Aplicações da Citometria de Fluxo

Citometria de fluxo multicolor | Citometria de fluxo intracelular

Quantificação simultânea de múltiplas proteínas
Apoptose, ciclo celular, proliferação e viabilidade
Soluções em Serviços apoiando os
avanços nas descobertas científicas
e nas necessidades clínicas.

Conheça nossos programas especializados de serviços técnicos

e científicos desenvolvidos para atender as necessidades
laboratoriais por meio de ações voltadas aos seus recursos
humanos e tecnológicos. Entre em contato com o Especialista
de Produtos de sua região ou pelo 0800 771 7157.

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PARA SEU EQUIPAMENTO: Suporte técnico diferenciado

• Contrato de Manutenção
• Extensão de Garantia
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• Serviços de Manutenção: Preventiva e Corretiva

*Consulte configurações necessárias para acesso remoto.

A BD é uma empresa líder mundial em tecnologia médica que
desenvolve, fabrica e vende dispositivos médicos, sistemas de
instrumentos e reagentes. A empresa se dedica a melhorar a saúde
das pessoas em todo o mundo, está focada na melhoria da
qualidade e velocidade do diagnóstico de doenças infecciosas e
câncer, além do avanço na descoberta, pesquisa e produção de
novos medicamentos e vacinas. Fundada em 1897 e sediada em
Franklin Lakes, New Jersey, emprega cerca de 30.000 associados
em mais de 50 países em todo o mundo. A BD atende
principalmente a instituições de saúde, pesquisadores das ciências
da vida, laboratórios clínicos, indústria farmacêutica e o público em
geral. Para mais informações visite www.bd.com.
Amplie suas
possibilidades de análise com
a Citometria de Fluxo.

O Centro de Conhecimento Aplicado BD – CCABD – possui toda a

infraestrutura necessária para garantir uma experiência de

aprendizado qualificada e prática. As diferentes plataformas de

citometria de fluxo disponíveis e os reagentes utilizados garantem a

todos os participantes o melhor aproveitamento das aulas práticas,

integrando sistemas e soluções.

CONSULTE NOSSOS
CURSOS E AGENDA EM
www.bdbiosciences.com/br/ccabd
Índice

Citometria de fluxo multicolor.............................................................6

Recursos e ferramentas .......................................................................6
Painel de Especificações de Fluorocromos.............................................8
BD Horizon™......................................................................................10

Citometria de fluxo intracelular ...........................................................11

Citocinas e fatores de transcrição.........................................................12
Proteínas fosforiladas BD Phosflow .....................................................13
Recursos e ferramentas .......................................................................14

Quantificação simultânea de múltiplas proteínas:

BD™ CBA (Cytometric Bead Array) ......................................................15
BD™ CBA (Cytometric Bead Array) Kit .................................................16
BD™ CBA (Cytometric Bead Array) Flex Set..........................................16
Recursos e Ferramentas .......................................................................18

Apoptose, ciclo celular, proliferação e viabilidade ..............................19

Viabilidade celular e apoptose .............................................................20
Ciclo e proliferação celular...................................................................20
Recursos e ferramentas .......................................................................22

Portfólio de Equipamentos BD Biosciences..........................................23

BD Accuri™ C6 ...................................................................................24
BD LSRFortessa™ X20 e BD FACSAria™ Fusion ....................................26
BD FACSJazz™....................................................................................27
 Citometria de Fluxo
A citometria de fluxo é uma tecnologia
que permite análise simultânea e
multiparamétrica de células ou
partículas em suspensão, avaliando-as
individualmente. À medida que o fluxo
de amostra passa por um ou mais feixes
de luz (gerados por um ou mais lasers),
o sistema óptico-eletrônico registra a
forma como as estruturas dispersam a
luz do laser incidente e captando as
fluorescências emitidas. Assim, o
equipamento obtém informações de
diversos parâmetros, como tamanho
relativo, complexidade interna e
intensidades de fluorescências de cada
célula ou partícula avaliada.
6
Aplicações
A técnica da citometria de fluxo vem
ganhando cada vez mais importância, tanto
na área clínica, quanto da pesquisa.
Qualquer célula ou partícula suspensa em
meio líquido pode ter diversos parâmetros
analisados simultâneamente. Conheça as
suas principais aplicações abaixo.
Pesquisa:
• Imunofenotipagem
• Proliferação Celular
• Vida e Morte Celular: Viabilidade,
apoptose e ciclo celular
• Comunicação Celular: quantificação de
proteínas, marcação Intracelular e
sinalização celular por citometria de Fluxo
• Marcação de Proteínas Intracelulares
Clínica:
• Caracterização de Células Tronco
• Monitoramento de HIV
• Diagnóstico de Leucemia
• Prova Cruzada de Transplantes
Bem vindo a um
mundo mais colorido!

Análise de múltiplos parâmetros

simultâneos e adicionando mais
cores, você pode desvendar um
novo mundo de informações e
correlações.
Experimente todo o potencial da
citometria de fluxo multicolor com
os equipamentos e reagentes BD.
Utilizando anticorpos conjugados a
fluorocromos, explore
características celulares como
expressão de moléculas de
superfície, intracelulares, proteínas
secretadas e muito mais.

