Las proteínas de carga exportadas desde el retículo endoplásmico al aparato de Golgi son típicamente

transportadas en vesículas recubiertas con el complejo de proteína II (COPII) de 60-90 nm de diámetro.

Varias moléculas de carga, incluyen colágenos y quilomicrones, forman estructuras que son demasiado
grandes para ser acomodadas por estas vesículas, pero su secreción sigue requiriendo proteínas COPII.
Aquí, primero revisamos el progreso reciente en grandes secreciones de carga derivadas, especialmente
de modelos animales y enfermedades humanas, que indican la importancia de las proteínas COPII.
Luego discutimos el reciente aislamiento de factores especializados que modulan el proceso de
formación de carga dependiente de COPII para facilitar la salida de cargas de gran tamaño del retículo
endoplásmico. Con base en estos hallazgos, proponemos un modelo que describe la importancia del
ciclo de GTPasa para la secreción de cargas de gran tamaño. A continuación, resumimos informes que
describen las estructuras de las proteínas COPII y cómo estos resultados proporcionan información
sobre el mecanismo de ensamblaje de los grandes transportadores de carga. Finalmente, discutimos qué
problemas quedan por resolver en el futuro.

Palabras clave: COPII, colágeno, quilomicrón, TANGO1, cTAGE5

El requerimiento de proteínas COPII para la exportación de colágeno desde el ER

Las cargas que salen del retículo endoplasmático (RE) al aparato de Golgi se empacan en vesículas
recubiertas con el complejo de proteína II (COPII) que típicamente tienen diámetros de 60-90 nm [1]. La
formación de vesículas COPII ocurre en regiones particulares de la ER llamadas sitios de salida ER,
también conocidas como ER de transición (tER), que se tiñen como puntos puntuados dispersos por el
citoplasma mediante análisis de inmunofluorescencia de células de mamíferos (Fig. 1). Los mecanismos
para formar vesículas de transporte están altamente conservados desde la levadura hasta los humanos.
La pequeña GTPasa Sar1 se activa por su factor de intercambio de guanina y nucleótido (GEF), Sec12 [2-
5]. Después de la activación, Sar1 se recluta a la membrana ER [6-8] y forma el complejo pre-gemación
[9-12], que consiste en el complejo de capas internas Sec23 / Sec24 y las moléculas de carga Sec24-
bound [13-15]. Posteriormente, el complejo de capa externa Sec13 / Sec31 se une, y este evento de
unión mejora la actividad de la proteína activadora de GTPasa de Sec23, completando así el ensamblaje
de la capa [16-19]. Sec16 es el otro factor esencial en la biogénesis COPII y funciona como un andamio
para interactuar con determinadas proteínas de la cubierta [20 - 25]. Recientemente, Sec16 también se
ha reportado para regular negativamente la hidrólisis de GTP por Sar1 [26 - 28]. Se han identificado
factores adicionales implicados en la producción de vesículas, como p125, TFG-1 y ALG2 [29-38]. Los
detalles de la biogénesis COPII convencional han sido ampliamente revisados en otros artículos
publicados recientemente [39-46].
Figura 1

Localización de sitios de salida de ER en células HeLa teñidas por anticuerpos contra la proteína
transmembrana Sec12 (monoclonal 6B3 de rata) y Sec31 citoplásmica (BD monoclonal de ratón
Biociences Biosciences). Las células HeLa se fijaron con metanol frío y se procesaron para
inmunofluorescencia

