Para apoyar la acumulación sostenida de biomasa, las

células tumorales se reprograman metabólicamente. Los

transportadores de nutrientes y las enzimas metabólicas
están regulados por las mismas señales oncogénicas que
impulsan la progresión del ciclo celular. Algunas de las
primeras terapias contra el cáncer usaron antimetabolitos
para interrumpir el metabolismo del tumor y ahora existe
un renovado interés en desarrollar fármacos que se centren
en las dependencias metabólicas. Muchos cánceres
presentan una mayor demanda de aminoácidos específicos
y se vuelven dependientes de un suministro exógeno o de
una síntesis de novo mejorada. Las estrategias para explotar
tales "adicciones metabólicas" incluyen agotar los
aminoácidos en el suero sanguíneo, bloquear la captación
por los transportadores e inhibir las enzimas biosintéticas o
catabólicas. Los hallazgos recientes resaltan la importancia
de utilizar sistemas modelo apropiados e identificar grupos
de pacientes objetivo a medida que las posibles terapias
avanzan en la clínica.
• Introducción Los requisitos metabólicos de
las células en proliferación, incluidas las
células tumorales, difieren de las de las
células quiescentes. Las células
proliferantes deben adquirir y procesar
metabolitos para satisfacer las demandas
biosintéticas de la replicación, al tiempo
que mantienen la energía y la homeostasis
redox. Esto presenta desafíos particulares
dentro del microambiente tumoral, que a
menudo está mal vascularizado y agotado
de nutrientes, incluido el oxígeno
molecular. En consecuencia, las células
cancerígenas utilizan una amplia gama de
estrategias para obtener combustibles
metabólicos, de modo que el "uso de
modos oportunistas de adquisición de
nutrientes" se describió recientemente
como un sello distintivo del metabolismo
del cáncer 1] Se realizó un descubrimiento
mínimo en el campo del metabolismo del
cáncer en la década de 1920 por Otto
Warburg, quien observó que los tejidos
tumorales consumen glucosa mucho más
rápidamente que el tejido sano
circundante y fermentan la glucosa al
lactato independientemente de la
disponibilidad de oxígeno (glicólisis
aeróbica o efecto Warburg) [2].
Posteriormente, Harry Eagle notó que la
proliferación óptima de ciertas líneas de
células de mamíferos cultivadas requiere
un exceso molar de glutamina varias veces
mayor que cualquier otro aminoácido 3. De
hecho, la glucosa y luego la glutamina son
los nutrientes más rápidamente
consumidos por muchas células
cancerígenas cultivadas [4,5], aunque el
metabolismo alterado de también se han
reportado ácidos grasos, acetato, nucleótidos,
ácido fólico, proteínas y varios aminoácidos
además de la glutamina. 1] El metabolismo de
las células cancerosas ha sido el blanco de las
drogas desde el advenimiento de la
quimioterapia moderna. A fines de la década
de 1940, se utilizó la xaminopterina antifolato
para inducir la remisión en pacientes con
leucemia linfoblástica aguda (LLA) pediátrica. La
aminopterina, suplantada en la década de 1950
por el fármaco relacionado metotrexato, inhibe
competitivamente la dihidrofolato reductasa y
por lo tanto bloquea el reciclaje de
tetrahidrofolato, un transportador de unidades
de un carbono que desempeña un papel
esencial en el metabolismo de aminoácidos y
ácidos nucleicos [6]. Hoy, los folatos, junto con
las antipirimidinas y las antipurinas, se usan
rutinariamente para tratar un rango de
cánceres, ilustrando la factibilidad de enfocarse
en el metabolismo para la terapia del cáncer
*Metabolismo de los aminoácidos de las células
cancerosas Los 20 aminoácidos proteinogénicos
estándar contribuyen a una diversidad de procesos
importantes para la célula proliferación, incluida la
biosíntesis de proteínas, nucleótidos, lípidos,
glutatión, glucosamina y poliaminas, y también la
reposición (anaplerosis) del carbono del ciclo del
ácido tricarboxílico (TCA). Las concentraciones de
aminoácidos en el suero sanguíneo y los tejidos
seleccionados se enumeran en la Tabla S1 (ver
material suplementario en línea). El metabolismo
celular de los aminoácidos es muy flexible y varía
notablemente con el tejido de origen subtipo de
cáncer, microambiente y mutaciones del controlador
oncogénico. Sin embargo, los estudios revelaron una
serie de características comunes: (i) aumento de la
demanda de nitrógeno para suministrar reacciones
biosintéticas: consumo elevado de aminoácidos y
regulación positiva de los transportadores
correspondientes; demanda de aminoácidos
específicos no esenciales que exceden el suministro
intracelular, lo que conduce a la dependencia de
fuentes exógenas; y (iv) niveles alterados de enzimas
que catalizan la síntesis de aminoácidos y / o el
catabolismo del metabolismo del cáncer. Otra
característica del metabolismo de aminoácidos en
células de mamíferos es una aparente redundancia
frecuente, con múltiples enzimas que catalizan una
reacción dada. Por ejemplo, varias enzimas convierten
la glutamina en glutamato, incluidas dos glutami nasas
mitocondriales (GLS y GLS2) 17]. Esta flexibilidad y
redundancia inherentes presentan desafíos para
dirigir el metabolismo de aminoácidos, y por lo tanto,
la selección de grupos de pacientes, la consideración
de los mecanismos de resistencia y la identificación de
sinergias de fármacos serán crucialmente importantes
para desarrollar terapias exitosas. Las técnicas para la
imagen del metabolismo in vivo también serán
valiosas para identificar los tumores con mayor
probabilidad de responder al tratamiento [8. A
continuación, describimos las estrategias para atacar
el metabolismo de los aminoácidos, con un enfoque
en la glutamina y la serina, los nutrientes más
rápidamente consumidos después de la glucosa en
muchas células cancerosas cultivadas [4,5]
Agotamiento de los aminoácidos séricos Actualmente, los
únicos agentes anticancerígenos que se dirigen
directamente al metabolismo de los aminoácidos son las
asparaginasas bacterianas (de Escherichia coli y Erwinia
chrysanthemi), que están aprobadas por la FDA para su
tratamiento. de pediatría y ad ALL. Una posible
complicación del uso de enzimas bacterianas es la
producción de anticuerpos neutralizantes durante el
tratamiento. La PEGilación disminuye la inmunogenicidad y
prolonga la vida media, y la L-asparaginasa de E. coli
PEGilada también está aprobada por la FDA para la terapia
de ALL. Numerosos ensayos clínicos actualmente están
evaluando la eficacia de las L-asparaginasas en el
tratamiento de una variedad de neoplasias malolácticas [9].
Las células de Mammalian pueden generar asparagina a
partir de aspartato y glutamina a través de la enzima
asparagina sintetasa (ASNS). Sin embargo, algunas células
cancerosas, que incluyen linfoblastos leucémicos, carecen
de expresión de ASNS y, por lo tanto, dependen del
suministro de asparagina en el suero sanguíneo (es decir,
son asparagina auxótrofas). Las 1-asparaginasas catalizan la
desamidación de la asparagina, lo que da como resultado un
rápido agotamiento de este aminoácido en el suero; las
asparaginasas también catalizan la desamidación de la
glutamina. Debido a que la glutamina tiene diversas
funciones en el metabolismo de las células cancerosas y se
requiere para la síntesis de asparagina mediada por ASNS, la
depleción sérica de glutamina probablemente contribuye a
los efectos terapéuticos de las L-asparaginasas. Se están
investigando enfoques similares para el tratamiento de
tumores auxotróficos de arginina. La enzima del ciclo de la
urea argininosucinato sintetasa (ASS) 1 cataliza la formación
de argininosuccinato a partir de citrulina y aspartato (figura
1). El argininosuccinato a su vez se convierte por
argininosuccinato liasa (ASL) en arginina. Aunque la mayoría
de las células pueden sintetizar arginina de novo usando
esta vía, la pérdida de la expresión de ASS1 ocurre en ciertos
cánceres, haciéndoles arginina auxótrofos 10. La deflaxia de
ASS1 apoya la proliferación de proliferación incrementando
el suministro de aspartato para la síntesis de pirimidina (Fig.
1) Arginina deiminasa bacteriana PEGilada (ADI -PEG20) y

