Apuntes de Cinetica de Crecimiento Microbiano PDF

Apuntes de ciné tica
de crecimiento
microbiano
Iván Paredes
M.SC. Ingeniería Bioquímica
Cinética de Cultivos Celulares
Crecimiento celular en un cultivo por lotes

El conocimiento de la cinética de crecimiento y producción de metabolitos es fundamental en el
tratamiento cuantitativo de los procesos de cultivos celulares. El conocimiento de la cinética de
cultivo permite la predicción del comportamiento del cultivo; la evaluación de velocidades,
rendimientos y productividades; y entrega información útil para establecer estrategias de
producción y optimización del proceso.
El comportamiento cinético de una población está determinado por un conjunto de factores

genéticos y ambientales (figura 1). Entre estos últimos destacan las condiciones de operación,
como la composición del medio, la temperatura, el pH, agitación, aireación, etc.; y la modalidad
del cultivo, entre las que se distinguen el cultivo por lotes, el cultivo por lotes alimentados y el
cultivo continuo.
Figura 1: Aspectos que intervienen en la interacción entre las células y el medio ambiente a lo largo de su
crecimiento.
El cultivo por lotes se define como aquel que se realiza sin intercambio de materia con los
alrededores, salvo en lo que se refiere a gases (aireación, producción de CO2, y otros gases), los
que se suministran y retiran en forma continua.
La curva característica de crecimiento de un cultivo por lotes (figura 2), se cumple siempre que se
den ciertas condiciones: que todas las células que componen la población se reproduzcan a
intervalos regulares, que no existan sustancias inhibidoras del crecimiento y que la composición
del medio se simple, en especial a las fuentes de carbono y nitrógeno.
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Figura 2: Curva característica del crecimiento de un cultivo celular por lotes
La curva presenta varias zonas o fases:

1. Fase de latencia: Se produce inmediatamente después de la inoculación. En ella no hay
iniciación de la replicación. En esta fase se realiza la adaptación y aclimatación del
microorganismo a las condiciones ambientales del cultivo (nutrientes, temperatura,
soporte, pH, etc.), comienza a activar su maquinaria enzimática para responder en forma
adecuada a las nuevas condiciones. La duración va a depender de que tan diferentes son
estas condiciones en relación a las anteriores (antes de la inoculación). Existe un efecto
significativo si el cambio se realizó desde un medio solido a uno líquido. Esta fase no es
productiva, por lo que se busca que su duración sea lo más corta posible, haciendo que el
medio de destino sea lo más similar al medio de origen, además es recomendable que en
el momento de realizar la inoculación, el cultivo este creciendo en forma vigorosa. La
cantidad de biomasa a inocular es aproximadamente el 10% de la biomasa que se busca el
terminar el cultivo. En cultivos industriales la propagación se realiza en forma escalonada.
2. Fase de crecimiento exponencial: En esta fase el tiempo entre las duplicaciones es el
mismo, produciéndose un crecimiento vigoroso del cultivo. Las bacterias son las que más
se ajustan a este modelo, al duplicarse siguiendo una progresión geométrica. En levaduras
el tiempo de duplicación va aumentando durante el transcurso del cultivo, debido a un
envejecimiento celular, por lo tanto la fase de crecimiento exponencial es más corta. En
un medio totalmente controlado, las bacterias detienen su crecimiento solo al sufrir un
agotamiento de nutrientes en el medio de cultivo, en cambio en un cultivo de levaduras,
se observaría una fase de desaceleración más larga.
3. Fase estacionaria: En la fase estacionaria biomasa permanece constante, sin observar una
pérdida de la viabilidad del cultivo. El crecimiento se detiene a causa de un agotamiento
de algún nutriente, falta de oxígeno, acumulación de un compuesto toxico o inhibitorio,
etc. Dependiendo del nutriente limitante, se presentan diferentes cambios en la fase
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estacionaria. En algunos microorganismos es posible la acumulación de oligosacáridos, si

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el nutriente limitante no es carbono.

4. Fase de muerte del cultivo: Esta fase es una consecuencia del agotamiento de la fuente de
carbono y energía o la acumulación de compuestos tóxicos sobre los límites tolerados por
la célula; por lo que el cultivo no es capaz de mantenerse viable, provocando la lisis
celular. En algunos casos esta lisis celular, da espacio a que este material vertido al medio
de cultivo sea aprovechado por otras células, produciéndose un crecimiento críptico.
Es posible distinguir también otras cortas fases de aceleración y desaceleración del crecimiento.
La fase estacionaria puede presentar una suave pendiente positiva si el nutriente limitante es la
fuente de nitrógeno. En el caso el metabolismo de la fuente de carbono y energía puede continuar
por algún tiempo, con acumulación de compuestos de reserva y aumento de la biomasa.
Modelación de crecimiento celular

Durante el crecimiento celular existe una variación de la biomasa en el tiempo, la cual puede ser
representada por:
𝒅𝒅𝒅𝒅
𝒓𝒓𝒙𝒙 = = 𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗 𝒅𝒅𝒅𝒅 𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄 𝒅𝒅𝒅𝒅 𝒍𝒍𝒍𝒍 𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃
𝒅𝒅𝒅𝒅
Según la ecuación de Malhtus se tiene el siguiente comportamiento en una población si se tiene

una progresión geométrica:
𝑑𝑑𝑑𝑑
𝑟𝑟𝑥𝑥 = = 𝑘𝑘 ∙ 𝑋𝑋 − 𝛼𝛼 ∙ 𝑋𝑋
𝑑𝑑𝑑𝑑
Donde k es una constante asociada al crecimiento celular, α es una constante asociada a la muerte
celular y X es la concentración de biomasa. Si suponemos una muerte celular despreciable en
relación a la duplicación, la ecuación se puede expresar de la siguiente manera:
𝑑𝑑𝑥𝑥 1
𝑘𝑘 = ∙
𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑥𝑥
De esta forma k pasa a ser la velocidad específica de crecimiento, que se notara como μ.
Por lo tanto la ecuación de velocidad de variación de biomasa queda como:
𝒅𝒅𝒅𝒅
𝒓𝒓𝒙𝒙 = = 𝝁𝝁 ∙ 𝑿𝑿
𝒅𝒅𝒅𝒅
Aplicando los límites de integración desde un tiempo inicial a un tiempo t:
𝑥𝑥 𝑡𝑡
𝑑𝑑𝑑𝑑
� = � 𝜇𝜇 ∙ 𝑑𝑑𝑑𝑑
𝑥𝑥0 𝑥𝑥 𝑡𝑡0
Resolviendo:
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𝑿𝑿
𝐥𝐥𝐥𝐥 �𝑿𝑿 � = 𝝁𝝁 ∙ (𝒕𝒕 − 𝒕𝒕𝟎𝟎 ) O 𝒙𝒙 = 𝒙𝒙𝟎𝟎 ∙ 𝒆𝒆𝝁𝝁∙𝒕𝒕
𝟎𝟎
Al graficar el ln(X) versus el tiempo (figura 3), se puede obtener μ, por medio de la determinación
de la pendiente de la ecuación de la recta.
𝐥𝐥𝐥𝐥( 𝒙𝒙) = 𝐥𝐥𝐥𝐥( 𝒙𝒙𝟎𝟎 ) + 𝝁𝝁 ∙ 𝒕𝒕
ln x
tiempo
Figura 3: determinación grafica de la velocidad especifica de crecimiento.
El parámetro μ es de especial relevancia en el estudio de la cinética de cultivos celulares. Su

dimensión es tiempo-1. Relacionado con μ, existe otro parámetro cuya interpretación física es más
directa: el tiempo de duplicación, td, definido como el tiempo que media entre dos duplicaciones
sucesivas, aplicando esto a la ecuación anterior
2𝑋𝑋0
ln � � = 𝜇𝜇 ∙ 𝑡𝑡𝑑𝑑
𝑋𝑋0
Por lo tanto el td, queda finalmente como:
𝐥𝐥𝐥𝐥(𝟐𝟐)
𝒕𝒕𝒅𝒅 =
𝝁𝝁
En forma referencial se pueden tomar los siguientes tiempos de duplicación:

