08 Facteurs Influençant La Fiabilité D'examen Cytobactériologique Des Urines

INSTITUT NATIONALE DE FORMATION SUPÉRIEURE
PARAMÉDICALE
DE BISKRA
MÉMOIRE PROFESSIONNELLE DE FIN D’ÉTUDE
LABORANTINE DE SANTE PUBLIQUE
Facteurs influençant la fiabilité

d’examen cytobactériologique des
urines
Enquête réalisé au laboratoire d’EPH TOUGGOURT.
Présenté par :
 HADJADJ ROUFAIDA.
 GNOUAI OUMELKHIR.
Sous la direction de :
Dr.AIDANE KHAOULA.
Pharmacienne Microbiologiste.
Promotion: 2014/2017
Nous tenons à remercier par le biais de ce mémoire en premier lieu le bon Dieu, le tout
puissant d’avoir éclairé notre vie, renforcé notre courage et notre volonté pour achever à
bien et en bonne santé le parcours de nos études. Nous exprimons notre profonde
gratitude et nos sincères remerciements au:
Docteur AIDANE KHAOULA Pharmacienne Microbiologiste , notre promotrice dirigé

ce mémoire ; nous la remercions vivement pour tous ses conseils pertinents qui nous ont
permis de mener à terme ce travail.
Et aussi chef d’option
Mr. MRIDJA ABD ALHAMIDE pour sa compétence et ses orientations.
Sans oublier :
La directrice de l’institut nationale de la formation supérieure Paramédicale BISKRA

AMI ALI Meriem pour son soutien moral et matériel ainsi que Mme HAMZAOUI radia
directrice des études et des stages. Nous remercions également tous les étudiants au
niveau de l’INFSPM de BISKRA et remercier tous les membres de notre juré d’avoir
examiné notre travail.
Mes remerciement vont également à toutes les personnes et amis qui ont consacré de
leur temps pour nous faire part de leurs suggestion et conseils sur des points précis tout au
long de cette études en particulier Mr : ALI et BOUBEKER GNOUAI sans oublier le corps
enseignant d’institue paramédicale qui a participer à notre formation.
Ainsi que tous les responsables et les personnels d’EPH de Touggourt.
Nos respects
Merci
Sommaire
Remerciement
Abréviations
Introduction
Choix du thème
Problématique
Hypothèse
Objectif
Définition des concepts
Partie théorique ..................................................................................................... 08
Chapitre I
Chapitre I : Généralité sur les infections urinaires ............................................ 09
I-1- Rappel sur l’arbre urinai1 ............................................................................. 11
I-2- L’urine : .......................................................................................................... 13
I-2-1- Définition :................................................................................................... 13
I-2-2-Composition : ................................................................................................ 13
I-3- L’infection urinaire : ..................................................................................... 13
I-3-1- : Définition : ................................................................................................. 13
I-3-2-Facteurs favorisants l’infection urinaire : ................................................. 13
I-3-3Etiologies bactériennes : .............................................................................. 14
I-3-4- La physiopathologie de l’infection urinaire : ........................................... 14
I-4- Classifications de l’infection urinaire ......................................................... 14
I-4-1- Les infections urinaires basses : ................................................................. 14
I-4-2- Les infections urinaires hautes :................................................................ 14
Chapitre II : Diagnostic d’une infection urinaire
II.1. Diagnostic clinique: ....................................................................................... 16
II-1-1- Cystite: .................................................................................................. 16
II-1-2-Pyélonéphrite : ....................................................................................... 16
II-1-3-Prostatite : ............................................................................................. 16
a. Prostatite aiguë ....................................................................................... 16
b. La prostatite chronique ......................................................................... 16
II-1-4-Abcès du rein ........................................................................................ 17
II.2. Diagnostic bactériologique : ........................................................................ 17
II-2-1-Généralité ....................................................................................... 17
II.2.1.1.Phase pré-analytique ................................................................... 17
II-2-1-2- Phase analytique : .................................................................................. 18
II-2-1-2-1 Examen cytobactériologique des urines (ECBU): ......................... 18
 Définition .................................................................................................. 18
 Contexte clinique ...................................................................................... 18

a) Tuberculose : ............................................................................................. 18
b) Patients immunodéprimés ....................................................................... 18
c) Prostatite :.................................................................................................. 19
 Protocole expérimental :........................................................................... 20
 Schéma du protocole expérimental ......................................................... 20

1) Etude des caractères macroscopiques : .................................................. 21
Tableau : les différents aspects des urines à l’état normal et à l’état pathologique ... 21
2) L’examen chimique : ................................................................................ 22
Les Bandelettes urinaire .................................................................... 22
Technique d’utilisation des bandelettes urinaires : ........................................... 22
3) Examen cytobactériologique ................................................................... 23
a) Examen cytologique : ......................................................................... 23
(1) Détermination de la leucocyturie ................................................. 23
Détermination du taux d'hématies ...................................................... 24
 Cellules épithéliales .................................................................................. 24
 Cylindre : ................................................................................................... 24
 Cristaux : ................................................................................................... 24
 Les micro-organismes ............................................................................... 25
b) Examen bactériologique : .................................................................. 25
 Choix des milieux ...................................................................................... 25
 Milieux non chromogènes ............................................................................... 25
 Milieux chromogènes ...................................................................................... 25
 Autres milieux ................................................................................................. 26
 Modes d'ensemencement : ......................................................................... 27
1) Méthode originale de Kass : ...................................................................... 27
2) Méthode simplifiée de Véron : ................................................................. 27
3) Méthode de l'anse calibrée : ..................................................................... 27
4) Méthode de la lame immergée : ............................................................... 27
. Technique des 4 séries de stries ...................................................................... 27

 L’examen microscopique de la bactérie : ............................................. 28
 Examen à l’état frais :............................................................................. 28
 Préparation :............................................................................................ 28
A. partir d’une culture en milieu liquide : ........................................................ 28.
B. partir d’une culture sur milieu solide : ........................................................ 28
 Incubation des urocultures : ................................................................. 28
 Examen après coloration ......................................................................... 29
a. COLORATIONS SIMPLES : (Coloration au bleu de Méthylène) . 29
Résultats : ................................................................................................. 29
b. Coloration différentielle de Gram :.................................................... 29
 Interprétation : .......................................................................................... 29
Chapitre III :Les modalités du prélèvement urinaire ....................................... 31
Les modalités du prélèvement urinaire : ............................................................ 32
I. Les conditions du prélèvement ........................................................ 32

Les modalités du prélèvement urinaire : ........................................................... 32
II. Les conditions du prélèvement : ....................................................... 32

 Le personnel réalisant l’acte de prélèvement (eu milieu hospitalier) .. 33
 Le degré de concentration des urines (les urines du matin) ................. 33
 Le prélèvement doit effectuer avant toute antibiothérapie .................. 34
III) Recueil des urines ..................................................................................... 35
1) Réalisation d’un prélèvement urinaire pour examen Cytobactériologique
des urines (ECBU)……………………………………………………………… 35
I. Préparation de matériel .................................................................................. 35

II. Réalisation de soin .......................................................................................... 35
 Personne autonome : ............................................................................... 35
 Prélèvement effectue par l’infermière : ................................................ 36
 Prélèvement chez un patient incontinent :............................................. 37
a)Matériel spécifique : .......................................................................................... 37
b) Procédure : ........................................................................................................ 37
Précautions avant le prélèvement ........................................................... 37
MATERIEL : 38
1. La technique du milieu du jet : ..................................................................... 39
2. Sachet collecteur ........................................................................................... 40
3. La ponction sus pubienne :............................................................................. 40
4. Sondage vésical ou Cathétérisme vésical : ................................................... 41
Le sondage à demeure avec un système ouvert : .............................................. 41
 Le sondage à demeure avec système clos : ........................... 41
 Le sondage urinaire intermittant : ........................................ 41
 Cathétérisme urétéral : ......................................................... 42
 Cathétérisme sus pubien : ...................................................... 42
 Etui pénien : ............................................................................ 42
 Cas particulier de la prostatite : ............................................ 42
2) Préconisations pour le prélèvement : ................................................................... 42
 Conservation des urines ............................................................................... 43
Transport : ................................................................................................................. 44
Chapitre VI: Présentation de la pratique d’ECBU
VI. Partie expérimentale: .......................................................................................... 48
I. Présentation de la pratique d’ECBU : .................................................................. 48
Prélèvement : .............................................................................................................. 48
1er jour : ....................................................................................................................... 48
I- .. Examen macroscopique : noter 48
II. Examen microscopique : 49
-La Bandelette Urinaire : ........................................................................................... 49
La Culture: ................................................................................................................. 49
2eme jour : ..................................................................................................................... 50
I. Lecture des cultures : ......................................................................................... 50
Aspect des colonies :................................................................................................... 51
La galerie biochimique : ............................................................................................ 51
Utilisation de Gélose : TSI (Trois sucre initiales) ................................................... 51
Catalase : ……………………………………………………………………………...52
Oxydase : ..................................................................................................................... 52
Coagulase : .................................................................................................................. 53
II. Antibiogramme : ................................................................................ 53
ème
3 jour : ..................................................................................................................... 53
Chapitre VII Identification des facteurs influençant la fiabilité d’ECBU .......... 54
Méthodologie de l’enquête : ...................................................................................... 55
1- L’objectif de l’étude : ......................................................................................... 55
2- Méthodologie d’enquête: ....................................................................................... 55
2-1- Lieu d’enquête : .................................................................................................. 55
2-2- Populations ciblées : .......................................................................................... 55
2-3- L’échantillonnage : ............................................................................................ 55
2-4-Méthode d’enquête : .......................................................................................... 55
I. Questionnaire (pour les personnelle du laboratoire) ................................. 56
Question N01 : Donc recevez-vous des prélèvements urinaires non conformes ? ........................... 57
Diagramme circulaire représentas les résultats de la question 01…………………………57
Question N02:Y a-t-il une importance de la communication entre le laborantin et le
patient dans la conformité du prélèvement d’urine ?..........................................................57
Diagramme circulaire représentas les résultats de la question 02………………………...58
Question N03 : Est-ce-que vous expliquez aux malades les conditions de prélèvement
urinaire ?......................................................................................................................58
Diagramme circulaire représentas les résultats de la question 03 ................................... 59
Question N04 : L’explication de la procédure du recueil des urines. Est-elle
indispensable ?........................................................................................................................ 59
Diagramme circulaire représentas les résultats de la question 04 ……………………….. 59
Question N05 : Ou pensez-vous que le prélèvement urinaire doit se faire ?..............……..60
Diagramme circulaire représentas les résultats de la question 05…………………………60
Question N06 : Les urines sont déposées au niveau de réception : ………………………..60
Diagramme circulaire représentas les résultats de la question 06………………………..61
Question N07 : Le recueil des urines peut être effectué sur un flacon non stérile ? .... ….61
Diagramme circulaire représentas les résultats de la question 07 ......................................62
Question N08 : La conservation des échantillons des urines doivent être à la température
de 4°C?.................................................................................................. ............................... …62
Question N09 : Quels produits de nettoyage doivent être utilisé avant de réaliser un
prélèvement urinaire ?………………………………………………………………………63
Diagramme circulaire représentas les résultats de la question 09 ................................. ...63
Question N10 : les urines analysées sont collectées ?............................................................63
Diagramme circulaire représentas les résultats de la question 10…………………….....64
Question N11 : Le taux de prélèvement urinaire non confirmé est ?.................................64
Diagramme circulaire représentas les résultats de la question 11 ……………………….64
Question N12 :
A votre avis, quelles sont les erreurs effectuées par le patient pendant le prélèvement
urinaire ? .......................................................................................................................... …65
Question N13 : est-ce-que ces erreurs affectent la qualité de prélèvement urinaire et le
résultat d’ECBU ? ............................................................................................................. ..65
Diagramme circulaire représentas les résultats de la question 13……………………….66
Question N14:
Quelles sont vos propositions pour améliorer la réalisation d’ECBU ! .......................... 66
Analyse des résultats :……………………………………………………………………….66
II. Questionnaire (pour les patients) .................................................................................. 67
Q N °01 :Avez-vous un problème urinaire ? ..................................................................... 67
Diagramme N°01 : récapitulatif selon les patients du problème urinaire ....................... 68
Q N°02 :Connaissez-vous les conditions du recueil d'urine ............................................. 68
Diagramme N°02 : récapitulatif selon le respect des patients a la technique de
prélèvement. ......................................................................................................................... 68
Q N° 03 :Est-ce que vous avez conservé les échantillons au (+4°c): ................................ 69
Diagramme N°03 : récapitulatif selon la conservation des échantillons au (+4°C). ...... 69
Q N° 04 : Est-ce que vous avez pris des médicaments avant le prélèvement ? ............... 70
Diagramme N°04 : récapitulatif selon les sujets qui sont au cours d’une prise de
médicament. ......................................................................................................................... 70
Q N°05 : Est-ce que vous avez transporté rapidement des échantillons au
laboratoire ? ......................................................................................................................... 70
Diagramme N°05 : récapitulatif selon la rapidité d’acheminement de prélèvement. ... 71
III. Étude statistique : ......................................................................................................... 71
Tableau N°1 : présentation des résultats ........................................................................... 71
Tableau N°2 : Nombre et pourcentage des prélèvements contaminés : ......................... 73
 Constat : ..................................................................................................... 74
Graphe N°1: le nombre de prélèvements conformes et non conformes ........................ 74
Graphe N° 2: le pourcentage des prélèvements conformes et non conformes. ............. 74
Tableau N°3 : répartition des cas non conformes, qui ont et qui n’ont pas fait un
deuxième prélèvement. ......................................................................................................... 75
 Constat : .................................................................................................... 75
Graphe N°3: le nombre des cas non conforme qui ont fait et qui n’ont pas fait le
deuxième prélèvement .................................................................................................... 75
Graphe N°4: le pourcentage des cas qui ont fait et qui n’ont pas fait un deuxième
prélèvement ..................................................................................................................... 76
Tableau N°4 : répartition des cas qui ont fait un deuxième prélèvement ..................... 76
 Constat : .................................................................................................... 76
Graphe N°5 : le nombre des cultures positives et négatives ……………………………..76
Graphe N° 6: le pourcentage des cultures positives et négatives ………………………..77
Tableau N°5 : répartition des cas positifs et négatifs chez le sexe féminin et masculin..77
 Constat : ..................................................................................................... 77
Graphe N° 7:le nombre des féminins et masculins. .......................................................... 78
Graphe N° 8: le pourcentage des féminins et masculins. .................................................. 78
Graphe N° 9:le nombre des cas positifs et négatifs chez le sexe féminin et masculin…..78
Graphe N° 10: le pourcentage des cas positifs et négatifs chez le sexe féminin .......... 79
Graph N°e 11: le pourcentage des cas positifs et négatifs chez le sexe masculin ........... 79
Synthèse ....................................................................................................................80
Analyse ......................................................................................................................81
Suggestion .................................................................................................................82
Conclusion ................................................................................................................83
Annexes
Annexe I .......................................................................................................... 85-88
Annexe II ............................................................................................................ 89-95
Annexes III ......................................................................................................... 95-99
Bibliographie
ECBU : Examen GN : Gélose nutritif.
Cytobactériologique des Urines.
GR : Globule Rouge.
E.P.H : Etablissement Public
Hospitalier. Gram + : Gram positif.
SIDA : Syndrome Gram - : Gram négatif.