A BD desenvolveu diversas ferramentas para lhe auxiliar no desenvolvimento de

painéis multicores e permitir o aproveitamento completo desta poderosa
metodologia, explore mais em:
www.bdbiosciences.com/br/tools

Fluorescence Spectrum Viewer BD FACSelect™

Encontre opções de fluorocromos para Multicolor Panel Designer
experimentos com mais cores e menos Construa um painel de reagentes baseado
compensação. em espécies, especificidades ou clones e
cores do interesse.

Absorption and Emission Spectra
Veja os espectros de emissão e aprenda
mais sobre cada fluorocromo contido na
linha de produtos da BD.
Multicolor Antibody
Reagents Catalog
Escolha a partir de nosso extenso portfólio
de anticorpos conjugados a diversos
fluorocromos os reagentes necessários para
a montagem de seus painéis multicolor.

BD FACSelect™
Buffer Compatibility Resource BD Antibodies iPad® App
Navegue pelas opções de buffer para Pesquise anticorpos e encontre ferramentas
selecionar a combinação certa para as suas e recursos adicionais para usar em seu iPad.
experiências de marcadores intracelulares e
de superfície.

Fluorochrome Specifications Example Human and

Chart and Poster Mouse Panels

7
 Painel de Especificações
de Fluorocromos

Utilize esta tabela para determinar quais fluorocromos

são excitados pelos lasers de seu equipamento.

Analisadores Sorters
Visite bdbiosciences.com/br/colors para informações
detalhadas sobre novos fluorocromos, equipamentos
e ferramentas que auxiliam a montagem de painéis
multicolor.

Linha de excitação Cor da emissão Ex-Max Em-Max

Fluorocromo Laser do laser (nm)* fluorescente (nm) (nm)
BD Horizon™ BUV395 UV 355 Violet 348 395
UV

Violeta

BD Horizon™ BB515 488 490 515

Azul

Azul / YG
Violeta

Azul / YG

BD Horizon™ BV650 Violeta 405 407 650

Vermelho

Azul / YG

Azul

Vermelho
Violeta
BD Horizon™ BUV737 UV 355 348 737
Azul / YG

Vermelho

BD Horizon™ BV786 Violeta 405 407 786

**A linha de excitação do laser representa os lasers que excitam o fluorocromo. Não necessariamente são os lasers de cada equipamento.
† APC e PE-Cy5 devem ser utilizados juntos nos instrumentos com compensação cross-beam.
‡ A sensibilidade do PerCP com laser de alta potência (>25mW) é reduzida e é somente recomendado para marcadores de alta expressão.
§ Capaz de detectar 8 cores simultâneamente (4 laser azul, 2 laser vermelho, 2 laser violeta). Filtros BD Horizon PE-CF594 e Alexa Fluor® 700 são
disponíveis separadamente.
¶ Cuidado extra para evitar a sobreposição de espectros.

* Produto registrado na Anvisa, entre em contato com a BD para informação sobre número de registro.
8 Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico, com exceção dos itens marcados com *.
Painel de referência de Lasers
e Fluorocromos

Ultraviolet Laser (355nm)

Violet Laser (405nm)

Blue Laser (488 nm) / Yellow-Green Laser (561 nm)

Red Laser (640 nm)

9
 BD Horizon Brilliant Violet TM TM

Marcadores brilhantes auxiliam na identificação de populações

celulares raras ou com baixa expressão das moléculas de interesse.

Agora você pode identificar populações celulares raras ou com baixa expressão das
moléculas de interesse com os polímeros conjugados BD Horizon™ Brilliant Violet™.

Desenvolvidos a partir de uma tecnologia pioneira na área de polímeros fluorescentes

adquirida da Sirigen Ltd., os marcadores fluorescentes da linha BD Horizon Brilliant
Violet são mais brilhantes que as alternativas convencionais. Sua maior intensidade de
brilho permite que você identifique populações celulares com menor densidade de
receptores em comparação com outros marcadores, permitindo a visualização de
populações celulares que não eram identificadas antes.

Além disso, os reagentes BD Horizon Brilliant Ultraviolet abrem um mundo de

possibilidades e produtividade para pesquisadores que utilizam a citometria de fluxo
multicolor em sua pesquisa. Ao adicionar a faixa do ultravioleta ao painel, marcadores
podem ser distribuídos por mais lasers, reduzindo os requisitos de compensação do
experimento.

A utilização destes novos corantes excitados pelo laser ultravioleta reduz o tempo de
configuração, porque há menos necessidade de ajustar a compensação. Quando
corantes são combinados com uma posição específica do laser ultravioleta, as opções
e capacidades são expandidos.

