Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Laboratorio de Bioquímica general
Determinación de Colesterol en la yema de huevo
4QM2 Sección: 2 Cruz Osorio Mariana Lizet Guerrero Hernández Diana Sarahid

Objetivos
Realizar por el método de Lieberman-Burchard la determinación cuantitativa de la
concentración de Colesterol presente en la yema de huevo
Resultados
Por equipo:
Estándar de Colesterol = 80µg/mL
 Concentración de Colesterol en el tubo 1

0.25𝑚𝐿 𝑋 80µ𝑔 20
[𝐶𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙] = = = 20µ𝑔
1𝑚𝐿 1

Tubo Estándar de Colesterol (mL) Absorbancia [µg] de colesterol

1 0.25 0.046 20
2 0.5 0.186 40
3 0.75 0.288 60
4 1 0.397 80
5 1.25 0.515 100
Pb 0 0.363 69.17
Tabla 1. Se muestran los resultados obtenidos de Absorbancia en equipo durante la práctica, así como la [C].

0.6

0.5

0.4
Absorbancia

0.3

y = 0.0057x - 0.0583
0.2
R² = 0.9974

0.1

0
0 20 40 60 80 100 120
Concentracion de colesterol.

Gráfica 1. Representación gráfica del comportamiento de los valores de Absorbancia obtenidos contra las diferentes
concentraciones del Colesterol obtenida por equipo. De color verde se observa la representación de valores de la
curva tipo y de color azul el tubo problema.
  Concentración de Colesterol en tubo problema
𝑌 = 𝑏𝑥 + 𝑎 Y= Absorbancia, a= Ordenada al origen, b= Pendiente
x= Concentración de colesterol
y = 0.0057x - 0.0583
𝑌−𝑎
x=
𝑏
0.336 − (−0.0583) = 69.17µg/5µL
[𝐶](𝑇𝑢𝑏𝑜 𝑃𝑏) =
0.0057
 Concentración de Colesterol en la yema de huevo en 9 mL
Considerando:
5µL = 0.005mL
69.17µ𝑔(9𝑚𝐿)
[𝐶](9𝑚𝐿) = = 124506µg = 124.506mg
0.005𝑚𝐿

124.506 mg es en media yema de huevo, en la yema completa es 249.012 𝑚𝑔

Por sección:

Tubo Estándar de Colesterol (mL) Absorbancia [µg] de colesterol

1 0.25 0.0706 20
2 0.5 0.17 40
3 0.75 0.2656 60
4 1 0.3893 80
5 1.25 0.4483 100
Pb 0 0.276 63
Tabla 2. Se muestran los resultados obtenidos de Absorbancias de la sección promediadas durante la práctica, así como
la [C].

0.5
0.45
0.4
0.35
Absorbancia

0.3
0.25
0.2
0.15 y = 0.0049x - 0.0237
0.1 R² = 0.9917
0.05
0
0 20 40 60 80 100 120
Concentracion de colesterol

Gráfica 1. Representación gráfica del comportamiento de los valores de Absorbancia contra las diferentes
concentraciones del Colesterol obtenida por sección. De color azul observamos los valores de la curva tipo y de color
naranja el tubo problema.
Discusión
Como sabemos el colesterol es un esterol no coloreado, por lo que resulta difícil poder
realizar su caracterización. Por ello empleamos una técnica colorimétrica, con la finalidad
de poder agregar grupos cromoforos y poder adquirir una coloración específica para su
análisis. La reacción de Lieberman Burchard consiste en una solución clorofórmica en la
cual el colesterol reacciona con anhídrido acético y ácido sulfúrico para dar un complejo de
color verde que resulta de la mezcla de dos compuestos uno de color azul (ácido 3,3-
biscolesta-3,4 Dienilsulfonico) y otro de color amarillo (ácido 3,3-biscolesta-3,5
Dienilsulfonico), en conjunto ambos colores podemos observarlos con una tonalidad verde
en la cual su color se va intensificando con respecto a la concentración de colesterol que
hay en la muestra.
En la bibliografía se reporta que una yema de huevo pesa en promedio entre 15 a 18 gr.,
la cual aporta aproximadamente entre 200 a 250 mg de colesterol, en la práctica el equipo
determino una concentración en la yema de huevo de 249.012mg. En base a esto podemos
decir que el valor determinado entra en el intervalo normal de la concentracion de una yema
de huevo promedio.
En la gráfica por sección la hipotesis esperada es que se observaran muy similares, puesto
que el experimento partio de la misma muestra y en efecto observamos que esto asi ocurre,
la R se ve disminuida en milesimas pero no es ninguno de los casos menor a 0.99 en base
a esto podemos sugerir que el equipo trabaja de una manera uniforme.En cuanto a los
microgramos de colesterol determinados en el tubo problema por seccion y por equipo que
de igual manera son parecidos.
Las pequeñas diferencias encontradas entre graficas se puede atribuir a la variacion en la
percepcion del analista, al medir las cantidades de los reactivos.
Conclusiones

 Se logro determinar la concentración de colesterol de la yema de huevo por el

método de Lieberman Burchard.
 Se determinó por equipo una concentración de colesterol en la yema de huevo de
249.012mg.
Bibliografía
 Anónimo, “Colesterol que aporta la yema de huevo”, revisado 07/11/17
http://www.abajarcolesterol.com/cuanto-colesterol-aporta-la-yema-de-huevo/
 Milagros Sandoval, “Reconocimiento del colesterol”, revisado 07/11/17
https://es.slideshare.net/Milisanm/reconocimiento-del-colesterol-quimica
 Anónimo, “Reacciones de identificación y propiedades de los lípidos”, revisado 07/11/17
http://www.fcv.luz.edu.ve/images/stories/catedras/bioquimica_i/identificacion_propiedades.
pdf
 E. Figueroa Carolina. (Marzo 2012). Análisis de la fracción lipídica de la yema de huevos.
Scielo, 47, 1-10.