d'immunodéficience acquise BM : Bleu de Méthylène.
PH : Potentiel d’ion
d’hydrogène. H: Heure.
VS : Vitesse de MH : Muller Hinton.

sédimentation
S: Sensible.
UFC : Unité Formant Colonie.
R: Résistant.
SHA : Solution Hydro
ATB : Antibiogramme.
Alcoolique.
C° : Centigrade.
BCP : Bromocresol purple.
C: Cylindre.
BGA : Bouillon glycosé agar.
Co2 : Dioxyde De Carbone.
TSI : Trois Sucre Initiale.
GS : Gélose au Sang. H2s : Sulfure D'hydrogène
.
Toute analyse eu biologie médicale notamment la bactériologie passe par
03phases :
-Une phase pré-analytique (prescription .préparation du malade, prélèvement,

étiquetage, transporte, conservation).
-Une phase analytique (validation, technique est analytique).
-Une phase post –analytique (validation biologique, interprétation, conclusion).
La phase pré –analytique est fondamentale le dans la maitrise de la qualité d’un

examen biologique.
Elle est qualifiée par le maillon faible d’un analyse médicale .Sa maitrise n’implique
pas que le laboratoire analyses médicales, mais plutôt plusieurs auteurs à savoir le
prescripteur, le préleveur, le patient, le biologiste, le laborantin……..etc.
Une grande densité de prélèvement reçu ou niveau de laboratoire de bactériologie

notamment les urines destinées à une ECB, et qui constitue jusqu'à 50% de l’activité
d’un de laboratoire de bactériologie.
Il est prémondial d’assurer une bonne qualité de prélèvement urinaire afin d’abrutir a
un diagnostic correcte et donc une prise en charge a adéquate et ciblée du malade.
Donc il est très important d’explication ou malade les bonnes conditions du recueil
des urines comme transport et conservation et ce la pour faire face Conformités
rencontrées lors de la réception du prélèvement.
Définition des concepts de la recherche :
1-Facteur : Elément jouant un rôle dans le déclenchement ou l’évolution d’un

phénomène, (Élément qui concourt à un résultant une couse).
2-Influence : Action, généralement continue, qu'exerce quelque chose sur quelque

chose ou sur quelqu'un.
3- Fiabilité : Probabilité pour qu'une pièce primaire, un dispositif ou un équipement

complet soit utilisé sans défaillance pendant une période de temps déterminée, dans
des conditions opérationnelles spécifiées.
4-ECBU : Examen cytobactériologique des urines consiste à détecté la présence d’un

ou plusieurs bactéries ou niveau cadre urinaires et une éventuelle réaction
inflammatoire en réponse è l’infection bactériologie.
Durant notre formation théorique et pratique au sein de l’institut para médicale.
Nous avons rassemblé les informations et les données qui nous ont permis de
développer et améliorer notre pratique durant la durée de formation, c’est pour cela
nous avons choisi le thème (Facteurs influençants la fiabilité d’examen
cytobactériologique des urines) comme le titre certifie :
 La fréquence et la gravité de ses complications d’ailleurs à elles

constituer les 2éme motifs la consultation médicale après la infection
respiratoire.
 Le principal motif d’explication microbiologique, l’ECBU peut
représenter jusqu'à 50% du laboratoire de microbiologie .Il permet
diagnostic de certitude d’une infection urinaire d’un l’importance élevé.
 Les non-conformités rencontrées ou leur de la réception des
prélèvements urinaires destinés à un examen cytobactériologique.
Durant notre stage qui s’est étale du Avril 2017 au Mai 2017 au niveau de
laboratoire de la bactériologie de l’E.P.H de SLIMANE AIMIRATE- TOUGGOURT
nous avons remarqué que certains prélèvements urinaires reçus ou laboratoire sont
non conforme et donc refusés à leur réception, et cela qu’après la mise en rote du
prélèvement, ce que nous amène à poser la question suivante :
 Quels sont les causes de non conformité de certains

Prélèvements urinaires destinés au laboratoire pour un examen
cytobactériologique des urines ?
Le problème peur être lie soit :
 Le matériel utilisé pond du recueil des urines (pots stérile, sachets
collecteurs, sondes urinaires).
 Au moment du prélèvement (première urine du matrice des
l’apport loin des symptômes, eu lors de toute traitement
antibiotique).
 Le respect des conditions d’asepsie rigoureuses leur le recueil des
urines toilette intime de la région urogénitale.
 La technique de recueil des urines le non respect les conditions de
transport, ainsi que la conservation du prélèvement (délai,
température).
Vus le problème posé, et les hypothèses suggérées nous avons comme objectifs :
 Interprétation un ECBU et donc distinguer autre une colonisation et une réelle
infection bactériologie afin d’éviter toute ATB inutile.
 Faire apprendre ou patients, infirmier, laborantin…..,, comment recueillir un
échantillonne d’urine destiné à une analyse bactériologique de façon conforme
à la bonne pratique des examens de laboratoire.
Partie théorique
Page 8
Chapitre I Généralité sur les infections urinaires
Chapitre I :
Généralité sur les infections urinaires
Page 9
Les infections des voies urinaires sont définies par la présence d’un nombre
significatif de bactéries qui se développent au niveau des voies excrétrices urinaires
hautes ou basses.
Il existe trois types d’infections urinaires selon l’organe de l’appareil urinaire
qu’elle touche:
• La cystite ou l’infection de la paroi vésicale avec pullulation bactérienne dans
les urines.
• La pyélonéphrite ou infection du parenchyme rénal.
• La prostatite ou infection de la prostate.
Une autre situation infectieuse urinaire est constituée par la bactériurie
asymptomatique ou la colonisation, ainsi dénommée en l’absence de signes cliniques
urinaires d’orientation, elle correspond à l’une des 3 infections précédentes.
L’infection est dite « simple » en l’absence d’anomalies urologiques décelables ou
jouant à l’évidence un rôle dans sa survenue et / ou sa présentation.
Elle est dite « compliquée » (à ne pas confondre avec une infection urinaire
grave ou sévère) lorsqu’une anomalie urologique haute ou basse entraîne une stase
urinaire ou lorsqu’un corps étranger tel un calcul même minime constitue un gîte
bactérien.
Les infections urinaires peuvent être compliquées également par une maladie
générale : insuffisance rénale, maladie de système notamment diabète ou maladie
immunosuppressive (cancer, SIDA), ou traitement immunosuppressif au long cours.
Sont aussi considérées comme compliquées la pyélonéphrite aiguë survenant chez la
femme enceinte et d’une façon plus générale les pyélonéphrites aiguës de l’homme.
Page 10
I-1- Rappel sur l’arbre urinaire :
L’appareil urinaire s’étend des reins au méat urétral

- Au niveau du rein, des papilles calicielles s’opposent au reflux intra rénal
- Des mouvements péristaltiques urétéraux favorisent l’écoulement de l’urine du
rein vers la vessie.
- Un système anti reflux au niveau de la jonction urétéro-vésicale évite le reflux
des urines vers le rein lors de la miction.
- La vessie s’évacue par l’urètre.
- Un double sphincter existe au niveau de la jonction urétro-vésicale et assure la
continence :
 Sphincter lisse : à commande réflexe.
 Sphincter strié : à commande volontaire.
Schéma de l’arbre urinaire
Page 11
Schéma de l’appareil uro-génital féminin

(Coupe sagittale)
Schéma de l’appareil uro-génital masculin

(coupe sagittale)
Page 12
I-2- L’urine :
I-2-1- Définition :
L’urine est un liquide jaune ambré, d’odeur spéciale, de PH en générale acide,

de densité voisine de 1.016 à 1.020, la quantité émise par vingt -quatre heures est en
moyenne de 1500 cm3.
Les urines doivent être jaunes pailles, limpides au moment de l’émission mais
elles peuvent se troubler au moment du stockage.
I-2-2-Composition :
Dans un litre d’urines, il y a environ 950g d’eau le reste étant des déchets
azotés de la créatinine, des sels minéraux, des chlorures et des phosphates.
I-3- L’infection urinaire :
I-3-1- : Définition :
L’infection urinaire se définit par la présence de bactéries dans les urines qui
normalement sont stériles. Elle se fait généralement par voie ascendante, se limite à
la vessie, entraînant une leucocyturie et une cystite. L’infection peut gagner les parties
hautes du tractus urinaire réalisant une pyélonéphrite infectieuse.
I-3-2-Facteurs favorisants l’infection urinaire :
- Les malformations de l’appareil urinaire.

- Les causes acquises : toute pathologie perturbant l’écoulement des urines,
tumeurs gynécologiques, lithiases urinaires….
- Les causes anatomiques propres à la femme : la brièveté du canal urétrale
permettant aux bactéries commensales de l’urètre d’atteindre facilement la
vessie.
- Le pH urétral : une augmentation du pH urétral peut favoriser la multiplication
des bactéries dans l’urètre et engendrer une infection.
Page 13
I-3-3étiologies bactériennes :
Les germes les plus fréquemment incriminés dans les infections urinaires
sont : Escherichia coli (80%), qui vit normalement dans le colon, proteus mirabilis,
Klebsielle, Enterococcus faecalis, Staphylocoque, pseudomonas aeruginosa
(essentiellement en milieu hospitalier).
I-3-4- la physiopathologie de l’infection urinaire :
1. La voie ascendante : survient quand un microorganisme habituellement une

bactérie prévenant du tube digestif, pénètre dans l’urètre antérieur puis dans la
vessie et commence à se multiplier, à l’occasion d’un petit reflux (urétrite),
puis remontre dans la vessie (cystite) et éventuellement jusqu’au rein
(pyélonéphrite).
2. La voie descendante : lymphatique ou sanguine, une bactériémie transitoire
peut être à l’origine des bactéries qui se développent dans l’appareil urinaire.
3. La voie iatrogène : toute exploration urologique ou sondage est susceptible
d’introduire des bactéries dans les voies urinaires.
4. I-4- classifications de l’infection urinaire :
Sur le plan clinique, on peut distinguer deux grandes classes d’infection de

l’appareil urinaire.
I-4-1- Les infections urinaires basses :
Représentées essentiellement par la cystite aigue, c’est une infection

strictement vésicale, qui associée dysurie, pollakiurie et brûlures mictionnelles, sans
fièvre ni douleur lombaire.
I-4-2- Les infections urinaires hautes :
La pyélonéphrite aigue ou chronique :c’est l’inflammation bactérienne du

parenchyme rénal, précédée ou non de signes de cystite associée à une fièvre élevée à
39-40 °c avec frissons et douleurs lombaires uni ou bilatérales.
Page 14
Chapitre II Diagnostic des infections urinaires
Chapitre II :
Diagnostic des infections urinaires
Page 15
II- Diagnostic d’une infection urinaire
II.1. Diagnostic clinique:
II-1-1- Cystite:
C’est l’infection de la vessie, elle se manifeste par un ou plusieurs des signes
suivants:
- Dysurie habituellement associée à une pollakiurie.
- Un besoin impérieux de miction.
- Des brûlures mictionnelles.
- Une douleur supra-pubienne.
La cystite isolée ne s’associe ni à de la fièvre ni à des douleurs lombaires.
II-1-2-Pyélonéphrite :
Le syndrome infectieux signe l’atteinte parenchymateuse. La fièvre peut
s’accompagner de frissons évocateurs d’une bactériémie.
Les douleurs lombaires et/ ou abdominales orientent vers une pyélonéphrite aiguë.
Ces lombalgies sont en règle générale unilatérales à irradiation descendante
vers le pubis et les organes génitaux externes, elles peuvent s’accompagner de signes
digestifs tels que nausées et vomissements. A l’examen les fosses lombaires sont
souvent empâtées.
II-1-3-Prostatite :
a. Prostatite aiguë
Comme pour la pyélonéphrite aigue l’atteinte du parenchyme prostatique
s’accompagne de fièvre et de frissons.
La prostate est très douloureuse, tendue associant un ou plusieurs signes cliniques :
- Pollakiurie.
- Rétention aiguë d’urines.
- Parfois tableau de septicémie.
b. La prostatite chronique :
Elle est souvent pauci symptomatique, on peut trouver :
- - Une douleur périnéale.
- - Une dysurie.
- - Des brûlures mictionnelles.
Page 16
- - Des douleurs pelviennes.