Saiba Mais em bdbiosciences.com/br/go/brilliant/

10
Citometria de fluxo intracelular:
Análise multiparamétrica de citocinas, fatores
de transcrição e proteínas fosforiladas

A citometria de fluxo intracelular é uma

poderosa técnica para identificação de
diversos tipos celulares e análise das vias de
sinalização e respostas funcionais em
amostras de linhagens celulares e
populações heterogêneas. Para
determinados tipos celulares essa
identificação depende da utilização
combinada de marcadores de
superfície e intracelulares, como
citocinas ou fatores de transcrição.
Por meio desta técnica, diversas
informações sobre a função e
sinalização celular podem ser obtidas
pela combinação de anticorpos
fluorescentes específicos para marcadores
de superfície com marcadores de apoptose,
proliferação e proteínas fosforiladas
determinando assim, a resposta a estímulos ou
tratamentos em diferentes subtipos celulares.
A combinação de múltiplos marcadores
simultaneamente diminui o tempo de aquisição dos dados e
possibilita a utilização de amostras raras, permitindo que um maior
número de parâmetros possam ser estudados simultaneamente, em uma mesma
célula.
Enquanto outras metodologias, como o Western blot, são úteis no estudo da
expressão de proteínas em uma população celular como um todo, a citometria de
fluxo intracelular permite a detecção de múltiplas proteínas de superfície e
intracelulares, simultaneamente, em células individuais.
A BD Biosciences possui anticorpos conjugados a diversos fluorocromos, tampões, kits
e protocolos para citometria de fluxo intracelular para o estudos de citocinas, fatores
de transcrição, vias de sinalização e análise de proteínas fosforiladas, contribuindo
assim, com novas descobertas nas áreas de imunologia, inflamação, biologia celular e
células-tronco.

bdbiosciences.com/br/intracellular
Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico. 11
 Citocinas e fatores de transcrição

Marcação Intracelular - Principais Produtos

554724 - BD GolgiStop™ – Protein Transport Inhibitor -

Monensin solution
! 555029 - BD GolgiPlug™ – Protein Transport Inhibitor -
! Inibição do
transporte de
Brefeldin A solution
555028 - BD Cytofix/Cytoperm™ Plus -
proteínas Fixation/Permeabilization Solution Kit with BD GolgiPlug™
554715 - BD Cytofix/Cytoperm™ Plus -
CITOCINAS Fixation/Permeabilization Solution Kit with BD GolgiStop™

Tampões de Marcação
Lise de eritrócitos 554657 - Stain Buffer (BSA)
para amostras de sangue 554656 - Stain Buffer (FBS)
total periférico Tampões de Lise
555899 - BD Pharm Lyse™ – Lysing Buffer 10x
349202 - BD FACS™ Lysing Solution*

1 Tampões de Fixação
1 Passo 1 554655 - BD Cytofix™ Fixation Buffer
Tampões de Permeabilização
FIXAÇÃO e 554723 - BD Perm/Wash™ Buffer
PERMEABILIZAÇÃO 554722 - BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization
Solution
347692 - BD FACS™ Permeabilizing Solution 2 10mL
340973 - BD FACS™ Permeabilizing Solution 2 25mL

2 Conjuntos de Tampões
2 Passo 2 (Fatores de Transcrição/Detecção de Citocinas)
562725 - Transcription Factor Buffer Set 25 testes (com
Fixation/permeabilization buffer, diluent buffer, perm/wash
MARCAÇÃO buffer)
562574 - Transcription Factor Buffer Set 100 testes (com
Fixation/permeabilization buffer, diluent buffer, perm/wash
buffer)
554714 - BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization
Solution Kit
555028 - BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization
Solution Kit with BD GolgiPlug™
554715 - BD Cytofix/Cytoperm™ Fixation/Permeabilization
Solution Kit with BD GolgiStop™
560409 - Mouse Foxp3 Buffer Set
641776 - BD IntraSure™ Kit

3
3 Passo 3

Analisar as células em um citômetro de fluxo BD FACS™

ANÁLISE

bdbiosciences.com/br/intracellular
* Produto registrado na Anvisa, entre em contato com a BD para informação sobre número de registro. Produtos exclusivos
12 para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico, com exceção do item marcado com *.
BD Phosflow - Principais Produtos

Protocolos padronizados e compatibilidade de reagentes

Fixar as células com um dos tampões fixadores

1 Passo 1 BD Phosflow por 10 minutos.
558049 - BD Phosflow™ Lyse/Fix Buffer (Amostras de sangue total)
FIXAÇÃO
557870 - BD Phosflow™ Fix Buffer I

Permeabilizar as células com um dos tampões

2 Passo 2 permeabilizadores BD Phosflow por 30 minutos.
557885 - BD Phosflow™ Perm/Wash Buffer I
PERMEABILIZAÇÃO
558052 - BD Phosflow™ Perm Buffer II
558050 - BD Phosflow™ Perm Buffer III
560746 - BD Phosflow™ Perm Buffer IV

Marcar as células com os anticorpos

3 Passo 3 conjugados BD Phosflow diluídos no tampão
BD Pharmingen Stain Buffer.
MARCAÇÃO Anticorpos da linha BD Phosflow para marcação das vias de
sinalização
Anticorpos contra proteínas de membrana ou intracelulares para
fenotipagem celular