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Tiempos de duplicación (horas)

 Bacterias 0,3 a 2,5
 Levaduras 1,0 a 4,0
 Mohos 1,5 a 7,0
 Microalgas 18 a 35
 Células animales 20 a 40
Efecto de la concentración de sustrato en el crecimiento celular

El valor de μ depende del microorganismo que se trate y de los parámetros ambientales de
cultivo. Entre estos cabe mencionar la composición del medio de cultivo, la temperatura, pH, Eh, la
presencia de tenso activos y la actividad termodinámica del agua.
El efecto del medio de cultivo es tanto cuantitativo como cualitativo. La naturaleza de los
nutrientes influye en el valor de μ, en especial en el caso de las fuentes de carbono, energía y
nitrógeno.
El efecto cuantitativo de la fuente de carbono y energía sobre la velocidad específica de

crecimiento, fue estudiado por Monod en 1949, quien observo experimentalmente la relación de
μ con la concentración de sustrato y propuso la siguiente ecuación para representarla,
representada gráficamente en la figura 4:
𝑺𝑺
𝝁𝝁 = 𝝁𝝁𝒎𝒎 ∙
𝑲𝑲𝒔𝒔 + 𝑺𝑺
Donde
Ks: es la constante de afinidad del microorganismo por el sustrato, entre mas afín sea, más
pequeño será el valor del Ks.
μm: valor máximo que puede obtener la velocidad especifica de crecimiento cuando la
concentración de sustrato es órdenes de magnitud mayor que Ks.
La velocidad específica de crecimiento es función de la concentración de sustrato limitante, sin
importar la concentración de los otros nutrientes.
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Figura 4: relación entre la velocidad específica de crecimiento y la concentración de sustrato limitante en un

cultivo celular.
De la grafica se puede evaluar las siguientes situaciones:

𝝁𝝁𝒎𝒎
• Ks = S entonces 𝝁𝝁 =
𝟐𝟐
• S >>> Ks entonces 𝝁𝝁 = 𝝁𝝁𝒎𝒎
𝑺𝑺
• S <<< Ks entonces 𝝁𝝁 = 𝝁𝝁𝒎𝒎 ∙
𝑲𝑲𝑲𝑲
La ecuación de Monod se puede linealizar tomando los recíprocos para obtener la expresión:
𝟏𝟏 𝑲𝑲𝒔𝒔 𝟏𝟏 𝟏𝟏
= ∙ +
𝝁𝝁 𝝁𝝁𝒎𝒎 𝑺𝑺 𝝁𝝁𝒎𝒎
Una grafica de 1/μ frente a 1/S (Figura 5), produce una línea recta con pendiente Ks/μm, abscisa al
origen -1/Ks y ordenada al origen μm.
Figura 5: Grafica de doble reciproca de 1/μ frente a 1/S
La aplicación de la ecuación planteada por Monod, se ha extendido a las fuentes de otros

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nutrientes, además de la fuente de carbono y energía.

Los valores de la constante de saturación Ks (tabla 1), son del orden de las unidades o las decenas
de partes por millón, por lo que cuando la concentración de sustrato es de gramos o decenas de
gramos por litro, la velocidad especifica de crecimiento se hace prácticamente igual a μm. Por este
motivo la pendiente de la figura 3 es una estimación de μm en ausencia de inhibidores.
Tabla 1: valores referenciales de Ks para diferentes géneros de microorganismos.
Durante en largo periodo de del crecimiento S >>> Ks; si es 10 veces mayor se supone un μ = µm, si
es igual o menor a 10 veces se comienza a tener evidencia de la falta de sustrato y comienza la
desaceleración del crecimiento. En la fase de crecimiento exponencial la velocidad específica de
crecimiento es constante y se asume como μm.
De esta forma la ecuación para la variación de biomasa en el tiempo queda como:
𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑆𝑆
= 𝜇𝜇𝑚𝑚 ∙ ∙ 𝑋𝑋
𝑑𝑑𝑑𝑑 𝐾𝐾𝑠𝑠 + 𝑆𝑆
Cuando Ks es menor que S, al integrar y despejar, la ecuación queda:
𝐗𝐗 𝒀𝒀 ∙ 𝑺𝑺𝟎𝟎 + 𝑿𝑿𝟎𝟎 − 𝑿𝑿
𝑷𝑷 ∙ 𝐥𝐥𝐥𝐥 � � −𝑸𝑸 ∙ 𝐥𝐥𝐥𝐥 � � = 𝝁𝝁𝒎𝒎 ∙ 𝒕𝒕
𝐗𝐗 𝟎𝟎 𝒀𝒀 ∙ 𝑺𝑺𝟎𝟎
Donde:
𝑋𝑋 − 𝑋𝑋0
𝒀𝒀 =
𝑆𝑆0 − 𝑆𝑆
𝐾𝐾𝑠𝑠 ∙ 𝑌𝑌 + 𝑆𝑆0 + 𝑋𝑋0

𝑷𝑷 =
𝑌𝑌 ∙ 𝑆𝑆0 + 𝑋𝑋0
𝐾𝐾𝑠𝑠 ∙ 𝑌𝑌 + 𝑆𝑆0 + 𝑋𝑋0

𝑸𝑸 =
𝑌𝑌 ∙ 𝑆𝑆0 + 𝑋𝑋0
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Efectos de inhibición sobre la velocidad especifica de crecimiento
El modelo de Monod no siempre logra representar adecuadamente los datos experimentales, en

especial cuando el medio de cultivo es complejo y contiene varias fuentes de carbono y de
nitrógeno. En esos casos pueden resultar más adecuados otros modelos de crecimiento, entre los
que destaca la ecuación logística y sus modificaciones.
𝒅𝒅𝒅𝒅
= 𝑲𝑲 ∙ 𝑿𝑿 ∙ (𝟏𝟏 − 𝜷𝜷 ∙ 𝑿𝑿)
𝒅𝒅𝒅𝒅
1
Donde 𝛽𝛽 = siendo Xm el máximo número de individuos que soporta el ambiente.
𝑋𝑋𝑚𝑚
Cuando βX es pequeña, se hace despreciable frente a 1. Cuando βX es igual a 1, el crecimiento se
detiene, con este modelo se logra poner un límite al crecimiento. Luego de ordenar e integrar la
ecuación finalmente queda:
𝑿𝑿𝟎𝟎 ∙ 𝒆𝒆𝒌𝒌∙𝒕𝒕
𝑿𝑿 =
𝟏𝟏 − 𝜷𝜷 ∙ 𝑿𝑿𝟎𝟎 ∙ (𝟏𝟏 − 𝒆𝒆𝒌𝒌∙𝒕𝒕 )
Cuando el tiempo es pequeño, el denominador se hace despreciable.