Los colágenos sintetizados en el ER se pliegan en hetero u homo-trímeros, que forman estructuras

rígidas de> 300 nm de longitud que son demasiado grandes para caber en vesículas recubiertas con
COPII convencionales [47-50]. Sin embargo, la obtención de imágenes mediante microscopía
fluorescente y electrónica indica que el colágeno I sale del RE a través del proceso dependiente de
COPII. Stephens y Pepperkok demostraron que la microinyección de un mutante de Sar1a (Sar1a H79G)
deficiente en GTPasa bloquea la secreción de colágeno I. Además, mostraron que el colágeno I sale del
ER en las estructuras marcadas con Sec24D, pero segrega de la glicoproteína del virus de la estomatitis
vesicular VSVG- ts045, un modelo de las proteínas de carga convencionales. El último resultado implica
que el transporte de colágeno al Golgi depende de la COPII, pero es distinto del tráfico de carga
convencional [51]. Mironov et al. fortaleció este hallazgo mediante el análisis por microscopía
electrónica, que demostró que VSVG y el colágeno I salen de la sala de emergencias mediante un
proceso dependiente de la COPII, pero desde distintos dominios. Además, se observó que las
protuberancias de los dominios ER en la vecindad de los sitios de salida ER forman portadores que
contienen VSVG o colágeno I. Curiosamente, la formación de portadores es dependiente de COPII, pero
no parece implicar la gemación y la fusión de recubiertos con COPII vesículas [52].

Sec23A

La importancia de las proteínas COPII para la secreción de colágeno también se ha sugerido mediante el
análisis de enfermedades humanas y modelos animales (Tabla 1). Se han identificado dos mutaciones
puntuales en los genes Sec23A (F382L y M702V) como responsables de la displasia cráneo-lenticular-
sutural (CLSD), un trastorno autosómico recesivo caracterizado por fontanelas de cierre tardío,
dismorfismos faciales y defectos esqueléticos [53, 54]. . Los fibroblastos aislados de pacientes con CLSD
mostraron una extensa dilatación del ER y la acumulación de colágeno I dentro del ER. Ambas
mutaciones se encuentran cerca del sitio de unión de Sec31. La caracterización bioquímica y estructural
sugiere que Sec23A / F382L no puede reclutar Sec13 / Sec31 y, por lo tanto, no se producen brotes de
vesículas [18, 55]. Por el contrario, Sec23A / M702V es capaz de interactuar con Sec13 / Sec31 y no tiene
efectos apreciables sobre la gemación de vesículas in vitro. Curiosamente, la mutación M702V parece
mejorar la actividad de Sar1B GTPasa a través de una interacción con Sec13 / Sec31 [56]. La mutación
del triturador de pez cebra se obtuvo a través de una pantalla de mutagénesis química para identificar
genes implicados en el desarrollo craneofacial [57]. Un análisis adicional reveló que la trituradora tiene
una mutación sin sentido en el resto 402 del gen Sec23A. Los condrocitos trituradores han distendido ER
con colágeno II acumulado en el interior [58], lo que confirma que se requiere Sec23A para la
exportación de colágeno desde el ER.
Table 1
COPII-related proteins reported in human diseases and animal models

Recientemente, Sec23A ha sido identificado como un objetivo del factor de transcripción residente en
ER BBF2H7, también conocido como Creb3L2 [59]. BBF2H7 se expresa en condrocitos y normalmente se
degrada por la vía ubiquitina-proteasoma, pero tras el estrés ER, el factor de transcripción se estabiliza y
se transporta al aparato de Golgi, luego se activa mediante proteólisis con proteasa localizada en el sitio
1 (S1P) y sitio-2 proteasa (S2P). El extremo N escindido se transloca al núcleo para regular al alza la
expresión de Sec23A [60-62]. Se encontró que los ratones knockout BBF2H7 muestran una
condrodisplasia grave. Los condrocitos de ratones knock-out han expandido ER, donde el colágeno II y la
proteína de la matriz oligomérica del cartílago se acumulan en grandes cantidades [59]. Un mutante de
pez cebra con una mutación sin sentido en BBF2H7 (feelgood) también mostró defectos en el desarrollo
de condrocitos, y la acumulación de colágeno II se observó en la RE distendida [63]. Estos resultados
sugieren que la activación de transcripción mediada por BBF2H7 de Sec23A es necesaria para el
transporte de colágeno en condrocitos. El requisito de la vía BBF2H7-Sec23A para el transporte de
colágeno también se informó para los fibroblastos dérmicos [64].

