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ESMERALDAS
FACULTAD DE INGENIERÍAS Y TECNOLOGÍAS CARRERA DE
INGENIERÍA QUÍMICA
TRABAJO EXPERIMENTAL
AUTOR:
TUTORA:
ESMERALDAS - ECUADOR
2017
I
DECLARACIÓN DE DERECHOS DE AUTORÍA
Yo, MOSQUERA BAGUI ESTEFANIA JAHAIRA con C.I. 080349265-1 declaro bajo
de los apiarios en dos recintos de Esmeraldas.”, ha cumplido con los parámetros exigidos
FIRMA
II
CESIÒN DE DERECHOS DE AUTOR
Dr.
Girard Vernaza A.
Rector de la Universidad Técnica “Luis Vargas Torres” de Esmeraldas.
Cesión de Derechos de Autoría del trabajo realizado como requisito previo para la obtención
del Título de Tercer Nivel, cuyo tema fue: “Análisis físico-químico y microbiológico de la
establece la Ley de Propiedad Intelectual, con la aprobación del Decreto Nº. 508 y Registro
ESTEFANIA JAHAIRA
MOSQUERA BAGUI
C.I. # 080349265-1
Contacto: # 0997156891
III
CERTIFICACIÓN
IV
TRIBUNAL EXAMINADOR DE GRADUACIÒN
FACULTAD DE INGENIERIAS Y
TECNOLOGIAS
Los miembros del tribunal examinador de graduación del trabajo de Proyecto Técnico:
“Análisis físico-químico y microbiológico de la miel (Apis Mellifera) de los apiarios en
dos recintos de Esmeraldas.” y su propuesta. Elaborado por
Mosquera Bagui Estefanía Jahaira, como requisito previo para la envestidura de Ingenieros
Químicos, una vez evaluado lo aprueban.
V
DEDICATORIA
A DIOS: Gracias Padre Santo por todo lo que has sido para mí, por tus
fidelidad, que siempre me mantuvieron firmes para seguir luchando hasta logar
uno más de tus propósitos en mi vida. Gracias Señor Jesucristo por ser el mejor
maestro que cuida y guarda mis pasos de noche y de día. Bendito seas Espíritu
Santo por ser mi consolador y fuente de esperanza, así como dice tu palabra:
Filipenses 4.13
2 Timoteo 4.7
VI
AGRADECIMIENTO
Doy gracias a Dios por siempre bendecir y guiar mi camino, por no abandonarme en
ningún momento y por darme vida y salud para seguir adelante y poder lograr todo lo
que me propongo.
A todas las personas que sin la necesidad de nombrarlas han participado de alguna manera en
el trayecto de mi vida como estudiante.
Agradezco de todo corazón a mi “ALMA MATER”. Siendo este trabajo como una
recompensa por los conocimientos en ella adquiridos. Y quedando en deuda con ella y he de
poner muy en alto en donde quiera que me encuentre.
VII
INDICE DE CONTENIDOS
Pag.
CAPITULO I: INTRODUCCIÓN 1
Planteamiento del Problema 4
Hipótesis 4
Objetivo General 4
Objetivos Específicos 5
VIII
ÍNDICE DE TABLAS
Pág.
Tabla 3 Tabla de Corrección de las lecturas deI refractómetro con escala para 23
sacarosa a una temperatura diferente de 20 ± 0,5°CTotal
IX
RESUMEN
Se define a la miel como un fluido natural de sabor dulce, producida por la abeja
(Apis mellifera) a partir del néctar de las plantas o de secreciones de partes vivas de plantas,
que las abejas recolectan, transforman combinándolas con sustancias especificas propias. Sus
características físicas, químicas y microbiológicas están relacionadas con la especie de la
planta, así como con la especie de abeja que la elabora. En el presente trabajo se escogieron
dos centros apícolas de la provincia de Esmeraldas (Chucaple y Santa Elvira), con el objetivo
de determinar la composición físico-química de la miel que producen (en cuanto a pH,
Conductividad Eléctrica, Azúcares Reductores Totales, Sólidos Solubles, Índice de
refracción, % de Cenizas, % de Humedad, Acidez libre e Hidroximetilfurfural). Asímismo, se
realizó una evaluación microbiológica (en base a Mohos y Levaduras, Recuento de Aerobios
Totales, de E.coli y de Salmonellas). Ambos tipos de parámetros teniendo en cuenta la norma
de referencia NTE INEN 1572 (2016) Miel de abejas. Requisitos. La determinación de dichos
parámetros se realizó con vistas a evaluar la calidad, madurez, pureza y/o deterioro de la miel
de abejas comercializada en la ciudad de Esmeraldas proveniente de estos dos centros
apícolas. Se adquirieron 10 muestras en frascos de 250g de cada centro apícola. Los
Resultados mostraron los valores siguientes: pH para la miel de Chucaple (MC)=3,62 y para
la miel de Santa Elvira (MS)=4,01; la Conductividad Eléctrica para MC=4,33 µʃ/cm y
MS=4,25 µʃ/cm; Azúcares Reductores para MC= 65,3g/100g y MS= 64,9g/100g; % de
Humedad para MC=19,8% y MS=18,6%; Índice de Refracción para MC= 1,4880 y MS=
1,4925, Acidez Total para MC=88,8 meq/1000g y MS=39,8 meq/1000g, Sólidos insolubles
para MC=79,2% y MS= 80,5%, Cenizas para MC=0.21 % y MS=0,17% ,
Hidroximetilfurfural (HMF) 63,3%. Con respecto al parámetro de Acidez libre para MC=
Miel Chucaple, excedió los límites permisibles (Máx. 40,0 meq/1000g) con respecto a la
Norma NTE INEN 1634:1989 (2012). Los parámetros microbiológicos evaluados no
mostraron contaminación en ninguna de las muestras analizadas. En conclusión, los dos tipos
de mieles recolectadas en las zonas apícolas escogidas para la investigación, cumplieron con
casi todos los requisitos de la normativa ecuatoriana para los parámetros físico-químico y
microbiológicos determinados.
PALABRAS CLAVE: Miel de abejas, parámetros físico-químicos, NTE INEN 1572 (2016)
X
SUMMARY
Honey is defined as a natural fluid of sweet taste produced by the bee (Apis mellifera) from
the nectar of plants or secretions of living parts of plants, which the bees collect, transform by
combining them with their own specific substances, their characteristics physical, chemical
and organoleptic are related to the species of the plant and the species of bee that produces it.
Two apicultural centers of the province of Esmeraldas were evaluated, to determine their
physico-chemical composition (pH, Electrical Conductivity, Total Sugars, Soluble Solids or
Brix, Ash, Moisture, Hydroxymethylfurfural), microbiological (Molds and Yeasts, Total
Aerobic, Recount E.coli, Salmonellas). The objective of the present work was to analyze the
physical-chemical parameters of quality to evaluate maturity, purity and deterioration and
microbiological of the honey of bees commercialized in the city of Esmeraldas, with and
without sanitary registry; reference standard NTE INEN 1572 (2016) Bee Honey
Requirements. Ten samples were acquired, 5 bottles of 250g from each apiculture center
Chucaple and Santa Elvira, respectively. The Results of Compliance: pH for MC = 3.62 and
MS = 4.01, Electrical Conductivity for MC = 4.33 μʃ / cm and MS = 4.25 μʃ / cm, Reductive
Sugars for MC = 65.3g / 100g and MS = 64.9g / 100g, Moisture for MC = 19.8% and MS =
18.6%, Refraction Index for MC = 1.4880 and MS = 1.4925, Total Acidity for MC = 88.8
meq / 1000g and MS = 39.8 meq / 1000g, Soluble Solids or Brix Degrees for MC = 79.2%
and MS = 80.5%, Ashes for MC = 0.21% and MS = 0.17%, Hydroxymethylfurfural (HMF)
63.3%.With respect to the parameter of Total Acidity for MC = Chucaple Honey, it exceeded
the permissible limits (Max 40.0 meq / 1000g) with respect to Standard NTE INEN 1634:
1989 (2012). In conclusion, the two samples collected from the apicultural areas comply with
almost all the parameters with the specifications regarding the Ecuadorian regulations.
