UNIVERSIDAD PEDAGOGICA NACIONAL

FACULTAD DE CIENCIA Y TECNOLOGIA

LICENCIATURA EN QUIMICA

GUÍA DE LABORATORIO
MICROSCOPIA II
RECONOCIMIENTO DE CELULAS PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS

DOCENTE: Sonia Muñoz Miranda

OBJETIVOS

 Reconocer morfológicamente las bacterias mediante micropreparados.

 Identificar estructuras subcelulares especificas de algunas bacterias.
 Distinguir características morfológicas y estructurales de las cianobacterias.
 Reconocer las células vegetales y sus características más notables.
 Distinguir algunos organelos en células eucarióticas vegetales y animales.
 Diferenciar algunas de los organelos de las células vegetales y animales mediante
con la ayuda de colorantes y métodos de tinción sencillos.

INTRODUCCIÓN

De los estudios realizados en corcho por Robert Hooke (1665), surge la palabra
"célula", que designa a las pequeñas cavidades de la pared de ese vegetal, constituido
fundamentalmente por celulosa. Posteriormente, el término, se aplicó a todos los
organismos vivientes microscópicos, que tienen vida independiente, es decir, a
aquellos organismos que, colocados en un ambiente con las condiciones adecuadas
de oxígeno, CO2, nutrientes, pH y temperatura mantienen el metabolismo celular.

Los organismos pueden ser unicelulares y pluricelulares. Los unicelulares

constituyen los microorganismos, como por ejemplo, las bacterias: y los
pluricelulares, por el contrario, están constituidos por varios tipos celulares, cada uno
de los cuales realiza determinadas funciones especializadas.

Las células pueden ser de dos tipos: Procariotas, cuando el material genético se
encuentra libre en el citoplasma sin ninguna membrana que lo aísle, y Eucariota,
cuando el material genético está aislado por un sistema de membranas formando el
núcleo celular.

Células procariotas
Las arqueobacterias son las bacterias más antiguas dentro de la evolución. Se
adaptan a condiciones ambientales extremas (extremófilos), son anaeróbicos y la
mayoría respira H2S. Se clasifican como halofílicas, son aquellas que viven en un
medio de salinidad extremo; metarógenas medios anaerobios extremos;
hipertermofiles medios con temperaturas extremas (volcanes); acidófilos grados de
acidez muy altos.
La eubacterias son propiamente las bacterias o procariotas, son microorganismos
unicelulares que se reproducen por fisión binaria (división simple). Presenta una
diversidad de tamaños que oscila 0.5 a 2 micrómetros y algunas pueden llegar a 10
micras.

Se clasifican en patógenas, fotosintéticas, forman parte del fitoplancton (púrpuras,

verdes, cianobacterias o algas azul-verdosas); fermentadoras, son saprofitas y
anaerobias estrictas; descomponedoras, son responsables de la mineralización de la
materia orgánica, participan en los ciclos biogeoquímicos; simbióticas, como el
rhizobium fijan el nitrógeno atmosférico en las leguminosas que digieren la celulosa en
el rumen de los rumiantes; las actinobacterias, importantes en medicina porque
producen antibióticos; y por ultimo bacterias que biodegradan productos de deshecho,
basura.

Las bacterias presentan una morfología definida determinada por su pared rígida. Son
en forma de coco, esféricas y ovaladas. Si la forma es cilíndrica se denominan bacilos
o bastones, los cuales pueden ser rectos, curvos o con forma de espiral, llamados
espirilos.

Los cocos o bacilos pueden agruparse en cadenas, en el caso de los cocos, cuando
se presentan agrupados, se denominan estreptococos; pueden formar tétradas o
como racimos, llamadas estafilococos. También se presentan como diplococos.

Casi todas las clases de bacterias poseen una capa

protectora resistente llamada pared celular (Fig. 1), ésta le
da su forma y le permite vivir en una amplia gama de
ambientes. Algunas especies están además rodeadas por
una cápsula, que la hace resistente a los productos
químicos. Todas las bacterias tienen una membrana
celular, que presenta invaginaciones llamadas
mesosomas, asimismo, en el caso de bacterias
fotosintéticas allí se encuentran los pigmentos
fotosintéticos. Las pequeñas moléculas del alimento se
incorporan a la célula a través de poros de ésta.

El citoplasma presenta un aspecto viscoso, que contiene enzimas, cuya función es

sintetizar y degradar el alimento. En su zona central aparece un nucleoide que
contiene la mayor parte del ADN bacteriano, y en algunas bacterias aparecen
fragmentos circulares de ADN con información genética, dispersos por el citoplasma
llamados plásmidos.

Muchas bacterias pueden presentar flagelos generalmente rígidos, implantados en la

membrana mediante un corpúsculo basal. Pueden poseer también, fimbrias o pilli muy
numerosos y cortos, que pueden servir como pelos sexuales para el paso de ADN de
una célula a otra. Poseen ARN y ribosomas característicos, para la síntesis de
proteínas.