- - Des douleurs scrotales.
- - Une éjaculation douloureuse.
- - Une hémospermie.
Elle est souvent à l’origine d’infection urinaire ou bactérienne asymptomatique
récidivante chez l’homme.
II-1-4-Abcès du rein :
C’est une maladie rare et de pronostic grave sans traitement. Son diagnostic
est soupçonné sur la clinique, (état général altéré, fièvre prolongée, frisson, douleur
lombaire unilatérale par la palpation) et la biologie (Hyperleucocytose, VS accélérée,
ECBU négatif). Il est confirmé par l’imagerie (Echographie, UIV, angiographie du
rein). L’abcès du rein est consécutif à une bactériémie ou à une pyélonéphrite non ou
mal traitée.
II.2. Diagnostic bactériologique :
II-2-1-Généralité :
II.2.1.1.Phase pré-analytique :
La réalisation proprement dite d’un examen bactériologique est précédée d’une phase
pré-analytique qui comporte plusieurs étapes séquentielles :
1- La prescription de l’analyse .
2- préparation du malade pour le prélèvement .
3- Le geste appelé « prélèvement », destiné à obtenir un échantillon biologique.
4-Le conditionnement et le transport de l’échantillon vers laboratoire d’analyse.
5-Le contrôle de la qualité de l’échantillon à l’arrivée au laboratoire d’analyse.
Le prélèvement à pour but de recueillir un échantillon d’urine aussi identique
que possible à l’urine vésicale. Tout risque de contamination par des cellules ou des
bactéries d’une autre origine (vaginale ou rectale) doit donc être évité.
Les conditions de prélèvement jouent donc un rôle essentiel dans la valeur des
résultats fournis par l’examen cytobactériologique.
Ces conditions varient avec l’âge et le sexe du malade.
1ère urine du matin (ou après 3 à4 h après stockassions dons la vessie)
récupérer de manière aseptique l’urine de jet, « à la volée », après un lavage
Page 17
hygiénique des mains et des organes génitaux externes au savon doux, puis rinçage à
l’eau ou par un antiseptique non agressif  urine à mi – jet (milieu du jet).
II-2-1-2- Phase analytique :
II-2-1-2-1 Examen cytobactériologique des urines (ECBU):
 Définition :
L’examen cytobactériologique des urines (ECBU) consiste en un examen direct de
l’urine au microscope et en une mise en culture (uro-culture) afin de rechercher,
identifier et dénombrer la présence de germes.
 Contexte clinique :
a) Tuberculose :
Toute leucocyturie sans bactériurie doit faire évoquer une tuberculose rénale. En
fonction du contexte, une recherche de mycobactérie sera réalisée sur urines
préalablement décontaminées 3 jours de suite (voir le chapitre
« M ycobactéries »).
b) Patients immunodéprimés
La survenue d'une cystite hémorragique chez un patient immunodéprimé ou un
patient âgé ou un patient ayant subi une intervention urologique doit faire évoquer une
infection à Corynebacterium urealyticum responsable de cystites dites « incrustantes».
Cette suspicion pourra être confortée par la présence de cristaux type phosphate
ammoniac magnésiens ou d'un pH urinaire alcalin. Les urines devront être
ensemencées sur gélose au sang et l'incubation sera prolongée au moins de 48 heures.
Cette corynébactérie a de plus la particularité d'être multirésistante.
Actinobaculum schaalii est une espèce récemment décrite proche des Actinomyces qui
a été incriminée dans les infections urinaires chez le patient âgé avec des facteurs
urologiques prédisposants (hypertrophie prostatique, cancer, etc.). Ce bacille à Gram
positif, oxydase négative, catalase négative, est de croissance lente ( > 3 jours) sur
gélose enrichie et sous atmosphère anaérobie ou enrichie en CO 2 . Son identification
reste délicate et repose sur les méthodes moléculaires. Les levures poussent
habituellement bien sur les milieux chromogènes en 24 heures.
Page 18
Toutefois, un milieu type Sabouraud ou chromogène pour levure sera ensemencé en

présence de levures à l'examen direct, et en cas de suspicion clinique d'infection
urinaire avec urine stérile.
c) Prostatite :
Les prélèvements selon la méthode de Meares et Stamey se font en recueillant 3
échantillons d'urines:
• 1 ère échantillon = 1 ml d'urines du premier jet ;
• 2ème échantillon = urines du milieu du jet ; on pratique alors un massage prostatique ;
• 3 e échantillon = urines du premier jet après massage. En cas de prostatite, il y a 10
fois plus de bactéries dans le 3 e échantillon que dans les deux autres. Pour d'autres,
l'examen bactériologique des urines après massage prostatique est déconseillé, en
raison de la douleur qu'il provoque et du risque de dissémination bactérienne, le
diagnostic sera réalisé sur un simple ECBU.
Page 19
 Protocole expérimental :
 Schéma du protocole expérimental
Echantillon d’urine
Etude des caractères macroscopique
aspect, couleur, odeur
Examen chimique Examen microscopique Examen bactériologique
Culture
Examen cytologique Coloration Coloration de
simple Gram
A l’état frais
Incubation à 37°C pendent 24h
Lecture
Identification biochimique Antibiogramme
Page 20
1) Etude des caractères macroscopiques :
Les différents caractères des urines dans les deux états normaux et pathologiques
sont présentés dans le Tableau:
Aspect des Etat normal Etat pathologique

urines.
La couleur Jaune plus au moins foncée. - Jaune orange ; maladies fébriles aigues.
- Rouge ; présence de sang ou d’hémoglobine
ou de pigments alimentaires.
- Brun verdâtre ; affection hépatovésiculaire
(présence de pigment biliaires).
-Noir ; anomalie enzymatique congénitale.
-Brun virant au rouge ; après addition
d’alcalin.
-Bleu ; prise du bleu de méthylène ou au
cours de putréfaction intestinales abondantes.
L’odeur « sui generis »difficile à -Acétonique ; diabète.
définir, due à des composés - fétide ; fièvre grave, cancer du rein et de la
volatiles existants à des vessie.
doses très faibles. - particulière ; affection métaboliques
Certains aliments (asperges, héréditaires de l’enfant.
choux, radis) peuvent - De sirop d’érable ; leucinose.
ajouter leur odeur à celle de - De choux bouillis ; tyurosinose.
l’urine. - De pieds en sueur ; acidemie.
- De chat ; la β-méthylcrotonylglycinurie.
La Limpide. -Trouble ; présence de pus.
transparence
La viscosité Légèrement supérieur à -Les caractères de l’urine peuvent être
celle de l’eau et dépend modifiés par la présence de pus, muccopus,
probablement de sa teneur protéines, graisses…etc.
en urée.
Tableau : les différents aspects des urines à l’état normal et à l’état pathologique
Page 21
2) L’examen chimique :
Les Bandelettes urinaire :
Ce sont des Tigettes en plastique surmontées de zones réactives qui changent

de couleur au contact de certains composants de l’urine, elles permettent de réaliser
dans l’unité de soins et/ou au laboratoire une analyse semi-quantitative et qualitative
selon les substances et /ou les résultats recherchés.
-Densité, ph -Eucocytes -Urobilinogène

-Glucose -Bilirubine -Corps cétoniques
-Protéines -Sang -Nitrites
Technique d’utilisation des bandelettes urinaires :
 Recueillir les urines dans un récipient sec et propre.

 Vérifier la date de péremption des bandelettes réactives.
 Effectuer un lavage simple des mains ou effectuer un traitement hygiénique
des mains par frictions avec une solution hydro-alcoolique.
 Mettre les gants non stériles pour se protéger d'éventuelles projections.
 Plonger une bandelette dans les urines.
 Tamponner le bord de la bandelette sur le rebord du récipient pour éliminer
l'excès d'urine.
 Maintenir la bandelette horizontalement pour éviter le mélange des réactifs.
Attendre 1 minute.
 Comparer les résultats obtenus à la réglette comparative.
 Jeter les urines, la bandelette, les gants ; désinfecter le récipient.
 Mettre les gants non stériles pour se protéger d'éventuelles projections.
Risque et complication :
_ Résultats faussés par le non respect des règles de recueil ou de prélèvement.
Surveillance des résultats :
_ PH : en complément d’autres paramètres.
_ Leucocytes : symptôme d'infection urinaire.
_ Nitrite : infection bactérienne des reins ou des voies urinaires.
_ Densité : symptôme d'infection urinaire.
Page 22
_ Glucose : dépistage et contrôle du diabète sucré ou d'une hyperglycémie.

_ Cétone : anomalies du métabolisme, danger de céto-acidose. Témoins d'une
hyperglycémie.
_ Acide ascorbique : avertissement de résultats erronés (sous-estimés) lors de
la détermination duglucose et du sang.
_ Protéine : symptôme d’une maladie des reins et des voies urinaires.
Evaluation de la fonction rénale :insuffisance rénale.
_ Sang : traumatisme urinaire, menstruations, infections graves des reins et
des voies urinaires, urolithiase, soupçon de tumeur des reins ou de la vessie.
_ Bilirubine : lésions du parenchyme hépatique, ictère obstructif (appelé aussi
« extra-hépatique » pour les problèmes d’écoulement des sécrétions biliaires).
_ Urobilinogène : lésions aigues ou chroniques du parenchyme hépatique,
ictère hémolytique, état pathologique du canal intestinal.
3) Examen cytobactériologique :
a) Examen cytologique :
(1) Détermination de la leucocyturie :
En théorie, la technique de choix pour détecter une leucocyturie anormale
est la mesure du taux d'excrétion des leucocytes ou c ompte d'Addis. Le
sujet, au repos, vide sa vessie puis absorbe un grand verre d'eau. On recueille
les urines des 3 heures suivantes. Le compte d'Addis représente le nombre
d'éléments par millilitre multiplié par le volume de la diurèse en millilitre,
pendant 3 heures divisé par 180 minutes. Normalement, il y a moins de 5 000
leucocytes/minutes, et moins de 5 000 hématies/ minutes. Toutefois, en raison
de la lourdeur de sa réalisation, le compte d'Addis (ou hématies
leucocytesminute) reste réservé à la surveillance des néphropathies
interstitielles. En pratique, la numération des leucocytes s'effectue sur un
échantillon d'urine en utilisant un hématimètre ou « cellule » calibrée.
D'abord, on procède à une homogénéisation des urines sur un agitateur. La
numération des éléments figurés se fait dans un hématimètre en verre de
Nageotte, Lemaur, ou Malassez, permettant la numération dans des volumes
respectivement de 50, 40, et 1 mm3. Le résultat est exprimé en hématies et
leucocytes par mm 3, ou par ml. Une urine normale contient moins de 10
leucocytes par mm3. Les cellules ne sont pas toutes d'origine vésicale.
Page 23
L'identification des cellules est possible ; elle sera précisée par l'étude du
culot urinaire. On doit distinguer les lymphocytes et polynucléaires (souvent
altérés et en amas). On rencontre aussi des cellules rondes rénales, des
cellules en raquette de la couche moyenne de l'épithélium vésical, de grandes
cellules à petits noyaux d'origine vaginale.
Détermination du taux d'hématies :

La numération des hématies sera systématiquement réalisée. La présence
d'un taux anormal d'hématies dans un contexte infectieux peut se rencontrer
au cours d'ITU à bactéries lithogènes Proteus mirabilis, Klebsiella spp, ou
Corynebacterium urealyticum.
 Cellules épithéliales :
Il existe quelques cellules épithéliales rénales et vésicales à l'état normal, leur
présence est augmentée en cas de néphropathies tubulo-interstitielles aiguës.
 Cylindre :
Les cylindres sont formés dans la lumière du néphron par précipitation de la
muco-protéine de Tamm-Horsfall sécrétée par ces mêmes cellules pour être éliminées
dans l'urine.
- C. hyalins: normal, sans signification pathologique.
- C. leucocytaires: signe une réaction inflammatoire aiguë du parenchyme
rénal.
- C. épithéliaux: formés des cellules de l'épithélium tubulaire lors d'une
desquamation massive du néphron.
- C. granuleux: agglomérat de débris cellulaires.
- C. cireux: stade ultime de la dégénérescence des cylindres granuleux après
une staseprolongée: en cas d'insuffisance rénale chronique avancée.
 Cristaux :
- l'urine est normalement saturée en sels de calcium, phosphate, acide urique.
- leur présence n'a pas de signification pathologique sauf:
 Acide urique: en cas d'insuffisance rénale aiguë donnant une hyper
uricémie.
Page 24
 Cystine : en cas de cystinurie.