FIGURA Agotamiento de arginina en plasma para

la terapia del cáncer. Los ensayos clínicos
actualmente están evaluando la arginina
deiminasa bacteriana PEGilada (ADI-PEG20) y la
arginase humana recombinante 1 (rhArg1-PEG, o
BCT-100) para el tratamiento de una variedad de
cánceres. Ciertos tumores pierden la expresión
de la argininosuccinato sintetasa (ASS1), la
enzima que cataliza la formación de
argininosuccinato a partir de aspartato y
citrulina. En consecuencia, estos tumores son
incapaces de sintetizar arginina de novo
(indicada por líneas punteadas), y dependen del
suministro y captación de arginina extracelular a
través de miembros de la familia de
transportadores SLC7. La pérdida de ASS1
beneficia a las células tumorales al aumentar el
suministro de aspartato para la síntesis de
pirimidina. Al agotar la arginina plasmática, AD-
PEG20 y rhArg1-PEG / BCT-100 mueren de
hambre a estas células tumorales de arginina. Un
mecanismo potencial para la resistencia a esta
estrategia de tratamiento es la reexpresión de
ASS1, que conduce a la restauración de la síntesis
de arginina de novo. Las flechas azules gruesas
indican vías de pasos múltiples. El texto azul
indica sus abreviaturas: ARG1, arginasa 1; ASL,
argininosuccinato liasa; ASS1, argininosuccinato
sintetasa; GLS glutaminasa; GOT, aspartato
aminotransferasa: OTC, ornitina transcarbamilasa

la arginase humana recombinante 1

(rhArg1-PEG, o BCT-100) reduce la
arginina sérica, y ambos son
actualmente sujetos de ensayos
clínicos (hasta la Fase III 10. Al igual
que la L-asparaginasa, una
complicación asociada con ADI-PEG20
de origen bacteriano es su
inmunogenicidad. Aunque rhArg1-PEG
carece de antigenicidad, su KM para la
arginina es aproximadamente diez
veces más alto que el de ADI-PEG20
[10]. Otra posible limitación de esta
estrategia es que las células
cancerosas pueden desarrollar
rápidamente resistencia a la privación
de arginina a través de expresión de
ASS1 [1 1101
*Reacciones de transferencia de nitrógeno: glutamina y sus vecinos
metabólicos Después de la glucosa, el nutriente más rápidamente
consumido por muchos cánceres cultivados es la glutamina [4,5], el
aminoácido más abundante en el suero sanguíneo7. Aunque otros
aminoácidos, que se consumen a tasas mucho menores que la
glutamina, representan colectivamente la mayoría de la masa de
carbono en las células de mamíferos en proliferación, el carbono
derivado de glucosa y glutamina constituye aún 5-10% de la masa total
de células secas [ 5], la glutamina es una importante fuente de carbono
para la síntesis no esencial de aminoácidos (Fig. 2) y, por lo tanto, el
carbono derivado de glutamina está sobrerrepresentado en la proteína
celular [5]. Además, los átomos de amida y nitrógeno de glutamina
respec - representan 11% y 17% del nitrógeno celular en células
cultivadas de cáncer de pulmón. En células que proliferan rápidamente,
incluidos los enterocitos inmunes del intestino delgado y algunas células
cancerosas, la glutamina juega un papel importante en la energía celular
y la homeostasis redox, además de suministrar reacciones biosintéticas
con nitrógeno y / o carbono (Fig. 2) 7. De hecho, aunque las células de
mamíferos pueden sintetizar glutamina de novo, la demanda elevada
puede hacerlas dependientes de un suministro exógeno durante la
proliferación rápida 7. Una serie de vías de señalización oncogénica y
factores de transcripción impulsan la reprogramación del metabolismo
de la glutamina celular durante la tumorigénesis [7,12,13]. Aunque nos
centramos más adelante en el catabolismo de la glutamina como posible
objetivo terapéutico, la síntesis de glutamina también desempeña un
papel crucial en algunas células cancerosas (cuadro 1). El nivel del
organismo, músculo esquelético, pulmón y tejidos adiposos median la
síntesis neta de novo y la liberación de glutamina. mientras que el
catabolismo neto de la glutamina ocurre en el riñón [7]. El hígado exhibe
el consumo neto de glutamina unido a la producción de urea en el
estado post-absortivo, y la producción neta de glutamina durante la
inanición prolongada. El transporte de glutamina a través de la
membrana plasmática está mediado por varios miembros de la
superfamilia de transportadores SLC, al menos cuatro de los cuales
están regulados positivamente en cánceres aguas abajo de c-Myc [14].

