzimas diméricas que a diferencia de la GSHpx no

metaboliza peróxido de hidrógeno. Catalizan reacciones de conjugación de GSH con
compuestos electrofílicos formando aductos covalentes. Las funciones fisiológicas de
estas enzimas son diversas, pueden tener relación con el metabolismo del alcohol,
metales pesados, reducción de peróxidos y metabolismo de drogas.

La presente investigación se propone estudiar los efectos de dos xenobióticos

preparados a nivel industrial (hot dog y nitrito de sodio) en la producción del estrés
oxidativo en ratas a corto plazo, cuando son suministrados a través del alimento,
además se demostrará el papel de la vitamina E como antioxidante natural, cuando se
administra simultáneamente con los xenobióticos.

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El estrés oxidativo será evidenciado a través de la cuantificación de la lipoperoxidación
expresada en la producción de un complejo tiobarbitúrico-malondialdehído; como
respuesta a este fenómeno se medirán las actividades de SOD y GSH S-transferasa,
Los cambios que se produzcan en estos indicadores después del tratamiento con la
vitamina reflejará su papel antioxidante.

Todos los organismos aerobios vivos están expuestos constantemente a una serie cada
vez más creciente de agentes externos (xenobióticos) que finalmente llegan al medio
interno y al intracelular. En el caso del hombre por ejemplo, estos compuestos
extraños son subsecuentemente eliminados, sea de manera intacta o metabolizados
por las "enzimas denominadas "enzimas metabolizadoras de drogas" o enzimas
detoxificantes. Muchas de las sustancias exógenas son ingeridas con los alimentos
provenientes del ambiente natural o de alimentos procesados [23, 33, 50].

Cuando el xenobiótico es sometido a un proceso de metabolización, este ocurre a

través de una o más enzimas del sistema antioxidante. El órgano más importante en
esta biotransformación es el hígado, tanto en el aspecto cualitativo y cuantitativo
debido a que contiene altos niveles de enzimas y otros compuestos que metabolizan
drogas, y porque captan rápidamente xenobióticos de la sangre [26].

En realidad, estas enzimas también actúan normalmente en condiciones fisiológicas, es

más, los metabolitos que son sustratos de estas enzimas se forman constantemente a
lo largo de toda la vida, de manera que pequeños "cuadros de estrés oxidativo" pueden
estar ocurriendo intracelularmente y sólo si estos mecanismos protectores son
agotados o si se pierden en alguna partícula celular, ocurrirá un desbalance y se
establecerá el cuadro de estrés oxidativo que desemboca en lipoperoxidación,
oxidación de grupos -SH de proteínas, daño del DNA, etc. [31]

METABOLISMO DE FARMACOS, GENERACION DE METABOLITOS REACTIVOS Y SU PAPEL EN EL ORIGEN DE LA

REACCIONES INMUNOLOGICAS A FARMACOS

EL PORQUÉ DE LA EXISTENCIA DEL METABOLISMO DE XENOBIÓTICOS

Una capacidad metabólica singular que los animales superiores y el ser
humano han adquirido en el transcurso de la evolución, es la de metabolizar
compuestos extraños para el organismo, sin relevancia para su metabolismo
energético, para facilitar su eliminación del organismo. Estos compuestos, denominados
xenobióticos, se encuentran presentes en los alimentos, en el medio
ambiente, con lo que inevitablemente entramos en contacto con ellos. Suelen
ser de naturaleza lipofílica, por lo que tienen una tendencia natural a acumularse
en los entornos lipídicos del organismo. A diferencia de los compuestos volátiles
(cuya eliminación se facilita mediante intercambio gaseoso en los pulmones)
o los hidrosolubles (filtración renal), la eliminación de los compuestos lipófilos
es mucho más problemática, por lo que su acumulación en el organismo
puede llegar a desencadenar fenómenos de toxicidad.
El hígado contribuye de forma mayoritaria a la función de facilitar la eliminación
de los xenobióticos lipófilos, mediante un conjunto de reacciones,

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globalmente denominadas de biotransformación, en las que se modifica de
manera más o menos compleja la estructura química de los xenobióticos para
aumentar su hidrosolubilidad y así facilitar su eliminación. Intestino, pulmones,
piel y riñón siguen en importancia al hígado, en cuanto a su capacidad para
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metabolizar xenobióticos. También contribuyen a estos procesos de biotransformación
los microorganismos saprofíticos que colonizan el tracto intestinal.
El resultado final de la biotransformación de un xenobiótico es la formación
de metabolitos que, por su menor lipofilicidad son más solubles en agua,
más fácilmente eliminables por vía renal o biliar y, por lo general, menos tóxicos
(Fig. 1). Es por ello por lo que a estas reacciones se les denomina también
reacciones de detoxificación.