Las cianobacterias (fig. 2), de color azulverdoso, son pequeñas, sin llegar al tamaño
de las bacterias, constan de una vaina que actúa como medio para evitar la
deshidratación y está formada de pectina. Bajo la vaina se encuentra la pared formada
por ácido murámico y celulosa y bajo ella la membrana protoplasmática. En el interior
de la célula se distinguen dos partes: el nucleoplasma lugar donde se encuentra el
ADN y el cromatoplasma. Tienen pigmentos con unas estructuras alargadas llamadas
tilacoides, de clorofila, xantofilas y carotenos Aparece también un pigmento, la
ficobilina localizado en los ficobilisomas; con este amplio conjunto de pigmentos están
en disposición de absorber la mayor parte de radiaciones.

Figura 2. Algas cianoficeas: diatomeas, spyrogiras, nostoc, entre otras

Células eucariotas

Se denomina eucariotas (del griego Eu=verdadero, Karion= núcleo) a todas las

células que tienen su material genético dentro de una membrana, que constituye el
núcleo celular. En su citoplasma se encuentra el citoesqueleto, complejo, muy
estructurado y dinámico, formado por microtúbulos y diversos filamentos proteicos.
Además puede presentar pared celular, típica de plantas, hongos y protistas
pluricelulares.

Las células eucariotas contienen en principio mitocondrias, orgánulos derivados por

endosimbiosis de ciertas bacterias, lo que les dota de la capacidad de desarrollar un
metabolismo aerobio. Sin embargo en algunos eucariontes del reino protistas las
mitocondrias han desaparecido secundariamente en el curso de la evolución, en
general derivando a otros orgánulos, como los hidrogenosomas.

Algunos eucariontes realizan la fotosíntesis, gracias a la presencia en su citoplasma

de orgánulos llamados plastos, los cuales derivan por endosimbiosis de bacterias del
grupo denominado cianobacterias (algas azules).

La célula presenta una membrana externa o plasmática que la rodea, su función es

la de mantener controlando lo que entra y sale de la célula. En las células vegetales
existe por fuera de la membrana una pared celular rígida. Todo el contenido de la
célula (moléculas y organelos) se denomina protoplasma. Técnicamente el
protoplasma se divide en un NÚCLEO y el CITOPLASMA.

El citoplasma se encuentran los organelos que están suspendidos en el citosol

(literalmente significa solución celular). Para formar y organizar el citoplasma y las
organelos existe una red de fibras proteicas que constituyen el citoesqueleto, formados
por microtúbulos, microfilamentos, filamentos intermedios y proteínas solubles y
diferenciaciones de ellas tales como fibras de actina y miosina.

Los principales orgánulos son: el núcleo es el elemento más prominente, rodeado de

una envoltura nuclear, es el depósito de la información genética de la célula, localizada
en la cromatina (ADN y proteínas); la cromatina puede estar dispersa en el núcleo o
condensada en cromosomas. Las mitocondrias, almacenan la energía, en forma de
ATP. El retículo endoplasmático (RE): sistema de canales membranosos que pueden
o no estar tapizados. Los ribosomas, son partículas de ARN y proteínas. El aparato
de Golgi: pilas de sacos membranosos que modifican las proteínas y los lípidos,
sintetizan carbohidratos y empacan moléculas para su transporte.

La forma de la célula es variada y relacionada a la función que realizan en los

diferentes tejidos, algunas tienen formas típica, como las neuronas (células del tejido
nervioso), son mas largas que anchas y otras, como las del parénquima (un tipo de
célula de las plantas) y eritrocitos (glóbulos rojos de la sangre), son
equidimensionales; otras, como los leucocitos, son de forma cambiante.

La célula vegetal comprende: membrana plasmática, retículo endoplasmático granular

liso, aparato de Golgi, mitocondria, núcleo, ribosomas, plastos o plastidios (como los
cloroplasto donde se realiza la fotosíntesis), pared celulósica, vacuola.

MATERIAL DE PRUEBA
Bacterias
Micropreparados

Cianofíceas
Agua de charco

Material Vegetal: mantenga este material fresco y húmedo, mientras lo transporta al

lugar de la práctica.
Papa, bulbos de cebolla, tomate, pasto, tallos, hojas de elodea, pétalos de flores.
Material Animal:
Agua de charco, extendidos de sangre, células epiteliales de mucosa, levadura
(hongos unicelulares).

REACTIVOS
Rojo neutro Tionina
Eosina NaCl 0.9%
Hematoxilina Azul de metileno
Lugol Suspensión de levaduras

MATERIALES
Láminas
Laminillas
Cuchilla
1 Gotero largo

Colores
Papel absorbente (pañuelos o toallas
desechables)
Jabón de manos
Palillo
EQUIPOS
Microscopio y estereoscopio.

OBSERVACIONES IMPORTANTES: siga las normas de microscopía para todas las

observaciones, enfoque primero en el menor aumento, luego en 10X y cuando haya
ubicado el objeto de observación, páselo al objetivo de 40X. Haga los cortes a mano
alzada o apoyándose en un portaobjetos, si lo desea, para una mejor visualización, utilice
un estereoscopio.
PROCEDIMIENTO
A. Reconocimiento de las bacterias y su estructura:
Observe la lámina del micropreparado en el objetivo de menor aumento. Posteriormente
adicione una gota de aceite de inmersión, y observe en el objetivo de 100X. Anote las
estructuras identificadas de la bacteria.