Sec24D

El vertebrado posee cuatro isoformas de Sec24, y se considera que estas isoformas satisfacen las
demandas de tráfico de variedades de moléculas de carga, aunque parecen ser parcialmente
redundantes en el reconocimiento de carga [65]. Estudios recientes en peces indicaron que Sec24D es
específicamente importante para la secreción de colágeno de la sala de emergencias. Las pantallas de
mutagénesis realizadas en medaka y pez cebra condujeron independientemente a la identificación de
las mutaciones sin sentido denominadas vbi y bulldog, respectivamente [57]. Ambos mutantes
mostraron defectos craneofaciales, y los condrocitos de estos mutantes no pudieron secretar el
colágeno II y mostraron una ER dilatada [66, 67]. La osteogénesis imperfecta, un trastorno asociado con
masa reducida del hueso, aumento de la fragilidad ósea y deformidad ósea, es causada principalmente
por mutaciones heterocigotos en los genes que codifican el colágeno I (COL1A1 o COL1A2) [68]. Un
estudio clínico reciente reveló que las mutaciones de Sec24D también son responsables del fenotipo de
osteogénesis imperfecta. Los individuos afectados poseen dos mutaciones de sentido erróneo en cada
alelo Sec24D o un sentido erróneo y la otra mutación sin sentido. Los fibroblastos de los pacientes
mostraron acumulación de colágeno I dentro del ER dilatado [69]. Curiosamente, el knockout de Sec24D
en ratones reveló letalidad embrionaria temprana [70]. Estos resultados implican que se requiere
transporte de carga dependiente de Sec24D para las primeras etapas de desarrollo, y las formas
truncadas o mutadas de Sec24D de mutantes de peces y pacientes tienen actividad marginal requerida
para el desarrollo temprano, pero no suficiente para secretar colágeno I de la ER. Curiosamente, se ha
informado que el patrón de expresión de Sec24d cambia durante el desarrollo. Se expresa de manera
ubicua durante las primeras etapas de desarrollo, mientras que la expresión se restringe al cartílago
craneofacial durante las etapas posteriores del desarrollo [66].

Sec13 / 31

Sec13 funciona formando complejos individuales en diferentes ubicaciones dentro de las células. Sec13
se sabe que constituye el complejo de poro nuclear (NPC) [71]. Sin embargo, Sec13 interactúa con Sec31
para servir como una capa externa de vesículas COPII. Además, Sec13 se ha sugerido recientemente
para formar un complejo con Sec16, que sirve como una plantilla para la formación de capas externas
Sec13 / 31 [25].

