1.

Preparación de soluciones amortiguadoras

Tipo de práctica: Duración: Indicaciones de peligro:

Grupal (2 personas) 4 horas

OBJETIVOS

 Explorar las características de los sistemas amortiguadores y la forma como

mantienen valores constantes de pH.
 Determinar la Ka para un ácido débil o Kb para una base débil.
 Preparar una solución amortiguadora de un pH determinado.
 Determinar la magnitud del cambio de pH cuando se adiciona acido o base a una
solución amortiguadora.

Conceptos relacionados: Soluciones tampón, equivalentes ácido-base, equilibrio

iónico, producto iónico del agua, contante de disociación del agua, capacidad
amortiguadora.

FUNDAMENTO TEÓRICO

Las soluciones amortiguadoras son muy importantes en los procesos biológicos y en

general, los seres vivos utilizan diferentes tipos de soluciones amortiguadoras para
controlar el pH en que llevan a cabo las reacciones bioquímicas.

Una solución amortiguadora contiene solutos que mantienen constante el pH

después de la adición de pequeñas cantidades de ácido o base. Un sistema de este
tipo, consiste de un ácido o una base débil y su sal respectiva, por ejemplo el ácido
carbónico y el bicarbonato de sodio son un sistema amortiguador.

El pH de una solución amortiguadora se puede determinar haciendo uso de la

ecuación de Henderson-Hasselbalch:

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A partir de esta fórmula se pueden deducir fácilmente las propiedades de los
amortiguadores:

1. El pH de una solución amortiguadora depende de la naturaleza del ácido débil

presente (de su pKa), de modo que para cantidades equimolares de sal y de
ácido, el pH es justamente el pKa de este ácido. Dicho de otra forma, se puede
definir el pKa de un ácido débil como el pH del sistema amortiguador que se
obtiene cuando [sal] = [ácido], siguiendo la ecuación de Henderson-Hasselbalch
mencionada anteriormente.
2. El pH de la solución amortiguadora depende de la proporción relativa entre la sal
y el ácido, pero no de sus concentraciones absolutas. De aquí se deduce que
añadiendo agua al sistema, las concentraciones de sal y ácido disminuyen
proporcionalmente, pero su cociente permanece constante, y el pH no cambia.
Sin embargo, si la dilución llega a ser muy grande, el equilibrio de disociación
del ácido se desplazaría hacia la derecha, aumentando la [sal] y disminuyendo la
[ácido], con lo que el cociente aumenta y el pH también, de forma que se iría
acercando gradualmente a la neutralidad (pH 7).
3. Cuando se añaden ácidos o bases fuertes a la solución amortiguadora, el
equilibrio se desplaza en el sentido de eliminar el ácido añadido (hacia la
izquierda) o de neutralizar la base añadida (hacia la derecha). Este
desplazamiento afecta a las proporciones relativas de sal y ácido en el equilibrio.
Como el pH varía con el logaritmo de este cociente, la modificación del pH
resulta exigua hasta que uno de los componentes está próximo a agotarse.

Como ejemplo de lo anterior, la adición de 10 mL de una solución 0.10 M de NaOH

a 1 L de agua destilada incrementa el pH en 4 unidades (de 7 a 11).

Para una solución amortiguadora de 0.20 M de ácido acético (CH3COOH) y de

acetato de sodio (CH3COONa) su pH es de 4.76. Cuando se le agregan cantidades
moderadas de un ácido o de una base a esta solución, el pH experimenta pocos

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cambios. Así, tendremos que la adición de 10 mL de una solución de NaOH 0.10 M
en un litro de la solución de ácido acético (CH3COOH) y acetato de sodio
(CH3COONa) incrementa el pH en 0.01 unidades, es decir el nuevo pH de la
solución sería 4.77.
En conclusión, una solución amortiguadora es capaz de resistir cambios en el pH,
situación que no sucede con el agua pura o con un ácido al que se le agrega la
cierta cantidad de base o viceversa.

Por ejemplo la solución amortiguadora preparada entre ácido acético (CH3COOH) y

acetato de sodio (CH3COONa):

El ácido acético y su anión acetato “CH3COO-“ reaccionan con los iones H+ u OH-
que se agreguen a la solución. Cuando se añade un ácido a esta solución, el ion
acetato reacciona formando ácido acético, que no se disocia completamente en
agua (electrolito débil), de acuerdo con la siguiente reacción:

De esta forma el pH de la solución no cambia.

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Cuando se añade una base a esta solución, el ácido acético reacciona con los iones
OH, de acuerdo con la siguiente reacción:

Debido a que el ion acetato no es una base lo suficientemente fuerte para aceptar
iones H+ del agua, el pH de la solución no presenta cambios significativos.

