¿SE PUEDE AISLAR CASEINA DE LA LECHE POR PRECIPITACIÓN?

EQUIPO 1: Domínguez Montalvo Eduardo; Martínez Nolasco Karla Gisela; Moreno Carrasco Rosendo; De La Luz Rosas Jesus Enrique.

INTRODUCCIÓN PROCEDIMIENTO
Las proteínas son biomoléculas formadas por cadenas de aminoácidos unidos por enlaces peptídicos y con un peso molecular mayor o igual a 5000g/mol. El término proteína deriva
del griego proteios, que significa primero. Todas las proteínas están compuestas por: carbono, hidrógeno, oxigeno y nitrógeno; y la mayoría cont iene además azufre y fósforo. OBJETIVO MATERIAL
Las proteínas conforman aproximadamente la mitad del peso de los tejidos del organismo, y están presentes en todas las células del cuerpo, además de participar en todos los procesos
biológicos que se producen, estas pueden clasificarse: Aislar la proteína caseína de leche,; Com- 1 matraz Erlenmeyer
NOMBRE GRUPO PROSTÉTICO
probar el efecto de las sales neutras en las
Metaloproteínas Iones metálicos 1 agitador
POR SU COMPOSICIÓN proteínas (Precipitación por salado); Y
Lipoproteínas Lípidos comprobar el efecto de la temperatura Papel filtro
Simples. Son aquellas que al hidrolizarse solo liberan aminoácidos.
Cromoproteínas Algún pigmento
sobre las proteínas.
3 tubos de ensaye
Conjugadas. Son aquellas que al hidrolizarse liberan aminoácidos y otro compuesto que recibe los nombres de grupo prostético (átomo o Nucleoproteínas Ácido nucléico REACTIVOS:
molécula. A su vez, se subclasifican de acuerdo a su grupo prostético: 1 baño maría a ebullición
Glicoproteínas Carbohidratos
Ácido acético 2 N
POR SU FORMA: 1 pipeta
Éter etílico
Fibrosas.- Son aquellas que parecen enrollarse a lo largo de un eje común. Generalmente estas proteínas efectúan funciones de sostén, Por ejemplo: Colágeno presente en tejido conjun- 1 embudo
tivo. Alcohol etílico
2 vasos de precipitado
Globulares.- Son aquellas que presentan plegamientos que les dan apariencia esférica. Generalmente estas proteínas están asociadas a funciones dinámicas, por ejemplo: Hemoglobina, Solución saturada de sulfato de amonio
Enzimas, Inmunoglobulinas. 1 baño maría a 38°C
POR SU SOLUBILIDAD: Agua destilada
POR SU FUNCIÓN:
NOMBRE SOLUBLES EN: NaOH al 50%
Estructurales.- Por ejemplo las que forman parte de la membrana. RESULTADOS
Albúminas Agua y soluciones
Reserva.- Por ejemplo Gliadina en el trigo, Albúmina en el huevo. (El hombre no tiene proteínas de reserva). salinas Ácido acético
Proteína activa
Globulinas Fórmula condensada C2H4O2 Propiedades fisicoquímicas
Hormonas.- Por ejemplo la Insulina. Soluciones salinas Peso molecular: 60.05 g/mol Punto de ebullición 117 - 118 °C Se logra observar un líquido incoloro.
Histonas isotónicas Punto de inflamabilidad 39 °C
Temperatura de ignición 485 °C
Catalizadoras.- Son aquellas que aceleran reacciones y reciben el nombre genérico de Enzimas. Punto de fusión 17 °C Proteína desnaturalizada
Prolaminas Soluciones salinas Densidad 1.049 g/cm3
pH 2.4
Toxinas.- Por ejemplo la Ricina o algunos venenos de serpientes. Medidas preventivas Primeros auxilios Es un líquido incoloro, pero se puede decir que es un poquito más denso
Glutelinas Etanol 70 u 80 %
No inhalar los vapores. Evitar el contacto con la piel, los ojos y la Inhalación: Trasladar a la persona al aire libre. En
Inmunoglobulinas.- Son las encargadas de proteger al organismo de agentes extraños. En conjunto confieren la llamada inmunidad ropa. Procurar una ventilación apropiada. caso de que persista el malestar, pedir Salado
Escleroproteínas En ácidos y bases Prevenir la contaminación del suelo, aguas y desagües. atención médica.
humoral; ejemplos son: IgG, IgM IgE. Recoger con materiales absorbentes o en su defecto arena o tierra Contacto con la piel: Lavar abundantemente con agua.
diluidos secas y depositar en contenedores para residuos para su posterior Quitarse las ropas contaminadas. Extraer el Se obtuvo un líquido turbio y aparentemente de tono blanco.
eliminación de acuerdo con las normativas vigentes. producto con un algodón impregnado en
Transportadoras.- Son aquellas que trasladan moléculas, iones o electrones.