Townley et al. primero informó que los morfantes Sec13 de pez cebra exhiben defectos en el desarrollo
craneofacial. En las células de mamíferos, el agotamiento de Sec13 por ARNsi dificulta la secreción de
colágeno I sin afectar el transporte de carga convencional [72]. Curiosamente, un mutante de pez cebra
identificado originalmente como el fenotipo de hígado pequeño en una pantalla se reveló que tenía un
truncamiento C-terminal de Sec13, lo que lo hace incapaz de unirse a Sec31 [73]. El pez mutante exhibe
un órgano digestivo hipoplástico y ojos pequeños con laminación retiniana alterada, y los condrocitos
del mutante mostraron acumulación de colágeno II en las estructuras de ER dilatadas [74, 75]. En este
contexto, una reducción Sec31A por morfolino se realizó en peces y mostró malformación del órgano
digestivo, como se observó en los mutantes Sec13. Además, los condrocitos de morphants acumulan
colágeno II dentro del ER dilatado. Estos resultados sugieren fuertemente que los defectos en el
desarrollo de órganos digestivos y la secreción de colágeno en los peces mutantes Sec13 se deben a la
función comprometida de COPII. La mutación en el componente NPC10 NPC exhibe falla en la
laminación de la retina, aunque la disminución de Sec31A y Sec31B o el tratamiento con brefeldina A, un
inhibidor de la ER para el tráfico de Golgi, no tiene ningún efecto sobre el desarrollo del ojo. Por lo
tanto, la función de Sec13 en el complejo NPC parece ser necesaria para el desarrollo de la retina [76].
A medida que la evidencia se acumula, no hay duda de que la secreción de colágeno de la ER requiere
componentes de COPII. Sin embargo, estos resultados no son suficientes para concluir si el colágeno se
transporta directamente por estructuras recubiertas con COPII modificado, que puede acomodar cargas
de gran tamaño, o el requisito de COPII para la secreción de carga de gran tamaño es limitado e
indirecto. Recientemente, se han identificado varias moléculas asociadas con los sitios de salida ER que
se requieren específicamente para la secreción de grandes cantidades de carga y se han propuesto
algunos modelos. Nos enfocaremos en este tema en la siguiente sección. Ir a: Componentes
específicamente requeridos para la secreción de colágeno. La detección de todo el genoma de TANGO1
en células S2 de Drosophila reveló varios genes implicados en la secreción de proteínas y la morfología
de Golgi [77]. El transporte y la organización 1 de Golgi (TANGO1), también conocida como actividad
inhibidora de melanoma 3 (MIA3), se aislaron en esta detección como implicadas en el tránsito de RE a
Golgi. TANGO1, una proteína que contiene múltiples dominios, con un dominio SH3 no canónico,
regiones transmembrana, dos dominios de espiral enrollada y dominio rico en prolina (PRD), solo se
conserva a través de metazoos (Fig. 2). TANGO1 se localiza en los sitios de salida ER con el dominio SH3
orientado hacia el lado luminal y el PRD hacia el lado citoplásmico. Los pliegues similares a Luminal SH3
en las proteínas de la familia MIA tienen propiedades estructurales únicas cuando se comparan con los
dominios SH3 citoplasmáticos canónicos [78]. Se ha demostrado que PRD de TANGO1 interactúa con
Sec23 / Sec24, probablemente de forma similar a la unión de Sec31 con Sec23 / Sec24, porque PRD de
Sec31 es responsable de la interacción con Sec23 / Sec24 [79, 80]. El dominio SH3 de TANGO1 es capaz
de interactuar con el colágeno VII, y una caída de TANGO1 perjudica la exportación de colágeno VII
desde la sala de emergencias sin afectar el transporte general de proteínas. Estos datos sugieren que
TANGO1 actúa como un receptor de carga para colágeno VII en sitios de salida de ER [81]. Es de destacar
que no se requiere TANGO1 para la secreción de colágeno I en células cultivadas, lo que sugiere que el
papel de TANGO1 como receptor de carga se limita a un cierto conjunto de moléculas y no a todas las
cargas sobredimensionadas. En un ensayo de incrustación de vesículas in vitro, se demostró que
TANGO1 no se exportaba desde el ER junto con los colágenos. Por el contrario, los receptores de carga
convencionales salen del ER junto con las proteínas de carga dentro de las vesículas revestidas con
COPII. Por lo tanto, TANGO1 puede emplear un mecanismo único para exportar grandes cargas desde el
ER.

ig. 2
The domain organization of MIA2, cTAGE5, and TANGO1
Los ratones TANGO1 knock-out se han hecho y exhiben condrodisplasia, lo que conduce a enanismo del
feto, edema periférico y letalidad neonatal. Estos fenotipos probablemente se deban a la acumulación
intracelular de colágenos y a la inducción de la fuerte respuesta de proteína desplegada, especialmente
en el esqueleto en desarrollo. Se descubrió que el knockout TANGO1 muestra defectos en la secreción y
parte de la maduración del colágeno I, II, III, IV, VII y IX a partir de condrocitos, fibroblastos, células
endoteliales y células murales [82]. A diferencia del agotamiento de TANGO1 por ARNip, el knockout
TANGO1 inhibe la exportación de colágeno I y VII desde el ER. Es interesante observar que el bloqueo
transcripcional del gen del colágeno I en ratones por la inserción de retrovirus condujo a la letalidad
embrionaria [83], que es un fenotipo más grave que el knockout TANGO1. Si TANGO1 tiene roles
directos en la secreción y maduración de una amplia gama de colágenos, aún no se ha investigado; sin
embargo, proponemos que el fenotipo de los animales knock-out es un resultado acumulativo debido a
la secreción alterada de un número limitado de colágenos. Es de destacar que se ha informado que
TANGO1 en drosophila también está implicado en la secreción de colágeno IV desde el RE [84, 85].