XI
1. INTRODUCCIÓN
En el Ecuador toma fuerza debido a las ventajas que obtienen los productores
escenario propicio para el desarrollo de esta actividad. Las provincias con mayor
producción están ubicadas en la parte norte del país, estas son: Pichincha, Santo
Domingo, Imbabura, Carchi y Esmeraldas, esta última cuenta con 15 centros apiarios
registrados y autorizados con permisos sanitarios para el manejo del cultivo de miel de
Los productos principales que se obtienen de la colmena son: la miel y jalea real, como
XII
En los recintos de Chucaple y Santa Elvira, se cuenta con un centro apícola cada uno
periodos, el primero comprende desde marzo hasta julio (verano) y el segundo desde el
La miel tiene sus cualidades y propiedades reconocidas y utilizadas por los seres
humanos desde tiempos remotos, como alimento y para endulzar naturalmente con
Existen diversas referencias históricas a esta sustancia. Además de las citas bíblicas,
muchos otros pueblos, como los antiguos egipcios o los griegos, por ejemplo, se
referían a la miel como un producto sagrado, llegando a servir como forma de pagar
los impuestos. En excavaciones egipcias con más de 3.000 años fueron encontradas
Son conocidas diversas variedades de miel que dependen de la flor utilizada como
fuente de néctar y del tipo de abeja que la produjo, pero como éstas la fabrican en
cantidad cerca de tres veces superior de lo que necesitan para sobrevivir, siempre fue
posible, primeramente, recogerse el exceso de ésta para el ser humano y más tarde
XIII
Hoy en día la miel es usada por la industria farmacéutica para la elaboración de
de enzimas y vitaminas.
Por lo anterior resulta muy importante que se den a conocer estos datos al consumidor,
y con esto, poder sugerir a las normas de producción y comercialización seguir con los
final.
XIV
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
La deficiente información del estado sanitario y del cumplimiento de los requisitos exigidos
por la normativa ecuatoriana para la miel de abeja, provocan que no se posea un registro
provincia de Esmeraldas escogidas para este estudio. Esto limita el proceso de producción y
las características organolépticas, entre otros factores, pero se deben analizar además si
cumple con los requisitos para los parámetros establecidos dentro de la norma ecuatoriana de
Seguridad Alimentaria INEN 1572 del 2016: Miel de Abeja. Requisitos, para su posterior
comercialización.
OBJETIVO GENERAL
XV
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
abeja.
determinados.
XVI
2. MATERIALES Y MÉTODO
La norma que regula los requisitos que debe cumplir la miel de abeja para consumo
humano directo y para usos industriales es la Norma Técnica Ecuatoriana Obligatoria
INEN 1572:1988-04 Miel de Abejas: Requisitos. Esta norma diferencia dos clases de
miel: la Clase I que hace referencia a miel de abejas para consumo humano directo, y la
Clase II que hace referencia a miel de abejas para usos industriales. La Tabla 1 muestra
estos requisitos.
CLASE I CLASE II
REQUISITO UNIDADES
MINIMO MAXIMO MINIMO MAXIMO
Sacarosa % en masa - 5 - 7
Relación fructosa-glucosa 1 - 1 -
-
Humedad % en masa - 20 - 23
Hidroximetilfurfural* mg/kg - 40 - 40
Número de diastasa** - 8 - 7 -
Acidez meq/1000g - 40 - 40
XVII
2.2. DEFINICIONES
Es un monosacárido (C6H12O6), del grupo de las cetosas que se encuentra en muchos frutos,
por lo que se le denomina “azúcar de la fruta” a los que otorga su sabor dulce característico,
es un componente de la miel, la sacarosa y la inulina. En la miel se obtiene también como
resultado de la hidrólisis de la sacarosa del néctar, por acción de la enzima invertasa,
producida por las abejas. (Morrison & Boid, 1998; Angel Gil, 2010).
La relación fructosa-glucosa debería ser 1 como mínimo, según NTE INEN 1572; con lo
cual se retardaría el proceso normal de cristalización, por ser esta una solución
sobresaturada de azúcares, la cristalización dependiente del contenido de glucosa, a mayor
cantidad de glucosa más rápido se produce la cristalización. (J. Agudelo Ramos, 2015)
2.2.4. Sacarosa:
XVIII
inversión de una pequeña cantidad de sacarosa. (Morrison & Boid, 1998).
2.2.5. Humedad:
2.2.6. Cenizas:
En miel, el contenido de cenizas dependerá de la fuente del néctar o mielada, que a su vez
estará influido por el origen botánico como por las condiciones edáfico-climáticas y los
métodos de extracción. Las mieles florales poseen un contenido de cenizas menor que las
de mielada. En la miel el porcentaje de minerales es muy bajo 0,05 a 1,5 %. (Angel Gil,
2010). La determinación de cenizas es un parámetro de pureza (higiene), pues valores
elevados podrían indicar contaminación con tierra o adulteración con melaza. (Pierre
Jean-Prost et al., 2007)
XIX
2.2.7. Hidroximetilfurfural:
2.2.8. Acidez:
Uno de los principales ácidos es el glucónico, este se forma por la acción de la enzima
glucosa oxidasa, sobre la glucosa, durante el proceso de transformación de néctar a miel.
Existen por lo menos 20 ácidos orgánicos entre los cuales están acético, cítrico, fórmico,
XX
etc. Los mismos que contribuyen a la estabilidad microbiológica, además de influir en su
aroma. (Angel Gil, 2010; Avilés, Humberto & Matos, Alfredo, 2009).
En la miel se cuantifican tres tipos de acidez: acidez libre, lactónica y total. La acidez
libre se diferencia de la lactónica, por cuanto algunos ácidos de la miel son hidroxiácidos,
es decir son ácidos y alcoholes a la vez. En esta clase de moléculas, en los casos que es
posible la formación de un anillo de 5 o 6 átomos, se produce una esterificación
intramolecular, de hecho, una hidrólisis de un éster pierde agua y abre rápidamente el
anillo lactónico para dar una sal de cadena abierta, para generar un éster cíclico que se
conoce como lactona. (Morrison & Boid, 1998).
2.3.METODOLOGÍA APLICABLE
Para la realización del presente trabajo se tuvo que recurrir a varios análisis que
determinan la calidad de la miel de abeja, ya que son las mayormente utilizadas por las
empresas a nivel provincial y nacional, y así verificar que la miel no esté contaminada ni
adulterada, teniendo las condiciones que nos rigen las normas ya antes mencionadas.
XXI
2.4. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Cada centro apícola consta de 30 colmenas, la miel fue extraída por trabajadores
capacitados, bajo la supervisión del Ing. Raúl Quintero. Se la almacenó en 5 diferentes
contenedores o portadores de paneles, se las traslado a la Sala de Extracción. Unas vez
esterilizada toda la sala, se colocó los paneles dentro de la centrifuga eléctrica, se
centrifugo y a través de una canalización se dreno en un contenedor con un sistema de
filtrado, donde se me permitió la toma de muestra de 5 frascos de 250 g. Luego es
almacenada previamente a su embotellamiento.
