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POLIETILENIMINA.

CARACTERIZACIÓN ESTRUCTURAL Y
DINÁMICA EN EL ESTADO SÓLIDO.
J.M. LÁZARO MARTÍNEZ†,‡, G.A. MONTI†, y A.K. CHATTAH†

† Instituto de Física Enrique Gaviola (IFEG-CONICET-UNC) – Medina Allende s/n - (5000) Córdoba – Argentina
‡ Departamento de Química Orgánica, FFyB-UBA, Buenos Aires, CP 1113, Argentina.
lazarojm@ffyb.uba.ar ; monti@famaf.unc.edu.ar ; chattah@famaf.unc.edu.ar

usada como referencia externa para la determinación de


INTRODUCCION los espectros de 13C, 15N y para setear la condición de
El polímero lineal poli(etilenimina), denominado Hartmann-Hahn para los experimentos de CP. El
PEI (Fig. 1), tiene un amplio campo de aplicaciones. Se recycling time fue de 4 s y el tiempo de contacto durante
lo ha empleado como ingrediente cosmético para ajustar la CP fue de 1.5 ms para los experimentos de 13C. Para
la viscosidad, como quelante de iones metálicos para los núcleos de 15N el recycling time fue de 4 s y el
inhibir la corrosión hasta como copolímero para el tiempo de contacto durante la CP fue de 3 ms. Para
desarrollo de dispositivos de almacenamiento de realizar el desacople heteronuclear 1H-13C y de 1H-15N
energía. A su vez, teniendo en cuenta la durante la adquisición se empleó la secuencia
biocompatibilidad que presenta el PEI, se lo ha SPINAL64 o TPPM, respectivamente (Fung et al., 2000
empleado en el área biotecnológica como vector no viral y Bennet et al., 1995). La velocidad de rotación en todos
para llevar a cabo procesos de transfección de genes, los casos fue de 10 kHz.
estabilizador de proteínas y desarrollo de biosensores. Los tiempos de relajación en el sistema rotante (T1),
y los experimentos 1H-13C 2D-HETCOR (heteronuclear
correlation) y 1H-13C 2D-WISE (Wideline separation)
fueron determinados según trabajos previos (Lázaro
Martínez et al., 2012 y Chattah et al., 2007).

Fig. 1. Estructura química del PEI. RESULTADOS Y DISCUSION


Los espectros de 13C CP-MAS para los polímeros de
Sin embargo hasta el momento no se ha realizado PEI con distintos pesos moleculares se presentan en la
una caracterización física en el estado sólido. Por tal Fig. 2 en comparación con el espectro de 13C RMN para
motivo, el objetivo del presente trabajo es estudiar la el PEI 87 KDa disuelto en agua deuterada (D2O). A
homogeneidad estructural y dinámica en tres variantes partir de estos resultados se pudo comprobar la
poliméricas de PEI que presentan diferentes pesos existencia de heterogeneidad en las distintas muestras de
moleculares (22, 87 y 217 KDa) empleando técnicas de PEI que no pudieron ser inferidas a partir de los
Resonancia Magnética Nuclear en el estado sólido resultados obtenidos de los difractogramas de rayos-X
(ssNMR). A su vez, se explorarán las modificaciones de polvo, ni por RMN en solución donde se obtuvo el
producidas tras la complejación de iones de cobre(II) desplazamiento químico isotrópico.
por parte de las mencionadas matrices poliméricas, dada
la importancia de los catalizadores heterogéneos de
Cu(II) para la activación de agua oxigenada y
degradación de polutantes de alto impacto ambiental
(Lázaro Martínez, et al., 2008 y 2011).
METODOLOGÍA
Los experimentos de ssNMR fueron obtenidos en un
espectrómetro Bruker Avance II-300 MHz equipado con
una probe de triple resonancia de 4-mm. Los espectros
de alta resolución de 13C y 15N en estado sólido fueron
determinados empleando la técnica de polarización Fig. 2. Espectros de 13C CP-MAS de los polímeros PEI
cruzada {1H}→{13C} ó {1H}→{15N} (cross- 22, 87 y 217 KDa (en estado sólido) y en D2O.
polarization = CP) y rotación en el ángulo mágico
(magic angle spinning = MAS) con desacople de En el estado sólido, las cadenas poliméricas pueden
protones durante la adquisición. Las frecuencias de estar confinadas en regiones con diferente movilidad,
Larmor para los núcleos 1H, 13C y 15N fueron de 300.13, teniendo en cuenta una disposición ordenada o no, lo
75.46 y 30.42 MHz respectivamente. La glicina fue que determina segmentos cristalinos o amorfos. En
cambio en cuando el sólido es disuelto, en caso de Para profundizar el estudio de estos materiales se
existir heterogeneidad molecular (regiones amorfas o procedió a realizar experimentos bidimensionales de
cristalinas), esta se pierde como consecuencia de que las ssNMR.
cadenas poliméricas adquieren un movimiento En primera instancia se llevaron a cabo
molecular promedio en el seno del líquido. experimentos 1H-13C 2D-WISE, en los que es posible
En complementación, la edición de los espectros de obtener una aproximación de la movilidad molecular a
13
C CP-MAS, empleando diversos tiempos de dinámica partir de las líneas de 1H extraídas de cada señal
de espines (d4), permitió visualizar señales que no eran observable de 13C, dado que el ancho medio de las
detectadas con las secuencias de CP-MAS mismas se relaciona con la interacción dipolar que
habitualmente empleadas (Fig. 3). En estos puedan sensar los núcleos de 1H asociados a los
experimentos se agregó y varió un tiempo d4 entre el respectivos 13C, según se encuentren en entornos rígidos
pulso inicial de π/2 y el proceso de polarización (mayores FHWW) o flexibles (menores FHWW)
cruzada. (Schmidt Rohr et al., 1992).
En particular, la Fig. 3 muestra el espectro de 13C Los resultados de estos experimentos se muestran en
CP-MAS para el PEI 217 KDa con un tiempo de la tabla 1, e indican que la región de mayor movilidad se
dinámica de espines de 0, 13 y 14 s. Si bien la asoció a la señal a 44.5 ppm, mientras que la de menor
resolución de los espectros se ve afectada, claramente movilidad resultó ser la señal de 42.9 ppm, en la
puede apreciarse las contribuciones de cada población dimensión de 13C.
de 13C a 42.9 y 44.5 ppm. Los experimentos también se A continuación se realizaron experimentos 2D de
realizaron para los otros PEI de 22 y 87 KDa variando correlación heteronuclear 1H-13C, denominados 1H-13C
el d4 entre 0-15 s, encontrándose similares resultados. HETCOR, que permiten correlacionar los distintos
núcleos de 13C con los protones (1H) directamente
unidos o en las cercanías. Los resultados para el PEI 87
KDa son mostrados en la Fig. 5. Claramente, puede ser
observado que cada tipo de carbono correlaciona con
semejantes calidades de protones pero que resultan entre
sí diferentes, indicando que las cadenas poliméricas del
PEI 87 KDa se encuentran en entornos físicos
diferentes, probablemente asociados a regiones con alto
grado de ordenamiento (cristalinas) o de desorden
(amorfas).