Los transportadores SLCIAS (ASCT2), que

cataliza la absorción dependiente de
sodio de aminoácidos neutros, y SLC7AS
(LAT1), que pueden acoplar el eflujo de
glutamina a la captación de aminoácidos
aromáticos y de cadena ramificada, han
recibido especial atención como posibles
dianas terapéuticas 14. Hasta la fecha, sin
embargo, no se han informado
inhibidores selectivos de alta afinidad de
estas proteínas 14] El catabolismo de
glutamina intracelular comienza con su
conversión a glutamato, catalizado por
glutamina amidotransferasas, que donan
el nitrógeno amídico de glutamina a
reacciones biosintéticas, o por
glutaminasas mitocondriales, que lo
liberan como amoníaco. Varias enzimas
contienen dominios de glutamina
amidotransferasa, incluida la asparagina
sintetasa, cinco enzimas en las rutas de
biosíntesis de nucleótidos y la glutamina-
fructosa-6-fosfato amino transferasa
(GFPT) 1, que cataliza el paso limitante de
la velocidad de
Esto es cuadro azul
Los perfiles metabólicos varían según el tipo de tumor y el
microambiente Varios estudios recientes han resaltado la importancia
de considerar el tipo de tumor, las condiciones de cultivo y los sistemas
modelo utilizados al investigar el metabolismo. La transición de células
de cáncer de pulmón de monocapa a cultivo independiente de anclaje
da como resultado la oxidación reprimida de glucosa y glutamina 130].
El aumento del metabolismo reductor de la glutamina vía isocitrato
deshidrogenasa citosólica (IDH) 1 se produce para generar citrato, que
ingresa a la mitocondria e impulsa la producción de NADPH a través de
IDH2 para mitigar las especies de oxígeno reactivo El fenotipo
metabólico también puede cambiar cuando las células se cambian entre
el modelo in vivo y ex vivo sistemas. Mientras que la utilización de
glutamina exógena por tumores mutantes de cáncer de pulmón no
microcítico impulsados por KRAS es mínima, las líneas celulares
cultivadas derivadas de estos tumores dependen de un aporte externo
de glutamina y también son sensibles a la inhibición de glutaminasa
(GLS) 129] Trasplante de las líneas celulares vuelven a los pulmones del
ratón producen tumores con un fenotipo metabólico similar al del tumor
original. Cabe destacar que el pulmón media la síntesis y liberación de
glutamina en individuos sanos, y un estudio anterior encontró que los
tumores pulmonares inducidos por MYC regulan positivamente la
glutamina sintetasa (GLUL) y acumulan glutamina, en contraste con los
tumores hepáticos inducidos por MYC que exhiben catabolismo de
glutamina mediado por GLS y disminución de la expresión de GLUL [57].
Al igual que los tumores pulmonares, los gliomas acumulan glutamina,
que producen a partir de glucosa en carbono mediante el ciclo de TCA y
GLUL [58,59]. La glutamina en estos tumores se utiliza para alimentar la
síntesis de purina de novo en lugar de la anaplerosis del ciclo de TCA.
Consistentemente, GLS está presente en niveles mucho más bajos en
glioblastomas ortotópicos que en el tejido cerebral circundante [5]. A
diferencia de los tumores pulmonares y los gliomas, el catabolismo de
glutamina mediado por GLS está regulado positivamente y tiene
importancia clínica en muchos cánceres 7. GLS está muy sobreexpresado
en el carcinoma hepatocelular humano (HCC) en relación con el tejido
hepático circundante, y también en el HCC dirigido por MYC en ratones
[16]. Pérdida de una copia de GLS en este modelo de ratón
embota el crecimiento del tumor, y el tratamiento con el
inhibidor de GLS bis-2- (5-fenilacetamido-1,2,4-tiadiazol-2-il)
sulfuro de etilo (BPTES) prolonga la supervivencia. De
manera similar, en un modelo de ratón con carcinoma de
células renales impulsado por MYC, GLS está positivamente
regulado positivamente y el crecimiento del tumor es
inhibido por BPTES 124]. Incluso diferentes subtipos de
cáncer muestran distintos fenotipos metabólicos. Por
ejemplo, células de cáncer de mama basales son
típicamente glutamina dependiente y sensible a la inhibición
GLS, mientras que la mayoría de las células de cáncer de
mama luminal expresan GLUL, son resistentes a los
inhibidores de GLS y son capaces de proliferación
independiente glutamina [25,60]. Además de añadir
complejidad dentro de los fibroblastos asociados con el
cáncer microambiente tumoral puede sintetizar glutamina a
través de GLUL, y suministrar glutamina vecina células
cancerosas auxotróficas [61,62]. Todo esto resalta la
importancia de elegir sistemas modelo apropiados para
estudiar el metabolismo de las células cancerosas y de
reconocer las profundas diferencias en el fenotipo
metabólico que existen entre los diferentes tipos de
tumores. Una posible fuente de artefactos experimentales,
que es controlable y podría abordarse en futuros estudios,
es el uso generalizado de medios de cultivo celular que
contiene concentraciones no fisiológicas de muchos
nutrientes, incluyendo aminoácidos (ver material
suplementario en línea). Por ejemplo, la concentración de
glutamina en el suero sanguíneo es de aproximadamente
0,5 mM en individuos sanos, y más baja en muchos
pacientes de cáncer et medios de cultivo celular estándar
contienen glutamina 2-4 mM Este problema es
potencialmente exacerba en estudios del metabolismo de
tumor cerebral, porque la mayoría amino los ácidos (a
excepción de la glutamina) se mantienen a concentraciones
2-12 veces más bajas en el líquido cefalorraquídeo que en el
suero [64].
Imagen Uso de glutamina / glutamato en células en proliferación. La
glutamina (Gin) y el glutamato (Glu), que se muestran en texto de color
verde oscuro, donan carbono y / o nitrógeno a diversos procesos
biosintéticos en células proliferantes. La glutamina es absorbida del
ambiente extracelular por varios transportadores de superfamilia SLC o
sintetizada de nuevo de glutamato y amoníaco por la glutamina
sintetasa (GLUL). Un heterodímero de SLCTAS (LAT1) y SLC3A2 acopla la
salida de glutamina a la absorción de aminoácidos aromáticos y de
cadena ramificada, y SLC7A11 (xCT) acopla la salida del glutamato a la
absorción de cistina. En el citosol, la glutamina dona su amida
nitrogenada produciendo glutamato) a una serie de reacciones
biosintéticas catalizadas por glutamina amidotransferasas, que incluyen
reacciones en las rutas biosintéticas de la purina, la pirimidina y la
hexosamina y también la reacción de la asparagina sintetasa. En la
mitocondria, la glutamina se convierte en glutamato por las
glutaminasas (GLS o GLS2), y el nitrógeno de la amida se libera en forma
de amoníaco. El glutamato citosólico y mitocondrial puede
intercambiarse a través del portador de aspartato / glutamato
SLC2SA13. En el citosol, el glutamato junto con la glicina y la cisteína
forman el tripeptide antioxidante glutatión. Las transaminasas
reversibles, algunas de las cuales tienen isoformas citosólicas y
mitocondriales, intercambian glutamato y a-cetoglutarato (o-KG), junto
con el intercambio de α-cetoácidos y aminoácidos, que incluyen serina,
alanina y aspartato. En la mitocondria, el glutamato también puede ser
desaminado por la glutamato deshidrogenasa (GLUD1 / 2) para producir
a-KG y amoníaco. El glutamato también se puede incorporar
directamente en la ruta de síntesis de prolina. Las flechas azules gruesas
indican vías de pasos múltiples y el texto azul indica sus productos.
Abreviaturas AA aminoácidos, a-KG, a-cetoglutarato; BCAT, amino
transaminasa de cadena ramificada: GLUL, glutamina sintetasa; GLS /
GLS2, glutaminasa / glutaminasa 2; GOT aspartato aminotransferasa;
GPT, alanina transaminasa; MDH, malato deshidrogenasa: ME, enzima
málica; MPC, portador de piruvato mitocondrial; OAA oxalacetato, PDC,
complejo piruvato deshidrogenasa; 3-PHP 3-phosphohydroxypyruvate:
3-PS, 3-phosphoserine: Succ-CoA, succinyl-Coenzyme A. Los
aminoácidos se indican mediante sus abreviaturas estándar de tres
letras.