Insolubles en agua Limpiar los restos con agua abundante. Neutralizar con sodio
hidróxido diluido
polietilenglicol.
Ojos: Lavar con agua abundante, manteniendo los Caseína
párpados abiertos. Pedir inmediatamente
NIVELES ESTRUCTURALES atención médica.
Ingestión: Beber agua abundante. Evitar el vómito Se obtuvo un precipitado previamente purificada, con esto se puede decir que es la caseína.
Las proteínas presentan diferentes estados en su plegamiento hasta alcanzar el de mayor complejidad determinado genéticamente y en éste son capaces de realizar su función biológica; (existe riesgo de perforación). Pedir
inmediatamente atención médica. No
DISCUSIÓN
en el esquema se presentan loa siguientes niveles estructurales neutralizar.
Alcohol etílico
Caseína
NIVEL REPRESENTA ENLACES CARACTERÌSTICOS Fórmula molecular C2H6O Propiedades fisicoquímicas
Masa molar 46.07 g /mol Punto de ebullición: 78.3°C
Primario Tipo, cantidad y secuencia de aminoácidos en la Enlace peptídico Punto de fusión: -114 °C Al poner la leche a 38 grados Celsius se logró aumentar la solubilidad de la proteína, al agregar el ácido acético lo que se logra hacer una hidrólisis de la proteína y al bajar el pH hasta 4.6, el cambio de
proteína Densidad relativa: 0.789 g/cm3
Punto de inflamabilidad No determinado pH de la solución en que se encuentra la proteína promueve cambio en las cargas de los residuos y por lo tanto un cambio de la carga total de la proteína. Cuando el número de cargas positivas se iguala
Temperatura de ignición: No reportado con el número de cargas negativas se dice que la proteína se encuentra en su pH isoeléctrico y presenta el mínimo de solubilidad ya que no hay repulsión electrostática entre las moléculas.
pH No reportado
Secundario Orientación geométrica (parcial) de la cadena Puentes de hidrógeno establecidos entre los integrantes del enlace
peptídico Medidas preventivas Primeros auxilios Al filtrar lo que se logra es separar la caseína de las proteínas séricas, obteniendo un precipitado (caseína) y un sobrenadante (proteínas séricas).
Trabajar en un lugar con buena ventilación, de Inhalación: Trasladar al aire fresco. Si no respira
Utilizar campanas de laboratorio de extracción forzada. administrar respiración artificial. Si respira Al trabajar con el precipitado se le agregó etanol con el fin de purificar la caseína, se usó el etanol como agente precipitante, esto se debe ya que al adicionar un solvente de menor capacidad de separación
Terciario Orientación espacial de la cadena. Para algunas Enlaces no covalentes como: iónicos y puentes de hidrógeno entre Sistema eléctrico y de alumbrado a prueba de explosión. con dificultad suministrar oxígeno. de iones hace que las proteínas precipiten como el etanol con respecto al agua.
proteínas éste es su nivel más complejo y por lo tanto radicales, efecto hidrofóbico. Covalentes lábiles como el puente Mantener los envases con sus respectivas etiquetas. Ingestión: Lavar la boca con agua. Inducir al vómito.
Respetar prohibiciones de no fumar, comer y beber bebidas en el Piel: Lavar la piel con abundante agua. Retirar la ropa
presentan su actividad biológica disulfuro lugar de contaminada y lávela con abundante agua y Salado
trabajo. jabón.
No pipetear con la boca. Usar propipeta. Ojos: Lavar con abundante agua, mínimo durante 15
Utilizar elementos de protección personal asignados (Guantes minutos. Levantar y separar los párpados Este resultado se debe a que se le agregó 1 ml de solución saturada de sulfato de amonio. Los iones son capaces de eliminar la capa de hidratación de las proteínas, lo que favorece su interacción y por
neopreno, gafas de seguridad y zapatos cerrados con suela para asegurar la remoción del químico.
antiderrapante) ello precipita, a este proceso se le denomina precipitación por salado o simplemente salado.