4 Passo 4
Analisar as células em um instrumento de
ANÁLISE citometria de fluxo BD FACS™.

PRINCIPAIS KITS
Veja a lista completa de Kits em bdbiosciences.com/br/intracellular
560750 BD Phosflow™ Human T Cell Activation Kit
Alexa Fluor® 647 conjugados com: p38 MAPK (pT180/Y182), ERK (pT202/204), Stat1 (pY701), Stat3 (pY705), Stat5 (pY694),
and Stat6 (pY641); cocktail T cell humano; reagentes para compensação, células controle e tampões
562089 BD Phosflow™ Human Monocyte/NK Cell Activation Kit
562496 BD Stemflow™ Human Definitive and Pancreatic Endoderm Analysis Kit
Pax-6 Alexa Fluor® 488, PDX-1 PE, FoxA2 PE, Sox2 PerCP-Cy™5.5, Sox17PerCP-Cy™5.5, Nanog Alexa Fluor® 647; BD
Phosflow™ perm buffer III; Tampão de fixação BD Cytofix™
561526 BD Stemflow™ Human Neural Lineage Analysis Kit
Sox2 PerCP-Cy™5.5, GFAP Alexa Fluor® 647, Doublecortin PE, Nestin Alexa Fluor 647, Ki-67 Alexa Fluor 488, Sox1 PerCP-
Cy5.5, CD44 FITC; tampão de fixação BD Cytofix™; BD Phosflow™ perm buffer III
550502 BD Phosflow™ Underphosphorylated Retinoblastoma (Rb) Set
Underphosphorylated Rb PE (clone G99-549); mouse IgG1, k PE isotype control (clone MOPC-21)

bdbiosciences.com/br/intracellular
Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico. 13
 Citometria de Fluxo Intracelular - Recursos
*Acesse estes recursos em bdbiosciences.com/br/resources/ics

Conheça os recursos disponíveis para a

Consulte brochuras,
Citometria de Fluxo Intracelular que FAQ, protocolos,
auxiliam sua pesquisa e aumentam seu ferramentas
conhecimento na área. e muito mais*!

Brochuras
• Intracellullar Flow Cyometry

Perguntas Frequentes
• BD Phosflow™ Cell Signaling

Informações de Produtos
• BD Pharmingen™ Transcription Factor Buffer Set
• BD FACSelect™ Buffer Compatibility Resource
• BD Phosflow™ Human CrkL (pY207) Monoclonal Antibodies
• BD Phosflow™ Human Monocyte/NK Cell Activation Kit
• BD Phosflow™ Smad Monoclonal Antibodies
• BD Phosflow™ T Cell Activation Kit (Human)
• BD Phosflow™ Violet Fluorescent Cell Barcoding Kit
• Cytobank Flow Cytometry Data Analysis Software

Lista de Produtos
• BD Phosflow™ Technology Product List
• Intracellular Flow Cytometry Product List

Protocolos
• 96 Deep Well Phosflow Staining with Cytokine Stimulation
• BD Phosflow™ Alternative Protocol 1: Fix–Stain–Perm
• BD Phosflow™ Alternative Protocol 2: Stain–Fix–Perm
• BD Phosflow™ Protocol for Adherent Cells
• BD Phosflow™ Protocols for Human PBMCs
• BD Phosflow™ Protocols for Human Whole Blood Samples
• BD Phosflow™ Protocols for Mouse Splenocytes or Thymocytes
• BD Phosflow™ Protocols for TCR Stimulation: Human
• Simultaneous Measurement of Cell Surface Markers with Cellular Proliferation and Protein Phosphorylation
• Simultaneous Measurement of Cell Surface Markers with T-bet and Stat5 (pY694) in IL-2–Stimulated Human
Whole Blood using BD Phosflow™ Lyse/Fix Buffer and BD Phosflow™ Perm Buffer III
• Suggested Stimulation Conditions for Phosphoprotein Detection

Ferramentas
• Antibodies to Cell-Surface Markers Tested for BD Phosflow™ Protocols
• BD FACSelect™ Buffer Compatibility Resource
• Cytobank

bdbiosciences.com/br/intracellular
14 Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
Quantificação de Proteínas solúveis:
BD™ Cytometric Bead Array (CBA)

Imunoensaio tipo sanduíche, o BD CBA é

uma aplicação da citometria de fluxo que
permite quantificar até 30 proteínas
solúveis e intracelulares ao mesmo
Anticorpo
tempo com apenas 25 a 50 μL de de captura
amostra. O sistema utiliza uma
Anticorpo
combinação de diferentes faixas de detecção
d e f l u o re s c ê n c i a e b e a d s
Analíto
conjugadas a anticorpos de Beads Fluorocromo PE
captura de alta afinidade. Cada Fluorescentes

uma destas beads possui uma

fluorescência única, permitindo a
detecção de várias proteínas
simultaneamente num único
tubo.
O sistema foi desenvolvido para
análises multiplex, oferece maior
quantidade de informações de uma
mesma amostra, maximizando o número
de proteínas que podem ser analisadas com
uma pequena amostra disponível. Assim a técnica
reduz o tempo e quantidade de amostra necessários
para os resultados se comparado às técnicas tradicionais ELISA
e Western Blot.

Concentração
Lavagem Análise por
Beads Amostra Citometria de Fluxo

Anticorpos de
detecção

Curva padrão

bdbiosciences.com/br/cba
Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico. 15
 BD CBA - Principais Produtos
O sistema BD CBA está disponível em três formatos
para diferentes necessidades:

BD CBA Flex Set

Um método de detecção aberto e configurável, para que o pesquisador possa construir seu próprio ensaio
Multiplex. Escolha até 30 proteínas de interesse e o conjunto de tampões apropriado para o seu ensaio. Flex Sets
são suficientes para 100 testes e contém os reagentes de captura, detecção e curva-padrão.

