UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTÓBAL DE HUAMANGA

FACULTA DE INGENIERÍA QUÍMICA Y METALURGIA

ESCUELA DE FORMACIÓN PROFESIONAL DE INGENIERÍA QUÍMICA

ASIGNATURA: ANÁLISIS INSTRUMENTAL QU – 342.

PRÁCTICA Nº 04:

DETERMINACIÓN DEL pKA DE UN INDICADOR ACIDO – BASE POR

ESPECTROFOTMETRIA.

PROFESOR: M. Sc. Jorge García-Blásquez Morote.

INTEGRANTES: Carlos Enrique García Santiago.

FECHA DE ENTREGA: 09 de septiembre del 2014.

________________________________________________________________________
I. OBJETIVOS:

 Observar la secuencia de operaciones que se sigue en la determinación de

una constante de equilibrio.
 Elaborar los espectros de absorción del indicador a pH bajo y alto, determinar
la longitud de onda adecuada para las lecturas de absorbancia a diferentes pH
del indicador.
 Determinar la constante de ionización del azul de bromotimol.

II. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA:

DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE pKA.

Mediante medidas espectrofotométricas se determinan las concentraciones de la

forma asociada y de la disociada de una sustancia sobre la base de que -1- ambas
formas obedecen la ley de Lambert-Beer y -2- que las concentraciones de las
mismas son determinables, ya sea porque absorben a diferentes longitudes de
onda o bien porque se cumple la condición de aditividad. La determinación se
realiza a un pH tal que ambas formas se encuentren en concentraciones
apreciables, esto es, a un pH próximo al pKa de la sustancia o, lo que es lo mismo,
grado de disociación cercano al 50%.
Para un indicador ácido monoprótico:

Análisis Instrumental - UNSCH

Aplicando logaritmo negativo:

Determinando las concentraciones de la forma asociada y disociada (de la misma

manera que en el práctico de Cr-Co) y midiendo el pH se puede calcular el pKa.
Necesitamos primeramente obtener los espectros de soluciones que contengan el
indicador a diferentes valores de pH: una cuyo pH sea tal que la forma disociada
del indicador sea la especie predominante, otra en que la especie predominante
sea la no disociada y la tercera a un pH intermedio de manera tal que ambas
formas se encuentren presentes y en equilibrio. Graficando la absorbancia en
función de la longitud de onda para las tres soluciones se obtendrá un gráfico
análogo a lo que se obtuvo para mezclas Cr-Co. En la figura se muestra un
ejemplo correspondiente al indicador verde de bromocresol. Allí puede observarse
que hay una longitud de onda en que los tres espectros se cortan. En ese punto se
llama punto isosbéstico y corresponde a la longitud de onda en que las dos formas
tienen la misma absortividad. La presencia de un punto isosbéstico (y constancia
para distintas distribuciones a concentración total constante) significa que la
concentración analítica total se distribuye entre solamente dos especies (HIn e In-
). Si la absorbancia y longitud de onda de un presunto punto isosbéstico varía será
porque existe una tercera o más especies para la sustancia (o indicador) y que no
se observa en los espectros.

Análisis Instrumental - UNSCH

Selección de la longitud de onda de trabajo:
Luego de obtenidos los espectros para las tres soluciones, se seleccionará para el
análisis una longitud de onda tal que los valores de absorbancia de la forma no
disociada [HIn] y el de la forma disociada
[In-] tengan la mayor diferencia relativa, por ejemplo λ1 o λ2 en el gráfico anterior.

Cálculos
Si en el gráfico anterior seleccionamos por ejemplo la longitud de onda λ 1,
llamamos 1 al espectro de la forma alcalina (totalmente disociada), 2 al espectro
de la forma ácida (sin disociar) y 3 al espectro de la solución de pH intermedio y
aplicamos la ley de Lambert-Beer:

Análisis Instrumental - UNSCH

III. MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS:

Materiales:

 07 fiolas de 50 mL.  01 estufa eléctrica.

 02 vasos de precipitado de 50 mL.  01 probeta de 10 mL.
 01 luna de reloj.  02 fiolas de 50 mL.
 01 varilla de vidrio.  01 espátula.
 01 pH metro.  01 balanza analítica.
 01 espectrofotómetro.  01 piseta.
Reactivos:

 Fosfato di-hidrógeno de sodio, NaH2PO4.

 Fosfato hidrogeno di-potásico, K2HPO4.
 Hidróxido de sodio, NaOH.
 Indicador Azul de bromotimol al 99%, C27H28Br2O5S.
 Alcohol etílico.
 Agua destilada, H2O.

IV. PROCEDIMIENTOS EXPERIMENTALES:

4.1. Reactivos:

 Azul de bromotimol; disolver 0.05 g de reactivo en 25 mL de etanol al 40 %.

 Fosfato di-hidrógeno de sodio; disolver 1.2 g de NaH2PO4 en agua
destilada y diluir a 50 mL.
 Fosfato hidrogeno di-potásico; disolver 1.7 g de K2HPO4 en agua destilada
a 50 mL.
 Hidróxido de sodio; disolver 1.2 g de NaOH en agua y diluir a 10 mL.

4.2. Preparación de soluciones amortiguadoras:

 Disponemos siete fiolas limpias de 50 mL y colocamos en cada una de

ellas 1 mL de solución de azul de bromotimol y luego agregamos los
siguientes volúmenes de soluciones de fosfatos:

Fiola Nº NaH2PO4 (mL) K2HPO4 (mL)

1 5 0
2 5 1
3 10 5
4 5 10
5 1 5
6 1 10
7 0 5

 A las 07 fiolas, adicionamos 2 gotas de NaOH.