Para tomar las muestras de miel, se recomienda extraer la misma por succión, utilizando
una inyección de 20 ml sin aguja y con 10 cm de manguera acoplada.
Se realizó el día jueves 28 de agosto del presente año. Una vez obtenido los 5 frascos de de
250 g de cada centro apícola para muestra, se almaceno a temperatura ambiente 25°C.
La recepción de las muestras en el laboratorio fue el 03 de Octubre para Miel del recinto
Chucaple y el lunes 20 de noviembre para Miel del recinto Santa Elvira. El análisis de
las muestras inició el día miércoles 04 de octubre para Miel de Chucaple y el miércoles
21 de noviembre para Miel Santa Elvira, y terminó el día jueves 16 de octubre para
Miel de Chucaple y el jueves 30 de noviembre Santa Elvira. Para este procedimiento, se
XXII
hizo a la contratación de los servicios profesionales del Laboratorio Lazo, ubicado en la
ciudad de Guayaquil (Cdla. IETEL, Mz. 30 Solar 1, Av. Francisco de Orellana 1007,
Edif. Bauhaus 1er. Piso Ofc.13), dirigido por la Q.F. Susana Lazo, detallando toda la
información en un informe. Se realizaron los análisis en base a los procedimientos
estipulados por la Norma INEN 1572 – 2016 – 10, con respecto a los requisitos de la
Miel de Abeja.
Los análisis que se realizaron y los métodos con los que fueron obtenidos, son los
siguientes:
XXIII
Parámetros Físico-Químicos
Estos métodos de determinación son realizados con el uso de un pHmetro con dos
electrodos. Primero se debe estabilizar el aparato, lavando los electrodos con agua destilada
hasta que la pantalla del pHmetro muestre un valor de 0. Se debe homogeneizar la muestra,
calentándola a baño de María a 65°C, teniendo cuidado de no sumergir por completo el
envase. Posterior a eso procedimos a mezclar correctamente la muestra por unos segundos
para luego dejarla enfriar rápidamente. Al tener impurezas, volvimos a someter a la muestra
a baño de María a unos 40°C por alrededor de 8 minutos, para luego filtrarla por medio de
un lienzo.
Según la Norma NTE INEN 1636:1989 (2012), este método consiste en la incineración de
la muestra del producto hasta la obtención de un residuo incombustible. Para realizar esta
determinación, fueron necesarios los siguientes materiales:
Equipos y Materiales
XXIV
Procedimiento
La Norma NTE INEN 1636:1989 (2012), establece que el contenido de cenizas debe ser
expresado en % en masa, y debe ser calculado mediante la siguiente fórmula:
XXV
Donde C es el contenido de cenizas de la muestra de miel de abejas expresado en %, m es
la masa de la cápsula vacía en gramos, m1 es la masa de la cápsula conteniendo la muestra
en gramos y m2 es la masa de la cápsula conteniendo las cenizas en gramos.
El procedimiento debió realizarse 3 veces por cada muestra, para lograr un resultado más
aproximado.
2.3.3.3 .Determinación del Contenido de Humedad Norma NTE INEN 1632:1989 (2012)
Equipos y Materiales
Procedimiento
Para preparar la muestra a analizar, primero se tuvo que introducir el envase a baño
de María a 65°C por unos 10 minutos hasta que la miel se fundió totalmente, ya que
la muestra se encontraba parciamente cristalizada. Hay que tener cuidado de no
sumergir totalmente el envase con la muestra.
Después de que se fundió en su totalidad, se agita o mezcla la muestra por unos
segundos para luego dejarlo enfriar.
Como la muestra tenía algunas impurezas, se la volvió a calentar en baño de María a
40°C, proceso que duró alrededor de 8 minutos, para luego filtrarla utilizando un
lienzo, obteniendo así una muestra homogeneizada.
XXVI
Luego de tener la muestra homogeneizada, se hace circular agua por la camisa del
refractómetro a una temperatura tal para que el mismo adquiera una temperatura de
20°C, este proceso duró unos minutos. Seguido de esto, procedimos a colocar una
porción de la muestra entre los prismas del refractómetro mientras se sigue haciendo
circular agua para que la temperatura del aparato y la de la muestra sean constantes y
de valores semejantes cuando se vaya a efectuar la lectura.
Finalmente, se debe anotar el resultado que marca el refractómetro para proceder con
los cálculos.
La Norma INEN 1632:1989 (2012) expresa que si la temperatura con la que se determinó
el índice de refracción es diferente a 20°C, se debe añadir 0.00023 por cada °C de más que
tenga. Si la temperatura es inferior a 20°C, se deben restar 0,00023 por cada °C de
diferencia.
XXVII
Tabla 2. Tabla de conversión de Índice de Refracción a Porcentaje de Humedad Total
Índice de % de Índice de % de Índice de % de
Refracción a Humedad Refracción a Humedad Refracción a Humedad
20 ºC 20 ºC 20 ºC
XXVIII
Al tener ya el resultado sacado de la tabla, debimos comprobar si la muestra de miel de
abeja cumplía con los requerimientos de humedad, se lo consigue mediante la siguiente
ecuación (Norma INEN 1632-1989, 2012):
Equipos y Materiales
Procedimiento
Para preparar la muestra a analizar, primero se tuvo que introducir el envase a baño
de María a 65°C por unos 10 minutos hasta que la miel se fundió totalmente, ya que
la muestra se encontraba parciamente cristalizada. Hay que tener cuidado de no
sumergir totalmente el envase con la muestra.
Después de que se fundió en su totalidad, se agita o mezcla la muestra por unos
segundos para luego dejarlo enfriar.
Como la muestra tenía algunas impurezas, se la volvió a calentar en baño de María a
40°C, proceso que duró alrededor de 8 minutos, para luego filtrarla utilizando un
lienzo, obteniendo así una muestra homogeneizada.
Luego de tener la muestra homogeneizada, se hace circular agua por la camisa del
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refractómetro a una temperatura tal para que el mismo adquiera una temperatura de
25°C, este proceso duró unos minutos. Seguido de esto, procedimos a colocar una
porción de la muestra entre los prismas del refractómetro mientras se sigue haciendo
circular agua para que la temperatura del aparato y la de la muestra sean constantes
y de valores semejantes cuando se vaya a efectuar la lectura. Finalmente, se debe
anotar el resultado que marca el refractómetro para proceder con los cálculos
Según la Norma NTE INEN 1634:1989 (2012), este método consiste en determinar la
acidez total en la miel por medio de la valoración de un álcali, mediante el uso de un
pHmetro. La norma dicta que esta acidez total es la suma de las substancias ácidas que
pueden ser valoradas en la muestra de miel por medio de la adición de una solución alcalina
de normalidad conocida, en este caso, el Hidróxido de Sodio (NaOH).
Equipos y Materiales
30
Procedimiento
Se debe titular la muestra diluida con una solución de 0.05N de NaOH a una
velocidad de 5 cm3/min, la titulación se la realiza mientras se efectúa la medición del
pH, para detener la adición del NaOH cuando la solución alcance un pH de 8.5.
Inmediatamente después, se añadieron 10 cm3 de NaOH al 0.05 N y se volvió a titular
con HCl al 0.05 N, empleando una bureta de 10 cm3, y se paró la titulación con el
ácido, cuando el pHmetro indicó que la solución alcanzó un pH de 8.3. Finalizada la
preparación de la muestra, se procedió a determinar la acidez total que contenían las
muestras de miel de abeja, mediante las fórmulas dadas por la Norma NTE INEN
1634:1989 (2012).