Cuaternario Resulta de la asociación de varias cadenas que se Enlaces no covalentes como: iónicos y puentes de hidrógeno entre Éter etílico
encuentran en su nivel terciario. Para algunas proteínas radicales.. Covalentes lábiles como el puente disulfuro Proteína desnaturalizada
éste es su nivel más complejo y por lo tanto presentan Fórmula molecular C4H10O Propiedades fisicoquímicas
Masa molar 74.12 g /mol Punto de ebullición: 34.6°C
su actividad biológica Punto de fusión: -116.2 °C El resultado se debe a que la proteína está desnaturalizada, esto sucedió cuando se sometió a baño María en ebullición durante 10 min. Se sabe que la mayoría de las proteínas a temperaturas mayores de
Densidad relativa: 0.7364 g/ml 45 a 60 grados Celsius sufren desnaturalización debido a la ruptura de puentes de hidrógeno y fuerzas de Van Der Waals.
Punto de inflamabilidad -45 °C
Temperatura de ignición: No reportado
FUNDAMENTO pH No reportado Proteína activa
Medidas preventivas Primeros auxilios
SOLUBILIDAD DE LAS PROTEÍNAS área bien ventilada, utilizando bata, lentes de inhalado: Si aspiró, mueva a la persona al aire fresco. Se sometió a temperaturas óptimas para que la proteína se considerarla activa, con esto la proteína interacciona mejor con el agua manteniéndose soluble, el rango de temperatura que permite la solubili-
seguridad y guantes, si es necesario, para evitar un contacto Si ha parado de respirar, hacer la
prolongado con la piel. respiración artificial.
zación de proteínas se encuentra entre 0 y 40 grados Celsius.
Las proteínas en disolución se ven afectadas en su solubilidad por: pH, fuerza iónica, propiedades dieléctricas del disolvente y temperatura. No deben utilizarse lentes de contacto. piel: Eliminar lavando con jabón y mucha agua.
Al trasvasar pequeñas cantidades con pipeta, utilizar propipeta ojos: Lávese a fondo con agua abundante durante 15 CONCLUSIÓN
pH minutos por lo menos.
Ingestión: No provocar el vómito. Nunca debe
administrarse nada por la boca a una se pudo aislar la caseína de la leche con el método aplicado, además de esto se logró determinar el efecto de la temperatura y la fuerza iónica de las proteínas en suero lácteo.
El cambio de pH de la solución en que se encuentra la proteína promueve cambio en las cargas de los residuos y por lo tanto un cambio de carga total de la proteína. Cuando el número persona inconsciente. Enjuague la boca
con agua
de cargas positivas se iguala con el número de cargas negativas se dice que la proteína se encuentra en su pH isoeléctrico (punto isoeléctrico) y presenta el mínimo de solubilidad ya que
Sulfato de amonio
no hay repulsión electrostática entre las moléculas.

El valor del pH isoeléctrico de una proteína determinada, puede variar dependiendo de la cantidad de iones presentes en la solución (aniones o cationes). Cuando se eliminan todos los
Fórmula molecular (NH4)2SO4
Masa molar 132.14 g /mol
Propiedades fisicoquímicas
Punto de ebullición: No aplicable CUESTIONARIO
Punto de fusión: 253 °C
iones diferentes a H+ o –OH se determina el llamado pH isoiónico y este no varía en la proteína especifica. Densidad relativa: 1.2 g/cm3
Punto de inflamabilidad No determinado
Temperatura de ignición: No determinado
Fuerza Iónica pH 5.5

La solubilidad de las proteínas en solución está influenciada por la fuerza iónica que está presente, así, a mayor fuerza iónica menor solubilidad de las proteínas y a menor fuerza iónica
Medidas preventivas Primeros auxilios
¿Cómo es la solubilidad de las proteínas en su PI? Es mínimo, ya que no presenta repulsión electroestática
mayor solubilidad de las proteínas. use bata, guantes y anteojos de seguridad con defensas laterales, Inhalación: Sacar a la víctima al aire fresco. Si no
usar respirador para polvo.
Utilizar zapatos cerrados y antiderrapantes.
respira, dar respiración artificial.
