INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS

DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA

LABORATORIO DE BIOQUIMICA

PRÁCTICA. Curva tipo de azúcares reductores.

OBJETIVO
Analizar algunos factores que modifican la velocidad de la reacción catalizada por la invertasa y
caracterizar de esta manera a dicha enzima.
RESULTADOS

Tubo no. Testigo 1 2 3 4 5

Absorbencia 0 0.055 0.101 0.324 0.772 0.849
Azúcar reductor (µmol) 0 1 2 4 8 10

CALCULOS

𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝑥 𝑚𝑙
µmoles =
1000𝑚𝑙
1: (0.1mL) x (0.01M) / (1000mL) = 1µmol
2: (0.2mL) x (0.01M) / (1000Ml) = 2µmol
3: (0.4mL) x (0.01M) / (1000mL) = 4µmol
4: (0.8mL) x (0.01M) / (1000mL) = 8µmol
5: (1.0mL) x (0.01M) / (1000mL) = 10µmol

REACCION QUIMICA
DISCUSION

Durante esta práctica se obtuvo una gráfica de curva tipo para azucares reductores la cual fue casi
exacta ya que los valores de absorbancia fueron aumentando conforme aumentaron las
concentraciones en µmoles de los carbohidratos.
Aunado a este punto también se apreció una reacción en medio alcalino entre el DNS y los azucares
reductores (glucosa y fructosa) en la cual, el compuesto obtenido (3,5-diaminosalicilato) posee una
absorbancia 540nm, siendo esto el patrón para el cálculo de las concentraciones de azucares
reductores obtenidos en la hidrólisis de la sacarosa por acción de la enzima invertasa.
Al calcular la actividad de la enzima en unidades de invertasa, se puede observar que se requiere
menos cantidad de la enzima para hidrolizar un µmol del azúcar reductor en un minuto en el tubo uno
(0.1 U.I) y esa cantidad va aumentando al aumentar los µmoles de sacarosa hasta el tubo 5 (1 U.I).

CONCLUSION
El método de DNS nos permite obtener valores de las concentraciones totales de azucares reductores
en una muestra problema determinada, mediante la comparación de una reacción testigo y su dicho
nivel de absorbancia presentado. Al finalizar la toma de datos, al realizar la representación de los
niveles de absorbancia-concentración, arrojados por el espectrofotómetro, mediante una gráfica,
podemos notar la formación de una curva de tipo lineal.
BIBLIOGRAFÍA
 Nelson D.L. & M. Cox. 2000. “Principios de Bioquímica” 3ra Ed. Omega. 113-242pp.
Recuperado el 16 de septiembre del 2017.
 Bibián. L. & R.M. Rojas. 2014. “Manual de métodos generales para la determinación de
carbohidratos” UPTC. 7-10pp. Recuperado el 16 de septiembre del 2017.