La relación de Monod se aplica en el caso de que el crecimiento no sea inhibido, si el cultivo es
afectado por concentraciones altas de producto o sustrato la ecuación de Monod se modifica.
Si corresponde a una inhibición por alta concentración de sustrato se obtiene
𝑺𝑺
𝑺𝑺
(𝑲𝑲𝒔𝒔 + 𝑺𝑺) ∙ �𝟏𝟏 +
𝑲𝑲𝒊𝒊 �
Por otro lado, si la inhibición es por producto la ecuación queda:
𝑺𝑺
𝑷𝑷
(𝑲𝑲𝒔𝒔 + 𝑺𝑺) ∙ �𝟏𝟏 + �
𝑲𝑲𝒑𝒑
Las altas concentraciones de sustrato provocan un estrés osmótico, por ejemplo Sacaromices
aceptan concentraciones de glucosa del orden de 100 [g/L], pero si se sube a 150 [g/L] causa
problemas a nivel de concentración osmótica. Otros efectos inhibidores pueden ser: modificación
del potencial químico del sustrato, intermediarios o productos; cambio en la permeabilidad
celular; efectos sobre las enzimas a nivel de síntesis o actividad.
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Levenspiel y Han propusieron una ecuación de Monod generalizada, tratando de cubrir la mayor
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parte de las situaciones, en particular la inhibición por sustrato, producto o las mismas células:
𝑪𝑪𝒊𝒊 𝒏𝒏 𝑺𝑺
𝝁𝝁 = 𝝁𝝁𝒎𝒎 ∙ �𝟏𝟏 − ∗ � ∙
𝑪𝑪𝒊𝒊 𝑪𝑪𝒊𝒊 𝒎𝒎
𝑺𝑺 + 𝑲𝑲𝒔𝒔 + �𝟏𝟏 − �
𝑪𝑪𝒊𝒊 ∗
O bien
𝑺𝑺
𝝁𝝁 = 𝒌𝒌𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐 ∙
𝑺𝑺 + 𝑲𝑲𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐
Donde:
𝐶𝐶𝑖𝑖 𝑛𝑛 𝐶𝐶𝑖𝑖 𝑚𝑚
𝒌𝒌𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐 = 𝜇𝜇𝑚𝑚 ∙ �1 − ∗ � 𝑲𝑲𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐 = 𝐾𝐾𝑠𝑠 ∙ �1 − ∗ �
𝐶𝐶𝑖𝑖 𝐶𝐶𝑖𝑖
Siendo:
 Ci: concentración del inhibidor
 Ci*: concentración critica del inhibidor que detiene completamente el proceso (en este
caso el crecimiento celular)
 n y m: Son constantes relacionadas con el poder toxico del inhibidor.
Sustituyendo en la ecuación general Ci por S, P o X; se podrá tratar la inhibición por sustrato,
producto o las propias células. Cuando Ci <<< Ci* la ecuación se reduce a la ecuación de Monod.
Para el caso de la inhibición por producto (Ci=P) o por las propias células (Ci=X), las constantes de
la ecuación pueden evaluarse a partir de una liberalización del tipo Lineweaver-Burk, de 1/μ frente
a 1/S.
𝑪𝑪𝒊𝒊 𝒎𝒎
𝟏𝟏 𝑲𝑲𝒔𝒔 ∙ �𝟏𝟏 − 𝑪𝑪∗𝒊𝒊 � 𝟏𝟏 𝟏𝟏
= 𝒏𝒏 ∙ +
𝝁𝝁 𝑪𝑪 𝑺𝑺 𝑪𝑪 𝒏𝒏
𝝁𝝁𝒎𝒎 ∙ �𝟏𝟏 − ∗𝒊𝒊 � 𝝁𝝁𝒎𝒎 ∙ �𝟏𝟏 − ∗𝒊𝒊 �
𝑪𝑪𝒊𝒊 𝑪𝑪𝒊𝒊
𝟏𝟏 𝑲𝑲𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐 𝟏𝟏 𝟏𝟏
= ∙ +
𝝁𝝁 𝒌𝒌𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐 𝑺𝑺 𝒌𝒌𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐
En la figura 6 se recoge la forma que toma dicha linealización para las seis formas más comunes de
inhibición:
a) Inhibición no competitiva, con n>0 y m=0
b) Inhibición competitiva, con n=0 y m<0
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c) Inhibición generalizada (anticompetitiva), con n>m>0

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d) Inhibición generalizada (anticompetitiva), con m>n>0

e) Inhibición anticompetitiva, con n=m>0
f) Caso general, con n>0 y m<0
Figura 6: Representación de Lineweaver-Burke para distintas formas de inhibición por el producto, de

acuerdo con el modelo de Han y Levenspiel
Efecto de la temperatura sobre la cinética del cultivo celular
Como todas las reacciones químicas, el crecimiento celular es afectado por la temperatura. La
relación entre la variación de biomasa y el efecto de la temperatura puede expresarse de la
siguiente manera.
𝒅𝒅𝒅𝒅
= 𝝁𝝁 ∙ 𝑿𝑿 − 𝜶𝜶 ∙ 𝑿𝑿
𝒅𝒅𝒅𝒅
Donde μ es la velocidad especifica de crecimiento y es la velocidad específica de muerte, ambas
con dimensión de tiempo-1. El crecimiento observado es un balance entre el crecimiento y la
mortalidad, sin embargo, en condiciones generales μ<<<α, por lo que el termino de muerte celular
se desprecia. Cuando se pasan las temperaturas optimas de crecimiento, la relación entre μ y α
cambia, y la muerte celular pasa a ser significativa. Al graficar el efecto sobre la velocidad
especifica de crecimiento frente a la temperatura (figura 7), se pueden distinguir 2 zonas. En la
zona 1, el aumento de la temperatura tiene un efecto positivo μ, alcanzando a su punto máximo al
llegar a la temperatura óptima.
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Temperatura optima
1 2
Figura 7: Influencia de la temperatura sobre la velocidad especifica de crecimiento.
De manera aproximada puede decirse que la velocidad específica de crecimiento se duplica por
cada incremento de 10°C en la temperatura, hasta que empieza a producirse la ruptura estructural
de las proteínas y lípidos celulares.
Los microorganismos pueden dividirse básicamente en 3 tipos dependiendo de la temperatura

óptima para su crecimiento (figura 8), estas clases son psicrófilos (<20°C), mesófilos (20-37°C) y
termófilos (>38°C).
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Figura 8: Intervalos de temperatura para el crecimiento de: 1 psicrófilos; 2 mesófilos; 3 termófilos.

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El efecto de la temperatura sigue un comportamiento del tipo Arrhenius:

−𝑬𝑬𝒂𝒂
� �
𝝁𝝁 = 𝑨𝑨 ∙ 𝒆𝒆 𝑹𝑹∙𝑻𝑻
−𝑬𝑬′𝒂𝒂
′ � �
𝜶𝜶 = 𝑨𝑨 ∙ 𝒆𝒆 𝑹𝑹∙𝑻𝑻
Dónde:
• A y A’ corresponden a la constante de Arrhenius.