Acidez Libre = (cm3 NaOH x 0.05 N – cm3 del título en blanco) x 50/g de muestra.
Para determinar la cantidad de lactonas se obedece a la siguiente fórmula:
Lactonas = (10,00 – cm3 de HCl 0.05 N) x 50/g de muestra.
Para determinar la Acidez Total se obedece a la siguiente fórmula:
Acidez Total = Acidez Libre + Lactonas.
El procedimiento se realizó 3 veces por cada muestra.
31
2.3.3.6. Determinación de Grados Brix Norma NTE INEN 380:86 (2012).
Esta Norma NTE INEN 380:86 (2012) establece el método para determinar el contenido
de sólidos solubles en conservas vegetales, mediante lectura refractométrica a 20°C. Este
método es aplicable particularmente a productos espesos, ricos en azúcares o que
contienen material suspendido. Si los productos contienen otras substancias disueltas, los
resultados serán aproximados; sin embargo, por conveniencia, se puede considerar el
resultado obtenido por este método como el contenido de sólidos solubles.
Equipos y Materiales
Preparación de la Muestra
32
Procedimiento
Cálculos
Correcciones
Refractómetro con escala para porcentaje en masa de sacarosa. Corregir la lectura usando
la Tabla 3
33
APENDICE X
Tabla 3. Corrección de las lecturas deI refractómetro con escala
para sacarosa a una temperatura diferente de 20 ± 0,5°C
34
Cálculos
Siendo:
P = % (m/m) de Grados Brix en la solución diluida.
Mo = masa, en gramos, de la muestra antes de la dilución.
M1 = masa, en gramos, de la muestra después de la dilución.
-Refractómetro con escala para porcentaje en masa de sacarosa: Para productos líquidos o
semi espesos, el contenido de sólidos solubles (°/o de sacarosa m/m) es el valor determinado
según (numeral 4) Procedimiento y corregido, de ser necesario, según (literal a y b)
Refractómetro. Para productos espesos, congelados o secos, calcular el contenido de sólidos
solubles mediante la fórmula indicada en (literal a y b) La diferencia entre los resultados de
dos determinaciones sucesivas realizadas por el mismo analista no excederá de 0,5 g de
sólidos solubles por 100 g de producto.
35
Equipos y Materiales
Reactivos
Crema de Alúmina
Preparar una solución fría saturada de alumbre (K2 S04 AI2 (S04)3. 24 H20) en agua.
Añadir hidróxido amónico (NH4 0H), agitando constantemente hasta obtener una
solución alcalina que reaccione con tornasol, dejar que el precipitado sedimente y
lavar por decantación con agua, hasta que el agua procedente de los lavados, tratada
con solución de cloruro de Bario (BaCI2), muestre ligeros indicios de sulfato.
Verter el agua sobrante y conservar la crema restante en una botella cerrada.
Solución de Fehling. Se obtiene mezclando en volúmenes iguales las soluciones A y B.
Solución A. Solución de sulfato de cobre. Disolver en agua destilada 69,28 g de
sulfato cúprico pentahidratado (Cu S04. 5H2 0, pm= 249,71) hasta obtener un litro.
36
Solución B. Solución alcalina de tartrato. Diluir en agua destilada 346 g de tartrato
sódico- potásico (C4 H4 KNa06. 4H2 0) y 100 g de hidróxido de sodio (Na 0H)
hasta obtener un litro. Filtrar con un filtro preparado de asbesto.
Preparación de la Muestra
Cortar la superficie del panal si está operculado y separar completamente la miel del
panal, filtrándola por un tamiz cuya malla tenga un reticulado cuadrado de 0,500 mm
por 0,500 mm (malla No. 40, tamaño del retículo, 420 mm).
Si algunas porciones del panal o de la cera pasan a través del tamiz, calentar la muestra
como se indica en el punto 2.4.1. Si la miel en el panal es granulada, calentar hasta
que la cera se licue, remover, enfriar y separar la cera.
Procedimiento
a. Primer procedimiento
Pesar 25g (P1) de muestra bien homogenizada y transferir con agua destilada a un matraz de
100 cm3; añadir 5 cm3 de crema de alúmina y diluir hasta la marca con agua a 20 ° C y filtrar.
b. Segundo procedimiento
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A continuación normalizar la solución de Fehling modificado de la siguiente manera:
Titulación preliminar
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de miel determinada en la titulación preliminar.
Calentar la mezcla fría sobre una tela metálica, hasta ebullición moderada durante 2
minutos. Añadir 1,0 cm3 de solución de azul de metileno al 0,2 por ciento sin
interrumpir la ebullición y completar la titulación, sin que el tiempo total de
ebullición pase de 3 minutos, con pequeñas adiciones repetidas de solución diluida de
miel, hasta que el indicador pierda el color.
Tomar nota del volumen total de solución diluida de miel. La diferencia entre
titulaciones duplicadas no deberá ser superior a 0,1 cm3
Cálculos
Cuando usa el procedimiento del numeral 1, los cálculos se hacen de la siguiente manera:
Siendo:
C - g de azúcar invertido por 100 g de miel
39
2.3.3.8. Determinación de Hidroximetilfurfural (HMF). Norma NTE INEN
1637:1989(2012).
Equipos
Equipo usual de laboratorio y en particular:
Vasos de precipitación, de 250 cm3
Pipetas
Tubos de ensayo, de 18 x 150mm.
Balones aforados, 250 cm3.
Espectrofotómetro, para medir a 284 y 336 nm.
Reactivos
40
Procedimiento
La determinación debe efectuarse por duplicado sobre la muestra convenientemente
homogenizada.
Pesar 5 g de miel en un vaso de precipitación, transferir a un balón aforado de 50
cm3, con aproximadamente 25 cm3 de agua destilada.
Añadir con una pipeta 0,50 cm3 de solución de ferrocianuro de potasio, mezclar
bien, añadir 0,50 cm3 de solución de acetato de zinc, llevar hasta un volumen de
50 cm3 con agua destilada.
Filtrarlos primeros 10 cm3 del filtrado se desechan.
Tomar dos tubos de ensayo (18 x 150 mm) y añadir a cada uno 5 cm3 del filtrado.
En un tubo, añadir 5 cm 3 de agua (muestra), y al otro tubo que servirá de
3
referencia, añadir 5 cm3 de solución de NaHSO, mezclar bien.
Determinar la absorbancia de la muestra patrón en contra de la absorbancia de la
muestra de referencia, a 284 y 336 nm en una celda de 1 cm.
Si la absorbancia (A) es mayor a 0,6, diluir la muestra patrón con agua, y también la
de referencia con NaHS03, en igual proporción. Determinar la absorbancia A y, para
los cálculos, considerar la dilución realizada.
Cálculos
41
Parámetros Microbiológicos
Este método se basa en la certeza de que un microorganismo vital presente en una muestra de
alimento, al ser inoculado en un medio nutritivo sólido se reproducirá formando una colonia
individual visible. Para que el conteo de las colonias sea posible se hacen diluciones
decimales de la suspensión inicial de la muestra y se inocula el medio nutritivo de cultivo. Se
incuba el inóculo a 30ºC por 72 horas y luego se cuenta el número de colonias formadas. El
conteo sirve para calcular la cantidad de microorganismos por gramo o por centímetro cúbico
de alimento.