Fig. 3. Espectros de 13C CP-MAS para el PEI 217 KDa


Tabla 1. Anchos medios (FWHH) de las
empleando distintos d4.
proyecciones de 1H obtenidos de los experimentos 1H-
13
A su vez, los espectros de 15N CP-MAS C 2D WISE.
1
determinados en las distintas muestras de PEI con H FWHH
abundancia natural de 15N, concordaron con lo Polímero
(kHz)
observado por 13C, indicando que el polímero de 87
PEI 27 KDa 123
KDa presentó nuevamente dos contribuciones que
pueden ser claramente diferenciadas. También se probó Cu(II)-PEI 27 KDa 167
la determinación de los espectros de 15N CP-MAS PEI 217 KDa 120
empleando distintos d4 en las otras variantes del PEI Cu(II)-PEI 217 KDa 156
(PEI 22 y 217 KDa), pero no fue posible observar las PEI 87 KDa (42.9 ppm) 147
dos contribuciones por separado, probablemente porque PEI 87 KDa (44.5 ppm) 101
la señal de 15N se encontró drásticamente afectada.
Cu(II)-PEI 87 KDa (44.5 ppm) 172

Para complementar los estudios, se llevó a cabo la


medición de los tiempos de relajación de 13C en el
sistema rotante (T113C). En estos experimentos, la etapa
de la polarización cruzada es seguida por un campo de
spin lock de 13C durante un tiempo variable (), con lo
cual la relajación espín-red tiene lugar en el sistema
rotante. Dicho proceso de relajación en el sistema
rotante es sensible a los movimientos en la escala de los
kilohertz, lo que permite obtener información en cuanto
Fig. 4. Espectros de 15N CP-MAS de los polímeros PEI a la homogeneidad de muestras sólidas (Chattah et al.,
22, 87 y 217 KDa. 2007). La ventaja de estudiar este parámetro, está dado
por la baja abundancia natural del 13C (1.1%) lo que longitud de dicha cadena, incrementando el componente
asegura su separación física dentro del sólido y una baja “rígido”, teniendo en cuenta la medición de los T113C y
o despreciable difusión de espines. el aumento de los anchos medios en la línea de 1H en los
experimentos 1H-13C 2D-WISE.