𝑘𝑘𝑘𝑘𝑘𝑘𝑘𝑘
• Ea y Ea’ corresponden a la energía de activación, con valores de 15-20� � para Ea y de
𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚
𝑘𝑘𝑘𝑘𝑘𝑘𝑘𝑘
60-70 � 𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 � para Ea’.
𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐
• R es la constante de los gases de 1,98 � �
𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚∙𝐾𝐾
• T corresponde a la temperatura absoluta en grados kelvin.
El aumento de la velocidad de mortalidad (y disminución de μ), a altas temperaturas, se debe
principalmente a la desnaturalización termal de las proteínas, la cual provoca un aumento
energético del mantenimiento celular para mecanismos de reparación (el coeficiente de
mantención también sigue una dependencia del tipo Arrhenius). A bajas temperaturas, los
mecanismos regulatorios de las células son afectados, además de las limitaciones difucionales
como el transporte de sustratos hacia dentro de la célula. Como resultado, la producción de
biomasa decae a temperaturas extremas.
Efecto del pH, Eh y aw sobre el crecimiento celular
El pH es un parámetro que afecta tanto al crecimiento como a la formación de producto. La

mayoría de los organismos tiene un rango de función entre 3 a 4 unidades de pH. El pH para un
crecimiento máximo crecimiento varía frecuentemente entre 1 y 1,5 unidades de pH.
La relación de μ con el pH presenta también un valor óptimo. Sin embargo la forma de la curva es
más variada que en el caso de la temperatura y no se dispone de un modelo matemático simple y
general para representarla. Como regia general, el pH óptimo para bacterias está ubicado en el
rango de 6 a 7.5, el de levaduras entre 3.5 y 5.5 y el de los mohos se extiende de 3 a 7, aunque
existen variadas excepciones a ella (tabla2).
Rangos típicos
Tipo celular pH
Bacteria 4-8
12
Levadura 3-6
Hongos 3-7
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Células eucariotas 6,5-7,5

Tabla 2: rangos típicos de pH para diferentes microorganismos
Durante el cultivo, el pH tiende a cambiar por diferentes motivos. Cuando la fuente de nitrógeno
es amonio, el pH tiende a bajar. El amonio en solución se encuentra como NH4+, el microorganismo
lo incorpora a las células como R-NH3+, donde R es el esqueleto carbonado, en el proceso un H+ es
liberado al medio. Si la fuente es nitrato (NO3-), los iones de H son removidos del medio al reducir
NO3- a R- NO3+, por lo que el pH tiende a subir. Cuando de utilizan compuestos amino orgánicos
(como la glutamina), el pH tiende a subir debido a la desaminación del compuesto.
Otro cambio de pH ocurre cuando se producen compuestos como ácido láctico o ácido piruvico. Si
se conoce la causa predominante del cambio de pH, es posible obtener información del
crecimiento midiendo la adición v de ácido o base para neutralizar el cambio de pH.
El potencial redox. Eh, del cultivo tiene también importancia, ya que su valor determina la
posibilidad de ocurrencia de reacciones de oxidación del sustrato y es especialmente relevante
para organismos quimioautótrofos que utilizan una reacción inorgánica como fuente de energía.
Finalmente, cabe mencionar la actividad termodinámica de agua, aw. Para su desarrollo los
microorganismos requieren niveles mínimos de aw que posibiliten que el agua cumpla con su rol
de solvente y reactante. Estos valores son normalmente mayores que 0.90, aunque existen mohos
y levaduras que pueden crecer a aw tan bajas como 0.6. Este factor es de especial relevancia en el
deterioro microbiano de alimentos de humedad intermedia y en los procesos de cultivos en
sustrato sólido.
Crecimiento Diaúxico
El crecimiento diaúxico es un tipo crecimiento microbiano en dos etapas, que tiene lugar cuando
hay presentes dos sustratos diferentes que pueden ser utilizados como fuente de carbono. En este
tipo de crecimiento microbiano se observa una curva de crecimiento bifásica debido a la
utilización secuencial distintas fuentes de carbono. El metabolismo del organismo es selectivo para
uno de los sustratos (se usa la fuente de carbono que permite un crecimiento más rápido) y
cuando la agota, comienza a metabolizar el otro. Como se puede ver en la figura 9, la velocidad
especifica de crecimiento, cuando se utiliza el nutriente que es más afín, es mayor que la que se
desarrolla con el segundo nutriente. En el caso de tener múltiples compuestos, se registraría un
comportamiento similar consecutivo.
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Figura 9: Curva de crecimiento celular en presencia de glucosa y lactosa.
Estequiometria del Crecimiento Microbiano
El proceso de reproducción celular aparece representado esquemáticamente en la Figura 10.

Desde una perspectiva cuantitativa, para que la representación a) sea posible, se deberá cumplir
con lo establecido en b), de manera de no violar los principios de conservación de masa y energía y
hacer posible la construcción de una nueva célula igual a la anterior.
La información para la construcción de la nueva célula está contenida en el cromosoma y es

transmitida de generación en generación. La materia debe ser suministrada a través de los
componentes del medio de cultivo. La energía se obtiene del catabolismo de la fuente de carbono
y energía, de reacciones inorgánicas de oxidación o de la radiación solar en el caso de organismos
fotosintéticos.
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Figura 10. Reproducción celular: a) Formación de nuevas células. b) Requerimientos cuantitativos.

Desde un punto de vista cuantitativo, las cantidades necesarias de nutrientes pueden

determinarse a partir de la estequiometria del crecimiento y formación de productos, ya que un
crecimiento microbiano puede expresarse en forma de reacción química.
Ejemplo: Sacharomyces cerevisiae en glucosa en condiciones aerobias:
𝑪𝑪𝟔𝟔 𝑯𝑯𝟏𝟏𝟏𝟏 𝑶𝑶𝟔𝟔 + 𝒂𝒂𝑶𝑶𝟐𝟐 + 𝒃𝒃𝒃𝒃𝑯𝑯𝟑𝟑 → 𝒄𝒄𝒄𝒄𝑯𝑯𝒙𝒙 𝑶𝑶𝒚𝒚 𝑵𝑵𝒛𝒛 + 𝒅𝒅𝒅𝒅𝑶𝑶𝟐𝟐 + 𝒆𝒆𝑯𝑯𝟐𝟐 𝑶𝑶
Para poder calcular los coeficientes estequeométricos es necesario conocer la composición

química del microorganismo por medio de un análisis elemental. Esta ecuación se expresa por
convenio en función de un único átomo de carbono. De esta manera se obtiene que:
𝑪𝑪𝑯𝑯𝟏𝟏.𝟕𝟕𝟕𝟕𝟕𝟕 𝑶𝑶𝟎𝟎.𝟒𝟒𝟒𝟒𝟒𝟒 𝑵𝑵𝟎𝟎.𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏
Estos valores pueden variar según el sustrato utilizado. La biomasa se representa en base a su
composición elemental. Composiciones típicas de bacterias, levaduras y mohos aparecen en la
Tabla 3.
Los elementos cuantitativamente más importantes son C, H, O y N, l0 que justifica la aproximación