Medios de cultivo
Agar para recuento en placa (Plate Count Agar). Preparación (ver Agares en la NTE
INEN 1529-1)
42
Preparación de la Muestra
Procedimiento
Para cada dilución el ensayo se hará por duplicado. En cada una de las cajas Petri bien
identificadas se depositará 1 cm3 de cada dilución. Para cada depósito se usará una
pipeta distinta y esterilizada.
Inmediatamente, verter en cada una de las placas inoculadas aproximadamente 20 cm3
de agar para recuento en placa–PCA, fundido y templado a 45°C ± 2°C. La adición
del medio no debe pasar de más de 45 minutos a partir de la preparación de la primera
dilución.
Cuidadosamente, mezclar el inoculo de siembra con el medio de cultivo imprimiendo
a la placa movimientos de vaivén: 5 veces en el sentido de las agujas del reloj y 5
veces en el contrario.
Como prueba de esterilidad verter agar en una caja que contenga el diluyente sin
inocular. No debe haber desarrollo de colonias.
Dejar reposar las placas para que se solidifique el agar.
Invertir las cajas e incubarlas a 30°C ± 1°C por 48 a 75 horas.
No apilar más de 6 placas. Las pilas de placas deben estar separadas entre sí, de las
paredes y del techo de la incubadora.
Pasado el tiempo de incubación seleccionar las placas de dos diluciones consecutivas
que presenten entre 15 y 300 colonias y utilizando un contador de colonias, contar
todas las colonias que hayan crecido en el medio, incluso las pequeñitas, pero, se debe
tener cuidado para no confundirlas con partículas de alimentos o precipitados, para
esto, utilizar lupas de mayor aumento.
Las colonias de crecimiento difuso deben considerarse como una sola colonia si el
crecimiento de este tipo de colonias cubre menos de un cuarto de la placa; si cubre
más la caja no será tomada en cuenta en el ensayo.
Anotar el número de colonias y la respectiva dilución.
43
Cálculos
En donde:
Σc = suma de las colonias contadas en las dos placas;
V = volumen inoculado en cada placa;
n = número de placas seleccionadas (en este caso, n = 2).
f=factor de dilución de la suspensión inicial o de la primera dilución inoculada o
seleccionada (d = 1 cuando se inocula un producto líquido sin diluir).
Redondear los resultados obtenidos a dos cifras significativas. Ejemplo: Se obtiene los
siguientes resultados (dos placas por dilución): primera dilución seleccionada (10- 2): 225 y
178 colonias, segunda dilución seleccionada (10- 3): 25 y 15 colonias,
Recuentos estimados
44
∑c
NE =
V×n×d
Redondeando
NE = 1300
NE = 1,3×103
b. Si las dos placas inoculadas con la muestra sin diluir (productos líquidos), o con la
primera dilución o con la suspensión inicial (otros productos) no presentan colonias,
expresar los resultados de la siguiente manera:
En donde:
NE= cantidad de microorganismos por gramo o por centímetro cúbico = factor de dilución
(ver literal a) Recuentos estimados.
d= factor de dilución (ver literal a) Recuentos estimados.
45
2.3.3.10. Determinación de Mohos y Levaduras. Norma NTE INEN 1529-10:1998.
Los procedimientos establecidos en esta norma para la cuantificación del número de unidades
propagadoras de mohos y levaduras son adecuados para las muestras que posean una alta
carga microbiana. Este método se basa en el cultivo entre 22ºC y 25ºC de las unidades
propagadoras de mohos y levaduras, utilizando la técnica de recuento en placa por siembra en
profundidad y un medio que contenga extracto de levadura, glucosa y sales minerales.
Preparación de la muestra
Procedimiento
46
primera (10-1) dilución (producto líquido), o 0,1 ml de la dilución 10-2 (otros
productos). Para facilitar el recuento de bajas poblaciones de levaduras y mohos,
los volúmenes pueden llegar hasta 0,3 ml de una dilución 10-1 de muestra, o de
la muestra de prueba, si es líquido, puede ser extendido en tres placas. Repetir
estas operaciones con diluciones posteriores, utilizando una pipeta estéril nueva
para cada dilución decimal. Si se sospecha un rápido crecimiento de mohos se
sospecha, extender el líquido sobre la superficie de la placa de agar con un
esparcidor estéril hasta que el líquido se encuentre completamente absorbido en el
medio.
También se inoculan las placas por el método de vertido, pero en este caso la
equivalencia de los resultados serán validados en comparación con la inoculación
en superficie, además la discriminación y la diferenciación de los mohos y
levaduras no son admisibles. El método de difusión en la superficie puede dar
mayor enumeración. La técnica de propagación de placa facilita la máxima
exposición de las células al oxígeno atmosférico y evita cualquier riesgo de
inactivación térmica de los propágulos fúngicos. Los resultados pueden depender
del tipo de hongos.
Incubar las placas preparadas aeróbicamente, con las tapas superiores en posición
vertical en la incubadora a 25 ° C ± 1 ° C durante 5 días. Si es necesario, deje las
placas de agar de pie con luz natural difusa durante 1 día a 2 días. Se recomienda
incubar las placas en una bolsa de plástico abierta con el fin de no contaminar la
incubadora en el caso de la difusión de los mohos de los platos.
Recuento y selección de colonias para la confirmación. Leer las placas entre 2 días
y 5 días de incubación. Seleccionar los platos que contienen menos de 150
colonias y contarlas. Si estos mohos son de rápido crecimiento puede ser un
problema, al momento del conteo, por ello se recomienda realizar un recuento a
los 2 días y otra vez después de 5 días de incubación. Contar las colonias de
levaduras y las colonias de mohos por separado, si es necesario. Para la
identificación de levaduras y mohos, seleccionar áreas de crecimiento de hongos y
examinar con el microscopio o inocular en el medio adecuado para su aislamiento.
47
Cálculos
a. Cálculo del número (N) de unidades propagadas (UP) de mohos y/o levaduras por
centímetro cubico ó gramo de muestra. Calcular según la siguiente fórmula:
En
donde:
Ejemplo:
Volumen sembrado = 1 cm3
Dilución 10 – 2 = 83 y 97 colonias
Dilución 10 – 3 = 30 y 28 colonias
Numero
d. Si el tercer digito empezando por la izquierda es cinco y es segundo de, por lo menos.
Un digito, añadir una unidad al segundo digito y remplazar por ceros a los restantes. Por
ejemplo, si el valor obtenido fue 31 554, redondearlo a 32 000 y expresar como 3,2 x
48
104. Si el tercer digito es cinco y no es seguido de otro (s) digito (s) ó lo es únicamente
por ceros, añadir una cantidad al segundo digito, si éste es impar; si es par ó cero
conservarlo inalterado, ejemplo: 235 redondear a 240 y expresar como 2,4 x 102, 24 500
redondear a 24 000 y expresar como 2,4 x 104.
Presentación de resultados
b. Si no hay desarrollo de colonias en las placas de las suspensión 10-1 , presentar como
número estimado ( ), de las siguientes formas;
c. Si no hay desarrollo de las colonias en las placas sembradas con 1 cm3 de muestra no
diluida(producto original líquido), expresar el resultado de la siguiente manera:
d. Si todas las placas sembradas presentan más de 150 colonias, calcular el resultado a
partir de las placas sembradas con la dilución más alta y expresar de la siguiente
manera:
e. Indicar entre
paréntesis la
dilución utilizada. Este resultado sirve como guía para decidir el número de diluciones
que se han de realizar en ensayos posteriores y, la decisión de aceptación o rechazo de
una partida de alimentos debe basarse solo en valores N.