Master Buffer Kit apropriado* Curva Padrão* Beads de Captura +

Disponíveis para 100 ou 500 testes Reagente de Detecção
Proteínas Liofilizadas
• Diluentes para confecção da • Imunoglobulinas
• Tampão de lavagem curva (acompanham • Citocinas e fatores
• Beads de Setup as beads de captura e • Proteínas fosforiladas
• Alguns kits incluem outros detecção). • Alta sensibilidade
reagentes adicionais

BD CBA Kit
Painéis pré-configurados para análise de perfis imunológicos. Suficientes para 50, 80 ou 100 amostras
(dependendo do kit escolhido). Contém todos os reagentes necessários para realização do ensaio. Kits para
Humanos, Camundongos e Primatas não-humanos. Detectam de 6 a 7 citocinas simultaneamente.

Tampões* Curva Padrão* Beads de Captura +

• Diluentes Proteínas liofilizadas Reagente de Detecção
• Tampão de lavagem para confecção da Reagentes para detecção de um conjunto pré-
• Beads de Setup curva padrão estabelecido de proteínas solúveis, como
Citocinas, imunoglobulinas e fatores.

BD CBA Functional Beads

Para pesquisadores que desejam quantificar uma proteína que não faz parte do portfólio dos sistemas BD CBA.

Functional Beads Conjugation Reagente de Beads de Captura

Buffer Set* Detecção
6 – 12 conjugações de
558556 • Anticorpo 500 – 1000 testes cada
15 conjugações conjugado a PE 30 opções de
• Tampão de conjugação contra a proteína ou fluorescências
• Tampão de armazenamento anticorpo de interesse • Para conjugação ao
* Para confirmação da conjugação capturado. anticorpo contra a
recomenda-se o uso de detectores • Reagente não poteína de interesse ou
marcados com PE contra a comercializado. conjugação a um
imunoglobulina conjugada. substrato poteico para
• Mouse Ig Detector – 558550 captura do anticorpo a
• Rabbit IgG Detector – 558553 ser investigado na
• Rat Ig Detector - 558551 amostra.
* Os componentes podem ser adquiridos separadamente, caso haja necessidade.
bdbiosciences.com/br/cba
16 Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
Destaques dos produtos BD CBA

Reagentes com qualidade e reprodutibilidade superiores.

Todos os produtos BD CBA têm a sua performance avaliada em relação à
reprodutibilidade, linearidade, taxa de recuperação e limite de detecção
teórica. Estes valores são reportados na documentação que acompanha
cada produto BD CBA.

Templates de aquisição e análise disponíveis para todos os equipamentos BD.*

Análise automatizada usando o FCAP Array.

• Reprodutibilidade
A reprodutibilidade intra e inter-ensaios são determinadas através da avaliação de dez
replicatas com três diferentes níveis de proteínas de uma mesma amostra (intra-ensaio)
e três replicatas de três diferentes níveis de proteínas de quatro experimentos diferentes
(inter-ensaio)

• Linearidade
Uma quantidade conhecida de determinada proteína é diluída em amostras de
sobrenadante de cultura celular, soro ou plasma com EDTA - ethylenediamine
tetraacetic acid - seguido de uma diluição seriada. As amostras diluídas são levadas ao
ensaio e os resultados são comparados com os valores esperados desta proteína em
cada diluição.

• Taxa de recuperação
Três concentrações diferentes de determinada proteína são adicionadas à amostras de
sobrenadante de cultura celular, soro ou plasma com EDTA - ethylenediamine
tetraacetic acid. As amostras são analisadas e os resultados comparados com a
concentração esperada para determinar a recuperação.

• Limite teórico de detecção

A curva padrão individual de determinada citocina define os níveis mínimos e máximos
de quantificação.

bdbiosciences.com/br/cba
Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
*Templates disponíveis para todos os citometros de fluxo BD validados para o uso do BD CBA. 17
 BD CBA - Quantificação de proteínas por
Citometria de Fluxo - Recursos
*Acesse estes recursos em bdbiosciences.com/br/resources/cba

Conheça os recursos disponíveis para Consulte

BD CBA - Quantificação de proteínas por brochuras, FAQ,
Informações de produtos,
Citometria de Fluxo – que auxiliam sua pesquisa guias, ferramentas
e aumentam seu conhecimento na área. e muito mais*!