cTAGE5

El antígeno 5 asociado al linfoma de células T (cTAGE5), también conocido como antígeno-6 expresado
por meningioma (MGEA6), que se aisló originalmente como antígenos específicos de tumores para
varios tipos de cáncer, es un homólogo cercano de TANGO1 en células de mamífero [ 86-89]. Aunque
cTAGE5 carece del tramo luminal largo N-terminal cuando se compara con TANGO1, contenía una región
transmembrana, dos dominios de espiral en espiral y un PRD ubicado en el extremo C, y se localiza en
los sitios de salida del ER (Fig. 2). El PRD de cTAGE5 también se une a Sec23 / Sec24. cTAGE5 interactúa
directamente con TANGO1 a través de uno de los dominios de bobina enrollada. Las células agotadas de
cTAGE5 por siRNA acumulan colágeno VII dentro de la ER, lo que sugiere que cTAGE5 actúa como
correceptor de TANGO1 en los sitios de salida ER [90].

cTAGE5 se conserva en todos los vertebrados y forma una familia multigene con nueve pseudogenes en
humanos y posiblemente en otros primates [91]. La expresión de cTAGE5 es bastante omnipresente,
pero el corte y empalme alternativo específico de tejido produce formas más largas de cTAGE5,
designado como MIA2 (figura 2). La expresión de MIA2 solo está restringida a los hepatocitos, y al igual
que TANGO1, contiene un pliegue N-terminal tipo SH3. Los ratones que poseen mutaciones puntuales
en MIA2 tienen VLDL, LDL, HDL y triglicéridos circulantes más bajos [92]. Se requiere investigación
adicional para determinar si MIA2 actúa como un receptor de carga para carga de gran tamaño. Se sabe
que MIA2 tiene una forma secretada más corta y se ha informado sobre su papel en la carcinogénesis
(figura 2) [93-97].

En base a los datos experimentales descritos anteriormente, se ha propuesto un modelo para la

exportación de colágeno VII por el complejo cTAGE5 / TANGO1 (figura 3) [81, 90, 98]. El complejo
cTAGE5 / TANGO1 en los sitios de salida ER se une al colágeno VII a través del pliegue luminal SH3 de
TANGO1 y Sec23 / Sec24 a través de los PRD tanto de cTAGE5 como de TANGO1. La interacción de estos
dos PRD con Sec23 / Sec24 inhibe el reclutamiento de Sec13 / Sec31, retrasando así la hidrólisis de Sar1
GTP requerida para la formación de vesículas. Una vez que el colágeno VII se acomoda en un portador
COPII del tamaño correcto, el colágeno VII puede disociarse de TANGO1, lo que conduciría a la
disociación de los PRD de Sec23 / Sec24. Sec13 / Sec31 puede ser reclutado y completar la formación del
transportista. Se requiere una validación experimental adicional para probar esta hipótesis.