49
2.3.3.11. Determinación de Coliformes Totales. Norma NTE INEN 1529-7:1990
Este método utiliza la técnica del recuento en placa por siembra en profundidad en agar
Cristal Violeta-rojo neutro Bilis (VRB) o similar y una temperatura de incubación de 30 ±
1°C para productos refrigerados y 35 ± 1°C para productos que se mantienen a temperatura
ambiente, por 24 ± 2h.
Equipos y Materiales
Preparación de la Muestra
Preparar la muestra según uno de los procedimientos indicados en la Norma INEN 1 529-2.
50
Procedimiento
1. Utilizando una sola pipeta estéril pipetear por duplicado alícuotas de 1cm3 de cada una
de las diluciones decimales en placas Petri adecuadamente identificadas. Iniciar por la
dilución de menor concentración.
2. Inmediatamente, verter en cada una de las placas inoculadas aproximadamente 20 cm3
de agar cristal violeta-rojo netro-bilis(VRB) o similar recientemente preparado y
temperado a 45 ± 2°C. La adición del medio de cultivo no debe pasar más de 15
minutos a partir de la preparación de la primera dilución.
3. Delicadamente mezclar el inóculo de siembra con el medio de cultivo imprimiendo a
la
placa movimientos de vaivén, cinco veces en una dirección; hacerla girar en sentido de
las agujas del reloj cinco veces. Repetir este proceso pero en sentido contrario.
4. Como control de esterilidad del medio, verter la cantidad de agar en una placa sin
inóculo.
5. Dejar reposar las placas para que solidifique el agar. Luego verter en la superficie otros
6 cm3 de agar todavía fundido y dejar solidificar.
6. Invertir las placas e incubarlas a 30 ± 1°C, para productos refrigerados y a 35 ± 1°C
para productos que se mantienen a temperatura ambiente, por sólo 24 ± 2 horas.
7. Pasado el tiempo de incubación, seleccionar las placas que presenten 30 - 150 colonias
y examinar con luz transmitida. Contar todas las colonias de 1 - 2 mm de diámetro
(mínimo de 0,5 mm) de color rojo amoratado rodeadas por un halo rojizo.
8. Para el control de rutina en planta, en general, no es necesario realizar ensayos
confirmatorios. Pero cuando sea necesario, especialmente con productos que
contengan otros azúcares que la lactosa, proceder como a continuación se indica.
9. Seleccionar un número de colonias equivalentes a la raíz cuadrada del total de las
colonias típicas.
10. A cada una de estas colonias inocularlas en tubos individuales que contengan 10 cm 3
de caldo BGBL de concentración simple y un tubo Durhan.
11. Incubar a 30 ± 1°C, para productos refrigerados y a 35 ± 1°C para productos que se
mantienen a temperatura ambiente, durante 24 - 48 h.
Cálculos
Si transcurridas las 48 horas hay presencia de gas en los tubos confirma la presencia
de coliformes.
51
Para el cálculo basarse en el número de colonias confirmadas en relación al número
de colonias sospechosas.
Siendo:
n = número de colonias típicas
f= factor de dilución
U F C = unidades formadoras de colonias.
La diferencia entre los resultados de las placas duplicadas de una dilución no debe exceder
del
15% del valor inferior. Caso contrario repetir el ensayo. Si las placas examinadas no
contienen colonias, expresar los resultados de la siguiente forma: Recuento estimado de
coliformes (<) 1,0 multiplicado por el respectivo factor de dilución: Ejemplo: Si en las placas
correspondientes a la dilución 10-1 no hubo desarrollo de colonias típicas el recuento se
expresará así: Recuento estimado de coliformes/g ó cm3 <1,0 x 101 U.F.C.
52
Tabla 5. Resultados de Escherichia coli a las pruebas INVIC
Nombre de la Producción de
prueba indol
Producción de
indol +
Prueba de rojo de
metilo +
Prueba de Voges- -
Proskauer
Utilización de -
citrato
Equipos
53
Tomar colonias que han crecido en los medios citados anteriormente y aplicar la
tinción Gram, a las colonias que sean bacilos gram negativos no esporulados,
utilizarlos para las pruebas INVIC.
Ejemplo. Usando una muestra sólida y tres tubos, en el 95% de los casos, los límites de
confianza varían de 13 a 200 Escherichia coli presuntiva por gramo por un NMP de 7,4 x10
Escherichia coli presuntiva por gramo, y de 4 a 99 Escherichia coli presuntiva por gramo de
un NMP de 2,4 X 10 Escherichia coli presuntiva por gramo.
54
APÉNDICE
Y
Tabla Y.1 – Valores de NMP por gramo de muestra y límites del intervalo de
confianza al 95% (tres tubos)
(cuando se utilizan tres porciones de análisis de 1 g, tres de 0,1 g y tres de 0,01 g)
Límites
Número de resultados Desviació de Categorí
positivos por volumen de MPN confianza al Índice
/ml o log10 n estándar a de
inóculo, ml o g /g 95% de
M de log10M anomalí anomalía
Superio
1,00 0,10 0,01 Inferior r a
a a
0 0 0 0 NA NA 0 1,1 1,00 1
0 1 0 0,30 −0,52 0,43 0,04 2,3 0,09 1
1 0 0 0,36 −0,45 0,44 0,05 2,7 1,00 1
1 0 1 0,72 −0,14 0,31 0,17 3,0 0,02 2
1 1 0 0,74 −0,13 0,31 0,18 3,1 0,21 1
1 2 0 1,1 0,06 0,26 0,35 3,7 0,02 2
2 0 0 0,92 −0,04 0,32 0,21 4,0 1,00 1
2 0 1 1,4 0,16 0,26 0,42 4,8 0,04 2
2 1 0 1,5 0,17 0,27 0,43 5,0 0,43 1
2 1 1 2,0 0,31 0,23 0,69 6,0 0,02 2
2 2 0 2,1 0,32 0,24 0,71 6,2 0,07 1
3 0 0 2,3 0,36 0,31 0,55 9,7 1,00 1
3 0 1 3,8 0,59 0,31 0,93 16 0,08 1
3 1 0 4,3 0,63 0,33 0,95 19 1,00 1
3 1 1 7,5 0,87 0,30 1,9 30 0,21 1
3 1 2 12 1,1 0,26 3,6 37 0,02 2
3 2 0 9,3 0,97 0,32 2,2 40 1,00 1
3 2 1 15 1,2 0,27 4,4 51 0,42 1
3 2 2 21 1,3 0,24 7,2 64 0,07 1
3 3 0 24 1,4 0,32 5,6 100 1,00 1
3 3 1 46 1,7 0,34 9,6 220 1,00 1
3 3 2 110 2,0 0,32 25 480 1,00 1
a a
3 3 3 ∞ NA NA 36 ∞ 1,00 1
a
No disponible.
55
2.3.3.13. Determinación de Salmonella Norma NTE INEN 1529-15:1990
Requisitos básicos. Para que haya uniformidad en los resultados, es necesario que los componentes
de los medios sean de una calidad uniforme y de grado analítico o, a su vez, utilizar medios
completos deshidratados, que se los reconstituye según las instrucciones del envase. Composición y
preparación de los medios de cultivo y reactivos. Ver NTE INEN 1529-1.
Instrumental y vidriería
56
mm x 12 mm
Probetas graduadas
Pipetas bacteriológicas de punta ancha graduadas en 1/10 de cm3
Placas Petri de vidrio o desechable de 100 mm x 15mm
Erlenmeyer
Frascos para muestreo con tapas de rosca, autoclavables
Pipetas Pasteur.