hecha en la ecuación del ejemplo. Los siguen un segundo grupo compuesto por Mg, S, P, Ca, Na y
K, mientras que los restantes elementos se encuentran en niveles muy bajos. Estos elementos
deben ser suministrados como compuestos aptos para ser metabolizados. La fuente de carbono
puede ser un carbohidrato u otro compuesto orgánico, o bien CO2, carbonato o bicarbonato en el
caso de células quimioautotróficas y fotosintéticas. La fuente de nitrógeno puede ser amonio,
nitrógeno amino de aminoácidos y proteínas, urea, nitrato o nitrógeno elemental, siendo las dos
primeras las más comunes. El resto de los elementos son proporcionados por sales inorgánicas.
Debido a deficiencias genéticas, ciertas cepas requieren de factores de crecimiento, tales como
vitaminas, aminoácidos y nucleótidos.
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Tabla 3: Composición química de células microbianas
La expresión en forma de reacción química permite la aplicación de balances de matera para cada
componente la determinación de los coeficientes estequeométricos. Se debe suponer un medio
definido y se aplica principalmente al sustrato limitante. Continuando con el ejemplo anterior se
pueden plantear los siguientes balances:
𝑪𝑪: 6 = 𝑐𝑐 + 𝑑𝑑
𝑯𝑯: 12 + 3𝑏𝑏 = 1,703𝑐𝑐 + 2𝑒𝑒
𝑶𝑶: 6 + 2𝑎𝑎 = 0,459𝑐𝑐 + 2𝑑𝑑 + 𝑒𝑒
𝑵𝑵: 𝑏𝑏 = 0,171𝑐𝑐
Se disponen de 4 ecuaciones para determinar 5 incógnitas, por lo tanto se define el coeficiente

respiratorio (CR o RQ), que corresponde a los moles de CO2 formados por cada mol de O2
consumido, en este caso queda como:
𝑑𝑑
𝑹𝑹𝑹𝑹: 1,033 =
𝑎𝑎
El sistema de 5 ecuaciones con 5 incógnitas puede resolverse para conducir a la siguiente ecuación
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ajustada:
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𝑪𝑪𝟔𝟔 𝑯𝑯𝟏𝟏𝟏𝟏 𝑶𝑶𝟔𝟔 + 𝟑𝟑, 𝟗𝟗𝟗𝟗𝟗𝟗𝑶𝑶𝟐𝟐 + 𝟎𝟎, 𝟑𝟑𝟑𝟑𝟑𝟑𝟑𝟑𝑶𝑶𝟑𝟑 → 𝟏𝟏. 𝟗𝟗𝟗𝟗𝟗𝟗𝟗𝟗𝑯𝑯𝟏𝟏,𝟕𝟕𝟕𝟕𝟕𝟕 𝑶𝑶𝟎𝟎,𝟒𝟒𝟓𝟓𝟓𝟓 𝑵𝑵𝟎𝟎,𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏 + 𝟒𝟒, 𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝟎𝑶𝑶𝟐𝟐 + 𝟒𝟒, 𝟖𝟖𝟖𝟖𝟖𝟖𝑯𝑯𝟐𝟐 𝑶𝑶
Si el producto principal se produce como consecuencia del metabolismo primario, se puede

plantear una reacción química similar a la ecuación del ejemplo, introduciéndose el producto
indicado como CHvOw; si el producto contiene nitrógeno puede tenerse en cuenta en forma
análoga.
𝒂𝒂𝒂𝒂𝑯𝑯𝒎𝒎 𝑶𝑶𝒏𝒏 + 𝒃𝒃𝑶𝑶𝟐𝟐 + 𝒄𝒄𝒄𝒄𝑯𝑯𝟑𝟑 → 𝒅𝒅𝒅𝒅𝑯𝑯𝒙𝒙 𝑶𝑶𝒚𝒚 𝑵𝑵𝒛𝒛 + 𝒆𝒆𝒆𝒆𝑶𝑶𝟐𝟐 + 𝒇𝒇𝑯𝑯𝟐𝟐 𝑶𝑶 + 𝒈𝒈𝒈𝒈𝑯𝑯𝒗𝒗 𝑶𝑶𝒘𝒘
En el caso que el producto se obtenga indirectamente como consecuencia del metabolismo

primario o sea un metabolito secundario, no puede aplicarse la estequiometria simple de la
ecuación anterior.
Requerimientos nutricionales
Resulta útil distinguir dos tipos de medios de cultivo, de acuerdo a su composición: complejos y
definidos.
Los medios complejos son formulados en base a desechos, subproductos y extractos naturales,
tales como melaza, licor de maceración de maíz, extracto de levadura, y otros. Su composición
química es compleja y variable y contienen varias fuentes de cada elemento. Estos medios pueden
requerir suplementación con compuestos que proporcionen cantidades adicionales de algunos
elementos, tales como N, Mg y P. Los medios complejos son extensamente utilizados en
microbiología básica (taxonomía, fisiología, genética), microbiología analítica, microbiología de
aguas y alimentos y en fermentaciones industriales.
Los medias definidos se formulan en base a compuestos puros, tales coma glucosa, sulfato de
amonio, metionina, fosfato mono acido de potasio, etc. Debido a ello su composición química es
conocida y reproducible, conteniendo fuentes de cada elemento y los nutrientes esenciales que
pueden ser requeridos. Estos medios son usados preferentemente en investigación y desarrollo de
procesos de cultivos. En el campo industrial, se percibe una creciente utilización de medios
definidos. Una clase especial de medio definido es el medio mínimo, que se puede caracterizar
como aquel formado por solo una fuente de cada elemento. El típico medio mínimo está
compuesto por glucosa, sulfato de amonio y otras sales minerales.
En la Tabla 4 se entrega un listado parcial de componentes de medios complejos industriales y en

la Tabla 5 se dan ejemplos de medias definidos, donde se puede apreciar que estos pueden llegar
a ser bastante complicados en su formulación, pero siempre con la característica de ser
químicamente definidos.
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Tabla 4: Medios de cultivos con fines industriales
Los medios complejos son adecuados a nivel industrial por ser más baratos y porque en ciertos
casos se obtienen con ellos mejores rendimientos y productividades. Ello se debe a que al
contener una variedad de moléculas orgánicas, evitan a la célula el trabajo de sintetizarlas a partir
de glucosa y compuestos inorgánicos. Por otro lado, los medios definidos permiten un mejor
control de las condiciones ambientales de crecimiento y producción, siendo fácil excluir sustancias
tóxicas o inhibidoras e incluir precursores e inductores en los niveles adecuados. Por esta razón,
ciertos cultivos que requieren un control ambiental estricto resultan más productivos cuando
utilizan medios definidos. Para optimizar la composición de un medio complejo, se puede recurrir
a diversas técnicas experimentales y teóricas.
Tabla 5: Ejemplos de medios definidos.

18
Página
Rendimiento de una reacción
La extensión en que los reactantes se convierten en productos se denomina rendimiento de la

reacción. Generalmente, rendimiento es la cantidad de producto formado o acumulado por
cantidad de reactante suministrado o consumido. Desafortunadamente, no existe una definición
concreta de rendimiento, siendo varios los parámetros utilizados para definirlo en diferentes
situaciones. Los términos utilizados para expresar rendimiento no son necesariamente aceptados
de manera universal.
Cuando reactantes o productos se ven involucrados en reacciones diferentes, el rendimiento

observado puede ser diferente del rendimiento teórico.
Existe un tercer tipo de rendimiento aplicable en determinadas situaciones. Para reacciones con
una conversión incompleta de reactante puede ser interesante especificar la cantidad de producto
formado par cantidad de reactante añadido a la reacción en vez del realmente consumido. Por
ejemplo, considerando la reacción de isomerización catalizada por glucosa isomerasa:
𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔 ↔ 𝑓𝑓𝑓𝑓𝑓𝑓𝑓𝑓𝑓𝑓𝑓𝑓𝑓𝑓𝑓𝑓
La reacción se realiza en un reactor cerrado con enzima pura. En el equilibrio, la mezcla de

azucares contiene 55% en moles de glucosa y el 45% de fructosa. El rendimiento teórico de la
fructosa a partir de la glucosa es 1 mol mol-I porque de la estequiometria se deduce que la
formación de 1 mol de fructosa necesita 1 mol de glucosa. El rendimiento aparente será también 1
mol mol-1 si la reacción Se produce en un sistema aislado. Sin embargo, si la reacción comienza
cuando únicamente existe glucosa, el rendimiento de equilibrio de fructosa par mol de glucosa
19
añadida al reactor es 0,45 mol mol-I. Este tipo de rendimiento para reacciones incompletas puede
Página
denominarse coma rendimiento bruto.