B. Observación de cianofíceas en agua de charco:

Sobre una lámina colocar una muestra de agua de charco no contaminado. Cubrirla con
una laminilla, observar con menor aumento y luego con 40X. Enfocar varios campos.
Anote las estructuras identificadas

C. Observación de levaduras (Saccharomyces cerevissiae):

1. Tome una muestra de suspensión de levaduras y colóquela sobre un portaobjetos.
2. Agregue una gota de azul de metileno coloque el cubreobjetos.
3. Observe al microscopio en el menor y mayor aumento y esquematice.

D. Montaje húmedo de catáfilo de cebolla (Allium cepa L.)

1. Desprenda un catáfilo de cebolla del lado interno de una hoja de bulbo de cebolla.
2. Colóquelo sobre una lámina, tratando que el corte quede bien extendido. Agregue
una gota de agua, cúbralo con la laminilla evitando la formación de burbujas.
3. Dibujar lo observado.
4. Repita los numerales 1 y 2, pero esta vez divida imaginariamente la lámina en dos
secciones. A la primera sección de catáfilo agregue una gota de solución de rojo
neutro y a la segunda agregue una gota de lugol. En ambos casos deje actuar
unos minutos mientras el colorante se absorbe y lleve al microscopio.
E. Observación de cloroplastos en células de Elodea (Egeria densa). (fig.3)
1. Prepare un montaje húmedo de una hoja fresca de elodea
2. Observe en menor y mayor aumento.
3. Identifique los cloroplastos y esquematice. Observe y describa el fenómeno de
"ciclosis".

F. Observación de amiloplastos en células de papa (fig. 4)

1. Tome un trozo de papa y con una cuchilla haga un raspado y deposítelo sobre la
lámina, agregue una gota de lugol, cubra y lleve al microscopio.
2. Observar y dibujar las estructuras identificadas.

G. Observación de cromoplastos: (fig. 5)

 Montaje húmedo de pulpa de tomate
1. Tome una muestra de su pulpa roja, extiéndala sobre la lámina. Agregue una gota
de agua, cubra y lleve al microscopio.
2. Observe las granulaciones coloreadas (cromatóforos)

H. Observación de diferentes tallos

1. Realice un corte transversal del tallo de pasto o de alguna de las muestras que
llevó para la práctica, lo más fino posible.
2. Adicione una gota de tionina. Deje unos minutos. Deje actuar unos minutos
mientras el colorante se absorbe y lleve al microscopio.
3. Dibuje las estructuras observadas. Identifique el xilema y el floema.

I. Observaciones de células animales (sanguíneas y epiteliales)

Células sanguíneas
Enfocar en el microscopio un micropreparado de sangre e identificar a mayor aumento los
glóbulos blancos, glóbulos rojos y plaquetas (fig. 6)

Células epiteliales (fig. 7)

Con un palillo raspe suavemente la superficie interna de la mejilla, elaborar un frotis sobre
una lámina que contiene una gota de solución salina, colorear con azul de metileno y
cubrir con la laminilla. Enfoque en el objetivo de menor aumento y luego en el de 10X.
Dibujar las células y señalar en ella los compartimientos que se observan.

II. Observaciones de células animales (protozoarios)

Figuras representativas de células animales y vegetales

Taller complementario
1. Mencione las estructuras exclusivas de las células eucariotas vegetales.
2. Enumere las estructuras comunes a todas células eucariotas.
3. Qué fenómenos ocurren en las células eucariotas vegetales?
4. Realice un cuadro clasificando los plastidios según pigmentos que presenten y
función que los mismos realizan.

BIBLIOGRAFIA
BERKALOFF, A., BOURGUET, J., FAVARD, P., Y LACROIX, J-C. Biología y Fisiología
Celular Volumen II: Aparato de Golgi, Lisosomas, Mitocondrias, Células y Virus.
Barcelona: Editorial Omega, S.A., 1988.

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Celular. Volumen III: Cloroplastos, Peroxisomas, División Celular. Barcelona: Editorial
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Celular. Volumen IV: Cromosomas, Nucleolos, Envoltura celular. Barcelona: Editorial
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CURTIS, H., N.S. BARNES. Biología. Barcelona: Panamericana, 6ª Ed. 2001.

DE ROBERTIS H. HIB., PONZIO. Biología Celular y Molecular de Robertis. Argentina: Ed.

El Ateneo.13ª ed. 2003.

PURVES, W. K K, D. SADAVA, G. H. ORIANS. Vida: La Ciencia de la Biología. México:

Ed. Panamericana, 7ªed. 2005.

Páginas web:
http://www.selectividad.net/cem/apuntesexamenes/apuntes/biologia/bacterias.pdf
http://www.bcelular.fmed.edu.uy/Material/morfyest.pdf

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http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/alumno/1ESO/planeta_habitado/activ_video2.htm