1. La unidad analítica debe provenir de una unidad de muestra de por lo menos 100 g,
y se la tomará según la NTE INEN 1529-2. Si el alimento está congelado, a la
cantidad necesaria descongelarla durante la noche entre 2 a 5°C ó, a una temperatura
menor de 45°C por aproximadamente 15 minutos, de preferencia, en un baño de
agua con agitación.
57
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
El análisis de las muestras de los respectivos apiarios Chucaple y Santa Elvira arrojaron
los siguientes resultados, teniendo en consideración que se le asignara una abreviatura
para cada muestra, MC=Miel Chucaple Y MS=Miel Santa Elvira.
Análisis Fisicoquímicos
3.1. pH y Conductividad eléctrica
Tabla 6. Valores de pH de MC y MS
pH
El valor obtenido de MC es de 3,62 unidades de pH, mientras que MS el valor es de 4,01 unidades de
pH, lo que indica según el rango permitido según Díaz (2003) varían entre 3,5 y 5,5 unidades de pH.
La conductividad eléctrica indica la cantidad de sales que contienen la miel, diferenciado a la
miel de néctar de la miel mielada, esta última es más rica en sales. A mayor conductividad
eléctrica, mayor cantidad de sales. Según López et al. (2015), la conductividad eléctrica es un
parámetro que está estrechamente relacionado con la presencia de ácidos orgánicos, proteínas
y sales en la miel. Los valores obtenidos conductividad eléctrica de los 2 apiarios se detallan
en la siguiente Tabla 7:
58
Tabla 7. Valores de conductividad eléctrica de MC y MS
Conductividad Eléctrica
Para MC el valor determinado fue de 4,33 µʃ/cm, mientras que para MS es valor determinado
fue de 4,25 µʃ/cm, esto implica según los requerimientos de conductividad de la miel
expuestos por López J., et Escriche I. (2015), la miel debe tener una conductividad eléctrica
máxima de 0.8 mʃ/cm u 800 µʃ/cm, observando así que las 2 muestras analizadas cumplen
con los estándares de calidad requeridos.
Con este parámetro se determinó el origen botánico de las mieles de los 2 apiarios. El
contenido de cenizas puede mantenerse como un factor de calidad durante un periodo de
transición, hasta que la conductividad sea aceptada como un estándar a nivel mundial. Los
valores obtenidos se muestran en la Tabla 8 a continuación:
% de Cenizas
Método de Referencia
MC 0.21 % Max. 0,5 % INEN 1636
Método de Referencia
MS 0,17 % Max. 0,5 % INEN 1636
Fuente: Propia (Estefanía Jahaira Mosquera Bagui)
Los valores del contenido de cenizas de cada apiario se detallan de la siguiente manera: para
MC se tuvo un valor de 0,21 %, mientras que para MS se obtuvo un valor de 0,17%, esto nos
indica que, en cuanto a este parámetro los niveles mínimo permitido es de 0,03% y el
máximo permitido es de 0,5 %, lo que indica que las dos muestras si cumplen con lo
establecido por la Norma NTE INEN 1636:1989 (2012).
59
La evaluación del contenido de cenizas es importante ya que representa el contenido de
minerales presentes en la miel. Así también las mieles obscuras o de color ámbar brillante se
relacionan a un contenido alto de minerales, superior al 0.4%. Se puntualiza que el contenido
alto de minerales en las mieles obscuras no es un factor indeseable sino un factor normal
(Luna, 2012).
3.3. Humedad
Debido a que el contenido de agua de la miel de abejas es muy variable. Al determinar este
parámetro podemos valorar con exactitud el porcentaje de humedad. Se puede lograr un
cálculo más rápido si se conoce el índice de refracción y con ayuda de tablas se obtiene
directamente. Los datos obtenidos se muestran en la tabla 9 a continuación:
% de Humedad
Método de Referencia
MC 19,8 % Max. 20,0 % INEN 1632
Método de Referencia
MS 18,6 % Max. 20,0 % INEN 1632
Fuente: Propia (Estefanía Jahaira Mosquera Bagui)
El exceso de humedad hace que pierda calidad y el tiempo de vida media sea menor. Medir
este parámetro garantiza la calidad de la miel, y ayuda a maximizar los rendimientos de la
miel, además permite una rotación más rápida de las colmenas. (Infoagro, 2017).
3.4.Azucares Reductores
En este parámetro permite determinar los valores de azucares reductores de las muestras de
miel de abeja de los 2 centros apícolas MC y MS. Una característica natural de la miel es su
alto contenido de azúcares reductores el cual es un factor importante que permite determinar
si fue adulterada con azúcares agregados. Los valores obtenidos se detallan en la Tabla 10 a
continuación:
60
Tabla 10. Valores de Azucares Reductores de MC y MS
Azucares Reductores
Método de Referencia
MC 65,3g/100g Min. 65,0g INEN 1633
Método de Referencia
MS 64,9g/100g Min. 65,0g INEN 1633
Fuente: Propia (Estefanía Jahaira Mosquera Bagui)
3.5.Grados Brix
Según Oroinaet et al, (2015) los azúcares son los componentes mayoritarios de la miel,
representan aproximadamente el 80% de los componentes totales y el 95% al 99% de los
sólidos totales.
Tabla 11. Valores del % Grados Brix de MC y MS
°BRIX
61
3.6.Índice de Refracción
Índice de Refracción
Método de Referencia
MC 1,4880 Sin Requisito Refractómetro
Método de Referencia
MS 1,4925 Sin Requisito Refractómetro
Fuente: Propia (Estefanía Jahaira Mosquera Bagui)
Para este ensayo los valores obtenidos de índice refractario de ambas muestras, para MC es
de 1,4880 y para MS es de 1,4925, lo que indica que fueron similares a los obtenidos por
Álvarez et. Sánchez (2016, p38), los que obtuvieron valores que oscilaron entre 1,492 y 1,
485.
3.7.Acidez
El parámetro de la acidez como su nombre lo indica determina el nivel de acidez que presenta
la miel de abeja, es decir que suele ser más elevada si esta fermentada o en proceso de
fermentación. Según Lazcano al et (2008) se ha encontrado que el ácido glucónico es más
abundante y procede principalmente de la descomposición de la glucosa, debido a la acción
de la enzima glucosa oxidasa presente de manera natural en la miel. Como producto
intermedio de esta descomposición se produce la gluconolactona, que también influye en la
concentración de la acidez. Los valores se detallan en la Tabla 13 a continuación:
62
Tabla 13. Valores de la Acidez de MC y MS
Acidez
Procedencia Medida Requisito Método de Ensayo
3.8. Hidroximetilfurfural
Este parámetro es el factor de calidad más importante para evaluar la frescura de la miel y el
sobrecalentamiento. Por lo que mieles de regiones tropicales poseen mayor cantidad de HMF,
así como mieles más ácidas en función del tiempo. (J. Agudelo Ramos, 2015). Los valores
obtenidos en este ensayo se detallan en la Tabla 14 a continuación:
Tabla 14. Valores de la HFM de MC y MS
Hidroximetilfurfural (HFM)
Procedencia Medida Requisito Método de Ensayo
63
Análisis microbiológicos
Aerobios Totales
El valor para MC = 12,02x102 UFC/kg, mientras que MS = 11,98x102 UFC/kg, esto indica
que los datos obtenidos cumplen con los requisitos según lo que establece la Norma NTE
INEN 1529-6:1988.
