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MACROMOLECULAS DE LA LEVADURA

Lina Agudelo Charrya, María Camila Giraldo Erazob.


amarcemario.lmac@gmail.com, b cami-23@hotmail.com

Agosto 9 de 2017

Resumen

Palabras claves: ligando, isómero, bidentado, metales de transición.

1. Introducción

Las macromoléculas son polímeros gigantes construidos por enlaces


covalentes de moléculas más pequeñas llamadas monómeros. Estos
monómeros pueden ser idénticos o no, pero siempre tienen estructuras
químicas similares. Las moléculas que poseen pesos moleculares superiores a
1.000 suelen considerarse macromoléculas y las proteínas, los polisacáridos,
Las funciones de las macromoléculas están directamente relacionadas con sus
formas y con las propiedades químicas de sus monómeros. Los monómeros
están unidos por reacciones de condensación, que liberan una molécula de
agua por cada enlace formado. La hidrólisis utiliza agua para romper polímeros
en monómeros1

Las macromoléculas están construidas mediante la formación de enlaces


covalentes entre moléculas más pequeñas, llamadas monómeros. Las
macromoléculas incluyen polisacáridos, proteínas y ácidos nucleicos. poseen
formas tridimensionales características y específicas que dependen de la
estructura, las propiedades y la secuencia de sus monómeros. Los diferentes
grupos funcionales brindan a los sitios dentro de la macromolécula propiedades
específicas importantes para su funcionamiento biológico y sus interacciones
con otras macromoléculas.2

1
El objetivo de esta práctica fue la separación por medio de la centrifugación las
macromoléculas presentes en las levaduras además de la identificación
cualitativamente del glucógeno, proteínas y acidos nucleicos.

2. Materiales y equipos

En la práctica realizada se hizo uso significativo de tres equipos, los cuales


fueron: una balanza analítica marca Metter Toledo con una precisión de
±0,0001 g, una plancha calefactora marca Corning y un embudo Buchner
marca Elementos Químicos.

De acuerdo a la información brindada por el personal del almacén de la


Universidad Santiago de Cali, se realizó el registro de las marcas y tipos de
reactivos utilizados durante la práctica; los cuales fueron: cloruro de cobalto
hexahidratado y ácido clorhídrico marca Fisher Chemical; etilendiamina marca
Merck; metanol, Dietil éter, etanol, y éter etílico marca Chemy, todos de tipo
analítico.

Además se utilizaron implementos de vidriería marca Pyrex y agua destilada


tratada y desionizada en la Universidad Santiago de Cali.

3. Metodología 3

4. Resultados

En las siguientes tablas se muestran la masa y descripción de los cristales


obtenidos a partir de la síntesis realizada:

Tabla 1. Masa de los compuestos obtenidos a partir de la síntesis realizada

Síntesis Masa (g)

𝑻𝒓𝒂𝒏𝒔 [𝑪𝒐(𝒆𝒏)𝟐 𝑪𝒍𝟐 ] 0,1494

𝑪𝒊𝒔 [𝑪𝒐(𝒆𝒏)𝟐 𝑪𝒍𝟐 ] 0,1062

2
Tabla 2. Descripción de los cristales

Cristal Color Tamaño

𝑻𝒓𝒂𝒏𝒔 [𝑪𝒐(𝒆𝒏)𝟐 𝑪𝒍𝟐 ] Verde Esmeralda Pequeños

𝑪𝒊𝒔 [𝑪𝒐(𝒆𝒏)𝟐 𝑪𝒍𝟐 ] Violeta Rojizo Pequeños

5. Análisis de Resultados
En la practica la levadura se trató con ácido tricloroacetico con el propósito de
separar el glucógeno de los ácidos nucleídos y proteínas, “la estructura del
glucógeno es muy ramificada, está formada por varias cadenas que contienen
de 12 a 18 unidades de α-glucosas, uno de los extremos de esta cadena se
une a la siguiente cadena mediante un enlace α-1,6-glucosídico, la importancia
de que el glucógeno sea una molécula tan ramificada es que aumenta su
solubilidad en disolventes de baja polaridad”4

El ácido tricloroacetico se convierte en un buen solvente para el glucógeno


porque la parte apolar de este acido solubiliza las cadenas carbonadas del
glucógeno, por esta razón al adicionar el ácido se forman dos fases una liquida
la cual contiene el glucógeno solubilizado y otra solida con proteínas y ácidos
nucleicos precipitados. La centrifugación es necesaria para optimizar el
proceso de decantación de estas dos fases evitando así que estas se vuelvan a
mezclar.5
Al sobrenadante que se obtuvo se adiciono alcohol etílico al 96% con el
propósito de precipitar el glucógeno, el etanol posee un grupo OH- el cual
puede formar puentes de hidrogeno con los OH- del glucógeno lo que
provocaría que el glucógeno se solubilice por esta razón es necesario realizar
el proceso de precipitación a bajas temperaturas para disminuir al máximo las
interacciones entre estos dos grupos y por ende disminuir su solubilidad, las
propiedades polares del etanol lo convierten en buen precipitante del
glucógeno porque este alcohol no puede solubilizar las cadenas carbonadas
que son apolares del glucógeno. Después de la centrifugación el precipitado se

