INFORME DE LABORATORIO: AGENTES FISICOS QUE INFLUYEN EN EL

CRECIMIENTO DE BACTERIAS Y RECUENTO DE PLACAS DE UNIDADES

FORMADORAS DE COLONIAS

UNIVERSIDAD DE CARTAGENA
FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES
PROGRAMA DE BIOLOGIA

INTEGRANTE: Mayerling Martínez Sandoval y Hector J. Ortiz Álvarez

DOCENTE: Yaleyvis Buelvas Montes
RESUMEN
las bacterias tienen la capacidad de formar colonias bajo las condiciones necesarias de
requerimientos nutritivos y físicos, a partir de estos requerimientos es posible realizar un
control y conteo de colonias bacteriana. En la práctica realizada se llevó a cabo el recuento
de bacterias y la identificación de estas a partir de sus requerimientos físicos, se logró
observar que a un medio de cultivo ácido no se observó la presencia de crecimiento
bacteriano, así como tampoco se logró observar bajo medios de concentraciones de
salinidad muy altos como lo fue en el caso del NaCl al 20%.
INTRODUCCIÓN
Los requerimientos para el crecimiento microbiano pueden dividirse en dos categorías
principales físicos y químicos. Los aspectos físicos comprenden el PH, y la presión
osmótica. Y los químicos incluyen requerimientos de carbono, azufre, nitrógeno, fósforos,
oligoelementos, oxigeno entre otros (Tortora et al., 2009). El crecimiento bacteriano no se
caracteriza por un aumento del tamaño, sino por aumento del número.
Para determinar el número y la viabilidad de las células existen distintas técnicas, una de
ellas consiste en contar en el microscopio el número de células en un volumen conocido.
Otra técnica consiste en establecer la cantidad de células por turbidimetría. Los más
representativo es el recuento de elementos variables. Para ello es necesario cultivar las
células y a partir de la base que cada bacteria es capaz de cultivar una colonia se procede
a contar (Negroni, 2009).
el propósito es determinar la cantidad de bacterias que pueden formar colonias a partir de
diferentes tipos de requerimientos físicos para su crecimiento.
MATERIALES Y MÉTODOS
Se tomaron seis tubos de ensayo y se le agregó 5 ml de caldo nutritivo a cada tubo de
ensayo, y luego se procedió de la siguiente manera: al primer tubo de ensayo 0.5 ml de
glucosa, al segundo 0.05 ml de glucosa, al tercero 1 ml de glucosa, al cuarto 0.5 ml de NaCl,
al quinto 0.05 ml de NaCl y al sexto 1 ml de NaCl con el fin de llevar las soluciones de
glucosa y NaCl en los tubos de ensayo al 1,10 y 20% de concentración, luego se procedió
a sembrar en cada uno de los tubos de ensayo y se procedió a incubar.
Luego se tomaron tres tubos de ensayo a los cuales se les agregaron a cada uno 5 ml de
caldo nutritivo, se le agregó una tira para medir PH y se obtuvo que se encontraba en 7, se
sacó uno de estos tubos de ensayo y se procedío a sembrar, en el segundo tubo de ensayo
se agregaron unas gotas de HCl con el fin de llevar el PH a 3, y se procedió a sembrar,
luego se agregaron unas gotas de NaOH con el fin de llevar el PH a 11, y se procedió a
sembrar en el tubo de ensayo y luego se incubó.
Se tomaron apróxidamente 10g de muestra de tierra y se agregó en un Erlenmeyer con
90ml de solución salina peptonada, se agitó por 5 minutos con la ayuda de un agitador.
Luego se tomaron 10 tubos de ensayo y se agregó a cada tubo de ensayo 10 ml de la
muestra preparada en el Erlenmeyer, luego se procedió de la siguiente manera con los
tubos de ensayo:
se homogenizó la muestra, se tomó un mL, con una pipeta estéril y se añadió al tubo número
1. Esta es la dilución 10¹ o 1/10 5. Con otra pipeta estéril se mezcló y se tomó un mL del
tubo número 1 y añadió al tubo numero 2 esta es la dilución de 10² o 1/100, y así
sucesivamente con cada tubo de ensayo hasta llegar a 106 . por último, se pasó a sembrar
en cajas de Petri marcadas de la misma manera que los tubos de ensayo, se incubó durante
24 horas y luego se procedió a contar el crecimiento de bacterias formadoras de colonias.
RESULTADOS
Se evaluó la presencia de bacterias en los tubos de ensayo que contenían las
concentraciones de glucosa, NaCl y los diferentes tipos de PH teniendo en cuenta la
turbidez de estos. En la tabla 1 se muestran los resultados de la presencia o ausencia de
bacterias dependiendo de las concentraciones de glucosa y NaCl de la siguiente manera:
(-): Sin crecimiento.
(+): Crecimiento escaso.
(++): Crecimiento regular.
(+++): Crecimiento abundante.
Compuesto Concentración
1% 10% 20%
NaCl +++ + -
Glucosa ++ + -
Tabla 1, evaluación de la presencia o ausencia de bacterias

En la tabla 2 se muestran los resultados de la presencia de bacterias teniendo en cuenta el

PH en el caldo
Ph Crecimiento
3 +
7 +++
11 -
Tabla 2, muestra la evaluación de presencia o ausencia de bacterias
teniendo en cuenta su Ph.
se realizó el conteo de bacterias formadoras de colonia sembradas en las cajas de Petri y
estos fueron los resultados obtenidos
10 ² ≈ 1088 m.o/ ml
10 ² ≈ 1904 m.o / ml
10 ³ ≈ 7920 m.o / ml
10 ³ ≈ 1408 m.o / ml
104 ≈ 648 m.o/ ml
105 ≈ 432 m.o / ml
Para el resto de las cajas no se consideró un crecimiento de colonia bacteriana óptimo para
su conteo, ya que solo se necesitaron aquellas que tuvieron un crecimiento mayor de 30 a
300 colonias.

CONCLUSIÓN
Las bacterias necesitan medios específicos para su crecimiento colonial, estos
requerimientos son de salinidad, PH, cantidad de oxígeno, oligoelementos entre otros
requerimientos, a partir de estos se puede llevar a cabo un control de crecimiento bacteriano
el cual permite el recuento de las colonias bacterianas cuando estas se encuentran en agar,
y la identificación de crecimiento de bacterias en caldo por medio de la turbidez de la
muestra.
BIBLIOGRAFIA
Negroni M. 2009. Microbiología estomatológica: fundamentos y guía práctica, ed. Medica
panamericana. Buenos Aires, Argentina. 656pp.
Tortora J. Gerard, Funke R. Bergell & Case L. Christine. 2007. Introducción a la
microbiología, Ed. Panamericana. Buenos Aires, Argentina. 959pp.