Brochuras
• BD™ Cytometric Bead Array

Perguntas Frequentes
CBA Kits
• BD™ Cytometric Bead Array: BD CBA Human and Mouse Th1/Th2/Th17 Kits
• BD™ CBA Reagents: A complete solution with the BD Accuri™ C6 Flow Cytometer
• Comparison of BD™ CBA Standards to the NIBSC/WHO International Standards
• Tools for Cytokine and Chemokine Quantitation
Flex Sets
• BD™ CBA: Cell Signaling Flex Set System
• BD™ CBA Enhanced Sensitivity Flex Set System
• BD™ CBA Human Immunoglobulin Flex Set System: Multiplexed, Sensitive Detection of Soluble Immunoglobulins
• BD™ CBA Reagents: A complete solution with the BD Accuri™ C6 Flow Cytometer
• BD™ CBA Soluble Protein Flex Set System: For Multiplex Analysis of Cytokines, Chemokines, and Growth Factors
• BD Human IL-17A Reagents: A Comprehensive Portfolio for Inflammation and Autoimmunity Research
• BD Pharmingen Mouse IL-17A Antibodies for Flow Cytometry and Multiplexed Bead Assays
• Comparison of BD™ CBA Standards to the NIBSC/WHO International Standards

Lista de Produtos
• BD™ Cytometric Bead Array

Ajuste e Configuração de Equipamento

CBA Kits & Flex Sets • BD FACSCalibur™ flow cytometer *
• BD Accuri™ C6 flow cytometer • BD FACSCanto™ II flow cytometer *
• BD FACSAria™ III cell sorter • BD FACSVerse™ flow cytometer
• BD FACSArray™ flow cytometer • BD LSRFortessa™ flow cytometer

Ferramentas
• Aquisition Templates for BD Accuri™ C6
• Bead Library - FCAP Array
• Cell Signaling Flex Set Compatibility
• Human Ig Flex Set Compatibility
• Human Soluble Protein/Receptor Flex Set Compatibility
• Mouse/Rat Soluble Protein Flex Set Compatibility
• References

bdbiosciences.com/br/cba
* Produto registrado na Anvisa, entre em contato com a BD para informação sobre número de registro. Produtos exclusivos
18 para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico, com exceção dos itens marcados com *.
Apoptose, ciclo celular, proliferação
e viabilidade

O balanço entre a proliferação e morte

celular é importante para o desen-
volvimento e homeostasia tecidual. A
proliferação celular é regulada pelo
p ro c e s s o d e c i c l o c e l u l a r,
possibilitando o aumento do
número de células após o
processo de mitose. A
apoptose é caracterizada
como uma morte celular
programada.

Nos últimos anos a citometria

de fluxo multicolor tornou-se
essencial no estudo de
processos celulares como ciclo
Celular, apoptose, viabilidade e
proliferação celular e seus
mecanismos fundamentais envol-
vidos na imunidade, inflamação,
hematopoiese e neoplasia, dentre outros.
O sucesso da metodologia é resultante da
sua capacidade de monitorar esses processos
simultaneamente a outros eventos celulares como a
fosforilação de proteínas e secreção de citocinas dentro de
populações celulares heterogêneas.

Para o estudo destes processos por citometria de fluxo, a BD Biosciences oferece

diversas ferramentas incluindo anticorpos, kits, e sistemas, além de reagentes de alta
qualidade para determinação e detecção da apoptose e proliferação celular por ELISA,
imunohistoquímica, imagem celular e Western blot. Não deixe de conhecer as
inovações do BD Horizon™ Violet Cell Proliferation Dye 450 (VPD450) e anticorpos
para PARP clivado e caspase-3 disponíveis para diferentes tipos de aplicações.

bdbiosciences.com/br/apoptosis
Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico. 19
 Apoptose, ciclo celular, proliferação e
viabilidade - Principais Produtos
AMOSTRA
TIPO DE

FIXADAS /
PERMEABILIZADAS
ESTUDO
TIPO DE

CICLO E
VIABILIDADE APOPTOSE
PROLIFERAÇÃO

Interação com DNA Síntese de DNA Proteínas

dupla-fita
BrdU e anticorpos
Viabilidade celular; para BrdU
Análise do perfil da
distribuição das fases do
ciclo celular
APLICAÇÃO E PRODUTOS

556463 - Propidium 550891 - BrdU Anticorpos 562247 BD Caspase-3 ativa

Iodide Staining solution Anti-Ki-67 e Horizon™
Solution Anti-PCNA Fixable PARP clivado
562253 - Apoptosis, Viability Stain
340242 - BD DNA Damage and 450
Cycletest™ Plus DNA Cell Proliferation Kit
Reagent Kit Fragmentação
559619 - FITC BrdU de DNA/TUNEL
349483 - BD™ Cell Flow Kit
Viability Kit 556381 - APO-
552598 - APC BrdU DIRECT™
559925 - 7-AAD Flow Kit Apoptosis
Staining Solution Detection Kit

555816 - BD Via- 556405 - APO-

Probe™ Cell Viability BRDU™ Apoptosis
Solution Detection Kit

bdbiosciences.com/br/apoptosis
20 Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
 Apoptose, ciclo celular, proliferação e
viabilidade - Principais Produtos
AMOSTRA
TIPO DE

CÉLULAS VIVAS /
NÃO FIXADAS
ESTUDO
TIPO DE

CICLO E
VIABILIDADE APOPTOSE
PROLIFERAÇÃO

Células vivas
Anexina V
em proliferação
Conjugada com diversos fluorocromos
(pode ser detectado
pós fixação/ Annexin V kits
permeabilização celular)
556463 - Propidium Iodide 556570 - Annexin V : FITC Apoptosis
Staining Solution Detection Kit II
APLICAÇÃO E PRODUTOS

CORANTE 349483 - BD™ Cell Viability Kit 559763 - Annexin V : PE Apoptosis

CELULAR Detection Kit I
559925 - 7-AAD Staining Solution

555816 - BD Via-Probe™ Cell

Viability Solution

562158 - BD Horizon™
Violet Proliferation Dye
450 Potencial de membrana mitocondrial

551302 BD™ MitoScreen (JC-1)

bdbiosciences.com/br/apoptosis
Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico. 21
 Apoptose, ciclo celular, proliferação
e viabilidade - Recursos
*Acesse estes recursos em bdbiosciences.com/br/resources/apoptosis

Conheça os recursos disponíveis para Consulte

BD CBA - Quantificação de proteínas por brochuras, FAQ,
Informações de produtos,
Citometria de Fluxo – que auxiliam sua pesquisa guias, ferramentas
e aumentam seu conhecimento na área. e muito mais*!