Fig. 3
Schematic of conventional COPII-vesicle budding and cTAGE5/TANGO1-mediated collagen
export. Collagen secretion may require tight regulation of the Sar1 GTPase cycle. The
cTAGE5/Sec12 complex efficiently activates Sar1, whereas TANGO1/Sedlin enhances its ...
Sec12

Inmunoprecipitación siguiente análisis de espectrometría de masas reveló Sec12 como un nuevo socio
de unión de cTAGE5 [99]. La Sec12, también conocida como proteína de unión a elementos reguladores
de prolactina en células de mamíferos, es una proteína transmembrana tipo II con pliegues WD-40 y
actúa como un GEF para Sar1 [5, 100]. Sec12 se une directamente a uno de los dominios de coiled-coil
de cTAGE5, y esta interacción no ejerce ningún cambio en la actividad GEF de Sec12 hacia Sar1. Sin
embargo, la interacción es necesaria para que Sec12 pueda ubicarse correctamente en los sitios de
salida de ER, ya que una caída de cTAGE5 conduce a la dispersión de Sec12 a lo largo del ER.
Curiosamente, la caída de cTAGE5 inhibe la secreción de colágeno VII, pero no tiene efectos sobre la
secreción proteica general, lo que indica que las cargas convencionales pueden secretarse siempre que
Sec12 esté presente en el ER. Por lo tanto, el reclutamiento de Sec12 a los sitios de salida de ER por
interacción con cTAGE5 parece ser específicamente necesario para que el colágeno VII salga del RE [99].
Como Sec12 es un GEF para Sar1, estos datos implican que la exportación de colágeno desde el ER
requiere altos niveles de Sar1 activado en la vecindad de los sitios de salida ER (Fig. 3).

Sly1-syntaxin18

Nogueira et al. informó recientemente que Sly1 interactúa con el dominio citoplásmico de TANGO1 en
presencia de un agente de entrecruzamiento. Se sabe que Sly1, una de las proteínas Sec1 / Munc18
(SM) implicadas en la reacción de fusión de membrana, interactúa con proteínas de unión a proteínas de
fusión sensibles a N-etilmaleimida específicas de ER-objetivo (t-SNAREs), sintaxina17 y sintaxina18 [101,
102]. Una caída de Sly1 o sintaxina18 bloquea específicamente la secreción de colágeno VII, pero no el
colágeno I u otras cargas convencionales exportadas desde el ER [103]. Recientemente, se informó un
modelo de transporte de colágeno VII que incorpora estos hallazgos, lo que sugiere que la fusión
dependiente de sly1-sintaxin18 de las membranas de reciclado como el compartimento intermedio ER-
Golgi es responsable de agrandar el portador mediado por COPII, en el que la formación sería
desencadenada por la acción de cTAGE5 / TANGO1 [103, 104].

Cul3-KLHL12

Jin et al. recientemente informaron que la ubiquitilación de los componentes COPII está involucrada en
grandes secreciones de carga. Las células ES de ratón agotadas con ubiquitina ligasa CUL3 forman
grupos de células fuertemente agrupadas, lo que sugiere la deposición aberrante de la matriz
extracelular (MEC). KLHL12 se aisló como un adaptador de CUL3, que se une y muestra un fenotipo
similar a CUL3 cuando se derriba en células ES. Curiosamente, CUL3-KLHL12 monoubiquitylates Sec31, y
esta ubiquitilación promueve la formación de estructuras recubiertas con COPII ampliada (200-500 nm
de diámetro) donde KLHL12 también está presente. Además, se requiere la formación de estas
estructuras ampliadas de COPII para el transporte de colágeno I y IV [105].

Sedlin

Sedlin, también conocido como TRAPPC2, es un componente del complejo TRAnsport Protein Particle
(TRAPP), que está involucrado en el anclaje de vesículas durante la RE a Golgi y el transporte dentro del
Golgi [106]. Sedlin ha sido identificado como un gen mutado en la displasia espondiloepifisaria tardía, un
trastorno esquelético ligado al cromosoma X caracterizado por una estatura desproporcionadamente
corta con un tronco corto y articulaciones degenerativas, y los condrocitos de los pacientes muestran
alteración de la secreción de moléculas de ECM [107]. Venditti et al. recientemente mostró que Sedlin
se localiza en los sitios de salida ER mediante la interacción con TANGO1 y parece interactuar
directamente con la forma de Sar1 enlazada a GTP. La caída de Sedlin conduce a la acumulación de una
forma activada de Sar1 en los sitios de salida de la ER y específicamente bloquea la secreción de
colágeno I y II a partir de condrocitos y fibroblastos. Los autores sugieren que Sedlin regula el ciclo Sar1
GTPasa para controlar la salida de colágeno del ER (Fig. 3) [108].

