Sie sind auf Seite 1von 3

RÁPIDA PRUEBA DE ELISA VISUAL PARA LA DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE LA

GONADOTROPINA CORIÓNICA HUMANA EN LA ORINA O SUERO

almacenar entre 2 y 8

uso previsto

INTRODUCCION

gonadotropina coriónica humana es una hormona glicoproteína secretada por la placenta en


desarrollo poco después de la fertilización. En el embarazo normal, la hCG puede detectarse
generalmente a los 7 días después de la concepción (1-4), se duplica cada 1, 3 a 2 días. En el
momento de la primera período menstrual perdido. concentración de hCG es de unos 100 mlU /
ml, y los niveles máximos de 100.000-200.000 mUI / ml se ve al final del primer trimestre. La
aparición de hCG poco después de la concepción y su posterior aumento de la concentración
durante el crecimiento gestacional temprano lo convierten en un excelente marcador para la
detección precoz del embarazo.

Los niveles de hCG elevados comparables a los observados en el embarazo temprano también
pueden estar asociados con neoplasia trofoblástica o no trofoblásticos (6-7) como mola
hidatidiforme, coriocarcinoma; Por lo tanto, la posibilidad de tal enfermedad debe descartarse
ante un resultado positivo de hCG se considera diagnóstico de embarazo.

PRINCIPIO DE LA PRUEBA

la prueba de ELISA HCG visual es un inmunoensayo enzimático sándwich (8-9) para la


determinación de la gonadotropina coriónica humana en la orina o suero. El método emplea dos
anticuerpos nonoclonal para identificar selectivamente hCG en orina / suero con un alto grado de
sensibilidad, En menos de 10 minutos, los niveles elevados de hCG o tan poco como 20 pueden ser
detectados mlU / ml.

Se permite la muestra del paciente para reaccionar con el conjugado enzima-anticuerpo y los
anticuerpos en la fase sólida de forma simultánea, En.

la presencia de hCG, una voluntad complejo de anticuerpo-hCG-anticuerpo-enzima específica de


en la superficie del pocillo de microtitulación. Después de enzima conjugado no unido se elimina
mediante aclarado en una corriente de agua destilada, el pozo se incuba con TMB Regent. El
desarrollo del color azul en el pozo indicó la presencia de hCCG.

la comparación de la intensidad de color de las muestras de pacientes con la de la referencia


conocido proporcionado, la cantidad de hCG se puede estimar visualmente para ser mayor o
menor que 20 mUI / ml.

RECOGIDA DE MUESTRAS Y PREPARACIÓN


los especimen deben recogerse en un recipiente limpio y seco, ya sea de plástico o de vidrio, sin
conservantes. Muestra recogida en cualquier momento se pueden usar. Sin embargo, la primera
orina de la mañana contiene generalmente la concentración más alta de hCG.

Todas las muestras deben ser refrigeradas (2-8 º C) y se almacenan hasta 72 horas antes del
ensayo. Si se refrigeran muestras, que deben equilibrarse a temperatura ambiente antes de la
prueba. Aquellas muestras que presenten partículas visibles deberían ser filtrados, se centrifuga o
permitir que sedimenten.

No se requiere ninguna preparación especial de la muestra del paciente. Aditivos tales como azida
de sodio deben ser evitados. Estudios limitado de la muestra indicaron que muestra de plasma
preparado a partir de EDTA puede ser usada en lugar de suero. El suero no a ensayar
inmediatamente deben almacenarse en un refrigerador o un congelador. Llevar estas muestras a
temperatura ambiente antes de la prueba. No congelar y descongelar repetidamente.

PRECAUCIONES

1. No añadir azida de sodio a las muestras como conservante, ya que inhibe la actividad
enzimática.
2. No mezcle reactivos de diferentes lotes y no utilice los componentes del kit después de la
fecha de caducidad.
3. Do not interchange bottle caps.

procedimiento de ensayo

Todos los reactivos y las muestras deben ser

Comparar el color desarrollado en los pozos de muestras a la de la referencia positiva bien (20 mUI
/ ml)

Positivo: pozos que muestran de color azul fuerte que el mlU / ml Estándar de Referencia 20
indican la presencia de hCG o resultados positivos.

Negativos: pozos que no muestran color o de color azul débil más débil que el estándar de
referencia 20 mUI / ml indican que no hay detectable amout o menos de 20 mUI / ml de hCG en la
muestra.

Un matiz azulado ligero, mucho más ligero que el de referencia positiva así, puede ser el resultado
de en un lavado suficiente y debe ser considerado negativo. Si la muestra de pacientes muestra un
resultado negativo, pero se sospecha de embarazo, la prueba debe repetirse utilizando una
muestra fresca obtenida de 2-3 días después.

nota

Dependiendo de la concentración de hCG en los especimen, el color puede desarrollar de forma


instantánea.

La incubación del reactivo TMB más allá de 5 minutos puede dar lugar a un ligero tono de azul
mucho menos intensa que a continuación de la referencia positiva (20 mUI / ml). Esto todavía
debe ser considerada negativa.

limitaciones del procedimiento

Se obtendrán resultados fiables y reproducibles cuando el procedimiento de ensayo in llevó a cabo


con una completa comprensión de las instrucciones del prospecto y con el cumplimiento de
buenas prácticas de laboratorio.

El procedimiento de lavado es lavado insuficiente crítico resultará en una precisión pobre y


lecturas de absorbancia falsamente elevadas.

Las muestras de suero que contengan lipemia, hemolisis o turbidez no deben ser utilizados con
este examen.

Los resultados obtenidos por el uso de este kit deben utilizarse sólo como un adjunto a otros
procedimientos de diagnóstico y la información disponible para el médico.

características de rendimiento

Los hombres sanos y mujeres no gestantes sanas no tienen hcg detectable por la prueba de elisa
visual. El nivel de hCG de 20 mUI / ml se puede alcanzar en el primer período menstrual. Niveles
de hCG punto máximo alrededor de 8 semanas después del último período menstrual y luego se
niegan a valores más bajos para el resto del embarazo. Después del parto, los niveles de hCG
disminuyen rápidamente y por lo general vuelven a la normalidad en cuestión de días después del
parto.

La sensibilidad y la especificidad.

La sensibilidad de la prueba ELISA visual se fija en 20 mlU / ml. El 20 mlU / ml Referencia Positivo
(calibrado para el estándar internacional 2 °) fue diseñado como el punto de corte para la prueba
debido a concentraciones de hCG en este rango se logran por lo general durante la 2 ° semana
después de la concepción.