FORMACIÓN DE ADUCTOS COVALENTES, COMO CONSECUENCIA

DEL METABOLISMO Y LA BIOACTIVACIÓN DE FÁRMACOS
En el curso de la biotransformación de los fármacos, tanto en reacciones
de fase I como de fase II, pueden generarse nuevos grupos funcionales que
confieran al metabolito generado la suficiente capacidad para reaccionar con
macromoléculas celulares formando aductos estables. Entre las subestructuras
más frecuentemente implicadas cabe destacar: carbonilos ,ß insaturados, aldehídos,
epóxidos, y algunos ésteres activos como son los conjugados con ácido
glucorónico, o con sulfato

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Intermedios reactivos y unión covalente de fármacos a biomoléculas. En el curso de la biotransformación
de xenobióticos pueden formarse especies químicas más reactivas que el propio
fármaco (electrófilos, radicales, conjugados inestables), capaces de reaccionar con macromoléculas
celulares (proteínas y ácidos nucleicos) formando aductos estables.

VARIABILIDAD EN LA EXPRESIÓN DE LAS ENZIMAS DE

BIOTRANSFORMACIÓN Y SUS POSIBLES CONSECUENCIAS
Hay un segundo aspecto inherente a las reacciones idiosincrásicas a fármacos
que es la diferente susceptibilidad y magnitud de la respuesta alérgica.
Parte de las diferencias en la susceptibilidad individual pueden ser debidas a
distinta capacidad en la formación de aductos. En el ser humano existe una variabilidad
interindividual muy significativa en la actividad y/o la cantidad de las
enzimas de metabolismo de fármacos. Parte de dicha variabilidad es debida a la
existencia de genes polimórficos, es decir, genes para los que existen distintas
variantes que codifican por isoformas de la enzima con especificidades y efica-
El metabolismo de fármacos, generación de metabolitos reactivos y su papel en
el origen de las reacciones inmunológicas a fármacos
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Figura 9. Expresión de las diferentes isoformas del CYP450 en tejidos humanos. La actividad enzimática
medible de las varias isoformas del CYP450 es diferente en los distintos tejidos humanos.
Sobresale el hígado en donde se expresan casi todas las isoformas en su nivel más elevado (100%).
No obstante, hay en los distintos tejidos actividades significativas.
(Adaptado de Pelkonen and Raunio; Metabolic activation of toxins: tissue-specific expression and
metabolism in target organs. Env Health Perspective, Supp 4. 105:767-774; 1997).
cias metabólicas diferentes. En otras ocasiones se trata de diferencias fenotípicas
de la expresión de dichos genes. Las diferencias en la actividad de enzimas
en los distintos seres humanos condicionan la mayor o menor formación de un
determinado metabolito reactivo y consecuentemente la formación de aductos,
la sensibilización y la respuesta de hipersensibilidad frente a ese fármaco.

¿CUÁN RELEVANTE ES EL HECHO DE QUE UN FÁRMACO FORME

ADUCTOS COVALENTES?
Conscientes de que el metabolismo de un fármaco puede dar origen a la
formación de metabolitos reactivos y con ello a la formación de aductos y posibles
reacciones adversas, la industria farmacéutica ha puesto énfasis creciente
en la investigación de este fenómeno en los compuestos candidatos a medicamento.
Compuestos que como consecuencia de su biotransformación, dan origen
a metabolitos electrófilos muy reactivos (capaces incluso de alquilar a ácidos
nucleicos) es difícil que lleguen a la fase clínica, porque son fáciles de detectar.
Excepción a esto lo constituyen aquellos fármacos antitumorales alquilantes,
cuyo mecanismo de acción se basa precisamente en la modificación del
ADN. El interés de la investigación se dirige, mas bien, hacia aquellos compuestos
de reactividad más moderada pero capaces de unirse a proteínas, y por
consiguiente con una mayor trascendencia de cara a instaurar reacciones de