Como se describió anteriormente, la secreción de colágeno del ER parece estar regulada por factores
especializados, que modificarían la función de las proteínas COPII convencionales. Se propone un
complejo receptor de carga cTAGE5 / TANGO1 para regular el ciclo de Sar1 GTPasa interactuando con
Sec12, además de la unión a Sec23 / Sec24 para una posible competencia con Sec13 / Sec31; CUL3-
KLHL12 monoubiquitylates Sec31 para ampliar los portadores, y las moléculas que participan en el
anclaje y la fusión, Sedlin y Sly1-syntaxin18, también participan en la secreción de proteínas grandes.

Ir:

Secreción de quilomicrones
Sar1B

Los quilomicrones sintetizados en el ER de enterocitos difieren en tamaño en diferentes condiciones (75-

450 nm), pero algunos se consideran más grandes que las vesículas COPII convencionales [109, 110].
Enfermedad de retención de quilomicrones (CMRD), enfermedad de Anderson y CMRD con el trastorno
neuromuscular El síndrome de Marinesco-Sjogren (MSS) son trastornos hereditarios de malabsorción
grave de grasa con transporte alterado de quilomicrones y que se asocian con mutaciones en Sar1B
(Tabla 1) [111 ] Las mutaciones en estas enfermedades se encuentran principalmente en los bolsillos de
unión de nucleótidos de Sar1B, lo que indica la importancia del ciclo Sar1 GTPasa [111-113]. El modelo
de pez cebra de la deficiencia de Sar1B basado en una demostración de caída de morfolino d un
fenotipo similar, donde los lípidos de la dieta se acumulan en enterocitos de peces mutantes [114]. Es de
destacar que los peces también exhiben defectos en el cartílago craneofacial asociados con la secreción
anormal de colágeno II, aunque estos defectos no se observan normalmente con la CMRD y
enfermedades relacionadas. Curiosamente, Sar1B parece tener características únicas en comparación
con la función de Sar1A. Basado en el análisis bioquímico de un mutante CLSD, se ha sugerido que Sar1B
tiene una afinidad más débil que Sar1A hacia Sec13 / Sec31. La interacción suelta de Sec13 / Sec31 con
Sar1B puede facilitar la formación de una capa exterior más flexible que luego puede acomodar grandes
cargas [55, 115]. Ir a: Análisis estructural de las proteínas COPII que proporcionan información sobre el
ensamblaje de grandes transportadores de carga. El análisis por microscopía electrónica de Sec23 /
Sec24 y Sec13 / Sec31 purificados mostró que estos dos complejos pueden ensamblarse en la estructura
tipo jaula desde un cuboctaedro con un diámetro de 60 nm hasta un icosidodecaedro con un diámetro
de 100 nm [116]. Sin embargo, estas estructuras aparentemente no son lo suficientemente grandes
como para acomodar grandes cargas como colágenos y quilomicrones. O'Donnell et al. recientemente
informaron que Sec13 / Sec31 también podría formar túbulos con interiores cilíndricos huecos de 330
nm de largo con un diámetro de 30 nm [117]. La formación de túbulos dependientes de COPII también
se ha informado en células semi-intactas, que fueron tratadas con un sistema activado forma de Sar1
(Sar1 H79G) [7, 118]. Además, varios informes indican que los liposomas artificiales pueden ser
tubulados por incubación con Sar1 H79G o con Sar1 en presencia de análogos de GTP no hidrolizables
tales como GMP-PNP y GTPγS [8, 119-122]. Estos datos implican que la secreción de grandes cargas
requiere grandes cantidades o Sar1 estabilizado unido a GTP, lo cual es consistente con la función
propuesta de Sec12 en la secreción de colágeno descrita anteriormente (Fig. 3) [99]. Mediante el uso de
la tomografía crioelectrónica y el promediado del subtomograma, Zanetti et al. demostraron que las