Despues de lo azul

biosíntesis de hexosamina (Fig. 2). Hay dos

genes de glutaminasa en humanos, GLS y
GLS2, cada uno de los cuales codifica al
menos dos isoformas como resultado de
mecanismos alternativos de splicing o
promotor sustitutivo 7. El GLS se expresa
ampliamente en tejidos de mamíferos,
abundantemente en riñón, cerebro, intestino
y linfocitos 15, y numerosos informes indican
que es pro-oncogénico y está regulado en
una variedad de cánceres 17). La expresión
de GLS2 es más alta en el hígado, el cerebro y
el páncreas, y el papel de GLS2 en el cáncer
parece ser dependiente del contexto [7]. Está
upregulated por el supresor tumoral p53
pero también por la protooncoproteína N-
Myc y, aunque GLS2 está epigenéticamente
silenciado en algunos cánceres de hígado
16], está significativamente sobreexpresado
y pro-oncogénico en tejidos de
neuroblastoma, tumores cervicales
resistentes a la radiación, cáncer colorrectal y
cáncer de lun [17 -19] fuertes para inhibir el
metabolismo de la glutamina para la terapia
del cáncer datan de los años 1950-70,
cuando se encontró que los antimetabolitos
de glutamina 6-diazo-5-oxo-L-norleucina
(DON), azaserina y acivicina tenían actividad
antitumoral [20]. Estas moléculas son no
selectivas inhibidores de enzimas que consumen
glutamina, su citotoxicidad surge principalmente a través de
la inhibición de las amidotransferasas implicadas en la
biosíntesis de nucleótidos. A pesar de los prometedores
datos preclínicos, los ensayos clínicos revelaron efectos
secundarios excesivos que impiden el uso de estos
inhibidores como agentes independientes. Las
investigaciones recientes se han centrado en la inhibición
selectiva de los nodos específicos del metabolismo de la
glutamina para minimizar la toxicidad sistémica [20,21].
Hasta la fecha, la estrategia más avanzada implica una
inhibición selectiva de GLS. El silenciamiento mediado por
ARNi de la expresión de GLS o la inhibición de GLS por los
compuestos de herramienta preclínica 968 o bis-2- (S-
fenilacetamido-1,2,4-tiadiazol-2-il) etil furo (BPTES) suprime
la proliferación de glutamina -dependientes pueden cer
células in vitro 22,23, y ralentiza el crecimiento de
xenoinjertos tumorales y tumores de ratón impulsados por
MYC in vivo 16,23,241. El derivado de BPTES CB-839 inhibe
la GLS mucho más potentemente que la molécula parental,
y muestra una eficacia in vivo contra el tumor de mama
triple negativo y los xenoinjertos de mieloma múltiple
[25,26]. El CB-839 se está evaluando actualmente en
ensayos clínicos y ha demostrado eficacia en algunos
contextos 27,28. Debido a que la utilización de glutamina
varía con el tipo de tumor, el microambiente y las
condiciones de cultivo celular 29,30], la consideración de
sistemas modelo y la selección de cánceres diana
apropiados serán cruciales para seguir desarrollando este
enfoque terapéutico (cuadro 1). Dada la aparente
importancia de GLS2 en algunos tipos de cáncer, será de
interés determinar si representa una segunda glutaminasa
farmacorresistente y, de hecho, si puede proporcionar
tumores con un mecanismo de resistencia al tratamiento
con CB-839.
• La asparagina sintetasa (ASNS) es una glutamina
amidotransferasa que cataliza la síntesis
dependiente de ATP de asparagina y glutamato a
partir del aspartato y la glutamina. La regulación de
la expresión de ASNS hace que las células de
leucemia sean resistentes al tratamiento con 1-
asparaginasa, y la ASNS es esencial para la
supervivencia celular en ausencia de asparagina
exógena 131. La sobreexpresión de ASNS ocurre en
una serie de tumores sólidos, incluidos los gliomas y
neuroblastomas, donde se asocia con mal pronóstico
[31]. La combinación del tratamiento con 1-
asparaginasa con la eliminación de la expresión de
ASNS simultáneamente priva a las células de
suministros externos e internos de asparagina e
inhibe potentemente el crecimiento tumoral in vivo
[32]. Los intentos en la década de 1970 para atacar
ASNS como una estrategia para superar la resistencia