3
depositó en un tubo para adicionarle lugol y de esta manera comprobar
cualitativamente si las levaduras contienen glucógeno, se tomaron 3 tubos uno
con agua destilada, otro con almidón y otro con glucógeno, a estos también se
adicionaron lugol, si se supone que la muestra contiene glucógeno este debe
sufrir una reacción positiva y similar a la del tubo patrón que contiene
glucógeno y efectivamente así fue en ambas muestras se formó una solución
de color café oscuro debido a la reacción positiva con el lugol este resultado
confirma la presencia de glucógeno en la levadura, el almidón también
reacciona con el lugol por que la solución se torna de color azul violeta.5

El sedimento que se obtuvo anteriormente el cual contenía proteínas y ácidos


nucleicos se trató con cloruro de sodio, los ácidos nucleicos por poseer bases
nitrogenadas y grupos fosfatos pueden solubilizarse en la solución acuosa de
cloruro de sodio, pero su solubilidad es baja por esta razón es necesario elevar
la temperatura del sistema para aumentar las interacciones entre las moléculas
de soluto y solvente y de esta manera se favorezca la solubilidad de los ácidos
nucleicos.6

Después de la respectiva centrifugación y decantación, se separa el


sobrenadante que contiene los ácidos nucleicos, el precipitado que contiene las
proteínas se deja en baño de hielo para garantizar una mayor precipitación de
estas moléculas. Los ácidos nucleicos se precipitan adicionando un solvente
más débil en comparación con el medio acuoso de cloruro de sodio, este
solvente es el etanol no obstante los grupos OH- de este compuesto vana
solubilizar a ciertos grupos fosfatos y bases nitrogenadas, por esta razón es
necesario disminuir la temperatura del sistema para desfavorecer la solubilidad
entre estos dos compuestos.6 Después de la centrifugación el sedimento
presento un color amarillo claro, este precipitado se disolvió en amortiguador
salino, también se tomaron dos tubos como muestra patrón un tubo contenía
albumina y el otro amortiguador salino, a los tres tubos se adiciono orcinol
calentando en baño de agua hasta que se evidencie un color verde, para el
tubo que contenía el amortiguador no ocurrió ningún tipo de cambio, de igual

4
manera para el tubo que contenía los ácidos nucleicos no presento cambios,
generalmente con el orcinol se puede detectar ribosa, pero aunque la prueba
para ácidos nucleicos no haya dado positiva no se puede decir que las
levaduras no poseen estos compuestos ya que todas las células tienen
información genética aunque sea mínima en el núcleo, probablemente la
reacción no se pudo evidenciar a macro escala pero seguramente a nivel
microscópico pueden haber cambios notorios por efectos de esta reacción.7

El sedimento que contiene proteínas se trató con cloruro de sodio debido a


q u e entre estas dos especies no se presenta solubilidad se formó una
suspensión, en otro tubo se adiciono solución salina sola, posteriormente a
cada tubo se adiciono sulfato cúprico tornándoselas muestras a color azul claro
este color simplemente se debe a que el sulfato cúprico presenta el color
mencionado y al estar en exceso torna las soluciones a este color, al adicionar
hidróxido de sodio la solución salina no sufre ningún cambio mientras que la
suspensión que contiene la muestra de proteínas toma un color violeta .Al
adicionar orcinol a una porción dela muestra que contenía proteína se observa
que la solución sufre el mismo cambio que la muestra que contiene albumina,
esta se puede considerar una prueba positiva para proteínas.8

6. Conclusiones
Para la extracción de las diferentes macromoléculas presentes en la levadura
es necesario modificar el medio de reacción aumentando o disminuyendo la
temperatura con el propósito de favorecer y desfavorecer la solubilidad de
ciertos compuestos.

Referencias

1. S.N (S.F). Macromoléculas: su química y biologia. Recuperado de:


file:///C:/Users/mari/Downloads/1497568235_cap3_macromoleculas1.pdf.(13
de agosto del 2017)

5
2. S.N (S.F). Macromoléculas biológicas. Recuperada de:
http://www.universidadupav.edu.mx/documentos/BachilleratoVirtual/Contenidos
_PE_UPAV/2Trimestre/QUI%202/Unidad3/tema1.pdf (Agosto 13 del 2017).

3. Bejarano. L (2013). Guía de laboratorio de química. Editorial universidad


Santiago de Cali. Facultad ciencias básicas. Programa de Química Pág. 32-33.
Colombia 2017.

4. S.F (2010). Metabolismo del glucógeno. Recuperado de:


https://es.scribd.com/presentation/338826365/Metabolismo-Del-Glucogeno
(Agosto 13 del 2017).

5. Saccharo my cescerevisiae during adaptation to saline conditions: questions,


some answers and a model. FEMS Microbiol. Lett.182:1-8.

6. Adler, L. & L. Gustafsson. 1980.Polyhydric alcohol productionand intracellular


amino acid pool inrelation to halotolerance of the yeast Debaryomyces hansenii
Arch. Microbiol. 124:123-130