Análisis Instrumental - UNSCH

  Diluimos cada solución hasta la marca y homogenizamos y registramos el
pH de cada solución.

4.3. Determinación de las longitudes de onda máxima absorbancia:

 Elaboramos los espectros de absorbancia del azul de bromotimol, de

referencia en el rango de 400 a 640 nm de las soluciones 1 y 7.

4.4. Lectura de absorbancias a diferentes pH:

 Seleccionamos dos longitudes de onda de manera que HIn e In- presenten

absorbancias muy diferentes.
 Medimos a estas longitudes de onda las absorbancias de las siete soluciones.

V. DATOS Y RESULTADOS EXPERIMENTALES:

5.1. Reportar los espectros de absorbancia de la soluciones acida y alcalina del

azul de bromotimol.

Análisis Instrumental - UNSCH

 5.2. Elaborar la gráfica de A vs pH para cada longitud de onda seleccionada.

Nº NaH2PO4 K2HPO4 Absorbancias

pH λ (nm)
Fiolas (mL) (mL) λ = 431 λ = 610
1 5 0 4,80 431 0,614 0,012
2 5 1 5,72 - 0,597 0,066
3 10 5 6,57 - 0,490 0,308
4 5 10 7,21 - 0,333 0,710
5 1 5 7,59 - 0,242 0,982
6 1 10 7,93 - 0,185 1,052
7 0 5 11,52 610 0,110 1,181

1.4

1.2

1
Absorbancia

0.8

Series2
0.6
Series1

0.4

0.2

0
0 5 10 15
pH

[𝐼𝑛− ] 1.05 − 0.53 0.52

= = = 0.98113
[𝐻𝐼𝑛] 0.53 − 0.0 0.53

[𝐼𝑛− ] [𝐼𝑛− ]
log ( ) = log(0.98113) → −0.00827 log ( ) = 𝑝𝐻 − 𝑝𝐾𝑎 𝑝𝐻 = 0
[𝐻𝐼𝑛] [𝐻𝐼𝑛]

−3
−0.00827 = 0 − 𝑝𝐾𝑎 𝑝𝐾𝑎 = 8.2735 ∗ 10−3 𝐾𝑎 = 108.2735∗10

𝐾𝑎 = 1.0192

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 5.3. Determinar las razones de (In-/HIn) para las soluciones 2 al 6.

Nº NaH2PO4 K2HPO4 Absorbancias Relaciones

pH
Fiolas (mL) (mL) λ = 431 λ = 610 [In-/HIn]
1 5 0 4,80 0,614 0,012 0,01954397
2 5 1 5,72 0,597 0,066 0,11055276
3 10 5 6,57 0,490 0,308 0,62857143
4 5 10 7,21 0,333 0,710 2,13213213
5 1 5 7,59 0,242 0,982 4,05785124
6 1 10 7,93 0,185 1,052 5,68648649
7 0 5 11,52 0,110 1,181 10,7363636

5.4. Elaborar la gráfica log (In-/HIn) contra pH.

Nº NaH2PO4 K2HPO4 Absorbancias Relaciones Log [In-/Hin]

pH
Fiolas (mL) (mL) λ = 431 λ = 610 [In-/Hin]
1 5 0 4,80 0,614 0,012 0,0195 -1,7090
2 5 1 5,72 0,597 0,066 0,1106 -0,9564
3 10 5 6,57 0,490 0,308 0,6286 -0,2016
4 5 10 7,21 0,333 0,710 2,1321 0,3288
5 1 5 7,59 0,242 0,982 4,0579 0,6083
6 1 10 7,93 0,185 1,052 5,6865 0,7548
7 0 5 11,52 0,110 1,181 10,7364 1,0309

1.0000

0.8000 y = 0.7917x - 5.4384

R² = 0.992
0.6000

0.4000

0.2000
Log [In-/HIn]

0.0000
0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 Series1
-0.2000
Linear (Series1)
-0.4000

-0.6000

-0.8000

-1.0000

-1.2000
pH

Análisis Instrumental - UNSCH

 5.5. Calcular la molaridad de las soluciones preparadas.

Nº NaH2PO4 K2HPO4 Concentración

Fiolas (mL) (mL) (M)
1 5 0 0,17568
2 5 1 0,01888
3 10 5 0,08813
4 5 10 0,20315
5 1 5 0,28098
6 1 10 0,30101
7 0 5 0,19715

VI. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES:

Conclusiones:

 En base al trabajo desarrollado utilizando el punto isosbestico pudimos concluir

que 400 nm y 640 nm son las longitudes de onda de trabajo que usaremos para
determinar el pKa del azul de bromotimol.
 La determinación del pKa de un indicador es uno de los procedimientos más
sencillos e ilustrativos de la técnica espectrofotométrica.
 Logramos elaborar los espectros de absorción a diferentes pH del indicador.

Recomendaciones:

 Al elaborar la gráfica de Absorbancia Vs pH tanto en el papel milimetrado como en

la hoja de cálculos del Excel se observa una diferencia con respecto al punto
isobestico.
[𝐼𝑛− ]
 La gráfica del log ([𝐻𝐼𝑛]) Vs pH, cuando tomamos desde la relación en el punto 1
hasta la 7, se observa que la figura no es una recta como debería ser sino más
bien se muestra una curvatura y por ese motivo despreciamos los valores de las
relaciones 1 y 7, para obtener una recta y así saber el pKa y Ka.

VII. BIBLIOGRAFÍA:

 http://triplenlace.com/2013/12/20/determinacion-espectrofotometrica-del-pka-
de-un-indicador-acido-base/
 http://es.scribd.com/doc/104080253/EL-pK-DE-UN-INDICADOR

Análisis Instrumental - UNSCH