a la asparaginasa en las células de la leucemia no
identificaron los inhibidores potentes. Sin embargo,
los datos preclínicos disponibles indican que los
esfuerzos adicionales para inhibir ASNS
farmacológicamente están justificados. Un producto
de las glutaminasas y las amidotransferasas es el
glutamato, que está presente a una alta
concentración intracelular (25 mM en células HeLa
(33)) y desempeña un papel central en el
metabolismo de los aminoácidos de celulosa. Los
principales destinos del glutamato incluyen:
incorporación a cadenas polipeptídicas durante
síntesis de proteínas; (i) ligación con cisteína para
formar yglutamilcisteína, que posteriormente se
condensa con glicina para producir el eflujo de
glutatión antioxidante a través de antiportadores
acoplados a la absorción de aminoácidos
extracelulares; (iv) conversión a a-cetoglutarato (a
KG), con nitrógeno ya sea liberado como amonio
(desaminación) o transferido a un a-cetoácido para
generar el aminoácido correspondiente
(transaminación), y (v) desvío a la ruta de síntesis de
prolina (figura 2). De los antiportadores de
glutamato, SLC7A11 (xCT) hasGly recibió especial
atención como un posible objetivo para la terapia del
cáncer [34,35]. El flujo de salida de glutamato a
través de SLC7A11 impulsa la adquisición de cistina
del ambiente extracelular. ystine es rápidamente
reducido en la célula a cisteína, que luego puede usarse en la
síntesis de proteínas y glutatión. Aunque las moléculas
pequeñas sulfasazina, erastina y sorafenib bloquean la función
SL.C7A11, cada una tiene otros objetivos conocidos y existe la
necesidad de desarrollar inhibidores más selectivos de este
transportador 134,35 La desaminación oxidativa de glutamato a
a-KG es catalizada por la glutamato deshidrogenasa 1 y 2
mitocondrial (GLUD1 / 2), y las selectinaminaciones son
catalizadas por varias enzimas, algunas de las cuales tienen
isoformas mitocondriales y citosólicas (Fig. 2). Las células
epiteliales mamarias proliferativas catabolizan el glutamato
principalmente a través de transaminasas, acoplando la
generación de a-KG con la síntesis de aminoide no esencial 36.
A medida que las células cambian a quiescencia, la expresión
de transaminasas disminuye y la expresión de GLUD se regula
positivamente. En consonancia con estos hallazgos, los tumores
de mama humanos altamente proliferativos muestran alta
transaminasa y baja expresión de GLUD, con expresión de los
genes de transaminasas PSAT1 (síntesis de serina citosólica),
GPT2 (síntesis de alanina mitocondrial) y GOTI (síntesis de
aspartato citosólico) que se correlacionan fuertemente con
proliferación tasa de iones 136]. El KRAS oncogénico suprime el
 GLUD y regula positivamente la expresión de GOTI en el
adenocarcinoma ductal pancreático como parte de un
programa metabólico que respalda la homeostasis redox 12, y
GPT2 se sobreexpresa en tumores de colon, conduciendo el uso
de glutamina para la anaplerosis del ciclo de TCA 137,38. Sin
embargo, GLUD tiene un papel importante en ciertos tumores,
y la disminución de la expresión de GLUDI en células de cáncer
de pulmón inhibe la tumorogénesis en un modelo de xenófobo
[39].
Los esfuerzos para detectar transaminasas y GLUD son actualmente
preclínicos, y existe una notable ausencia de inhibidores que sean
selectivos para las transaminasas individuales. El aminooxiacetato, un
inhibidor de la pan-transaminasa, contribuye al crecimiento tumoral en
modelos de xenoinjerto de cáncer de mama [40], y el inhibidor de
GLUD1 R162 suprime el crecimiento de xenoinjertos de cáncer de
pulmón [39]. La transaminasa 1 de aminoácidos de cadena ramificada
(BCATI) es importante para la proliferación de células de glioma de tipo
salvaje IDH1 y también para aloinjertos de carcinoma de pulmón no de
células pequeñas [41,42]. Aunque el medicamento gabapentin
aprobado por la FDA inhibe BCAT1, su K, está en el rango milimolar y
probablemente sean necesarios inhibidores más potentes para la
Serina / glicina y el
inhibición efectiva de BCAT1 in vivo.7