 Les micro-organismes
On notera la présence de bactéries, de levures, de Trichomonas. Un œil exercé voit
des bactéries à partir d’une numération comprise entre 20 000 et 30 000 bactéries/ml.
On réalise alors une coloration de Gram sur un culot de centrifugation et
on précise la morphologie et « le Gram » de la bactérie.
b) Examen bactériologique :
Culture :
 Choix des milieux
La très grande majorité des bactéries responsables d'infections urinaires ne sont
pas exigeantes et sont cultivées sur géloses ordinaires.
 Milieux non chromogènes
Initialement, les milieux les plus usuels étaient adaptés à la croissance des
entérobactéries avec le plus souvent un indicateur de l'attaque du lactose permettant
une différenciation des colonies.
Les milieux les plus utilisés étaient soit non sélectifs – le milieu de CLED, et
milieu lactosé au bromocrésol pourpre –, soit sélectifs – le milieu de MacConkey.
L'utilisation d'un milieu sélectif pour les bactéries à Gram négatif rendait
impératif l'ensemencement d'une gélose adaptée aux bactéries à Gram positif telle
qu'une gélose au sang avec ou sans inhibiteurs type acide nalidixique plus colimycine.
 Milieux chromogènes
Le principe du milieu chromogène est d'utiliser des substrats synthétiques qui sont
des analogues structuraux d'une molécule naturellement clivée par une enzyme
caractéristique d'une espèce bactérienne ou d'un groupe d'espèces bactériennes.
Le substrat clivé acquiert des propriétés chromogéniques et précipite en colorant
la colonie sans diffuser dans la gélose.
La plupart des milieux chromogènes utilisent un jeu de différents substrats
permettant une très bonne différenciation des colonies et une identification
présomptive de la, ou des espèces bactériennes présentes dans l'urine. Le tableau 18.2
indique les enzymes détectées et l'aspect des colonies suivant les différents milieux
commercialisés.
Page 25
Aujourd'hui, les milieux chromogènes, bien que plus onéreux, ont largement
supplanté les milieux non chromogènes en raison de plusieurs avantages.
Ces milieux permettent une discrimination plus finedes colonies et donc une
meilleure sensibilité de détection des urines polymicrobiennes. Ils permettentune
identification directe d'E. coli , Enterrococcus spp. et de Proteus mirabilis, à l'aide de
tests complémentaires simples (indole, état frais) permettant un rendu d'identification
plus rapide au clinicien et une éventuelle adaptation de l'antibiothérapie probabiliste.
Ils permettent une économie substantielle en réactifs et en temps-technicien.
Il est à noter toutefois que, dans de rares cas, ce système d'identification peut être
pris en défaut. Ainsi, par exemple, de rares souches de Citrobacter freundii
indologènes dépourvues de β -D-glucosidases peuvent être identifiées à tort comme E.
coli. Par ailleurs, quelques souches d' Enterobacter spp. Et de Citrobacter spp. Ont
été décrites avec un phénotype de β -D-glucuronidase.
Le microbiologiste, notamment en milieu hospitalier, du fait de la plus grande
diversité des entérobactéries rencontrées, devra donc rester vigilant et bien contrôler
l'adéquation entre l'identification et l'antibiogramme. Un autre risque est représenté
par la possibilité de confondre un entérocoque et un streptocoque du groupe B qui
peut être responsable d'infection urinaire chez la femme enceinte ou le nouveau-né.
Chez ces patients, l'utilisation en parallèle d'une gélose au sang apparaît souhaitable.
 Autres milieux
D'autres milieux seront utilisés en fonction du contexte clinique ou en fonction du
Gram :
- En cas de suspicion de tuberculose, la recherche de M. tuberculosis sera réalisée
sur les milieux adéquats.
- En cas de cystite hémorragique chez des patients immunodéprimés, on
recherchera Corynebacterium urealyticum en ensemençant une gélose au sang et
en prolongeant l'incubation au-delà de 24 heures.
- En présence de bactéries à Gram positif à l'examen direct, une gélose au sang sera
systématiquement ensemencée.
- en présence de germes à l'examen direct et en l'absence de culture en 24 heures,
une recherche d' anaérobies et de germes exigeants sera réalisée en ensemençant
Page 26
une gélose au sang incubée en anaérobiose durant 48 heures et une gélose «

chocolat » sous CO2 durant 48 heures ;
- En présence de levures, un milieu Sabouraud ou un milieu chromogène pour
levures (permettant l'identification présomptive de C. albicans notamment) sera
ensemencé et incubé à 30 °C.
 Modes d'ensemencement :
L'ensemencement doit répondre au double but de dénombrer les bactéries et
d'isoler la ou les bactéries en cause en obtenant des colonies bien distinctes les unes
des autres.
1) Méthode originale de Kass : on fait des dilutions en série de 10 en 10. Un
volume connu de chaque dilution est étalé sur une boîte de Pétri.
2) Méthode simplifiée de Véron : l'urine est diluée au 1/100 e en eau distillée
stérile. On étale 0,1 ml de cette dilution. Une colonie correspond à 1 000
bactéries par millilitre.
3) Méthode de l'anse calibrée : cette méthode est actuellement la plus utilisée.
L'urine est prélevée à l'aide d'une anse de 10 μ l et ensemencée selon une
méthode standardisée qui permet, grâce à un abaque, de convertir l'aspect de la
culture en UFC/ml, et ce sans dénombrement. Cette méthode simple, sans
dilution préalable, permet une numération de 10 3 à 10 6 UFC/ml tout en
permettant l'obtention de colonies isolées.
4) Méthode de la lame immergée : on plonge dans l'urine fraîchement émise
une lame portant des milieux nutritifs, généralement MacConkey et CLED.
Cette méthode permet l'ensemencement des urines au lit du malade. Toutefois,
elle présente le désavantage de ne pas obtenir des colonies isolées pour des
concentrations de 10 6 bactéries par ml et donc nécessite souvent le
réensemencement en isolement de l'urine en cas d'infection.
. Technique des 4 séries de stries

· Tracer sur le fond extérieur de la boite de pétri deux diamètres perpendiculaires
séparant la boite en quatre secteurs.
· Prélever à l'anse (stérile) la suspension ou le bouillon dans le cône stérile.
· Avec la main gauche maintenir entrouverte la boite dans le cône stérile et étaler
Page 27
Le prélèvement par stries très serrées dans une moitié de quadrant (quadrants 1et
2 - Flamber l'anse et laisser refroidir
· Etaler à nouveau le prélèvement par stries serrées dans la moitié correspondante
aux quadrants 2 et 3.
· Flamber l'anse et laisser refroidir.
· Répéter une dernière fois l'étalement en stries serrées dans la moitié
correspondante aux quadrants 3 et 4.
 L’examen microscopique de la bactérie :
L’observation microscopique permet de faire une étude morphologique des
cellules ? d’une espèce bactérienne. Elle comprend :
 Examen à l’état frais :
C’est l’examen microscopique de bactéries vivantes, en milieu liquide. Il permet
d’apprécier leur mobilité (ou immobilité) et leur morphologie.
 Préparation :
A. partir d’une culture en milieu liquide :
Déposer sur une lame propre soit le contenu d’une « anse de platine » soit «
une petite goutte » à l’aide d’une pipette Pasteur. Recouvrir la goutte d’une lamelle.
B. partir d’une culture sur milieu solide :
Déposer une gouttelette de liquide (milieu liquide ou eau) sur la lame. Prélever
une trace de culture à l’anse de platine et l’émulsionner dans le liquide.
Recouvrir d’une lamelle.
- Technique :
1. Flamber l’anse de platine.
2. Déposer une goutte de la suspension bactérienne.
3. Recouvrir d'une lamelle.
 Incubation des urocultures :

La majorité des bactéries des infections urinaires poussent en 18 à 24 heures et, en
dehors de contextes particuliers, il n'y a pas lieu de prolonger l'incubation. Dans
certains cas, bactéries exigeantes, déficientes, ou culture négative, malgré la présence
de bactéries à l'examen direct, il faut savoir adapter le milieu de culture (gélose au
sang ou « chocolat »), et l'atmosphère (anaérobiose et CO 2), et prolonger
l'incubation.
Page 28
 Examen après coloration :

L’examen après coloration permet d’observer des bactéries tuées fixées sur
une lame et ayant subi l’action d’un ou plusieurs colorants. Les colorations,
réalisées sur des frottis sèches et fixes, sont classées en :
· Coloration simple (un seul colorant).
· Coloration différentielle type Gram.
· Colorations spéciales des structures bactériennes (capsules, spors….).
a. COLORATIONS SIMPLES : (Coloration au bleu de Méthylène)
La coloration au bleu de méthylène peut apporter des informations concernant
la morphologie des germes.
Résultats :
Les bactéries sont colorées en bleu sombre. Cette coloration est intéressante
pour l'observation rapide des frottis mais elle permet seulement l'étude de la
morphologie des bactéries.
b. Coloration différentielle de Gram :
C’est la coloration de base en bactériologie qui permet de distinguer les
bactéries en Gram positif et en Gram négatif, cette distinction est fondamentale pour
leur identification.
En effet, le violet de gentiane se fixe sur des composants cytoplasmiques et après
ce temps de coloration, toutes les bactéries sont violettes. Chez les bactéries à Gram
négatif, la paroi, riche en lipides, laisse passer l'alcool (ou le mélange alcool +
acétone) qui décolore le cytoplasme alors que, chez les bactéries à Gram positif, la
paroi constitue une barrière imperméable à l'alcool et le cytoplasme demeure coloré
en violet.
 Interprétation :
C'est une partie très importante de l'ECBU. Elle s'appuie sur : la leucocyturie,
la bactériurie, la nature des espèces en cause et le fait que l'on retrouve un seul ou
plusieurs types de bactéries à la culture.
Page 29
Tableau : Interprétation de l'ECBU
Bactéries /ml Leucocyturie
< 10000/ml >10000/ml
Absence de Pas d’infection urinaire Traitement antibiotique en cours

bactérie infection génitale ; tuberculose ;
urinaire ; prélèvement
défectueux
Contamination ou infection infection traitée par antibiotiques
102<bact< 104 débutante ou par diurèse abondante
Monomicrobien À contrôler Infection urinaire débutante
Prostatite, urétrite Infection sur
sonde
Prélèvement défectueux
Infection urinaire
débutante Infection sur Infection urinaire
terrain particulier ;
> 105  femme enceinte
Monomicrobien  sujet âgé
 sonde
 immunodépression
 À contrôler
102<bact< 104 Souillure probable Souillure ou infection sur sonde

Polymicrobien A contrôlé
< 105  souillure ou infection Infection urinaire probable si

Polymicrobien urinaire anomalies urologiques
 A contrôlé Contamination possible A
contrôler
Page 30
Chapitre III Les modalités du prélèvement urinaire
Chapitre III :
Les modalités du prélèvement urinaire
Page 31
Quelle que soit la méthode de diagnostic utilisée, la qualité du prélèvement

d’urine est essentielle. Ainsi, le respect des procédures de prélèvement est
fondamental pour permettre l’évaluation et le diagnostic.
Les modalités du prélèvement urinaire :
I) Les conditions du prélèvement :
 Expliquer la méthode au patient et s’assurer de sa compréhension ou réaliser le

prélèvement.
 Se laver soigneusement les mains car les germes situées sur la peau causent
une contamination de l’échantillon.
 Après une toilette génito-analesoigneuse au savon liquideordinaireet avec
®
un antiseptique (Dakin dilué, chlorexidine) suivie d’un rinçage à l’eau en évitant la
contamination lors de la miction par la florecommensale qui colonise l’urètre et
la région périnéale, la présence d’antiseptique dans l’échantillon pouvant
inhiber la croissance bactérienne. De plus une fois les urines recueillies dans
un récipient stériles.
 Le patient élimine le premier jet urinaire (10 à 50 ml et non pas quelques
gouttes ; présence du germe à l’extrémité de l’urètre) afin de laver l’urètre
antérieur et de le débarrasser de sa flore commensale.
Il recueille le milieu de la miction (2ème jet) dans un pot stérile ouvert juste
avant le recueil et refermé juste après. La qualité du prélèvement d’urine est
essentielle. Ainsi, le respect des conditions du prélèvement est fondamental pour
permettre un bon diagnostic précis et efficace.
Les modalités du prélèvement urinaire :
II) Les conditions du prélèvement :
 Expliquer au patient les conditions ainsi que la technique du prélèvement urinaire et

s’assurer de sa compréhension.
 Se laver soigneusement les mains car les bactéries de la fleure commensale
sexuelle peuvent contamine l’échantillon.
Page 32
 Après une toilette génitale soigneuse au savon neutre avec un antiseptique (Dakin dilué,
chlorexidine) suivie d’un rinçage à l’eau en évitant la contamination lors de la miction par
la flore commensale qui colonise l’urètre et la région périnéale, la présence d’antiseptique
dans l’échantillon pouvant inhiber la croissance bactérienne. De plus une fois les urines
recueillies dans un récipient stériles,
 Le patient élimine le premier jet urinaire (10 à 50 ml et non pas quelques
gouttes ; présence du germe à l’extrémité de l’urètre) afin de laver l’urètre
antérieur et de le débarrasser de sa flore commensale.
- Il recueille le milieu de la miction (2ème jet) dans un pot stérile ouvert juste
avant le recueil et refermé juste après.
- Cas particulier des prostatites : le recueil de 5 à 10 ml du 1er jet peut être
unitile car le 2éme jet souvent, soit est stérile, soit met en évidence une
bactériurie non significative (<10000 / ml). L’infection urinaire secondaire à
l’infection prostatique n’est pas obligatoire. En cas de rétention d’urine aiguë
fébrile, il faut prélever l’échantillon d’urine au moment où on traite la
rétention par cathétérisme sus-pubien de la vessie.
 Volume minimum nécessaire :>20 ml ; quantité suffisante pour la démarche
d’ECBU.
La cytologie : utilise 10ml d’urines.
Uri-culture : 10ml d’urines.
 Le personnel réalisant l’acte de prélèvement (eu milieu hospitalier) :
. Infirmier(e)s diplômés d’état.
. Technicien(ne)s de laboratoire titulaires du certificat de prélèvement.
. Médecins et Pharmaciens biologistes.
 Le degré de concentration des urines (les urines du matin) :
Idéalement, le prélèvement d’urine devrait intéresser les urines du matin chez
les enfants qui ont acquis la propreté nocturne parce que d’une part, les
bactéries ont le temps de se multiplier toute la nuit dans la vessie et d’autre
part, le jeûne nocturne augmente la concentration des urines. Chez les
nourrissons les urines stagnent peu dans la vessie, car les mictions sont
fréquentes rythmées par la fréquence des biberons. Il a été montré qu’un
apport hydrique avant l’examen peut diminuer le nombre.
Page 33
 Prélever la première urine du matin ou après une rétention de 4 heures

minimum. La figure 1 montrel’évolution des colonies dans la vessie et
l’importance du délai entre les mictions.
Figure :
 Le prélèvement doit effectuer avant toute antibiothérapie :
Une antibiothérapie, même brève, même inefficace peut stériliser les urines
d’authentiques infections urinaires, du fait des fortes concentrations urinaires des
bêta-lactamines, aminosides, sulfamides, quinolones. Ceci souligne le peu d’intérêt
des ECBU sous traitement .
En conclusion, en particulier chez les enfants hospitalisés ou examinés dans des
services d’urgences, il faut privilégier le prélèvement urinaire per-mictionnel. En cas
de difficulté diagnostique et si l’antibiothérapie est considérée comme urgente, il est
souhaitable de recourir au cathétérisme, voire à la ponction sus-pubienne, en fonction
des habitudes et des possibilités des services.
Page 34
III) Recueil des urines :
1) Réalisation d’un prélèvement urinaire pour examen Cytobactériologique des

urines (ECBU) :
I. Préparation de matériel :
 Toilette uro-génitale :
 Bassin propre.
 Gants à usage unique non stériles pour le soignant.
 Un flacon de Bétadine moussante.
 Un gant de toilette propre.
 Une cuvette.
 Une serviette de toilette propre.
 Un méprotec.
 Un sac poubelle.
 Matériel spécifique pour le prélèvement :
 Pot stérile.
 Bétadine.
 Gants à usage unique non stériles pour le soignant.
 Pochette bleue de laboratoire (transport).
 2 Etiquettes patient.
II. Réalisation de soin :