vesículas gigantes unilamelares incubadas con Sec12, Sar1, Sec23 / Sec24, Sec13 / Sec31 y GMP-PNP
generan túbulos recubiertos con proteínas COPII. La disposición de las capas interna y externa en estos
túbulos está conectada estructuralmente, pero es distinta de la de las vesículas COPII convencionales
informadas previamente [10, 116, 123-127]. Cabe señalar que la arquitectura de ensamblaje de estos
túbulos es bastante diferente de los túbulos Sec13 / 31 ensamblados in vitro descritos anteriormente
[117]. Aunque aún no se ha demostrado, estos túbulos pueden estar involucrados en el transporte de
grandes cargas, y es Es interesante especular que la tubulación depende de la monoubiquitilación de
Sec31. En este sentido, un estudio reciente de S. cerevisiae mostró que la función de Sec13 en la
formación de vesículas COPII puede ser la de rigidizar el complejo externo COPII para aumentar la
capacidad de doblar la membrana [128]. Además, se ha informado que la fosforilación de Sec31 por la
caseína quinasa II reduce su afinidad por Sec23, aunque su implicación en la secreción de grandes cargas
no está clara [129]. Se espera que el trabajo futuro revele si estas modificaciones de los componentes
básicos de COPII son (en parte) responsables de la formación de transportistas de cargas de gran
tamaño [130, 131]. Ir a: Perspectivas futuras Los estudios recientes sobre enfermedades humanas y
modelos animales han revelado que COPII los componentes son cruciales, no solo para la exportación de
carga convencional, sino también para la exportación de grandes proteínas y complejos proteicos desde
el ER. Por otra parte, varios factores específicamente involucrados en la secreción de grandes proteínas
se han identificado y se ha descubierto que modifican el proceso de formación de vesículas
dependientes de COPII para permitirles secretar a partir del ER. Sin embargo, varios problemas aún
deben abordarse. Un problema importante que queda por resolver es la identificación de los portadores
responsables del transporte de grandes proteínas. La existencia de megacarriers o túbulos, que podrían
acomodar grandes cargas, se ha propuesto como se describe en esta revisión, pero las entidades exactas
y los mecanismos para formar estos contenedores no se comprenden completamente. Un segundo
problema es la relación entre los factores especializados identificados. . Se informa que el complejo
cTAGE5 / TANGO1 y el eje sly1-syntaxin18 son bastante específicos para el transporte de colágeno VII,
pero no para el colágeno I. Sin embargo, CUL3-KLHL12 y Sedlin han sido implicados en el transporte de
colágeno I. Ya sea que puedan cooperar para llevar a cabo la gran exportación de carga o que
individualmente apliquen distintos mecanismos requiere una mayor investigación. Aunque todavía hay
asuntos pendientes, la identificación reciente de factores especializados ciertamente nos ha
proporcionado pistas para resolver estos problemas. Acceda a: Agradecimientos Agradecemos a los
miembros del Laboratorio de Katada por las valiosas discusiones. Este trabajo fue apoyado en parte por
becas de investigación del Ministerio de Educación, Cultura, Deportes, Ciencia y Tecnología (MEXT) de
Japón (KS y TK) y la Sociedad Japonesa para la Promoción de la Ciencia (JSPS; KS y TK) .Go a:
AbreviaturasCMRD Enfermedad de retensión de ChylomicronCOPII Complejo de proteína de escudo
IICLSD Displasia cráneo-lentículo-sutural CE Matriz extracelular ER Retículo endoplasmático Factor de
intercambio de GUANINA-nucleótidoMIA Actividad inhibitoria de melanomaSMS Síndrome Marinesco-
SjogrenNPC Complejo de poro nuclearTANGO Transporte y Organización GolgiTRAPP Partícula de
proteína TRAnsport.