metabolismo alterado del metabolismo de

serina de un carbono en los tumores se
observó hace casi medio siglo, y el flujo
elevado a través de la novo vía de síntesis de
serina de (SSP) es un fenómeno común en las
células cancerosas (43]. El SSP ramas de la
glucólisis en el punto de 3-fosfoglicerato y
consiste en tres reacciones secuenciales,
catalizadas por la deshidrogenasa 3-
fosfoglicerato (PHGDH), fosfoserina
aminotransfer ase (PSAT) 1 y fosfatasa
fosfoserina (PSPH) (Fig. 3a). a pesar de que
hasta el 10% de carbono glicolítica puede ser
desviado en esta vía [44] serina exógena es
stll la tercera nutriente más rápidamente
consumida por las células cancerosas
cultivadas [4,5]. serina se puede convertir a
la glicina por serina
(hydroxymethyltransferases SHMT Solic cito-
o SHMT2 mitocondrial) , la donación de una
unidad de un carbono a la piscina folato que
en última instancia puede ser utilizado en la
biosíntesis de nucleótidos (Fig. 3b) que
suministran carbonos para la biosíntesis de
novo de purina, o donar una unidad de un
carbono a la piscina folato a través de la mit
sistema de escisión de glicina ochondrial (Fig.
3. Aunque el consumo de glicina fue Glicina a
su vez se requiere para la biosíntesis de
nucleótidos, directamente
Imagen
Metabolismo serina / glicina en células proliferativas. (a) La vía de
síntesis de serina (SSP). Muchos miembros de la superfamilia SLC de
transportadores pueden importar serina del entorno extracelular, y
también puede sintetizarse de novo en el citosol a través del SSP. La SSP
se ramifica a partir de la glucólisis en el punto del 3-fosfoglicerato (3-PG)
e implica tres reacciones secuenciales catalizadas por 3-fosfoglicerato
deshidrogenasa (PHGDH), fosfoserina am-transferasa PSATI y fosfosen-
fosfatasa PSPH Hasta 10% de carbono glucógeno se deriva en la SS en la
célula cancerosa El gen que codifica PHGDH amplificado de manera
recurrente en un subconjunto de humanos cánceres, y con frecuencia se
sobreexpresa incluso en ausencia de amplificación. El producto final de
la serina SSP activa alostéricamente la piruvato quinasa M2 (PKM2), lo
que permite que aumente el flujo glucolítico. Por lo tanto, cuando la
serina se agota, la actividad de PKM2 se suprime y los productos
intermedios glucolíticos que incluyen 3-PG se acumulan para suministrar
el SSP. Además, el 2-fosfoglicerato intermedio glucolítico (2-PG) activa
PHGDH. Las flechas azules gruesas indican vías de pasos múltiples y el
texto azul indica sus productos. La línea verde punteada y el símbolo
indican mecanismos de activación enzimática. (b) Contribución del
metabolismo monocarbono de serina y glicina. En células de mamífero
en proliferación, la isoforma mitocondrial serina hidroximetiltransferasa
2 (SHMT2), y no la SHMT1 citosólica, es el principal catalizador de
conversión de serina a glicina (la reacción SHMT1 está indicada por una
línea de puntos finos, y la reacción SHMT2 por una línea sólida gruesa,
para ilustrar el flujo primario de carbono). La reacción de SHMT
transfiere una unidad de carbono de serina a tetrahidrofolato (THF),
generando glicina y 5,10-metilentetrahidrofolato (5,10-CH2-THF). El
sistema de escisión de glicina mitocondrial (GCS) transfiere una unidad
de carbono de glicina a THF, que también genera 5,10-CH-THF. Este
intermediario es oxidado en la mitocondria por metilentetrahidrofolato
deshidrogenasa 2 (MTHFD2) o similar a MTHFD2 (MTHFD2L) para
producir 10-formil-THF. El THF puede regenerarse a partir de 10-formil-
THF, con la liberación de formiato, en una reacción catalizada por
MTHFDIL. Después del transporte al citosol, el formiato es consumido
por el trifuncional MTHFD1 junto con el THF citosólico, generando4
Despues de la imagen
informaron que se correlacionan con la tasa de proliferación [4], otros
sugirieron que las células que proliferan rápidamente cambian al
consumo de glicina solo después de agotar la serina 145 exógena.
Ilustrando la importancia del metabolismo serina / glicina para el
crecimiento oncogénico, células de carcinoma colorrectal nulas TP53
cultivadas en El medio libre de serina exhibe estrés oxidativo y una
proposición y viabilidad severamente dañada [45. Debido a que la serina
y la glicina son aminoácidos no esenciales, la depleción crónica
resultante de las dietas libres de serina / glicina puede tolerarse in vivo.
Ratones alimentados dictados que carecen de serina y glicina muestran
tamaños de tumor de xenoinjerto colorrectal reducidos y sobreviven
más tiempo que los ratones alimentados con dietas de control, lo que
indica que el uso terapéutico de serin glicina deplction es digno de
investigación 45] Mitocondrial SHMT2 es el catalizador principal para la
producción de glicina de serina, y las unidades monocarbono se generan
exclusivamente en las mitocondrias en la mayoría de las células
cultivadas (Fig. 3b) 6,45 Además, SHMT2 es uno de los genes
metabólicos sobreexpresados con mayor frecuencia en tumores
humanos 146, y su debilitamiento afecta gravemente la proliferación de
cáncer cultivado células 14]. Paradojalmente, SHMT2 es compatible con
tumorigénesis bajo hipoxia, en parte manteniendo niveles bajos de
serina intracelular. La serina es un activador alostico de la isoforma de
piruvatoquinasa M2 (PKM2) (figura 3a) y, por lo tanto, cuando se agota
la serina intracelular, se suprime la actividad de PKM2 y se acumulan los
intermedios glicolíticos 6]. Al mantener bajas concentraciones de serina,
SHMT2 asegura baja actividad de PKM2 y por lo tanto limita el
suministro de piruvato para el ciclo de TCA (y consecuente generación
de especies reactivas de oxígeno), proporcionando una ventaja de
supervivencia provista para las células de glioma hipóxico 147]. La
ventaja vital dotada por SHMT2 bajo hipoxia depende de la depuración
del producto de glicina por el sistema de escisión de glicina mitocondrial
(GCS), y en particular el componente glicina descarboxilasa GLDC) [47]
cánceres humanos, y se informa que es uno de la mayoría de los genes
regulados positivamente en células iniciadoras de tumores aisladas de
tumores de cáncer de pulmón de células no pequeñas 48]. SHMT2 y
GLDC se han propuesto como objetivos terapéuticos atractivos, y las
estrategias para inhibir estas enzimas se persiguen [6]. En particular,