Brochuras
• Apoptosis Brochure

Application Notes
CBA Kits
• Cell Cycle Analysis Using the BD BrdU FITC Assay on the BD FACSVerse™ System
• Detection of Apoptosis Using the BD Annexin V FITC Assay on the BD FACSVerse™ System
• Multiple Methods for Detecting Apoptosis on the BD Accuri™ C6 Flow Cytometer
• Technique for Loading Cells with BD Horizon™ Violet Proliferation Dye 450 (VPD450)

Informações de Produtos
• Annexin V Reagents
• Apoptosis, DNA Damage, and Cell Proliferation Kit
• BD Horizon™ Fixable Viability Stain 450
• BD Horizon™ Violet Cell Proliferation Dye 450

Lista de Produtos
• Apoptosis Product List

Protocolos
• Annexin V with Cell Surface Antibody Staining for Suspension Cells
• Annexin V Staining of Adherent Cells for Flow Cytometry
• Annexin V Staining Protocol
• APO-BRDU™ Procedure (TUNEL Assay for Flow)
• APO-DIRECT™ Procedure (TUNEL Assay for Flow)
• Cell Death Induced by Camptothecin
• Cell Death Induced by Staurosporine
• Induction of Apoptosis Using Anti-Human Fas (CD95), Clone DX2
• Induction of Apoptosis Using Anti-Mouse Fas (CD95), Clone Jo2

bdbiosciences.com/br/apoptosis
22 Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
Portfólio Equipamentos

Equipamentos para Pesquisa

Separador Celular - Cell Sorters

BD FACSAria™ Fusion BD FACSAria™ III BD FACSJazz™ BD Influx™

Analisadores

BD Accuri™ C6 BD FACSVerse™ BD LSRFortessa™ X-20 BD LSRFortessa™

SPECIAL ORDER PRODUCTS

Separador Celular Analisadores
Cell Sorters BD Accuri™ C6
BD FACSAria™ III BD LSRFortessa™
BD Influx™

Equipamentos Clínicos

Analisadores

BD FACSCalibur™ * BD FACSCanto™ II *

* Produto registrado na Anvisa, entre em contato com a BD para informação sobre número de registro. Produtos exclusivos
para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico, com exceção dos itens marcados com *. 23
 TM
BD Accuri C6
Citometria de Fluxo ao seu alcance.

Leve a citometria de fluxo para onde você quiser:

um equipamento acessível, portátil e de fácil utilização.
O BD Accuri™ C6 possui dois lasers (azul e vermelho), processa simultaneamente até
quatro cores e seis parâmetros e é capaz de ler os marcadores mais conhecidos e
utilizados do mercado.

Citometria descomplicada
Com alta capacidade de processamento de dados, ele simplifica sensivelmente a
operação de um citômetro de fluxo. Sem necessitar de ajustes de voltagem, a
obtenção de resultados pode ser obtida através de análises simples. Seu software
possui interface altamente intuitiva, permitindo a aquisição e análise de dados sem
complicação. Usando a última geração de arquivos de citometria, permite modificação
de parâmetros após a aquisição de dados.

Extremamente compacto
Com tamanho reduzido, cabe facilmente nas bancadas padrão dos laboratórios. E
pode ser facilmente transportado, graças ao desenho de seu sistema ótico que
garante grande estabilidade e seus menos de 15kg.

Automação
O BD Accuri™ C6 pode contar com o CSampler™, opcional que facilita ainda mais as
rotinas dentro do laboratório. Esta opção permite a leitura automatizada de tubos ou
placas de 48 e 96 poços. Utilizando o software do BD Accuri™ C6, a programação da
leitura dos tubos ou poços é muito simples e intuitiva.

bdbiosciences.com/br/accuri
24 Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
 TM
Kits e Templates para o BD Accuri C6
Análise Celular fácil como nunca visto antes

O BD Accuri™ C6 torna ainda mais fácil aliar o

poder da citometria de fluxo com sua pesquisa
através de templates livres, pré-configurados e
kits prontos de reagentes específicos, oferecendo
um fluxo de trabalho mais fácil e intuitivo.
Kits pré-configurados incluem anticorpos
fluorescentes, sistemas de tampões e reagentes
necessários para aquisição e análise. Os
templates do software BD Accuri™ C6
combinados aos kits incluem Workspaces
predefinidos, marcadores, regiões, gates e nomes
dos parâmetros para uma rápida e fácil
configuração e análise.

