Pruebas cruzadas

Prueba cruzada con antiglobulina indirecta

Los argumentos para mantener la prueba cruzada con antiglobulina indirecta se

basan en el fallo en la identificación de anticuerpos contra antígenos de baja
frecuencia en la prueba de detección de anticuerpos. Sin embargo, existen
evidencias resumidas por Garratty de que la probabilidad de no detectar un
anticuerpo clínicamente significativo es de alrededor de 1 entre 10.615 pruebas
cruzadas, si se omite el componente de la prueba de la antiglobulina indirecta y
la detección de anticuerpos depende solo de una detección de anticuerpos
sensibles. Además, el desenlace habitual de una transfusión, si existía un
anticuerpo y no se detectó por la prueba de detección anticuerpos, se limita a
una reducción de la supervivencia delos eritrocitos.
Sin embargo, siempre debería realizarse una prueba de compatibilidad de
antiglobulina indirecta si el paciente tiene anticuerpos antieritrocitarios de
probable significado clínico, incluso si no son detectables actualmente. Las
razones para ello son las siguientes:
1. Actúa como una doble comprobación de que el fenotipo de la donación ha sido
determinado correctamente y la sangre etiquetada como negativa para el o los
correspondientes antígenos también.
2. Asegura la compatibilidad serológica, incluso si la identificación del o de los
anticuerpos es incorrecta o incompleta.
3. Permite la detección de anticuerpos para antígenos de baja frecuencia no
presentes en las células de detección, que podrían encontrarse quizás en un
paciente que es claramente un ≪respondedor≫ y que podrían quedar
enmascarados por otros aloanticuerpos.
Prueba cruzada de centrifugación inmediata
El único propósito de esta técnica es detectar la incompatibilidad ABO. Puede
emplearse a fin de suministrar la sangre para una transfusión cuando el paciente
tiene un grupo sanguíneo completo y detección de anticuerpos negativa.
Puede usarse para cambiar de grupo de prioridad y reservar/cruzar cuando se
pide la sangre y se suele asociar a una prueba cruzada con antiglobulina. La
prueba cruzada de centrifugación inmediata asegurara que se han seleccionado
las unidades correctas y que a la unidad de eritrocitos del donante le ha sido
asignado el grupo ABO correcto. Claramente, no es una prueba útil para usar en
la detección de incompatibilidad ABO si la prueba sérica de determinación del
grupo sanguíneo revela unos anti-A o anti-B muy débiles.
Hay indicios de que esta técnica esta poco estandarizad, pero su sensibilidad
puede optimizarse seleccionando suspensiones celulares, tiempos de
incubación y proporción suero: células apropiadas. Se recomienda el siguiente
método en tubo:
1. Mezclar 2 volúmenes de plasma/suero con un volumen al 2-3% de células
suspendidas en PBS o LISS (o EDTA salino si se emplea suero; v. fig. 20.4).
2. Incubar a temperatura ambiente durante 2-5 min para potenciar la detección
de anticuerpos ABO débiles.

3. Leer la reacción cuidadosamente empleando una técnica de ≪inclinación y

rotación≫.

Figura 19.2. Aspecto macroscópico de la aglutinación en tubos con fondo redondeado. La

aglutinación muestra distintos grados de«granularidad»; en ausencia de aglutinación, las células
sedimentadas aparecen como un botón redondeado liso, como en el extremo derecho.

FUNDAMENTO:
La prueba de compatibilidad permite conocer si existe compatibilidad serológica
entre la sangre de una persona donante y la de un receptor. Este procedimiento
incluye la prueba cruzada, que consiste en poner en contacto el suero del
receptor con glóbulos rojos del donante (Prueba cruza mayor).Esta prueba es
requerimiento fundamental, porque es la mejor manera de detectar anticuerpos
que pueden dañar las células rojas transfundidas y causar una reacción
hemolítica transfusional, y la prueba cruza menor, que se hace reaccionar el
suero del donador con eritrocitos del receptor. La incompatibilidad de sangre se
puede dar tanta aglutinación como hemolisis y la seguridad del receptor depende
no solo de que las técnicas se realicen de forma adecuada sino también de la
debida identificación de grupos sanguíneos de receptores y donadores.
RESULTADOS:

Prueba Prueba
Equipos Receptor Donante Mayor Menor Compatibilidad
1 O+ A+ Hemolisis Sedimentación No compatible
2 A+ O+ Sedimentación Hemólisis Compatible
3 O+ B+ Aglutinación Sedimentación No compatible
Muestra insuficiente
de eritrocitos para
4 B+ O+ fase III Aglutinación Compatible
5 O+ A+ Aglutinación Sedimentación No compatible
sin
6 A+ O+ aglutinación Aglutinación

ANALISIS DE RESULTADOS:
Los resultados obtenidos de el equipo1 es no compatible, para la prueba mayor,
ya que en el suero del grupo O+ se encuentran anticuerpos: anti-A y anti-B, por
lo tanto atacaran los anti-A a los antígenos del grupo A provocando hemolisis.
Sin embargo la prueba menor en el Suero del grupo A+, se encuentra
anticuerpos anti-B y no atacaran ningún antígeno ya que el grupo O+, no hay
antígenos.
Equipo 2, para la prueba mayor es compatible ya que en el suero del grupo A+,
se encuentra anticuerpos anti-B y no atacaran ningún antígeno ya que el grupo
O+, no hay antígenos, por lo que si habría transfusión. Para la prueba menor el
suero del grupo O+ se encuentran anticuerpos: anti-A y anti-B, por lo tanto
atacaran los anti-A, a los antígenos de la membrana del grupo A+ provocando
hemolisis.
Equipo 3, es no compatible, para la prueba mayor, ya que en el suero del grupo
O+ se encuentran anticuerpos: anti-A y anti-B, por lo tanto atacaran los anti-B a
los antígenos del grupo B provocando hemolisis. Sin embargo la prueba menor
en el Suero del grupo B+, se encuentra anticuerpos anti-A y no atacaran ningún
antígeno ya que el grupo O+, no hay antígenos.
Equipo 4, para la prueba mayor es compatible ya que en el suero del grupo B+,
se encuentra anticuerpos anti-A y no atacaran ningún antígeno ya que el grupo
O+, no hay antígenos, por lo que si habría transfusión. Para la prueba menor el
suero del grupo O+ se encuentran anticuerpos: anti-A y anti-B, por lo tanto
atacaran los anti-B a los antígenos de la membrana del grupo B+ provocando
hemolisis.
En el caso de los equipos 5y 6 sucede la misma situación de los equipos 1 y 2,
para el caso del factor RH no hay problema ya que en todos los grupos
sanguíneo tienen factor RH positivo.
REFERENCIAS:

 Manual de Prácticas para el laboratorio de análisis bioquímico clínico I,

Hematología. Facultad de Estudios Superiores Zaragoza.

 Dacie and Lewis, Hematología Practica, 10.a edición 2008 Elsevier

España, S.A.