 Personne autonome :
 Explication claire du prélèvement au patient qui le réalise lui-même.
 Lavage simple des mains.
 Toilette uro-génitale à la Bétadine.
- Pour les femmes : de l’avant vers l’arrière, rincer, sécher.
- Pour les hommes : décalotter, nettoyer, rincer, sécher.
 Ouvrir le pot stérile (ne pas toucher l’intérieur).
 Déposer le couvercle (extérieur) sur la table.
 Uriner le premier jet dans les toilettes.
 Stopper la miction.
 Approcher le pot de l’appareil uro-génital.
 Recueillir le deuxième jet.
Page 35
 Refermer le pot.
 Appeler un membre du personnel dès la fin du prélèvement.
 Prélèvement effectue par l’infermière :

 Nettoyage du plan de travail.
 Remplir la cuvette d’eau.
 Installer le patient sur le bassin.
 Enfiler les gants non stériles.
 Toilette uro-génitale à la Bétadine scrub.
 Rinçage.
 Enlever les gants et les jeter dans la poubelle.
 Enfiler gants à usage unique.
 Ouvrir le pot de prélèvement.
 Faire uriner le patient.
 Recueillir le deuxième jet.
 Fermer le pot.
 Réinstaller le patient.
Page 36
 Porter le bassin muni de son couvercle au lave – bassins. (Le ranger

quand le cycle de nettoyage - désinfection est terminé)
 Enlever les gants et les jeter dans la poubelle.
 Etiqueter le pot et la pochette.
 Noter le soin sur la feuille de température.
 Faire parvenir l’ensemble au laboratoire au plus tard dans les 20
minutes qui suivent le prélèvement ou le déposer au réfrigérateur
maximum 24 heures.
 Prélèvement chez un patient incontinent :

 Chez l’homme :
Le principe étant d’éviter un geste invasif (sondage évacuateur), préférer le pénilex.
a)Matériel spécifique :
 Pénilex.
 Sachet vidangeable.
 Porte-sachet.
 Alcool iodé.
 Compresses non stériles.
b) Procédure :
 Toilette uro-génitale (se conformer à la personne autonome).
 Poser le pénilex.
 Adapter le sac à urine vidangeable.
 Indiquer l’heure de pose (Vérifier la présence d’urine toutes les 20
minutes maximum).
 Décontamination du bouchon du sachet vidangeable à l’alcool iodé.
 Recueillir l’urine dans le pot stérile.
 Refermer le bouchon vidangeable et le pot.
 Enlever le pénilex.
 Etiqueter flacon et pochette.
 Spécifier sur la pochette « ECBU + Pénilex ».
Page 37
 Chez la femme :
 Se référer au protocole de sondage vésical clos.
 Sondage à réaliser avec une sonde rigide.
 Patient sonde :
Précautions avant le prélèvement :
Effectuer un lavage hygiénique des mains ou une désinfection (SHA)
avant le prélèvement. Si le prélèvement est effectué lors d’un changement de
sonde, faire le prélèvement sur la nouvelle sonde.
MATERIEL :
 1 flacon de “Bandelettes réactives pour urines”, utilisé pour le
dépistage avant ECBU.
 1 tube stérile à bouchon sécurité vert kaki de 6 ml.
 1 corps de pompe avec sécurité.
 1 aiguille stérile adaptable sur le corps de pompe.
 SHA et savon doux ou lingettes à usage unique.
 Collecteur à aiguilles.
 Solution antiseptique.
 Compresses stériles.
 1 paire de gants non stériles.
 1 bon de demande d’examen.
 Etiquette au nom du patient pour le tube.
Page 38
Il existe plusieurs techniques de prélèvement adaptées à l’âge et à l’état du

malade, mais toutes doivent être soumises aux conditions d’asepsie rigoureuse.
1. La technique du milieu du jet :
Cette technique est simple et réalisée chez des malades autonomes et
coopérants adultes et enfants de plus de deux ans. Elle est réalisée chez l’enfant de
plus de 02 ans et chez l’adulte (homme et femme).
Elle consiste à éliminer le premier jet urinaire (20 ml) qui peut contenir jusqu’à 104
UFC/ml de bactéries provenant de la flore urétrale, le milieu du jet qui correspond à
l’urine vésicale est récupéré dans un pot stérile qui n’est ouvert qu’à la fin de la
toilette sans toucher le bord supérieur du récipient, et après élimination du dernier jet,
le tube est fermé hermétiquement. Chez la femme il faut écarter les grandes lèvres, et
en cas de leucorrhées importantes il faut placer une compresse au niveau de la région
vulvaire, afin d’éviter toute contamination par la fore vaginale.
Page 39
2. Sachet collecteur :
Le collecteur ou la poche à urine est une technique simple et non invasive.
Elle est réservée aux nouveaux nés et nourrissons qui ne font pas de miction à la
demande. Le collecteur d’urine présente une partie adhésive qu’on colle sur la région
périnéale préalablement désinfectée et essuyée afin d’assurer son adhérence et éviter
le contact avec la partie anale. Le collecteur est laissé en place vingt à trente minutes.
Si le nourrisson n’a pas uriné au bout de 30 mn, il faut placer un nouveau collecteur
après une nouvelle toilette ; la miction peut être stimulée en donnant à boire au
nourrisson. À la fin de la miction on retire le collecteur et on le ferme en collant les
parties adhésives entre elles. ‚ Chaque laboratoire doit disposer de fiches techniques
pour expliquer la toilette, la technique du milieu du jet ainsi que celle du sachet
collecteur, car ces deux techniques sont réalisées souvent à la maison par le malade ou
son parent.
3. La ponction sus pubienne :
La ponction sus pubienne permet de récuperer les urines intra vésicale, mais c’est un
acte invasif de pratique peu courante. La ponction de vessie est un acte médical
invasif, réalisée chez les nourrissons fébriles nécessitant une antibiothérapie en
urgence, ainsi que devant des résultats douteux sur plusieurs prélèvements réalisés par
voie basse.
Page 40
Elle est réalisée au moins 4 heures aprés la dernière miction (vessie pleine) afin de
visualiser le globe vésical. Le nourrisson est allongé, les régions sous ombilicale et
sus pubienne sont nettoyées puis badigeonnées d’alcool iodée, le médecin porte des
gants stériles et ponctionne avec une seringue stérile verticalement sur la ligne
médiane en plein matité à un centimètre au dessus de la symphyse pubienne. L’urine
est aspirée, l’aiguille est capuchonnée et le point de ponction est comprimé.
4. Sondage vésical ou Cathétérisme vésical :
C’est une technique invasive indiquée dans des cas particuliers tel que :
Rétention vésicale, Problème d’incontinence chez les personnes âgées et chez la
femme.
Cette technique est à éviter car elle présente des risques d’infections iatrogènes lors de
la pose de la sonde et doit être réalisée dans les conditions d’asepsie rigoureuse.
On distingue différents systèmes de sondage vésical :
 Le sondage à demeure avec un système ouvert :
Le prélèvement est réalisé par ponction au moment de la miction des urines
avec une seringue stérile au niveau de la paroi de la sonde après désinfection et
clampage en aval, le point du prélèvement est obturé par du sparadrap. Ce
prélèvement n’est pas représentatif de l’urine vésicale car les bactéries adhèrent à la
paroi de la sonde et un biofilm se forme autour d’elle. Il est donc préférable de
réaliser le prélèvement au moment du changement de la sonde, si possible.
 Le sondage à demeure avec système clos :
Cette technique est plus representative, car elle s’oppose à
la colonisation par les bactéries grâce aux valves anti retour. Il
existe un site de prélèvement et un site de drainage du collecteur.
L’urine doit être prélevée au niveau du site de prélèvement
sur la tubulure de la poche après sa désinfection avec un
antiseptique. L’urine est recueillie à l’aide d’une seringue stérile.
Pour les deux types de sondage, le prélèvement au niveau
de la poche de collection des urines est proscrit car il y a une
pullulation microbienne importante.
 Le sondage urinaire intermittant :
Il est réalisé uniquement au moment du prélèvement en introduisant une sonde
urinaire dans la vessie. Le recueil de l’urine se fait directement dans un tube stérile.
Page 41
 Cathétérisme urétéral :
Il permet d’avoir les urines du rein gauche ou
droit, après désinfection de l’extrémité de la sonde, on
recueille les urines en demandant au malade en
décubitus latéral de tousser à plusieurs reprises.
 Cathétérisme sus pubien :
Il constitue le seul moyen pour réaliser un
prélèvement quand l’urètre n’est pas accessible ou trop
abîmé, c’est un mode de drainage assez confortable
mais il nécessite un spécialiste pour la technique.
En cas d’urétérostomie et sans sondage, le prélèvement
est réalisé avec un collecteur d’urine après un nettoyage de la stomie urinaire.
 Etui pénien :
Le prélèvement par l’intermédiaire d’un étui pénien est réalisé en cas
d’incontinence sans rétention urinaire, ce système est non traumatisant et
reste confortable pour le malade,il est préféré au sondage pour le sexe masculin. Si le
malade porte déjà un étui pénien il faut l’enlever, réaliser une toilette et placer un
nouvel étui pénien avec un sac vidangeable. L’étui pénien, comme le sac collecteur,
ne doit pas être gardé plus de vingt à 30 minutes. Les urines sont recueillies
directement de l’étui penien, à travers son orifice, vers le pot stérile.
 Cas particulier de la prostatite :
Dans ce cas le prélèvement est réalisé selon la technique de MEARS-

STAMEY. Après une abstinence sexuelle d’au moins 03 jours et après une toilette
soigneuse, on récupère les premières urines et 10ml du milieu du jet. Après arrêt de la
miction, le médecin pratique un massage prostatique et les gouttes du liquide
prostatique tombent directement dans le pot stérile, les trois pots sont étiquetés avant
d’être envoyés au laboratoire.
2) Préconisations pour le prélèvement :
- Uriner ensuite dans le flacon stérile fourni par le laboratoire et le refermer
soigneusement.
- Le prélèvement d’urine doit être individualisé par une étiquette comportant : le
nom et prénom du malade, accompagné du fiche de renseignements sur :
- L’âge.
Page 42
- La technique de prélèvement.
- La date et l’heure de prélèvement.
- Nom et qualité de la personne qui a effectué le prélèvement.
- Les renseignements cliniques.
- Régime alimentaire.
- Thérapeutique antérieure.
Les urines prélevées seront acheminées rapidement possible (< 2 heures) au
laboratoire, si possible dans l’heure qui suit le prélèvement.
Cette précaution est particulièrement indispensable pour la bactériologie
quantitative, la croissance des germes dans l’urine étant variable suivant les
espèces.
 Conservation des urines
De nombreuses études soulignent depuis longtemps l’importance majeure d’un
transport rapide et d’une conservation adaptée pour éviter la multiplication des
bactéries contaminantes .L’objectif étant de limiter la pullulation microbienne, qui
dépend du délai entre le prélèvement et l’ensemencement, de la température de
l’échantillon pendant ce délai et enfin de la rapidité de la multiplication qui varie
ème
selon la nature du micro-organisme. A partir de la 3-4 heure, il existe une différence
de l’ordre de 1 log10 entre les urines laissées à 22°C et les urines placées à 4°C ; en
ème
fonction des espèces, cette différence varie entre 1 et 3 log10 à la 6 heure et > 3 log
ème
10
à la 24 heure (cf. Tableau 1). Au-delà de 12 heures à 4°C, la bactériurie ne sera
pas modifiée, mais les leucocytes peuvent s’altérer et se grouper en amas.D’UFC/ml :

une hydratation excessive peut diminuer le nombre de bactéries par ml en dessous du seuil de
5
10 UFC/ml.
Page 43
Dans l’idéal, les urines recueillies dans un récipient stérile doivent être
ensemencées dans les 20 minutes. Elles ne doivent jamais être conservées plus de 2
heures à température ambiante ou, à défaut, conservées à 4°C pour une durée
maximale de 24 heures. Des milieux de transport contenant de l’acide borique
permettent de conserver les urines pendant 48 heures. Ces délais maximaux et ces
températures incluent les conditions de transport du prélèvement qu’il est donc
important de bien contrôler. Il faut donc noter l’heure du recueil.
Transport :
Le tube est fermé hermétiquement et étiqueté correctement portant nom, prénom et
heure du prélèvement. Le tube doit contenir 10 à 20ml d’urine accompagné d’une
fiche de renseignements qui doit comporter :
• L’identité du malade.
• L’origine du malade hospitalisé ou externe.
• Pathologie existante.
• Notion d’intervention chirurgicale sur l’appareil urinaire.
• Les signes cliniques.
• La prise ou non d’antibiotiques, avec le nom de (ou des)antibiotique(s) et la
posologie ainsi que la durée de prise.
• La technique de prélèvement pratiquée.
Page 44
Ces renseignements jouent un rôle très important et permettent une interprétation

adéquate selon les différents cas qui peuvent se présenter.
Le transport doit être rapide et ne doit pas dépasser trente minutes après la miction. Si
le transport nécessite une à deux heures, l’urine est placée dans de la glace afin
d’éviter les faux positifs car à température ambiante on a une pullulation
bactérienne.
3) résumé : voici des instructions sur la modalité du prélèvement
Pour rechercher les microbes dans l’urine, il faut impérativement un prélèvement
de bonne qualité.
a- Rassembler le matériel nécessaire au prélèvement
- un flacon à prélèvement si possible stérile : flacon à large ouverture fermant
hermétiquement.
- du savon et de l’eau propre.
- quelques compresses stériles (minimum 3) ou des linges propres.
Page 45
Partie pratique
Chapitre VI Présentation de la pratique d’ECBU
Chapitre VI:
Présentation de la pratique d’ECBU
Page 47
VI. Partie expérimentale:

I. Présentation de la pratique d’ECBU :
Pour atteindre notre objectif, nous avons réalisées une étude
cytobactériologique sur un échantillon des urines dans le laboratoire de bactériologie
de l’EPH TOUGGOURT.
Matériel : Lames, lamelles, portoir, microscope, pipettes pasteurs ,Bec bunsen , eau
distillée, le tube de 9ml d'eau physiologique, l'étuve, Eau oxygénée pour le test de
catalase, Disque d’oxydase, Sérum de lapin ou plasma humaine pour le test de
coagulase, Les disques de l'antibiogramme.
Milieux :
Gélose nutritif, Uriselect Chapman, BCP ou MEC-CONKEY, Hecktoen, Muller
Hinton, Gélose au sang, Sabouraud.
Gélose TSI (trois sucres initiales).
Prélèvement :
Le prélèvement étant la première étape, la qualité de sa réalisation conditionne la
fiabilité del’ensemble des résultats de l’analyse.
Un mauvais prélèvement conduit à des résultats erronés.
Recueillir dans un flacon stérile, les urines :
- 1er urine du matin, (à défaut en urgence 3 à 4 de puis la dernière miction).
- avant tout traitement antibiotique.
- après nettoyage, rinçage et séchage par tamponnement du méat urinaire (une toilette
intime soigneuse).
1er jour :
I- Examen macroscopique : noter
 L’aspect : des urines clair, un trouble, présence du dépôt, légèrement
purulente.
 La couleur : jaune pale, ictérique, hématique, blanc châtre, rouge brique,
rose.
Page 48
II. Examen microscopique :

-La Bandelette Urinaire :
La bandelette urinaire sert à dépister : la présence de sang, protéine, l’acétone,
glucose, ph.
 une leucocyturie, leucocyte positive .
 une bactériurie, Nitrite positif .
1. La cytologie : mettre une goutte d'urines entre lame de Mallassez et
lamelle, examiner au Microscope optique à l'objectif 40 Cette
méthode permet de :
 Une Etude qualitative:
 Signaler la présence de GR, de Cellule épithélial et de levure.
 Signaler la présence de bactérie (abondance, morphologie,
agencement).
 Signaler la présence des cristaux (nature biochimique et abondance).
 Signaler la présence éventuelle de trichomonas vaginalis.
 Etude quantitative : déposé à l’aide d’un une pipette pasteur un petit
volume d’urine à analyser entre la cellule Mallassez et la lamelle.
Procédé au dénombrement des leucocytes et hématies contenus dans un volume
de 1mm3.
La Culture:
Une anse calibrée à 10 μl est utilisée pour ensemencer les géloses nutritives et
uriselect.
On prélève verticalement avec l’anse calibrée et par capillarité une goutte d’urine que
l’on ensemence par stries sur la boîte de gélose : une strie centrale est ensemencée
puis perpendiculairement réaliser un isolement de haut en bas de la boite en desserant
légèrement les dernières stires.
Sur gélose BCP, Chapman, hektoen, GS, en fonction de la morphologie de la
bactérie observée à l’examen microscopique et au gram.
Les géloses ensemencées sont incubées à 37 °C pendant 24h en atmosphère
normale ou sous CO2(GS).
Page 49
2eme jour :
I. Lecture des cultures :
- Seuil de leucocyturie retenu : ≥ 104/mL (ou 10/mm3)
- Seuil de bactériurie associé à une leucocyturie significative modifié en tenant
compte de la forme clinique et de l’espèce bactérienne :
 103 UFC/ml pour les cystites aiguës à E. coli et autres entérobactéries
notamment Proteus spp, Klebsiella spp et pour S. saprophyticus.
 >105 UFC/ml pour les cystites à autres bactéries (notamment entérocoque).
 104 UFC/ml pour les pyélonéphrites et prostatites. Dans tous les cas, le
seuil ne peut être opposé à tableau clinique évident.
Niveau 1 : bactéries considérées pathogènes même en cas de bactériurie faible
(≥103UFC/ml) : E coli, Proteus, Klebsiella S saprophyticus.
Niveau 2 : bactéries souvent impliquées (notamment dans les IUN) : entérobactéries
autres que E coli S aureus Entérocoques Corynebacterium urealyticum P aeruginosa.
Niveau 3 : bactéries dont l’implication est peu probable : Staphyloocques à coagulase
négative (≠ S saprophyticus) S agalactiae Aerococcus urinae Pseudomonaceae≠ P
aeruginosa Acinetobacter spp Stenotophomonas maltophilia.
Niveau 4 : espèces appartenant aux flores uréthrales et génitales, à considérer en
général comme des contaminants (streptocoque hémolytiques, Gardnerella vaginalis,
Lactobacillus spp, bacilles corynéformes ≠ Corynebacterium urealyticum.
 Coloration de bleu de méthylène (BM) : cette coloration permet

d’apprécier la morphologie des bactéries.
 Coloration de Gram : c’est une coloration différentielle entre les
bactéries Gram (+) et Gram (-).
Page 50
Aspect des colonies :
Aspect des colonies Germe considéré

jaune opaque, centre légèrement foncé, rose Escherichia coli
bleu translucide, Beige Proteus.
vert avec surface typique et des contours irréguliers. Pseudomonas Aeroginosa.
Bleu toroquoi
petite jaune diamètre environ 0.5mm, Streptococcus Faecalis.
jaune foncé de couleur uniforme, jaune claire Staphylocoque aureus.
jaune pale plus opaque que celle du Streptococcus Staphylocoquecoagulase
Faecalis. négative
La galerie biochimique :
L'indentification biochimique d'une souche bactérienne responsable d'infection
urinaire est établie par l’utilisation de la galerie API 20 E(pour les entérobactéries)
comprend 20 teste biochimique ou par la galerie traditionnelle .
Utilisation de Gélose : TSI (Trois sucre initiales)

Milieu d’identification rapide pour les entérobactéries, il permet de mettre en
évidence la fermentation du lactose ou de glucose (avec ou sans dégagement gazeux),
du saccharose et la production d’hydrogène sulfuré.
Souche test Pente Culot H2S Gaz

Escherichia coli Jaune Jaune (-) (+)
Proteus rouge Rouge (+) (-)
Pseudomonas rouge Rouge (-) (-)
aeruginosa
Page 51
Lecture :
Fermentation du glucose :Culot rouge: Glucose (-).
Culotjaune: Glucose (+).
Fermentation du lactose : Pente rouge : Lactose, Saccharose (-).
Pente jaune : Lactose Saccharose (+).
Production du gaz : apparition de bulles de gaz dans le culot.
Formation d’ H2S : production d’une coloration noire entre le culot et la pente
ou long de la piqure.
Catalase :
 Principe :
Est une enzyme de la chaine respiratoire, ayant la propriété de décomposer
l’eau oxygéné avec dégagement d’oxygène.
 Technique :
On dépose une goutte d’eau oxygéné sur une lame propre à laquelle on rajoute
quelque germe de la culture à étudier cultivée sur un milieu solide.
 Lecture :
La lecture est immédiate : si on observe une formation de bulles d’air, la
souche possède une catalase (Staphylocoque).
Dans le cas contraire la souche dépourvue de cette enzyme (Streptocoque).
Oxydase :
 Principe : c’est la dernier enzyme de la chaine respiratoire, qui
intervient dans divers couple d’oxydoréduction.
 Technique :
On prélève quelque germe de la souche à étudier, a laide dune pipette pasteur
stérile on étale sur un disque d’oxydase préalablement imbibé avec une goutte
d’eau distillé, stérile.
 Lecture :
L’apparition dune coloration violette sur le disque indique que : la souche
possède l’oxydase.
Dans le cas contraire la souche est dépourvue de cette enzyme.
Page 52
Coagulase :
 Principe :
Une souche bactérienne produit une coagulasecapable de faire coaguler le
plasma.
 Technique :
Quelques gouttes de culture en bouillon des souches à étudier sont ajoutées à
du plasma dilué au 1/10 dans du sérum physiologique. Les tubes sont incubés
pendant 2 h à 37 °C.
 Lecture :
La coagulation du plasma indiqué que la souche possède la
coagulase(Staphylococcus aureus).
Dans le cas contraire la souche est dépourvue de cette enzyme
(Staphylococcusepidermidis).
II. Antibiogramme :
 Milieu de culture : MH (Muller Hinton)
 Ensemencement: on fait un ensemencement par une suspension
bactérienne des colonies prélevé à partir d'un isolement frais !
 Application des disques: on pose les disques sur la gélose puis
l'incubation à l'étuve à 37°c pendant 24h.
3ème jour :
 Lecture de l’antibiogramme : pour chaque antibiotique :
Mesurer le diamètre de la zone d’inhibition. Rapporter cette distance sur l'échelle
concordance.
Page 53
Chapitre VII Identification des facteurs influençant la fiabilité d’ECBU
Chapitre VII
Identification des facteurs influençant la fiabilité
d’ECBU
Page 54
Méthodologie de l’enquête :
1- L’objectif de l’étude :
Identifie les facteurs influençant la fiabilité d’un examen cytobactériologique des
urines au niveau de l’EPH d’TOUGGOURT et pour confirmer ou infirmer nos
hypothèses.
 Proposer des solutions pour notre problématique :
(Quels sont les causes de non conformité de certain
Prélèvements urinaires destinés au laboratoire pour un examen

cytobactériologique des urines ?)
2- Méthodologie d’enquête:
2-1- Lieu d’enquête :
Cette enquête est réalisée au niveau de l’EPH d’ Touggourt du 09 avril au 09 Mai
2017.
2-2- Populations ciblées :
L’enquête a été réalisée avec :
Personnelles de laboratoire.
Les patients
2-3- L’échantillonnage :
Notre étude a été réalisée auprès de :
- 20 personnelles de laboratoire (laborantins, biologiste, microbiologiste).
- 15 patients (externes et internes)
2-4-Méthode d’enquête :
On utilise les moyens suivants :
- Questionnaire pour les personnelles de laboratoire.
- Questionnaire pour les patients.
- Statistique (Archives).
Page 55
I. Questionnaire (pour les personnelle du laboratoire)

 20 réponses
Service Fonction Expérience
Labo Laborantin <5ans
Labo Laborantin 5-10ans
Labo Laborantin >10ans
Labo Biologiste <5ans
Labo Laborantin >10ans
Labo Microbiologiste <5ans
Labo Biologiste >10ans
Labo Microbiologiste <5ans
Labo Biologiste 5-10ans
Labo Microbiologiste >10ans
Labo Microbiologiste 5-10ans
Labo Microbiologiste >10ans
Labo Microbiologiste <5 ans
Labo Biologiste >10ans
Page 56
Question N01 : Donc recevez-vous des prélèvements urinaires non conformes ?

Réponse Oui non Totale
Nombre de personnelle 20 0 20
Pourcentage 100% 0% 100%
Graphe No1 :
0%
%
Oui
pourcentage
100%
Diagramme circulaire représentas les résultats de la question 01
Interprétation : 100% des réponses positive ; ils ont tous reçu un mauvais
prélèvement (au moins une fois).
Question N02: y a-t-il une importance de la communication entre le laborantin et le
patient dans la conformité du prélèvement d’urine ?
Réponse Oui parfois Non Totale

Nombre de personnelle 14 4 2 20
pourcentage 70% 20% 10% 100%
Interprétation : La plupart des personnes croient que la communication entre le

laborantin et le patient est importante dans la conformité du prélèvement urinaire.
Page 57
Oui Parfois Non
10%
20%
70%
Question N03 : est-ce-que vous expliquez aux malades les conditions de prélèvement
urinaire ?

pourcentage 60% 30% 10% 100%
Interprétation : 60% des personnelle expliquent aux malades les conditions de

prélèvement urinaire, 30% d'entre eux qu'ils font et parfois l'interprétation, tandis que
les 10% restant ont répondu par non..
Page 58
Oui Parfois Non
10%
30%
60%
Question N04 : L’explication de la procédure du recueil des urines. Est-elle

indispensable ?