Categoria Informações Kit Nº Catálogo

Annexin V FITC Apoptosis Detection Kit II 556570
Kits e
Annexin V PE Apoptosis Detection Kit I 559763
Templates
BD Apoptose MitoScreen (JC-1) Kit 551302
Biologia
Caspase-3 PE Assay Kit 550914
Celular
Kits e Templates DNA Reagent Kit 340242
BD Ciclo Celular FITC BrdU Flow Kit 559619
e DNA
APC BrdU Flow Kit 552598
CD45RA / CD45RO / CD3 / CD4 340571
Kits e Templates
CD45RA / CD62L / CD3 / CD4 340977
BD Naïve/Memory T- Cell
Human Naïve/Memory T Cell Panel 561438
Kits e Templates Th1/Th2/Th17 Phenotyping Kit 560751
Imunologia BD Célula T IFN-g/CD69/CD8/CD3 Kit 346048
Intracelular
IFN-g/IL4 Kit 340456
Kits e Templates Human Regulatory T Cell Cocktail 560249
BD para Células Human Th17/Treg Phenotyping Kit 560762
T Reguladoras
FoxP3 Staining Kit 560132
Kits e Templates Human Pluripotent Stem Cell Sorting and Analysis Kit 560461
Células BD Células-Tronco Human Pluripotent Stem Cell Transcription Factor Analysis Kit 560589
Tronco Pluripotentes
Human and Mouse Pluripotent Stem Cell Analysis Kit 560477
Ensaios Reagentes BD™ Cytometric CBA Kits Consulte site
Bead-Based Bead Array (CBA) CBA Flex Sets Consulte site
Template BD Accuri™ C6 -
Microbiologia Eawag Water Quality Template
de Qualidade da Água Eawag

8 and 6 Peak Bead Template 653144, 653145,

Configurações 653160
do Guia de Usuário do
Equipamento software BD Accuri™ 8 and 6 Peak Bead Template 24-tube Rack 653144, 653145,
653160

Faça download dos templates em bdbiosciences.com/br/templates

Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico. 25
 TM
BD LSRFortessa X-20
Desenvolvido para espaços reduzidos e potenciais sem limites

Analisador celular de alta performance para

ensaios multicolor com as menores dimensões
de sua categoria: 76,2 x 73,7 e 76,2 cm. Pode
ser configurado com até 5 lasers, para
detecção de até 20 parâmetros simultâneos. A
configuração óptica mais comum inclui os
lasers azul, vermelho, violeta, yellow-green e
UV. Mas há opções de lasers que podem ser
incorporados ao instrumento na compra ou
posteriormente, atendendo a novas
necessidades e aplicações.

bdbiosciences.com/br/x20

TM
BD FACSAria Fusion
A fusão de segurança, performance e separação celular

O BD FACSAria™ Fusion traz melhorias à

tecnologia patenteada que une a excepcional
performance multicolor e a facilidade de uso
trazida para o universo da separação celular
com o lançamento do BD FACSAria™ em
2003. Agora a expertise da separação celular
foi combinada com a melhor opção em
biossegurança para criar o BD FACSAria Fusion,
um separador celular totalmente integrado a
uma cabine de biossegurança para os
laboratórios de pesquisa. Um equipamento
que atende a exigência crescente de
laboratórios procupados com a exposição
acidental dos operadores às amostras
biológicas.

bdbiosciences.com/br/fusion

26 Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico.
 TM
BD FACSJazz
A nova era do cell sorting da BD.

Desempenho de tirar o fôlego. Isolamento

celular - cell sorting - de bancada com preço acessível.

Sorting Compacto e Descomplicado

Necessita menos de 51 x 51cm de espaço de bancada, o BD FACSJazz™ adequa-se
bem tanto como equipamento único do laboratório, quanto como componente de
facilities. O sistema eletrônico, fontes de alimentação de energia e tanques de
fluídos ficam localizados embaixo da bancada, ocupando um reduzido espaço da
área de trabalho ou, caso necessário, sendo facilmente instalado em cabines de
segurança biológica (CBS).
Com recursos que simplificam a operação de isoladores “stream-in-air”, o
BD FACSJazz™ aumenta a eficiência operacional de laboratórios com alto fluxo de
trabalho. O BD FACSJazz™ opera com diversos ajustes pré-otimizados, visando
simplificar a instalação e o treinamento. O inovador BD FACS™ Sortware foi
especialmente desenvolvido para fácil controle do equipamento durante a aquisição,
isolamento e análise.

Configuração
O BD FACSJazz™ pode ser configurado com até 3 (três) lasers e 8 parâmetros,
adequando-se às necessidades de laboratórios de diferentes portes. O sistema foi
desenvolvido para também realizar aplicações mais elaboradas, como, por exemplo,
análises “single-cell”, grandes responsáveis pelo acelerado ritmo de crescimento das áreas
de genômica e sequenciamento de nova geração.

bdbiosciences.com/br/jazz
Produtos exclusivos para uso laboratorial não clínico, não utilizar em procedimento diagnóstico. 27
Conheça as ferramentas online que
auxiliam sua pesquisa:
bdbiosciences.com/br/tools

Saiba mais sobre aplicações específicas com os

webinars BD Biosciences online:
bdbiosciences.com/br/webinars

Abril/2014

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