En 2011 se
GLDC está sobreexpresado en algunos.

descubrió que el gen que codifica PHGDH

que cataliza la primera ramificación de
reacción de la glicólisis SSP (Fig. 3a), se
amplifica de manera recurrente en un
subgrupo de cánceres humanos que
incluyen tumores de mama, donde la
sobreexpresión de PHGDH se asocia con
triple negativo / subtipos basales y mal
pronóstico [44,49. Una pantalla de
pérdida de funciones basada en RNAi en
un modelo de xenoinjerto de cáncer de
mama humano identificó PHGDH como
uno de los 16 genes metabólicos
necesarios para la tumorigénesis in vivo
149). La eliminación de PHGDH en líneas
celulares cancerosas con alta expresión
daña gravemente la biosíntesis de serina
y la proliferación celular .
Recíprocamente, la expresión ectópica de
PHGDH en células MCF 10A no
tumorigénicas induce algunas
características de transformación celular
44,49. Es importante destacar que la
pérdida genética de PHGDH en las células
cancerosas no puede ser rescatado por serina
suplementaria o glicina (incluso si se restauran los niveles
intracelulares de serina), lo que indica que el SSP tiene un
papel crucial más allá de la generación de serina [49. El
mecanismo subyacente para este hallazgo aún no se ha
resuelto [43]. Recientes, se identificaron dos inhibidores
distintos de molécula pequeña de PHGDH usando pantallas
de alto rendimiento, que inhiben la biosíntesis de serina de
novo y muestran toxicidad selectiva para células cancerosas
con SSP elevado. flujo [50,51]. El inhibidor NCT-503, que
tiene un ICso de 2.5 HM, reduce el crecimiento y el peso de
los xenoinjertos de tumores de mama dependientes de
PHGDH sin afectar los xenoinjertos independientes de
PHGDH [50]. La inhibición de PHGDH suprime la producción
de serina / glicina marcada a partir de [U-Clglucose y la
incorporación de unidades de un carbono marcadas
derivadas de U.13Clglucose en nucleótidos (Fig. 3b). La
concentración de serina intratumoral total no se ve afectada
por la inhibición de PHGDH debido al influjo de serina
extracelular, consistente con los estudios de cultivo celular
descritos anteriormente. De hecho, cuando las células se
cultivan en medio que contiene UBCserina, la inhibición de
PHGDH da como resultado un conjunto intracelular
incrementado de serina exógena (marcada). Sin embargo, la
inhibición de PHGDH disminuye la incorporación de
unidades monocarbono desde serina extracelular a
nucleótidos. En cambio, el SHMT1 citosólico se activa y
consume 5,10-C2THF y glycine para generar serina a
expensas de la síntesis de nucleótidos (Fi 3b). En presencia
del inhibidor de PHGDH NCT-503, la deleción genética de
SHMT1 permite la incorporación de unidades de carbono
exógeno serina-serbio (a través de SHMT2 y el GCS) en la
biosíntesis de nucleótidos [50]. Por lo tanto, el desarrollo de
inhibidores de PHGDH ha proporcionado a los
investigadores nuevas herramientas para investigar la
función de PHGDH en células cancerosas, pero también
representa un paso importante en el desarrollo de fármacos
que se dirigen al SSP.9 Otros objetivos potenciales
Uno de los genes metabólicos más
sobreexpresados en tumores humanos PYCR1,
que codifica pirrolina-5-carboxilato reductasa 1,
una enzima mitocondrial en la vía que sintetiza la
prolina a partir del glutamato (Fig. 2) [46. PYCR1
fue identificado como uno de los 16 genes
metabólicos en un modelo de xenoinjerto de
cáncer de mama [49], y su expresión está
regulada positivamente por el factor de
transcripción oncogénico c-Myc, que
simultáneamente regula negativamente las
enzimas que catalizan el catabolismo prolina
[52]. Un estudio reciente que utilizó perfiles de
ribosomas encontró que la prolina es el
aminoácido restrictivo en tumores de riñón y
xenoinjertos de cáncer de mama (los ribosomas
estaban "detenidos" en los codones) | 53]. Por lo
tanto, la propia prolina, en lugar de un
intermediario o subproducto de la ruta de
biosíntesis, puede ser limitante para el
crecimiento tumoral. Aunque CRISPR / Cas9-
knockout mediado de cultivo de la capa, elimina
por completo la formación de tumores in vivo
153 Estos datos indican que la ruta de biosíntesis
de prolina, y en particular PYCR1, podría ser el
objetivo de la terapia del cáncer PYCR1 no tiene
efecto sobre la proliferación celular de cáncer de
mama en mono –
Cuadro de pura letra