Ingestión: Provocar el vómito inmediatamente.
entre sus moléculas.
PROPIEDADES DIELÉCTRICAS DEL DISOLVENTE Mantener una ventilación adecuada Suministre grandes cantidades de agua.
piel: lave con abundante agua y jabón durante al menos
15 minutos mientras se quita la ropa y
La constante dieléctrica se define como la capacidad de mantener separados a iones de diferente carga, en este sentido el agua presenta la mayor constante dieléctrica lo que permite zapatos contaminados.
ojos: Enjuagar los ojos con abundante agua durante al
mantener en solución a las proteínas. La adición de solventes de menor capacidad de separación de iones hace que las proteínas precipiten. menos 15 minutos, elevando los párpados
superior e inferior.
Temperatura
Hidróxido de sodio
Es necesario considerar que como cualquier molécula, las proteínas se encuentran en constante movimiento, un aumento en la temperatura hace que este movimiento aumente y por lo Fórmula molecular NaOH Propiedades fisicoquímicas ¿Cuál es la explicación física de la precipitación por salado? A mayor fuerza iónica hay menor solubilidad y
tanto la proteína interacciona mejor con el agua manteniéndose soluble. Masa molar: 40.01 g /mol Punto de ebullición: 1388°C
Punto de fusión: 318.4°C
Densidad: 2.13 g/ml
a menor fuerza iónica mayor solubilidad de las proteínas. Esto se debe a que los iones son capaces de
El rango de temperatura que permite la solubilización de proteínas se encuentra entre 0°C y 40°C. Punto de inflamabilidad No determinado
Temperatura de ignición: 651 °C
pH 11.6
eliminar la capa de hidratación de las proteínas, se favorece su interacción y como consecuencia preci-
Precipitación por salado
Medidas preventivas Primeros auxilios pitan.
La explicación física de este comportamiento es compleja pero al parecer, los iones son capaces de eliminar la capa de hidratación de las proteínas, lo que favorece su interacción y por Uso de gafas, bata y guantes de neopreno o nitrilo. No debe Inhalación: Proporcionar ventilación. Suministrar
ello precipitan, a este proceso se le conoce como Precipitación por Salado o simplemente Salado. usarse lentes de contacto. oxígeno, si es necesario.
Debe manejarse en la campana. Ojos: Lavar con abundante agua corriente,
Mantener una ventilación adecuada. asegurándose de levantar los párpados,
Se pueden separar proteínas usando precipitación por saldo ya que cada proteína tiene un grado diferente de hidratación. Además las proteínas presentan su conformación nativa y es No poner en contacto con el agua. hasta eliminación total del producto.
Piel: Quitar la ropa contaminada inmediatamente.
posible solubilizarlas en una solución con fuerza iónica adecuada. Lavar el área afectada con abundante agua
corriente.
AGENTES QUE AFECTAN A LAS PROTEÍNAS Ingestión: No provocar vómito. Dar a beber una
cucharada de agua inmediatamente y
después, cada 10 minutos.
Temperatura
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ¿Cómo afecta la temperatura a las proteínas? La mayoría sufren desnaturalización cuando se alcanzan tem-
La mayoría de las proteínas a temperaturas mayores de 45°C- 60°C sufren desnaturalización debido a la ruptura de puentes hidrogeno y fuerzas de Van Der Waals. Algunas proteínas
recobran su conformación al bajar lentamente la temperatura, a esto se le llama renaturalización. Bohinski. 1991 Bioquímica. 5ed., Pearson. México. peraturas de 45°C-60°C, debido a la ruptura de puentes de hidrógeno y fuerzas de Van Der Waals.
pH Mathews Van Holde . 2004 Bioquímica. 3 Ed Pearson. España Cuando vuelve a bajar la temperatura y recobra su conformación se dice que se renaturaliza.
Fesenden and fesenden. 2002. Química orgánica. Interamericana. México
La mayoría de las proteínas sufren desnaturalización a valores de pH menores de 6 y mayores a 8 debido al cambio de carga en los radicales de los residuos aminoacidicos, lo que
ocasiona la ruptura de puentes de hidrogeno debida a radicales y enlaces iónicos. CTR cientific. Hoja de datos de seguridad acetato de plomo. http://www.uacj.mx/IIT/CICTA/Documents/Acidos/Acido%20Ac%C3%
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