Pourcentage 70% 20% 10% 100%
Interprétation : L’explication de la procédure du recueil des urines est
indispensable Cela a été confirmé par la plupart des personnelle dans leur réponse.
Oui Parfois Non
10%
20%
70%
Page 59
Question N05 : ou pensez-vous que le prélèvement urinaire doit se faire ?
Réponse À domicile Au labo Totale

pourcentage 40% 60% 100%
Interprétation : La réponse de 60% des personnes que le prélèvement urinaire doit
être fait dans le laboratoire, tandis que 40% disent qu'il devrait être à domicile.
Au labo A domicile
40%
60%
Question N06 : les urines sont déposées au niveau de réception :
Réponse Moins d'une Entre 1 heure Au-delà de Totale

heure de recueil. et 2 heures du deux heures du
recueil. recueil.
pourcentage 25% 75% 00% 100%
Interprétation : La majorité des personnes interrogées ont répondu que les urines
sont déposées au niveau de la réception entre 1 heure et 2 heures du recueil.
Page 60
Moins d'une heure de recueil Entre 1 heure et 2 heures du recueil.

Au-delà de deux heures du recueil.
0%
25%
75%
Question N07 : Le recueil des urines peut être effectué sur un flacon non stérile ?
Réponse Oui Parfois Non Totale

Pourcentage 00% 00% 100% 100%
Interprétation: toute le personnelle ont répondu que Le recueil des urines ne peut pas
être effectué sur un flacon non stérile.
Page 61
Non
0%
0%
100%
Question N08 : La conservation des échantillons des urines doivent être à la

température de 4°C?
Réponse OUI NON Totale

Interprétation : 85% de personnelles ont dit que la conservation des échantillons des
urines doit être à la température de 4°C. Et 15% répondants par NON.
Page 62
OUI NON
15%
85%
Question N09 : Quels produits de nettoyage doivent être utilisé avant de réaliser un
prélèvement urinaire ?
Réponse l’eau seule le savon le savon et un Totale
antiseptique
Pourcentage 10% 40% 50% 100%
Interprétation : 50% de personnelle ont dit qu’ils utilisent le savon et un

antiseptique, Alors que 40% disent que le savon suffit.
Page 63
Avec de l’eau seul Avec du savon le savon et un antiseptique
10%
50%
40%
Question N10 : les urines analysées sont collectées ?
Réponse Le matin, Le n’importe quel moment de Totale

premières urines la journée
Interprétation : Selon les personnes, Les urines analysées son collectées Le matin,
Les premières urines.
Le matin, Le premières urines
0%
100%
Page 64
Question N11 : Le taux de prélèvement urinaire non confirmé est ?
Réponse Moins Important Très Totale

important important
Pourcentage 05% 10% 85% 100%
Moins important Important Très important
5%
10%
85%
Interprétation : Le taux de prélèvement non conforme est très important selon la

réponse de la plupart des personnelles.
Question N12 : A votre avis, quelles sont les erreurs effectuées par le patient pendant
le prélèvement urinaire ?
Interprétation : la majorité des personnes était leur réponse comme suit :
 Le tube de prélèvement n’est pas fermé hermétiquement .
 Ne pas utiliser d’un tube a vis stérile et pas fermer hermétiquement.

 La durée du prélèvement qu’il ne doit pas dépasser deux heures ne pas
respecter.
Page 65
 Ne pas faire le prélèvement opportun en fonction du contexte clinique :
-Précocement.
-Avant tout antibiothérapie.
 N’utilise pas du matériel stérile a usage unique et ne pas respecter les

règles d’asepsie élémentaire lors des prélèvements.
Question N13 : est-ce-que ces erreurs affectent la qualité de prélèvement urinaire et

le résulta d’ECBU ?
Réponse OUI NON Totale

OUI NON
25%
75%
Interprétation : 75% pensent que les erreurs du patient affectent la qualité des résultats.
Page 66
Question N14: Quelles sont vos propositions pour améliorer la réalisation d’ECBU !
Interprétation : la solution proposée par la plupart est d’informer les patients sur les
conditions du recueil des urines.
Analyse des résultats :
D’après les tableaux qu’on à obtenu on constate que :
 Dans le laboratoire on peut recevoir des prélèvements urinaires non conforme.

 Il existe une relation entre la communication (laborantin-patient) et la conformité
du prélèvement d’urines .
 La majorité des personnes expliquent aux patients les bonnes conditions de
prélèvement urinaire.
 La plupart de personnelles considèrent l'explication nécessaire pour un bon
prélèvement.
 Le prélèvement urinaire doit se faire au labo.
 Les urines sont déposées ou niveau de réception Entre 1 heure et 2 heures du
recueil.
 Le recueil des urines peut (doit) être effectué dans un flacon stérile.
 La conservation des échantillons des urines doivent être à la température de 4°C.
 Toilette est effectuée Avec du savon.
 Les urines analysées son collectées Le matin.
 Le taux de prélèvement non conforme est très important.
 les erreurs effectuées par le patient pendant le prélèvement urinaire Qui affectent
le résultat :
*Le tube de prélèvement n’est pas fermé hermétiquement .
*Ne pas utiliser d’un tube a vis stérile et pas fermer hermétiquement.
*La durée du prélèvement qu’il ne doit pas dépasser deux heures ne pas
respecter.
*Ne pas faire le prélèvement opportun en fonction du contexte clinique :
-Avant tout antibiothérapie.
Page 67
*N’utilise pas du matériel stérile a usage unique et ne pas respecter les règles
d’asepsie élémentaire lors des prélèvements.
*Pour améliorer la réalisation d’ECBU ; il faut informer les patients sur les
conditions du recueil des urines
II. Questionnaire (pour les patients)

Q N °01 :Avez-vous un problème urinaire ?
Oui non Totale

NOMBRE 15 00 15
POURCENTAGE 100% 00% 100%
pourcentage
oui Non
0%
100%
Diagramme N°01 : récapitulatif selon les patients du problème urinaire

Q N°02 :Connaissez-vous les conditions du recueil d'urine
Oui Non TOTALE

NOMBER 08 07 15
POURCENTAGE 53.33 46.66 100%
Page 68
Diagramme N°02 : récapitulatif selon le respect des patients a la technique de

prélèvement.
 On a constaté dans cette étude que les sujets qui n’ont pas Connaisses
les conditions de prélèvement représentent 46.66%, et les sujets qui
ont Connaisses les conditions de prélèvements représentent 53.33%.
 La moitié des patients ne Connaissent pas les techniques de
prélèvement et pour cela on a trouvé que la discordance manifeste
beaucoup chez cette tranche.
 Un bon prélèvement conduit à un bon résultat.
Q N° 03 :Est-ce que vous avez conservé les échantillons au (+4°c):
Oui Non totale

nombre 02 13 15
pourcentage 13.33 86.66% 100%
Page 69
Diagramme N°03 : récapitulatif selon la conservation des échantillons au (+4°C).
 Dans cette étude on a constaté que 86.66% des échantillons n’ont pas
conservé et 13.33% ont conservé.
 La conservation des échantillons est très importante car elle empêche la
prolifération des bactéries.
Q N° 04 : Est-ce que vous avez pris des médicaments avant le prélèvement ?
Page 70
Diagramme N°05 : récapitulatif selon les sujets qui sont au cour d’une prise
de médicament.
 dans cette étude on a remarqué que Les patients qui sont sous
traitement représentent 26.66%, par contre les sujets qui ne sont pas
sous traitement représentent 73.33%.
 La prise de médicament (antibiotique) avant l’ECBU peut manifester
une discordance entre la cytologie et la culture et provoquée une
infection débutante absence de culture et présence des leucocytes.
Q N°05 : Est-ce que vous avez transporté rapidement des échantillons au laboratoire ?
Oui Non totale
nombre 12 03 15
pourcentage 80% 20% 100%
Diagramme N°06 : récapitulatif selon la rapidité d’acheminement de prélèvement.
 dans cette étude on a remarqué qu'il y a 20% ne respecte pas cette condition
ce qui perturbe le résultat de l'ECBU, et 80% assurent la rapidité
d'acheminement.
 La rapidité d'acheminement de prélèvement est importante pour empêcher la
prolifération bactérienne, et pour la conservation des éléments cellulaire dans
les urines.
Page 71
III. Étude statistique :

Notre étude a été faite sur 385 échantillons du Juin 2016 au Mars 2017 au niveau
du laboratoire central de l’EPH de SELIMANE AMIRATE TOUGGOURT. Où on a
trouvés 90 prélèvements non conformes.
Dans ces 90 prélèvements, nous avons trouvé 30 cas qui ont refait un deuxième
prélèvement, tandis que les autres 60 cas ne le fait pas.
Tableau N°1 : présentation des résultats
Malade Sexe Age 1ere culture 2eme culture

Malade 1 Masculin 8 mois une flore microbienne Négative
polymorphe
Malade 2 Féminin 10 ans une flore microbienne Négative
polymorphe
Malade 3 Masculin 21 ans une flore microbienne Négative
polymorphe
polymorphe
Malade 5 Masculin 40 ans une flore microbienne Escherichia coli
polymorphe
polymorphe
polymorphe
polymorphe
Malade 9 Féminin 36 ans une flore microbienne Proteus
polymorphe
polymorphe
polymorphe
Page 72

polymorphe
polymorphe
Malade 14 Féminin 62 ans une flore microbienne Escherichia coli
polymorphe
Malade 15 Féminin 26 ans une flore microbienne Staphylococcus
polymorphe aureus
Malade 16 Masculin 23 mois une flore microbienne Négative
polymorphe
polymorphe
polymorphe
polymorphe
Malade 20 Masculin 57 ans une flore microbienne Pseudomonas
polymorphe aerogenosa
polymorphe
polymorphe
polymorphe
Malade 24 Féminin 76 ans une flore microbienne Proteus
polymorphe
Malade 25 Féminin 26 ans une flore microbienne Positif de levure
polymorphe
polymorphe
Malade 27 Féminin 29 ans une flore microbienne Escherichia coli
polymorphe
Page 73

polymorphe
Malade 29 Féminin 62 ans une flore microbiennepolymorphe Pseudomonas
aerogenosa
Malade 30 Féminin 29 ans une flore microbienne Staphylococcus
polymorphe aureus
Nombre Pourcentage
Les échantillons 385 100%
Prélèvements non Conformes 90 23.37%

prélèvements Conformes 295 76.62%
Tableau N°2 : Nombre et pourcentage des prélèvements contaminés :
 Constat :
 Le nombre des prélèvements non conformes est 90, ces
prélèvements présentent un pourcentage de 23.37%
400
350
300
250
385
200
295
150
100
90
50
0
Les échantillons prélèvements Prélèvements
Conforme non Conformes
Graphe N°1: le nombre de prélèvements conformes et non conformes.
Page 74
prélèvements Conformes Prélèvements non Conformes
23.37%
76.62%
Graphe N° 2: le pourcentage des prélèvements conformes et non

conformes.
Tableau N°3 : répartition des cas non conformes, qui ont et qui n’ont pas fait un
deuxième prélèvement.
Nombres Pourcentage
Les cas qui ont fait un deuxième prélèvement. 30 33.33%
Les cas qui n’ont pas fait un deuxième 60 66.66%
prélèvement.
Totale 90 100%
 Constat :
 33.33% des cas ont fait le deuxième prélèvement.

 66.66% des cas n’ont pas fait le deuxième prélèvement.
Page 75
100
80
60 90
40 60
20 30
0
Totale les cas qui ont les cas qui
fait un 2e n'ont pas fait
prélèvement un 2e
prélèvement
Graphe N°3: le nombre des cas non conforme qui ont fait et qui n’ont pas fait
le deuxième prélèvement
les cas qui ont fait un 2e

prélèvement
les cas qui n'ont pas fait un
2e prélèvement
.
Graphe N°4: le pourcentage des cas qui ont fait et qui n’ont pas fait un
deuxième prélèvement
Tableau N°4 : répartition des cas qui ont fait un deuxième prélèvement
Les cas Nombres Pourcentage

Cas positif 09 30%
Cas négative 21 70%
Totale 30 100%
Page 76
 Constat :
 30% des cas ont des infections urinaires.
 70% ont des cultures négatives.
Nomber
30
20
Nomber
10
0
Totale Cas négatifs Cas positifs
Graphe N°5 : le nombre des cultures positives et négatives
Cas positifs Cas négatifs
30%
70%
Graphe N° 6: le pourcentage des cultures positives et négatives
Page 77
Tableau N°5 : répartition des cas positifs et négatifs chez le sexe féminin et
masculin :
Sexe Nombres pourcentage Nombres Nombres Pourcentage Pourcentage

des cas des Des cultures de cultures
positifs cultures positives négatives
négatifs
féminin 19 63.33% 07 12 36.84% 63.15%
masculin 11 36.66% 02 9 18.18% 81.81%
 Constat :
 63.15% du sexe féminin ont des cultures négatives et
36.84 ont des cultures positives.
 81.81% du sexe masculin ont des cultures négatives et
18.18% ont des cultures positives.
30
Nombres
20
30
19
10
11
0
total féminin masculin
Graphe N° 7:le nombre des féminins et masculins.
Page 78
féminins masculins.
36.66%
63.33%
Graphe N° 8: le pourcentage des féminins et masculins.
12
10
8
Nombres des cas négatifs
6
Nombres des cas positifs
4
0
féminins masculan
Graphe N° 9:le nombre des cas positifs et négatifs chez le sexe féminin et
masculin.
Page 79
féminins
cas positifs ca négatifs
36.84%
63.15%
Graphe N° 10: le pourcentage des cas positifs et négatifs chez le sexe féminin.
masculin
cas positifs cas négatifs
18.18%
81.81%
Graph N°e 11: le pourcentage des cas positifs et négatifs chez le sexe masculin
Page 80
D’après l’analyse des statistiques qu’on a réalisées sur 385 échantillons nous
avons relevé le suivant :
- 23.37% des cas ont des prélèvements non conformes.
Sur les 90 prélèvements contrôlés préalablement non conformes ont trouvé :
- 66.66% cas que ne sont pas recueils les deuxièmes prélèvements.
-33.33% cas que recueils les deuxièmes prélèvements et dans cette cas ont
trouvé :
-30% des cas ont des infections urinaires.
-70% des cas ont des cultures négatives.
-63.33% sont des féminins.
-36.66% sont des masculins.
-63.15% des féminins ont des cultures négatives.
-36.84% des féminins ont des cultures positives.
-81.81% des masculins ont des cultures négatives.
-18.18% des masculins ont des cultures positives.

