Nombre: Gabriel Zambrano Fecha: 02/02/2018 NRC: 3084

¿Cómo puede usted determinar si las plantas son haploides o diploides?

Para determinar si una planta es haploide o diploide, en primer lugar, se debe analizar la fase de
fecundación y la meiosis, ambas tienen un mismo ciclo vital, la fase haploide (n), el gametofito,
después de surgir una fusión se da la fase diploide (2n), el esporofito (Raven, 1992).
Las plantas se alternan entre aquellas que tienen células diploides de las de células haploides. Esto
se llama alternancia de generaciones, porque el tipo de planta se alterna de generación en
generación. En esta “fase”, la planta alterna entre un esporofito que tiene células diploides y un
gametófito que tiene células haploides (Caruana, 2010).
La alternancia de generaciones se puede resumir en los siguientes cuatro pasos:
1. El gametofito haploide produce los gametos, o esperma y huevo, por mitosis.
2. Luego, el esperma fertiliza el óvulo, produciendo un cigoto diploide que se convierte en el
esporofito, que por supuesto es diploide.
3. El esporofito diploide produce esporas haploides por meiosis.
4. Las esporas haploides pasan a través de la mitosis, desarrollándose en el gametofito
haploide.
Según Joo (2017) la transición haploide a diploide en Chlamydomonas está controlada
magistralmente por el heterodímero GSM1 / GSP1, traduciendo la fertilización y la coalescencia de
gametos en un programa de diferenciación de buena fe. La integración de genes desencadenada
por la fertilización necesaria para crear orgánulos relacionados, pero estructural y funcionalmente
distintos presenta un escenario probable para la evolución de redes complejas de regulación del
desarrollo genético.
Consultar las aplicaciones del cultivo in vitro de anteras (Mínimo 5).

 Generación rápida de genotipos homocigotos después de duplicar los cromosomas

 Reduzca el tiempo para el desarrollo de variedad, por ejemplo, de 10 a 6 años o menos
 La línea homocigótica recombinante puede desarrollarse en una generación en lugar de
después de numerosas generaciones de retro cruces
 La selección de rasgos recesivos en líneas recombinantes es más eficiente ya que estos no
están enmascarados por los efectos de los alelos dominantes
 El cultivo de anteras se usa para el estudio de mutaciones. Ejemplo: - Los mutantes de
nitrato reductasa se informan en Nicotiana tabacum.
 Mejoramiento de cultivos y plantas
  Obtención de alcaloides. Ejemplo: Recombinación homocigota Hyoscyamus niger que tiene
mayor contenido de alcaloides se obtiene por cultivo de anteras
 Formación de dobles haploides que son homocigotos y fértiles

Mencione 5 estudios relacionados con el cultivo de anteras in vitro y hacer énfasis en los
resultados obtenidos. (Usar bibliografía actualizada 2010 mínimo.)

1. “In Vitro Flax (Linum usitatissimum L.) Anthers Culture”

Según Lassaga (2010) e investigadores, el cultivo in vitro de anteras de Linum usitatissimum dio
como resultado un porcentaje de callogénesis total de 67,05 % entre todos los genotipos, se
observaron los callos verdes, así como los oxidados. Se evaluaron 3 parámetros: efecto del cobre,
pretratamiento con frío y con una dosis de furfuryl-6-amino purina (FAP), en donde se generó una
gran reducción en la producción de callos verdes y la respuesta en regeneración no fue mejorada.
2. “Study of in vitro anther culture in selected genotypes of genus Capsicum”
En esta investigación se estudió el efecto de diferentes tiempos de incubación en medio de
inducción CP (a los 12, 14 y 16 días) en combinación con 2 concentraciones de kinetina en medio de
regeneración R1 (0.1 y 0.3 mg / L) sobre la efectividad de la androgénesis in vitro inducido en cultivos
de anteras de formas seleccionadas de pimiento (Capsicum spp.). La mayor respuesta androgénica
se observó para 6 genotipos después del período de incubación de 16 días en medio CP. No se
encontró una única variante de cultivo óptima para todos los genotipos estudiados en este artículo
(Olszewska, 2014).
3. “Solid-stemmed spring wheat cultivars give better androgenic response than hollow-
stemmed cultivars in anther culture”
Weig (2016) muestra resultados destacados en su investigación como que, de todos los cultivos
probados, ocho fueron clasificados como de tallo sólido, mientras que los polacos que se utilizaron
en el experimento se clasificaron como tallos huecos. Los callos se formaron después de 8 a 10
semanas de cultivo. La mayor eficiencia de regeneración de plantas verdes (24 por cada 100 anteras)
se obtuvo a partir de los callos de cultivos de Ac Abbey en medio C17 con 2,4-D y dicamba. Los
cultivos de tallo sólido produjeron más callos y regeneraron más plantas verdes que los de tallo
medio o hueco.
4. “Hormonal requirements for effective induction of microspore embryogenesis in triticale (3
Triticosecale Wittm.) anther cultures”
La efectividad de ME en el cultivo de anteras es un aspecto importante en la parte de resultados ya
que el tratamiento con genotipos vegetales y macollas tuvo un efecto significativo en la
concentración de auxina en anteras de Triticosecale. Se observó una acumulación intensiva de ABA
en respuesta al tratamiento con macollas en anteras de todas las líneas DH estudiadas. La
suplementación de TIBA y PCIB no modificó la eficacia de la inducción de ME. Se hicieron distintos
equivalentes, los cuales muestran que a bajos niveles de auxina en comparación con los niveles de
CK y ABA, así como el valor más bajo de CK Eq / ABA, favorecieron la formación de la estructura de
tipo embrión y la capacidad de regeneración de la planta verde (Zur, 2015).
 5. “Effect of ovary induction on bread wheat anther culture: ovary genotype and
developmental stage, and candidate gene association”
La respuesta del cultivo de anteras se estudió en cultivos de control (medio MS3MF200) y OVPCM
(cultivo de ovario y medio con ovario de MS3MF200), usando anteras del cultivo de alta respuesta
de “Pavon” y del cultivo de respuesta media a baja “Caramba”. En “Pavon”, se obtuvieron 262
plantas verdes con OVPCM y 27,2 en el medio de control, lo que representa un aumento de 9,6
veces. Sin embargo, se observó un aumento de 16,7 veces con OVPCM en “Caramba”. El uso del
medio con ovario y el co-cultivo de ovario aumentó la eficiencia de la producción de plantas dobles
haploides verdes en cultivo de anteras de trigo integral (Castillo, Sánchez, & Vallés, 2015).
Consultar diferentes estudios genéticos de variedades de cebada que hayan sido identificadas
como genotipos altamente androgénicos frente a variedades que se deseen utilizar para cultivo
de anteras.
Entre los estudios importantes destacan:

 “Evaluación de la capacidad androgénica de cinco variedades de cebada (Hordeum vulgare

l.) mediante la técnica de cultivo in vitro de anteras”
Gallardo (2010) estudió la capacidad androgénica de las variedades de cebada, los factores que
alteran los genotipos fueron: tiempo de exposición, estado vegetativo y la eficiencia del medio de
inducción BAC3.

 “Effect of genotype on androgenesis in barley (Hordeum vulgare L.)”

Este estudio se lo realizó para determinar la respuesta de 12 cebadas diploides cultivadas mediante
cultivo in vitro de anteras en un medio FHG sólido suplementado con 90 mg/L de sacarosa, 2 mg/L
de 2,4-D y 0.1 mg/L de kinetina (Kahrizi, 2011).

 “Anther culture effectiveness in producing doubled haploids of cereals”

La obtención de un gran número de líneas DH de híbridos de cebada y trigo con respuesta de
androgénesis desconocida puede organizarse en dos etapas: primero: selección de híbridos de
material inicial reproductores sensibles en cultivo de anteras, que permite la producción de
regenerantes de plantas verdes, y segunda producción de Líneas DH a gran escala de híbridos
seleccionados (Grauda, 2014).

 “Plant regeneration and callus type in barley: effects of genotype and culture medium”
Se examinaron quince genotipos de cebada, principalmente cultivos o líneas élite de mejoramiento
adaptadas a América del Norte, por su capacidad de formar callos regenerables a partir de
embriones inmaduros en versiones modificadas de los medios MS, B5 y CC. Se obtuvieron callos
regenerables de todos los genotipos. La frecuencia de inducción de callos embriogénicos, la
morfología y la friabilidad de callos embriogénicos, la tasa de crecimiento relativo de callos
embriogénicos y la capacidad de regeneración se vieron influenciados por las interacciones entre
genotipo, medio de cultivo y genotipo de cada medio de cultivo (Bregitzer, 1992).
Entre otros estudios se tienen:

 “Evaluation of 10 Canadian Barley (Hordeum vulgare L.) Cultivars for tissue culture
response” (Baillie, Rossnagel, & Kartha, 1993)

 “Comparison of anther and isolated microspore cultures in barley. Effects of culture density
and regeneration medium” (Castillo, Vallés, & Cistué, 2000)

 “Diallel analysis of androgenetic plant production in hexaploid triticale (X. triticosecale,

Wittmack). Theorical and Applied Genetics” (Charmet & Bernard, 1984)

 “Comparison of anther culture and Hordeum bulbosum method for the production of
doubled haploid in winter barley” (Devaux, 1987)
En que consiste el uso de la tecnología de dobles haploides. Argumente su respuesta basándose
mínimo en 3 publicaciones científicas.

La producción doble haploide (DH) se ha convertido en una herramienta importante en el

mejoramiento de plantas, en gran parte debido a su capacidad para producir plantas
completamente homocigotas en una generación.
La tecnología de dobles haploides según Humbphreys & Knox (2015) se puede integrar con la
reproducción asistida por marcador para una mayor eficiencia y para crear la población de DH para
rasgos particulares. La tecnología también se puede utilizar para acelerar el desarrollo de
germoplasma con nuevos genes de interés y para generar reservas citogenéticas. Sin embargo,
Sánchez (2017) menciona que las líneas dobles haploides (DH) se pueden obtener a partir de cruces
entre variedades locales de maíz exóticas del proyecto Mejora de Germoplasma de Maíz (GEM) y
las líneas de PVP expiradas PHB47 y PHZ51.
El uso de DH puede reducir a la mitad el tiempo necesario para producir un cultivo comercial en
cultivos como el trigo de invierno afirma Santra (2017). Además de reducir el tiempo, la tecnología
DH corrige los alelos raros y puede jugar un papel importante en la evaluación de la diversidad
genética. Los dobles haploides son plantas homocigóticas desarrolladas por androgénesis (cultivo
de micro esporas y anteras), Gino génesis (cultivo de ovarios y óvulos) e hibridación amplia. Sin
embargo, bajo condiciones artificiales, la variación genotípica para la habilidad de realizar cruces
entre especies, las polinizaciones múltiples, la aplicación de reguladores de crecimiento y las
técnicas in vitro pueden aprovecharse para posibilitar una amplia hibridación (Jiang & Hammad,
2014).

Bibliografía
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Caruana. (2010). Ck-12. Obtenido de Plant Reproduction and Life Cycle:

https://www.youtube.com/watch?v=ZvBMQIrlhYw
Castillo, A. M., Sánchez, R. A., & Vallés, M. P. (2015). Effect of ovary induction on bread wheat anther
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