Pág.20
sensibilización.
José V. Castell
118
Con la utilización de técnicas cada vez más sensibles (fármacos radiactivos,
espectrometría de masas), es posible, hoy día, la identificación y cuantificación
aductos covalentes fármaco/proteína. Resulta relativamente sencillo constatar si
un fármaco se ha unido o no a proteínas celulares, y si ello es consecuencia de una
reacción de metabolismo/bioactivación. En el caso de disponer del fármaco radiactivo,
la medida de la radiactividad unida a proteínas (no extraíble disolventes orgánicos
de distinta polaridad), proporciona una medida real de la magnitud de formación
de aductos. No es posible determinar, sin embargo, si la entidad molecular
unida a proteínas es el propio fármaco o un metabolito derivado de aquel. Más información
estructural puede obtenerse a través del estudio por espectrometría de
masas de los péptidos conteniendo el aducto fármaco-proteína.
El lugar donde se forman dichos aductos es determinante de cara a una posterior
respuesta alérgica. Los hepatocitos, pese a su notable capacidad de metabolismo,
y en consecuencia la inevitable formación de aductos, participan de manera
muy esporádica en el desencadenamiento de respuestas alérgicas a fármacos. Por
el contrario, otras células/tejidos (piel, pulmón) con una capacidad metabólica
considerablemente
inferior, pueden generar aductos que resultan determinantes para la
puesta en marcha de una respuesta alérgica. Influye en ello no solo la formación de
aductos, sino cómo lleguen a ser accesibles a la vigilancia del sistema inmune.
Existen ejemplos que demuestran cómo fármacos que son causantes de
reacciones alérgicas localizadas en un tejido específico, fueron inicialmente bioactivados
en dicho tejido. Así por ejemplo, el sulfametoxazol, agente que causa
reacciones cutáneas específicas de hipersensibilidad retardada, es metabolizado
por queratinocitos de la piel los cuales, a través de la enzima NAT-1, dan lugar
a intermedios reactivos derivados de la N-4-hidroxilamina. Ello hace presuponer
que estas células estén implicadas en la iniciación y en el desencadenamiento
de la hipersensibilidad cutánea a dicho compuesto.
El mecanismo aceptado acerca de cómo el sistema inmunológico reconoce
a los fármacos para desencadenar una respuesta inmune, se asienta en la hipótesis
de los haptenos formulada por Landsteiner que establece que por debajo
de un cierto peso molecular, un compuesto debe unirse de forma covalente a
proteínas endógenas para poder ser reconocido por el sistema inmune, tras lo
que será procesada y presentada por células presentadoras de antígeno (APCs)
a los linfocitos específicos.

La formación de aductos es una etapa necesaria pero no suficiente para el

desencadenamiento de una respuesta alérgica, en la que hay un componente idiosincrásico
que determina el umbral de tolerancia que un determinado individuo puede
tener frente a los aductos formados; es decir el umbral a partir del cual habría respuesta
inmunológica. Una vez formados los aductos fármaco-proteína, el paso sub-secuente es su
accesibilidad a las células del sistema inmune. Su captación, procesamiento
por las células presentadoras de antígeno (quién y cómo presentan los antígenos,
el estadio de inmadurez o madurez de las células implicadas), y el reconocimiento
del hapteno por los linfocitos, son determinantes para regular la tolerancia
versus no tolerancia inmunológica. Las células dendríticas inmaduras de los tejidos
contribuyen a la tolerancia periférica frente a las moléculas propias y a moléculas
exógenas inocuas gracias a encontrarse en un estadio caracterizado por una alta capacidad
de endocitosis pero de baja expresión de moléculas de HLA y de coestimulación
(CD40, CD80, CD86) en superficie. Ante ciertas situaciones (por ejemplo, daño
tisular) la célula dendrítica inmadura evoluciona hacia la madurez, estadio en el
que pierde capacidad de endocitosis pero aumenta la de procesamiento de antígenos
favoreciendo su asociación al complejo HLA y su exposición en la superficie celular
donde permanecen estables. Se produce de manera concomitante una regulación
positiva de la expresión de moléculas de coestimulación y de moléculas que facilitan
la migración a los ganglios. La maduración induce también un cambio en el

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patrón de citocinas secretadas por las células dendríticas que contribuye a generar
una respuesta de tipo Th1 o Th2 en los linfocitos, determinada fundamentalmente
por la producción de IL-12 o IL-4. Estas señales inducen la activación y proliferación
de los clones linfocitarios específicos que interaccionan con las células dendríticas
maduras, y con ellos el tipo de respuesta inmunoalérgica que se produce.

Mecanismo general de la sensibilización alérgica a fármacos. La generación de especies

químicas reactivas derivadas del fármaco, como consecuencia de las reacciones de biotransformación,
pueden dar origen a aductos fármaco-proteína (1). La exposición de dichos aductos a la vigilancia
del sistema inmune puede sensibilizar a linfocitos TH (2), que se traducirá en un tipo de respuesta
TH1 o TH2, y finalmente una sensibilización que hará que, cuando de nuevo se produzcan
aductos (como consecuencia de seguir administrando el fármaco), se produzca una respuesta dirigida
contra el fármaco, en la célula que genere dichos aductos (3).

V. BIBLIOGRAFIA:
https://www.uv.es/jcastell/Metabolismo_de_xenobioticos.pdf
o DETOXIFICACIÓN HEPÁTICA Y DEFENSA ANTIOXIDANTE POR EFECTO
DE XENOBIÓTICOS ALIMENTARIOS
http://sisbib.unmsm.edu.pe/BibVirtual/Tesis/Salud/Suarez_C_S/discus.htm

https://www.uv.es/jcastell/Metabolismo_de_farmacos.pdf

EL METABOLISMO DE FÁRMACOS,
GENERACIÓN DE METABOLITOS REACTIVOS
Y SU PAPEL EN EL ORIGEN DE LAS REACCIONES
INMUNOLÓGICAS A FÁRMACOS

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