Ces résultats indiquent que le taux des les prélèvements urinaires non conformes est
élevé (23.37%) dans le cas de non-respect des conditions du recueil tels que l'hygiène
et l'heure de prélèvements urinaires Étant donné que les femmes sont plus sensibles à
prélèvements non conformes.
Page 81
D’après plusieurs études (questionnaire et statistique) en ce qui concerne

les conditions et les méthodes de prélèvement, nous avons trouvé :
 Plusieurs cultures contaminées, plusieurs prélèvements dupliqués,
 les prélèvements qui ne sont pas réalisent correctement peut

provoque la contamination de l’échantillon d’urine.
 L’urine constitue un milieu de culture favorable à la croissance
bactérienne. Pour cela une fois prélevée; elle doit être acheminée
rapidement et analysé au laboratoire, ou conservé à « +4°C ».
 L’assistance des infirmiers ou laborantin avec les patients. Et les

informer comment effectue la technique de prélèvement et ses
conditions, avec l’acheminement rapide au laboratoire peut être
diminué les discordances dans l’ECBU.
 Plusieurs choses peut contaminées les échantillons des urines par les
bactéries de l’environnement telles que : (périnée et voies génitales du
malade, mains de l’opérateur, matériels de prélèvement, … etc.).
Tout cela conduit à un traitement tardif et, bien sûr, l'absence de certitude dans l'état
du patient à l'émergence de l'état psychologique.
Cela est dû au biologiste et le patient de telle sorte que l'indifférence et l'ignorance de

ces conditions.
De coté de biologiste et laborantin c’est le manque d’expérience et le besoin

d’être rappeler de l’importance de cette étape ; aussi le malade n’est pas informé sur
les conditions et même si il en est rappelé n’en prend pas conscience.
A la fin c’est au profit du malade pour qu’il ait un traitement efficace.
Page 82
Voici des suggestions pour éviter la contamination de prélèvement, le

dérangement du patient, la répétition des examens et le perd de temps, nous
espérons sincèrement que ce message passe à tous ceux qui sont concernés par
ce mémoire ; s'il vous plaît ayez l’obligeance de noter que les suggestions
suivantes soient pris en considération :
 Présenter un document expliquant les conditions et les méthodes de

prélèvement en plusieurs langues avec des images attachées pour
faciliter le processus
 Effectuer des séances de sensibilisation sur l'importance de pré-analyse
et son rôle essentiel dans le résultat de l'analyse, bien sûr, dans la
présence de biologistes et les personnes concernées.
 Informer le malade sur l’importance de prélèvement et lui révèle les
conséquences qui peuvent survenir en raison de la négligence dans le
suivi des conseils.
 Assurer la fourniture de matériel approprié pour la collecte de l'urine
 En ce qui concerne le transport et l’acheminement, Les délais
d’acheminement des prélèvements doivent être le plus court possible.
En cas d’acheminement différé, les échantillons doivent être conservés
à des températures adéquates, différentes selon la nature du
prélèvement : à 4°C pour les urines (pour éviter la prolifération
bactérienne), par exemple.
 Renforcer la relation et créer la compréhension entre le biologiste et le
patient.
Page 83
A partir des études et les expériences réalisées pendant les recherches on

a pu prouver que la réflexion sur les modalités et les conditions du
prélèvement de l’ECB des urines est demandée pour éviter :
 Perte d’argent et de temps.
 Résultats expérimentaux erronés ou inappropriés.
 Perte de produits importants.
 Embarras du personnel (réputation dû à des résultats erronés).
Enfin, nous espérons avoirréussila préparationde ce travail, et avons

pu attirer l'attention sur l’importance decette phasedans la démarche de
l’examen cytobactériologie des urines.
Page 84
Annexes
Annexes
Page 85
Annexes
Annexe I :
Page 86
Annexes
Page 87
Annexes
Leucocyte
Les hématies
Cellule épithéliale
Page 88
Annexes
– Exemples d'uroculture quantitative sur milieu chromogène.

A) 10 6 UFC/ml de Klebsiella pneumoniae et de Proteus mirabilis . B) 10 5 UFC/ml
d'Escherichia coli. C) 10 4 UFC/ml d' Escherichia coli et de streptocoque du groupe D.
Page 89
Annexes
Annexe II :
Page 90
Annexes
Annexes III :
GRILLE D’EVALUATION : E.C.B.U. chez un patient

continent
Cette grille a pour objectif d’évaluer les pratiques observées et de

mesurer les écarts existants avec le référentiel. Il permet également
l’évaluation de ce référentiel en vue d’apporter d’éventuelles
modifications.
Les efforts de formation porteront sur les écarts observés.
La case « OBSERVATIONS » permet de noter immédiatement après le
soin avec la soignante la raison de la non observance du critère de
référence. Ce travail permet de corriger le geste immédiatement en
expliquant l’importance de tous les gestes.
Page 91
Annexes
SERVICE DATE HEURE
SITUATION OUI NON OBSERVATIONS
1- Le soin est réalisé par IDE
PRÉPARATION DU MATÉRIEL POUR LA TOILETTE URO-

GÉNITALE
2 -Bassin propre
3- Gants U.U. non stériles
4- Flacon de Bétadine scrub
5- Cuvette propre
6 -Serviette de toilette propre
7 -Méprotec
8 -Sac poubelle
MATÉRIELS SPÉCIFIQUES AU PRÉLÈVEMENT
9- Pot stérile
10 -Bétadine gynécologique
11- Gants U.U non stériles
12 -Pochette bleue de laboratoire
13- 2 étiquettes patientes
PROCÉDURE
14- Décontamination/désinfection du plan
Page 92
Annexes
de travail
15 -Lavage simple des mains
16 -Remplir la cuvette d’eau
17 -Installer le patient sur le bassin
18 -Enfiler gants non stériles
19 -Toilette uro-génitale à la Bétadine

scrub
20- Rinçage à l’eau
21 -Jeter les gants dans la poubelle
23- Enfiler gants non stériles
24 -Ouvrir le pot de prélèvement
25 -Recueillir le 2éme jet d’urine
26- Fermer le pot
27- Réinstaller le patient
28 -Porter le bassin muni de son

couvercle au lave bassin
29 -Jeter les gants dans la poubelle
31- Etiqueter le pot et la pochette
Page 93
Annexes
32- Noter sur feuille de température
33- Faire parvenir au labo dans les 20 min
34- Si non déposer au réfrigérateur
Page 94
Annexes
GRILLE D’EVALUATION : E.C.B.U. chez un patient

incontinent et chez le jeune enfant
SERVICE DATE HEURE
OUI NON OBSERVATIONS
PRÉPARATION DU MATÉRIEL POUR LA TOILETTE URO-

GÉNITALE
1-Matériel propre
2- Sac poubelle
MATÉRIELS SPÉCIFIQUES AU PRÉLÈVEMENT
3-Etui pénien / urinocol
4- Pot stérile
5-Antiseptique
PROCÉDURE
6-Décontamination/désinfection du plan
de travail
7 -Toilette uro-génitale au savon

antiseptique
8 -Vérifier la présence d’urine toutes les

20 min.
Page 95
Annexes
10 -Préciser sur la pochette
E.C.B.U. réalisé sur étui pénien
11- Faire parvenir au labo dans les 20

min
Page 96
Annexes
Page 97
Annexes
Page 98
Annexes
Page 99
Annexes
Page 100
Les livres :
1- Bactériologie médicale (Techniques usuelles) par François Denis, Marie-Cécile (ECBU)
2- Examen Cytobactériologique des Urines(E.C.B.U) par (F. Djennane,D. Mohammedi,D.
Tiouit,D. Touati K. Rahal) (technique de recueil des urine).
3- Avril Jl, Dabernat H, Denis F Et Monteil H, 1992 : bactériologie clinique, 2 ième édition, ed
marketing, paris, pp 9; 11; 20.
4 - Avril Jl, Dabernat H, Denis F Et Monteil h, 2000 : bactériologie clinique ,3ième édition,
elleps, pp 8-9, 170-181.
5- Barza M, Flandrois Jp Et Taly F.P, 1999 : microbiologie et pathologie infectieuse, 2 ième

édition, ed dion, paris, pp 187, 190, 192.
6 -Ferron A, 1984 : bactériologie médicale à l'usage des étudiants en médecine, 12ième édition c et
r, ed madeleine, paris, pp 126-129; 344-353.
7-Gaillard j et michel s, 1989 : bactériologie, ed. flammarion médecine, paris, pp 107-10
8- Jerome J. Perry, James T. Staley Et Stphen Lory, 2004 : microbiologie, dunod, paris, pp 164-
165.
9-Larpent Jp Et Gourgaud ml, 1985 : manuel pratique de microbiologie, ed hermann paris, pp

47-48, 193-197.
Site :
www.google.com Les infections urinaires.

http://www.soins-infirmiers.com Examen_cytobacteriologique_urines_ecbu.php
FICHE SYNOPTIQUE
Le thème
Facteurs influençant
Le nom, prénom et la qualité du directeur du mémoire
Dr: AIDANE Khaoula ; Pharmacienne Microbiologiste.
Le ou les noms des élèves qui ont élaboré le mémoire
- Melle : HADJADJ Roufaida
- Melle: GNOUAI Oumelkhir
(05) mots clés
Facteurs La Conformité prélèvement ECBU La fiabilité
Un résumé
Ce mémoire a du problème du
cytobactériologique des urines, et la recherche de solutions pour
non faits.
On a utilisé pour cela un questionnaire pour les personnelles de laboratoire de bactériologie
et les patients au niveau d'établissement public hospitalier (SLIMAN AMIRAT) de Touggourt.
Et une étude statistique sur notre problème (du juin 2016 au Mars 2017) dans le même
laboratoire.

08 Facteurs Influençant La Fiabilité D'examen Cytobactériologique Des Urines

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08 Facteurs Influençant La Fiabilité D'examen Cytobactériologique Des Urines

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INSTITUT NATIONALE DE FORMATION SUPÉRIEURE

MÉMOIRE PROFESSIONNELLE DE FIN D’ÉTUDE

LABORANTINE DE SANTE PUBLIQUE

Facteurs influençant la fiabilité

Docteur AIDANE KHAOULA Pharmacienne Microbiologiste , notre promotrice dirigé

Et aussi chef d’option

Mr. MRIDJA ABD ALHAMIDE pour sa compétence et ses orientations.

La directrice de l’institut nationale de la formation supérieure Paramédicale BISKRA

Ainsi que tous les responsables et les personnels d’EPH de Touggourt.

II-2-1-2-1 Examen cytobactériologique des urines (ECBU): ......................... 18

 Contexte clinique ...................................................................................... 18

 Protocole expérimental :........................................................................... 20

 Schéma du protocole expérimental ......................................................... 20

. Technique des 4 séries de stries ...................................................................... 27

I. Les conditions du prélèvement ........................................................ 32

II. Les conditions du prélèvement : ....................................................... 32

I. Préparation de matériel .................................................................................. 35

SIDA : Syndrome Gram - : Gram négatif.

VS : Vitesse de MH : Muller Hinton.

GS : Gélose au Sang. H2s : Sulfure D'hydrogène

-Une phase pré-analytique (prescription .préparation du malade, prélèvement,

-Une phase analytique (validation, technique est analytique).

-Une phase post –analytique (validation biologique, interprétation, conclusion).

La phase pré –analytique est fondamentale le dans la maitrise de la qualité d’un

Une grande densité de prélèvement reçu ou niveau de laboratoire de bactériologie

1-Facteur : Elément jouant un rôle dans le déclenchement ou l’évolution d’un

2-Influence : Action, généralement continue, qu'exerce quelque chose sur quelque

3- Fiabilité : Probabilité pour qu'une pièce primaire, un dispositif ou un équipement

4-ECBU : Examen cytobactériologique des urines consiste à détecté la présence d’un

 La fréquence et la gravité de ses complications d’ailleurs à elles

 Quels sont les causes de non conformité de certains

I-1- Rappel sur l’arbre urinaire :

L’appareil urinaire s’étend des reins au méat urétral

Schéma de l’arbre urinaire

Schéma de l’appareil uro-génital féminin

Schéma de l’appareil uro-génital masculin

L’urine est un liquide jaune ambré, d’odeur spéciale, de PH en générale acide,

I-3- L’infection urinaire :

I-3-2-Facteurs favorisants l’infection urinaire :

- Les malformations de l’appareil urinaire.

I-3-4- la physiopathologie de l’infection urinaire :

1. La voie ascendante : survient quand un microorganisme habituellement une

4. I-4- classifications de l’infection urinaire :

Sur le plan clinique, on peut distinguer deux grandes classes d’infection de

I-4-1- Les infections urinaires basses :

Représentées essentiellement par la cystite aigue, c’est une infection

I-4-2- Les infections urinaires hautes :

La pyélonéphrite aigue ou chronique :c’est l’inflammation bactérienne du

II- Diagnostic d’une infection urinaire

II.1. Diagnostic clinique:

- - Des douleurs pelviennes.

II.2. Diagnostic bactériologique :

II-2-1-2- Phase analytique :

II-2-1-2-1 Examen cytobactériologique des urines (ECBU):

Toutefois, un milieu type Sabouraud ou chromogène pour levure sera ensemencé en

Etude des caractères macroscopique

aspect, couleur, odeur

Examen chimique Examen microscopique Examen bactériologique

Identification biochimique Antibiogramme

1) Etude des caractères macroscopiques :

Aspect des Etat normal Etat pathologique

Ce sont des Tigettes en plastique surmontées de zones réactives qui changent

-Densité, ph -Eucocytes -Urobilinogène