Tabla 2. Tiempos de relajación de 13C en el sistema


rotante (T113C).
T113C
Material
(ms)
0.71 (81%)
PEI 27 KDa
3.8 (19%)
0.7 (62%)
Cu(II)-PEI 27 KDa
2.0 (38%)
0.69 (77%)
PEI 217 KDa
2.4 (23%)
0.22 (23%)
Fig. 5. Espectro 1H-13C HETCOR para el PEI 87 KDa. Cu(II)-PEI 217 KDa
1.17 (77%)
La tabla 2 muestra los valores de T113C para los
carbonos de los metilenos (CH2) presentes en el
polímero de PEI. Los mismos fueron determinados a
partir de la disminución de la magnetización (Mc) en
función del tiempo de espín-lock (). En particular, estas
gráficas presentaron un comportamiento bi-exponencial,
característico de muestras no homogéneas con al menos
dos fases con diferente orden o movilidad, que pueden
ajustarse a la siguiente ecuación:
 
 
MC
( )  A  e 1  (1  A)  e  2 (Eqn. 1)
M0 Fig. 6. Espectros de 13C CP-MAS de los polímeros PEI
Teniendo en cuenta que la magnetización ha sido 22, 87 y 217 KDa y sus respectivos complejos
normalizada, los números A y 1-A (Eqn. 1) pueden ser de Cu(II).
directamente interpretados como el porcentaje de la
muestra que posee diferente relajación (1 y 2). CONCLUSIONES
Usualmente en compuestos sólidos, los valores menores La ssNMR resultó ser una herramienta valiosa para
de T113C se corresponden con fracciones amorfas en estudiar la dinámica y homogeneidad de las distintas
donde existe un alto grado de desorden y una mayor muestras de Polietilenimina. Si bien los resultados de
movilidad relativa en comparación con zonas cristalinas cristalografía de rayos-X de polvo no muestra
en donde los T113C son mayores y donde la movilidad diferencias significativas entre las diferentes muestras en
se encuentra restringida. Por lo que, analizando los las que se varió el peso molecular, la ssNMR a través de
resultados obtenidos, los T113C estuvieron en los espectros de 13C CP-MAS empleando diferentes
concordancia con lo obtenido de los experimentos 2D- tiempos de dinámica de espines (d4) permitieron
WISE en donde se observaron regiones con diferente evidenciar la heterogeneidad en cada caso, como así
movilidad y que pueden ser estimados en porcentaje a también los espectros de 15N CP-MAS. Estos resultados
partir de la determinación de los T113C. fueron confirmados a través de la medición de los
Por último, se llevó a cabo el análisis de los T113C, 1H-13C 2D-WISE y 1H-13C 2D-HETCOR
complejos metálicos de Cobre(II)-PEI (Cu(II)-PEI). Los Por último, la formación de complejos con los iones
resultados de 13C CP-MAS se presentan en la Fig. 6 y cobre(II), produjo una reducción importante de la
los resultados de los experimentos 2D-WISE y la movilidad como consecuencia del entrecruzamiento
medición de los T113C se encuentran en la Tabla 1 y 2, entre las distintas cadenas poliméricas para coordinar el
respectivamente. ión metálico, a partir de los resultados de T113C y 1H-
13
La coordinación de los iones Cu(II), comprometió a C 2D-WISE.
las regiones poliméricas con distinta dinámica molecular
en las distintas muestras. A su vez, produjo una REFERENCIAS
importante reducción en la movilidad molecular en las Bennet, A. E., Rienstra, C., Auger, M, Lakshmi, K.,
cadenas poliméricas del PEI, independientemente de la Griffin, R., “Heteronuclear decoupling in rotating
solids”, J. Chem. Phys., 103, 6951-6958 (1995). Buldain, G., Campo Dall´Orto, V., “Synthesis and
Chattah, A. K., Garro Linck, Y., Monti, G. A., Levstein, characterization of novel polyampholyte and
P. R., Breda, S. A., Manzo, R., Olivera, M., “NMR polyelectrolyte polymers containing imidazole,
and IR characterization of the aluminium complexes triazole or pyrazole”, Polymer, 53, 1288-1297
of norfloxacin and ciprofloxacin”, Magn. Reson. (2012).
Chem., 45, 850-859 (2007). Schmidt Rohr, K., Clauss, J., Spiess, H., “Correlation of
Fung, B. M., Khitrin, A., Ermolaev, K., “An improved structure, mobility, and morphological information
broadband decoupling sequence for liquid crystals in heterogeneous polymer materials by two-
and solids”, J. Magn. Reson., 142, 97-101 (2000). dimensional wideline-separation NMR
Lázaro Martínez, J. M., Leal Denis, M., Piehl, L., spectroscopy”, Macromolecules, 25, 3273-3277
Rubín, E., Buldain, G., Campo Dall´Orto, V., (1992).
“Studies on the activation of hydrogen peroxide for
color removal in the presence of a new Cu(II)-
polyampholyte heterogeneous catalyst”, Appl. Catal.
B, 82, 273-283 (2008).
Lázaro Martínez, J. M., Rodríguez Castellón, E., Torres,
R., Denaday, L., Buldain, G., Campo Dall´Orto, V.
“XPS studies on the Cu(I,II)–polyampholyte
heterogeneous catalyst: An insight into its structure
and mechanism”, J. Mol. Catal. A: Chem., 339, 43-
51 (2011).
Lázaro Martínez, J. M. Chattah, A. K., Torres, R.,