Según la norma INEN 1529-10:98, este método se basa en el cultivo entre 22°C y 25°C de las
unidades propagadoras de mohos y levaduras, utilizando la técnica de recuento en placa por
siembra en profundidad y un medio que contenga extracto de levadura, glucosa y sales
minerales. Los valores se detallan en la Tabla 16 a continuación:
64
Tabla 16. Valores de la Mohos y Levaduras de MC y MS
Mohos y Levaduras
El valor para MC = 6,02x101 UFC/kg, mientras que MS = 5,06x101 UFC/kg, según lo que
establece la Norma NTE INEN 1529-10:1988. Estas diferencias podrían ser atribuidas a la
fuente floral y región geográfica de recolección de las muestras de miel. Los flavonoides son
un grupo químico de compuestos que son parte de los fenoles. Esto explica que los valores
encontrados para flavonoides totales sean mucho menores, los flavonoides identificados en la
miel y propóleos son normalmente grupos de flavonoides tales como: flavonoles, flavonas,
flavanonas (dihidroflavonas), isoflavonas, antocianidinas y flavanoles (Quiñones et al, 2012).
Este parámetro determina el recuento de coliformes totales que presentan las dos muestras.
Los valores para MC y MS se detallan en la Tabla 17 a continuación:
Coliformes Totales
El valor MC= es de <10 y MS = <10. Esto indica que cumplen con las valores requeridos por
la Norma NTE INEN 1529-7:1990. (Estrada H.2005) esto es debido a la viscosidad y la
producción de enzimas de la miel que inhibe el desarrollo de la mayoría de las
65
Enterobacterias, sin embargo se considera de suma importancia su la búsqueda de estos
agentes por el riesgo que estas representan por el humano, principalmente cuando se analizan
muestras obtenidas del comercio debido a que estas son manipuladas por los comerciantes los
cuales alteran la composición natural de la miel y por tanto la concentración de estos
componentes inhibitorios.
Este parámetro determina el recuento de coliformes totales que presentan las dos muestras.
Los valores para MC y MS se detallan en la Tabla 18 a continuación:
E.coli
El valor de MC = <10, mientras que de MS = <10, esto nos indica que de acuerdo a la Norma
NTE INEN 1529-8:199, esto nos indica que cumple con la norma. Según (Estrada H.2005),
aunque no se determinó recuento de E.coli, es necesaria la búsqueda de estos agentes para
determinar la inocuidad de la miel.
3.13. Salmonella
La determinación de Salmonella se realizó con preenriquecimiento, enriquecimiento selectivo
y recuento en placa. Este parámetro permite medir el desarrollo de colonias que afecten la
inocuidad de la miel de abeja. Los valores se detallan en la Tabla 19 a continuación:
66
Tabla 19 Valores de Salmonella de MC y MS
Salmonella
67
4. CONCLUSIONES
Con respecto al parámetro de Acidez libre para MC= Miel Chucaple, excedió los límites
permisibles (Máx. 40,0 meq/1000g) con respecto a la Norma NTE INEN 1634:1989 (2012).
68
5. RECOMENDACIONES
69
6. BIBLIOGRAFÍA
2. Troya, A., & Carolina, P. (2017). Costos de producción de la miel de abejas en las
provincias de Pichincha, Imbabura y Carchi, por categoría de explotación
(Bachelor's thesis, Quito: UCE).
6. Vit, P., Gonzalez, I., Sorroza, L., & Pedro, S. R. (2016). Caracterización
físicoquímica de miel de angelita Tetragonisca angustula (Latreille, 1811)
producida en Esmeraldas, Ecuador/Physicochemical characterization of “angelita”
Tetragonisca angustula (Latreille, 1811) honey produced in Esmeraldas, Ecuador.
Ciencia Unemi, 9(20), 77-84.
7. LUNA P, Estefanía. Caracterización y evaluación de parámetros de calidad en
la miel de abeja de tres regiones del país para su cristalización inducida. 2012.
8. Alimentarius, Codex. 2005. CODEX STAN 12-1981, Norma del codex para la
miel.
9. https://www.gob.mx/cms/uploads/attachment/file/95427/Producci_n_de_Miel.pdf
70
10. FAO. Guía práctico sobre manejo de Colmenas. (2014).
Recuperado de:
http://teca.fao.org/sites/default/files/resources/manejocolmenas.pdf
11. https://www.gob.mx/cms/uploads/attachment/file/95427/Producci_n_de_Miel.pdf
12. Frígoli, L. (2014). Consideraciones para la cosecha de miel. INTA. Recuperado de:
http://www.vet.unicen.edu.ar/ActividadesCurriculares/IntroduccionProduccionAgr
opecuaria/images/Documentos/2014/INTA%20Cosecha%20de%20Miel.pdf
15. Camargo, J.M.F.; Pedro S.R.M. (2007). Meliponini Lepeletier 1836. En: J.S.
Moure, D. Urban, G.A.R. Melo (Eds.), Catalogue of Bees (Hymenoptera, Apoidea)
in the Neotropical Region (pp. 272- 578), Curitiba, Brasil: Sociedade Brasileira de
Entomologia [versión online http://moure.cria.org.br/catalogue?id=34135
actualizada 17 jun 2013, consultada 14 oct 2015].
17. Frígoli, L. (2014). Consideraciones para la cosecha de miel. INTA. Recuperado de:
http://www.vet.unicen.edu.ar/ActividadesCurriculares/IntroduccionProduccionAgr
opecuaria/images/Documentos/2014/INTA%20Cosecha%20de%20Miel.pdf
18. Guzmán, E., Correa, A., Espinosa., L., & Guzmán, G. (2011). Colonización,
impacto y control de las abejas melíferas africanizadas en México. Recuperado de:
http://www.scielo.org.mx/pdf/vetmex/v42n2/v42n2a5.pdf
71
https://books.google.es/books?hl=es&lr=&id=NRnVlm_rp6kC&oi=fnd&pg=PA4
&dq=la+miel+de+abeja+se+guarda+en+el+buche&ots=Ws0RCqSTJy&sig=yPRb
YCpVBU pwtb0QNsImhzekYDM#v=onepage&q&f=fals
21. (INEN) IEdN. NTE INEN 1632. [Online].; 1989 [cited 2017 03 27. Available from:
https://archive.org/details/ec.nte.1632.1989.
22. (INEN) IEdN. NTE INEN 1633: Miel de abejas. Determinación del contenido de
sólidos solubles o grados brix. [Online].; 1989 [cited 2017 03 28. Available from:
https://archive.org/details/ec.nte.1633.1989.
23. (INEN) IEdN. NTE INEN 1634: Miel de abejas. Determinación de la acidez total.
[Online].; 1989 [cited 2017 03 28. Available from:
https://archive.org/details/ec.nte.1634.1989.
24. (INEN) INEyN. NTE INEN 1636: Miel de abejas. Determinación de las cenizas.
[Online].; 1989 [cited 2017 03 28. Available from:
https://archive.org/stream/ec.nte.1636.1989/ec.nte.1636.1989_djvu.txt.
25. (INEN) IEdN. NTE INEN 1637: Miel de abejas. Determinación del contenido de
hidroximetil-furfural (HMF). [Online].; 1989 [cited 2017 03 27. Available from:
https://archive.org/details/ec.nte.1637.1989.
72
ANEXOS
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3. Almacenaje en portadores de panales previos a su extracción
74
5. Extracción de miel en el decantador
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5. Equipo de protección previo a la toma de muestras
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