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La cantidad de ácido o base que se puede agregar a una solución amortiguadora
antes de cambiar de forma significativa su pH de denomina capacidad de
amortiguación o capacidad buffer.

Entre las soluciones amortiguadoras fisiológicas importantes se encuentra el

sistema ácido carbónico – anión bicarbonato, responsable de mantener el pH de la
sangre dentro de un intervalo pequeño de variación, indispensable en los humanos.

MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales Reactivos
Espátula Cloruro de sodio (NaCl) 0.1M
Erlenmeyer de 100 y 250 mL Hidrogenosulfato de sodio (NaHSO4) 0.1 M
pH metro Acetato de sodio (CH3COONa) 0.1 M
Pipeta de 10 mL Ácido acético (CH3COOH) 0.1 M
Vaso de precipitados Carbonato de sodio (Na2CO3) 0.1 M
Hidrogenocarbonato de sodio (NaHCO3) 0.1 M
Hidróxido de sodio (NaOH) 0.1 M
Ácido clorhídrico (HCl) 0.1 M

PROCEDIMIENTO

1. Preparación de soluciones amortiguadoras de: Acetato y Bicarbonato

Con ayuda del pHmetro, mida el pH de cada una de las soluciones que dispone en
la mesa de reactivos. Compare estos resultados con los datos teóricos calculados
previo a la práctica de laboratorio.

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Posteriormente, prepare 50 mL de las soluciones amortiguadoras de: CH3COOH y
CH3COONa; Na2CO3 y NaHCO3 a una concentración 0.1 M. Realizar los cálculos
teóricos de pH y compararlos con los resultados experimentales obtenidos.

2. Evaluación capacidad amortiguadora

Divida en dos volúmenes iguales la solución amortiguadora de acetato (preparada
en el paso anterior). Adicione 1 mL de NaOH 0.1 M a una mitad y 1 mL de HCl 0.1
M a la otra mitad. Registre el pH resultante de después de cada adición. Realice los
cálculos teóricos de pH y compárelos con los obtenidos experimentalmente.

Repita el procedimiento anterior a) utilizando la solución amortiguadora Bicarbonato

y, b) utilizando agua en lugar de solución amortiguadora.

3. Determinación de la constante ácida (Ka)

Preparar una solución amortiguadora mezclando 1 mL de la solución ácida y 10 mL

de la base conjugada. Medir el pH. Calcular con estos datos el pKa y el Ka del ácido.

Preparar una solución amortiguadora mezclando 10 mL del ácido y 1 mL de solución

de la base conjugada. Medir el pH y calcular con estos datos el pKa y el Ka.
Comparar resultados con el punto anterior y los datos teóricos reportados en la
literatura.
 Disposición de los residuos
Los residuos químicos generados en la práctica de laboratorio deben ser
descartados en el recipiente apropiado, rotulado de acuerdo al tipo de sustancia.

CUESTIONARIO PREVIO AL DESARROLLO DE LA PRÁCTICA DE

LABORATORIO
1. Escribir las ecuaciones químicas netas para soluciones de NaCl, NaHSO 4,
CH3COONa, CH3COOH, Na2CO3, y NaHCO3 0.1 M, y calcular los valores teóricos
de pH.

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2. Para cada etapa de la sección experimental, determine los valores de pH
teóricos así como también, los volúmenes requeridos para preparar las
soluciones amortiguadoras.
3. Si quisieras preparar un buffer de fosfatos de potasio pH 11, ¿Qué sales
seleccionarías?
4. ¿El buffer de acetato de sodio que preparaste está a un pH que se puede
considerar adecuado para servir como solución reguladora? Explica tu respuesta.
5. En la preparación del acetato de sodio, cual es el ácido y cual la base conjugada.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Wilson, K., and Walker, J. 2000. Principles and Techniques of practical

Biochemistry. Fifth edition. Cambridge University Press.
2. Robert, JF. and White B.J. 1990. Biochemical techniques theory and practice. 1st
edition. Waveland Press, Inc. USA.
3. Douglas A. Skoog and Donald M. West.1971. Principles of Instrumental Analysis.
Holt, Rinehart and Winston, Inc.
4. Rodney F. Boyer.1986. Modern Experimental Biochemistry. The
Benjamin/Cummings Publishing Company, Inc.
5. Segel, I. H. 1976. Biochemical Calculations. How to Solve Mathematical
Problems in General Biochemistry. Second Edition. John Wiley & Sons, Inc., New
York.