el 10-formil-THF citosólico, que se requiere

para la síntesis de purina, y el 5,10-CH2-THF
citosólico. Este último intermediario dona la
unidad de un solo carbono para convertir
monofosfato de desoxiuridina (dUMP) en
desoxitimidina monofosfato (dTMP), área
catalizada por timidilato sintasa (TYMS). El
otro producto de la reacción de TYMS,
dihidrofolato, se convierte de nuevo a
tetrahidrofolato mediante la enzima
dihidrofolato reductasa (DHFR). TYMS es un
objetivo de los medicamentos de
quimioterapia usados comúnmente
pemetrexed y 5-fluorouracilo (5-FU), y DHFR
es un objetivo de pemetrexed y metotrexato.
Citosólico 5,10-CH2-THF también dona una
unidad de carbono para la metilación de
homocisteína en el ciclo de metionina. Las
flechas azules gruesas indican vías de pasos
múltiples y el texto azul indica sus productos.
Las reacciones que implican la transferencia
de unidades de un carbono se destacan con
el texto "1C" en azul. Abreviaturas: a-KG, a-
cetoglutarato: ENO, enolasa; LDH, lactato
deshidrogenasa: PGAM, fosfoglicerato
mutasa; Pi, fosfato inorgánico: 3-PG, 3-
fosfoglicerato: SSP, vía de síntesis de serina.
Los aminoácidos se indican mediante sus
abreviaturas estándar de tres letras.
No l3tras

Finalmente, se está investigando un aspecto distinto del

metabolismo de aminoácidos como objetivo para la
inmunoterapia del cáncer. Las mutaciones subyacentes al
cáncer conducen a la expresión de antígenos anormales por
las células cancerosas, pero los tumores adquieren la
capacidad de evadir la vigilancia inmunológica del huésped
(tolerancia inducida por el tumor) 54]. Uno de los
mecanismos para la tolerancia inducida por tumor implica
indoleamina 2,3 dioxigenasa (IDO), que es sobreexpresada
por la mayoría de los tumores huma y cataliza la reacción
limitante de la velocidad para el catabolismo de triptófano a
través de la vía de kinurenina [SS. Ambas isoformas de IDO
(IDO1 e IDO2) están sobreexpresadas en cáncer, pero la
investigación hasta la fecha se ha centrado en IDO1. La
actividad de IDO limita la respuesta inmune al reducir el
triptófano, que es esencial para la proliferación de células T,
del microambiente tumoral y también causa acumulación
del metabolito de tryp tophan cinurenina y sus derivados,
que inhiben aún más la proliferación de células inmunitarias
[SS. Estudios preclínicos han demostrado que la
identificación de IDO1 inhibe el crecimiento tumoral y
provoca una respuesta inmune antitumoral en modelos de
roedores, y los inhibidores de molécula pequeña de IDO1
junto con una vacuna dirigida a IDO1 están siendo
evaluados en ensayos clínicos [28,55]. El triptófano 2,3-
dioxigenasa (TDO2) también cataliza la degradación del
triptófano a través de la vía cintinurina. Aunque TDO2
normalmente está presente solo en el tejido iver y tiene una
K mayor que IDO1 para el triptófano, también es una enzima
inmunosupresora y con frecuencia se regula positivamente
en tumores humanos. La inhibición de TDO2 se ha mostrado
prometedora en modelos preclínicos [56] pero
actualmente3 no se está evaluando en ensayos clínicos.
Observaciones finales La última década ha visto avances
rápidos en nuestra comprensión de la reprogramación
metabólica que ocurre durante la tumorigénesis. Las
estrategias para dirigirse a nodos específicos del
metabolismo de aminoácidos de células cancerígenas
han progresado de estudios preclínicos a ensayos
clínicos, y están demostrando eficacia en algunos
contextos. Hasta la fecha, la recarchilla en este tipo ha
dependido en gran medida de las células cancerosas
cultivadas en medios de cultivo estándar. Sin
embargo, el trabajo reciente revela ese notable 2,3.
Las adaptaciones de tipo etabólico pueden tener lugar
cuando las células se transfieren entre
microambientes (Cuadro 1). Además, los
tophanphenotypes metabólicos difieren mucho entre
los tipos de tumores, e incluso entre distintas regiones
de un solo tumor. Esto resalta la importancia de
reconocer las limitaciones de cualquier sistema
modelo particular para estudiar el metabolismo del
cáncer. Los fármacos que se dirigen a la metabomina
de aminoácidos probablemente serán más eficaces
como un componente de la terapia personal contra el
cáncer, y se evaluarán los biomarcadores genéticos y
metabolómicos antes de seleccionar una estrategia de
tratamiento. Una comprensión más amplia del
metabolismo tumoral i vivo, los avances tecnológicos
para obtener imágenes y perfilar el metabolismo en
pacientes, y los continuos esfuerzos para descubrir
inhibidores potentes y selectivos juntos tienen el
potencial de producir nuevas terapias efectivas para el
cáncer. Conflictos de interés Los autores no tienen
conflictos de interés declarar. Agradecimientos a Cindy
Westmiller por su ayuda con la preparación del
manuscrito Apéndice A. Datos complementarios El
material complementario relacionado con este
artículo se puede encontrar en la versión en línea en
http://dx.doi.org/10.1016/j.drudis.2016.12.003.