Rendimientos en cultivos celulares
Cuando se consideran procesos como el crecimiento celular se están agrupando muchos efectos
individuales de conversiones químicas y enzimáticas. A pesar de esta complejidad, los principios
del rendimiento pueden aplicarse al metabolismo celular para relacionar el flujo de sustrato en las
rutas metabólicas para la formación de biomasa y otros productos.
Los rendimientos que se muestran generalmente y aquellos de especial importancia se expresan

mediante coeficientes de rendimiento o factores de rendimiento. Varios coeficientes de
rendimiento son de uso común, como el rendimiento de biomasa a partir de sustrato, el
rendimiento de biomasa a partir de oxígeno o el rendimiento de producto a partir de sustrato. Los
coeficientes de rendimiento permiten cuantificar la necesidad de nutrientes y las características de
producción de un organismo.
La definición de los coeficientes de rendimiento puede generalizarse de la siguiente manera:
−∆𝑭𝑭
𝒀𝒀𝑭𝑭𝑭𝑭 =
∆𝑮𝑮
Donde YFG es el factor de rendimiento, F y G son las sustancias involucradas en el metabolismo, ΔF
la masa o moles de F producidos y ΔG la masa o moles de G consumidos. Como ΔG es negativo en
valor para una sustancia consumida, para que el rendimiento se calcule como una cantidad
positiva es necesario añadir un signa negativo a la ecuación.
En la Tabla 6 se muestra una lista de los coeficientes de rendimiento mas frecuentemente

utilizados. Aunque el término “rendimiento” se refiere generalmente a la cantidad de producto
formado por cantidad de reactante, el rendimiento puede utilizarse también para relacionar otras
cantidades. Algunos coeficientes de rendimiento se basan en cantidades tales como el ATP
formado o el calor involucrado en el metabolismo.
Símbolo Definición
YXS Masa o moles de biomasa producida por unidad de masa o mol de sustrato
consumido.
YPS Masa o moles de producto formado por unidad de masa o mol de sustrato
consumido.
YPX Masa o moles de producto formado por unidad de masa o mol de biomasa formada.
YXO Masa o moles de biomasa formada por unidad de masa o mol de oxígeno consumido.
YCS Masa o moles de dióxido de carbono formado por unidad de masa o mol de sustrato
consumido.
RQ Moles de dióxido de carbono formados por mol de oxígeno consumido. Este
rendimiento es el denominado cociente respiratorio.
YATP Masa o moles de biomasa formada por mol de ATP formado.
20
Ykcal Masa o moles de biomasa formada por kilocaloría de calor involucrada en la reacción
Tabla 6: Algunos coeficientes de rendimiento metabólicos
Página
Un problema en la aplicación de la ecuación generalizada de rendimiento, es que los valores de ΔF

y ΔG dependen del periodo de tiempo en el que se miden. En un cultivo discontinuo, ΔF y ΔG
pueden calcularse como la diferencia entre los valores inicial y final, obteniéndose un rendimiento
global que representa una especie de valor medio durante el periodo entero de cultivo. Por otro
lado, ΔF y ΔG pueden calcularse entre otros dos puntos cualquiera en el tiempo, lo cual puede
producir un valor diferente de YFG. Los rendimientos pueden variar durante el cultivo y algunas
veces es necesario calcular el rendimiento instantáneo en un determinado punto en el tiempo.
Para un reactor cerrado de volumen constante en el que la reacción entre F y G es la única
reacción en la que intervienen estos componentes, si rF y rG son velocidades volumétricas de
producción y consumo de F y G respectivamente, el rendimiento instantáneo puede calcularse de
la siguiente manera:
−∆𝑭𝑭 𝒅𝒅𝒅𝒅 −𝒅𝒅𝒅𝒅�𝒅𝒅𝒅𝒅 𝒓𝒓𝑭𝑭

𝒀𝒀𝑭𝑭𝑮𝑮 = 𝐥𝐥𝐥𝐥𝐥𝐥 =− = =
∆𝑮𝑮→𝟎𝟎 ∆𝑮𝑮 𝒅𝒅𝒅𝒅 𝒅𝒅𝒅𝒅� 𝒓𝒓𝑮𝑮
𝒅𝒅𝒅𝒅
Por ejemplo, YXS en un determinado instante se define como:
𝑟𝑟𝑥𝑥 𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐

𝑌𝑌𝑥𝑥𝑥𝑥 = =
𝑟𝑟𝑠𝑠 𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣𝑣 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑐𝑐𝑐𝑐𝑛𝑛𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠
Cuando se expresan rendimientos de cultivo, debe manifestarse el tiempo o período de tiempo al

cual se refieren.
Tal como se describió anteriormente, es necesario distinguir entre rendimiento teórico y

observado. Este aspecto es particularmente importante en el metabolismo celular porque siempre
existen muchas reacciones produciéndose de manera simultánea, por lo que ambos rendimientos
pueden ser diferentes. Considerando el ejemplo de rendimiento de biomasa a partir de sustrato,
YXS. Si la masa total de sustrato consumido es ST, parte de ST igual a SG se utilizara para el
crecimiento celular mientras el restante, SR, se canalizara hacia otros productos y actividades
metabólicas no relacionadas con el crecimiento. Por lo tanto, el rendimiento de biomasa
observado basado en el consumo total de sustrato es:
′
∆𝑋𝑋 ∆𝑋𝑋
𝑌𝑌𝑥𝑥𝑥𝑥 =− =−
∆𝑆𝑆𝑇𝑇 ∆𝑆𝑆𝐺𝐺 + ∆𝑆𝑆𝑅𝑅
Donde ΔX es la cantidad de biomasa producida e Y’XS el rendimiento de biomasa observado a

partir de sustrato. A efecto comparativo, el rendimiento de biomasa teórico o verdadero a partir
de sustrato es:
∆𝑋𝑋
𝑌𝑌𝑥𝑥𝑥𝑥 = −
∆𝑆𝑆𝐺𝐺
21
Página
Donde ΔSG es la masa de sustrato realmente utilizada en la producción de biomasa. Debido a la

complejidad del metabolismo, generalmente no se conoce el valor de ΔSG y el rendimiento
observado es el único rendimiento disponible. Los rendimientos teóricos se refieren normalmente

a un rendimiento máximo posible, ya que ellos representan el rendimiento en ausencia de
reacciones paralelas.
Cinética de consumo de sustrato
El parámetro de rendimiento de un nutriente en células, es útil para la formulación de medios de

cultivo y para el estudio cuantitativo de los procesos de cultivos celulares, este se define como la
masa celular obtenida por unidad de nutriente consumido:
∆𝑿𝑿 𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎 𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄 𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑

𝒀𝒀𝒙𝒙𝒙𝒙 = =
−∆𝑺𝑺 𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏 𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄
A través de este parámetro se puede relacionar las velocidades de variación de biomasa y de

consumo de sustrato:
Si el rendimiento se definió como:
∆𝑋𝑋
𝑌𝑌𝑥𝑥𝑠𝑠 =
−∆𝑆𝑆
Reordenando la ecuación queda:
1
−∆𝑆𝑆 = ∙ ∆𝑋𝑋
𝑌𝑌𝑥𝑥𝑥𝑥
Ahora, cuando se evalúa que ocurre en un intervalo de tiempo muy pequeño; es decir dividiendo
la ecuación por Δt y llevando al límite cuando Δt→0:
1
, lim
∆𝑡𝑡 ∆𝑡𝑡→0
La ecuación queda:
𝑑𝑑𝑑𝑑 1 𝑑𝑑𝑑𝑑
22
− = ∙
𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑌𝑌𝑥𝑥𝑥𝑥 𝑑𝑑𝑑𝑑
Página
Recordando que:
𝑑𝑑𝑑𝑑
= 𝜇𝜇 ∙ 𝑋𝑋
𝑑𝑑𝑑𝑑
La ecuación puede ser escrita como:
𝑑𝑑𝑑𝑑 1
− = ∙ 𝜇𝜇 ∙ 𝑋𝑋
𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑌𝑌𝑥𝑥𝑥𝑥
Siendo esta una expresión que modela el perfil de la concentración de sustrato durante un cultivo
por lotes, en términos de velocidad de consumo.
Ahora si se divide por la biomasa, se obtiene:
1 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔 𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠𝑠

− ∙ = 𝒒𝒒𝒔𝒔 = � �
𝑋𝑋 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔𝑔 𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏 ∙ ℎ𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜
Donde qS, corresponde a la velocidad específica de consumo de sustrato, por lo que la ecuación
queda:
𝝁𝝁
𝒒𝒒𝒔𝒔 =
𝒀𝒀𝒙𝒙𝒙𝒙
En la figura 11, se muestra los perfiles característicos que se obtienen al graficar la variación de la
concentración de sustrato y biomasa, durante el tiempo de cultivo
2
1,8
1,6
Concentracion (g/l)
1,4
1,2
1
0,8
0,6
0,4
0,2
0
0 50 100 150
Cinetica de Sustrato Cinetica Celular Tiempo en minutos
23
Figura 11: Variación de biomasa y sustrato en el tiempo en un cultivo por lotes.

Página
Si la velocidad de consumo de sustrato, depende del rendimiento y de μ, y si se supone un

rendimiento constante durante el cultivo, qS, tendrá una relación directamente proporcional con
μ, y cuando esta obtenga su valor máximo, también lo hará qS.
El rendimiento de la fuente de carbono y energía depende de la velocidad específica de

crecimiento. Para encontrar esta relación se recurre a un balance de masa de la fuente de carbono
y energía:
∆𝑺𝑺𝑻𝑻 = ∆𝑺𝑺𝑪𝑪 + ∆𝑺𝑺𝑴𝑴 + ∆𝑺𝑺𝑷𝑷
La ecuación expresa que el sustrato consumido se utiliza para crecimiento, mantención de la

viabilidad celular y producción de metabolitos extracelulares.
El término de crecimiento engloba el sustrato consumido para formar parte de la biomasa y para
generar energía para la biosíntesis: esta última porción aparece como CO2 en la ecuación
estequeométrica. El término de mantención se refiere al sustrato utilizado para generar energía
para funciones distintas al crecimiento, como son el transporte de nutrientes, la rotación de
proteínas, el equilibrio osmótico y otras. El término de producto puede o no estar presente, según
el microorganismo considerado las condiciones de cultivo.
Dividiendo la ecuación por Δt y llevando al límite cuando Δt→0:
𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑑𝑑𝑑𝑑

� � =� � +� � +� �
𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑇𝑇 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝐶𝐶 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑀𝑀 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑃𝑃
Reemplazando cada término en función de parámetros de cultivo se obtiene:
𝝁𝝁 ∙ 𝑿𝑿 𝝁𝝁 ∙ 𝑿𝑿 𝒒𝒒𝒑𝒑∙𝑿𝑿
= ° + 𝒎𝒎 ∙ 𝑿𝑿 + °
𝒀𝒀𝒙𝒙𝒙𝒙 𝒀𝒀𝒙𝒙𝒙𝒙 𝒀𝒀𝒙𝒙𝒙𝒙
Donde qP, corresponde a la productividad especifica.
Si no hay producción de metabolito extracelular y se reemplaza cada término en función de

parámetros del cultivo.
𝝁𝝁 ∙ 𝑿𝑿 𝝁𝝁 ∙ 𝑿𝑿
= ° + 𝒎𝒎 ∙ 𝑿𝑿
𝒀𝒀𝒙𝒙𝒙𝒙 𝒀𝒀𝒙𝒙𝒙𝒙
El rendimiento máximo, YOXS se define como la biomasa obtenida por unidad de sustrato
consumido destinado a crecimiento. Así definido, YOXS no puede medirse directamente por análisis
químico. Definición análoga corresponde a Y°PS. Ambos son límites teóricos.
24
Si se toma la ecuación, se simplifica por X y se divide por μ, queda:

Página
𝟏𝟏 𝟏𝟏 𝟏𝟏 𝒒𝒒𝒑𝒑
= ° + ∙ �𝒎𝒎 + ° �
𝒀𝒀𝒙𝒙𝒙𝒙 𝒀𝒀𝒙𝒙𝒙𝒙 𝝁𝝁 𝒀𝒀𝒙𝒙𝒙𝒙
Tomando esta ecuación y realizando un gráfico de 1�𝑌𝑌 frente a 1�𝜇𝜇 y si no hay producto
𝑥𝑥𝑥𝑥
extracelular, YOXS puede ser determinado por extrapolación, como se muestra en la Figura 12, la
que también permite calcular el valor del coeficiente de mantención m, el que corresponde a la
pendiente de la recta.
Figura 12: Relación de Yxs con µ para la fuente de carbono y energía
En los casos de producción de metabolitos extracelulares, la gráfica de recíprocos será recta si la

productividad específica, qP es constante en el rango de µ considerado. En este caso la pendiente
𝑞𝑞𝑝𝑝
será �𝑚𝑚 + ° �, de donde se deberá conocer 2 valores para determinar el tercero. Algunos
valores de m se entregan en la Tabla 7
25
Tabla 7: valores seleccionados de coeficientes de mantención

Página
Cuando no se dispone de datos experimentales, se puede recurrir a un método de cálculo o

estimación de los rendimientos. Un balance de los contenidos de un elemento en la célula y en el
respectivo nutriente conduce a la ecuación:
% 𝒅𝒅𝒅𝒅𝒅𝒅 𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆 𝒆𝒆𝒆𝒆 𝒆𝒆𝒆𝒆 𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏

𝒀𝒀𝒙𝒙𝒙𝒙 =
% 𝒅𝒅𝒅𝒅𝒅𝒅 𝒆𝒆𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍 𝒆𝒆𝒆𝒆 𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃
Ejemplo:
Fuente de N: (𝑁𝑁𝐻𝐻2 )2 𝑆𝑆𝑂𝑂4
14 ∙ 2
%𝑁𝑁 = ∙ 100 = 21%
132
Dónde:
14 corresponde al peso atómico del nitrógeno
2 corresponde al número de átomos de nitrógeno
132 corresponde al peso molecular del compuesto
Si se toma un estimado de 10% de contenido de nitrógeno en la biomasa, tomando en cuenta que

va entre 6 y 14%, el rendimiento será:
21,2
𝑌𝑌𝑥𝑥𝑥𝑥 = = 2,12
10
Por lo tanto, en forma teórica se puede decir que por cada unidad de masa de sulfato de amonio
consumido, se obtiene 2,12 de biomasa. Se supone que el elemento pasa del nutriente a la
biomasa.
En cuanto a la fuente de carbono y energía, no todo el carbono metabolizado aparece en la

biomasa, sino que una porción forma parte de los productos de oxidación (C02 y moléculas
orgánicas pequeñas en metabolismo anaerobio). Para este caso se tiene que:
% 𝒅𝒅𝒅𝒅𝒅𝒅 𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆 𝒆𝒆𝒆𝒆 𝒆𝒆𝒆𝒆 𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏

𝒀𝒀𝒙𝒙𝒙𝒙 = ∙ 𝒇𝒇
% 𝒅𝒅𝒅𝒅𝒅𝒅 𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆 𝒆𝒆𝒆𝒆 𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃𝒃
En metabolismo aerobio f está comprendido entre 0.5 y 0.6, mientras que para el crecimiento
anaerobio f es aproximadamente 0.1.
La ecuación anterior considera el CO2 desprendido en la generación de energía de crecimiento y

26
mantención por lo que el YXS calculado es una estimación del entregado por la ecuación:
Página
𝝁𝝁 ∙ 𝑿𝑿 𝝁𝝁 ∙ 𝑿𝑿
= ° + 𝒎𝒎 ∙ 𝑿𝑿
𝒀𝒀𝒙𝒙𝒙𝒙 𝒀𝒀𝒙𝒙𝒙𝒙
Diseño de medios de cultivo
Para la formulación de medios de cultivo se debe conocer la concentración celular que se desea, la
composición elemental de la biomasa (normalmente de datos generalizados como los de la Tabla
3) y las fuentes de cada elemento que se utilizaran como nutrientes. Además de los
requerimientos de factores de crecimiento. Los rangos de concentraciones celulares más utilizados
aparecen en la Tabla 8.
Tabla 8: Valores típicos de concentraciones celulares
El cálculo se realiza determinando YXS para cada nutriente con ayuda de las ecuaciones:
% 𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒 𝑒𝑒𝑒𝑒 𝑒𝑒𝑒𝑒 𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛

𝑌𝑌𝑥𝑥𝑥𝑥 =
% 𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒 𝑒𝑒𝑒𝑒 𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏
% 𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒 𝑒𝑒𝑒𝑒 𝑒𝑒𝑒𝑒 𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛

𝑌𝑌𝑥𝑥𝑥𝑥 = ∙ 𝑓𝑓
% 𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒𝑒 𝑒𝑒𝑒𝑒 𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏𝑏
27
Página
∆𝑋𝑋 𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐 𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝𝑝

𝑌𝑌𝑥𝑥𝑥𝑥 = =
−∆𝑆𝑆 𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛𝑛 𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐
Llegando a:
�𝑋𝑋𝑓𝑓 − 𝑋𝑋0 �
𝑆𝑆0 = 𝑆𝑆𝑓𝑓 +
El valor de Sf se supone cero en primera instancia. Luego los valores de So obtenidos pueden
multiplicarse por 1,1-1,5, a excepción del nutriente que se quiere sea el limitante.
Cinética de Formación de productos
De forma análoga a los rendimientos celulares se puede definir el rendimiento de sustrato en

producto:
∆𝑷𝑷 𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒅𝒅𝒖𝒖𝒖𝒖𝒖𝒖𝒖𝒖 𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇

𝒀𝒀𝒑𝒑𝒑𝒑 = =
−∆𝑺𝑺 𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏𝒏 𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕 𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄
∆𝑷𝑷 𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑 𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇

𝒀𝒀°𝒑𝒑𝒑𝒑 = =
(−∆𝑺𝑺)𝑷𝑷 𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇𝒇 𝒅𝒅𝒅𝒅 𝑪𝑪 𝒚𝒚 𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆𝒆í𝒂𝒂 𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄 𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑 𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑𝒑
El valor de YPS puede ser medido experimentalmente e Y°PS, puede ser calculado de datos
experimentales graficando la ecuación:
𝟏𝟏 𝟏𝟏 𝟏𝟏 𝒒𝒒𝒑𝒑
= ° + ∙ �𝒎𝒎 + ° �
𝒀𝒀𝒙𝒙𝒙𝒙 𝒀𝒀𝒙𝒙𝒙𝒙 𝝁𝝁 𝒀𝒀𝒙𝒙𝒙𝒙
Pero considerando ahora el término de formación de producto, siempre que qP sea conocido y
constante y se conozca el valor de m.
Otra forma de estimar Y°PS es determinar el rendimiento teórico de un metabolito, Y*PS. Este
parámetro entrega el valor máximo que se puede alcanzar en la conversión del sustrato a
producto, bajo la condición ideal que no haya consumo de sustrato para crecimiento ni
mantención. De acuerdo a la ecuación de balance de sustrato:
28
∆𝑆𝑆𝑇𝑇 = ∆𝑆𝑆𝐶𝐶 + ∆𝑆𝑆𝑀𝑀 + ∆𝑆𝑆𝑃𝑃

Página
Y°PS coincide plenamente con Y*PS en el caso de metabolitos extracelulares.

Los valores de Y*PS son útiles como referencia para evaluar el comportamiento de un cultivo y
adoptar decisiones sobre acciones a seguir. Un YPS muy alejado de Y*PS implica que el proceso
puede ser mejorado invirtiendo recursos en investigación y desarrollo. Valores de YPS cercanos a
Y*PS aconsejan no invertir en mejorar más ese proceso.
El cálculo de Y*PS se basa en la estequiometria de la reacción de conversión de sustrato a

producto y es sencillo para productos cuyas rotas biosintéticas sean simples y conocidas. De no ser
así, el cálculo resulta más elaborado y algo incierto. La Tabla 9 resume algunos valores de Y*PS
calculados en la forma propuesta.
Tabla 9: Rendimientos teóricos de productos
De interés resulta también la aplicación de Y°PS o Y*PS junto a Y°XS y m, a la determinación de las
fracciones del sustrato total consumido que se invierten en crecimiento, mantención y producción.
Una porción mayoritaria del sustrato se utiliza en generar biomasa, energía de mantención; siendo
menor el sustrato destinado a la producción del metabolito de interés, como se aprecia en la Tabla
10.
29
Página
Tabla 10: Destino del sustrato en producción de algunos metabolitos
Estas ideas y conceptos en cuanto a las posibilidades de mejoramiento en la producción de un

determinado metabolito o enzima han llevado al actual concepto de ingeniería metabólica, que
busca individualizar las reacciones metabólicas cuya alteración lleve a la sobreproducción.
El rendimiento de sustrato en producto, es muy sensible a las condiciones ambientales, lo que

dificulta su aplicación práctica, como parámetro es de mayor utilidad la productividad específica.
Ordenando la ecuación de rendimiento:
∆𝑃𝑃 = 𝑌𝑌𝑝𝑝𝑝𝑝 ∙ (−∆𝑆𝑆)
Dividiendo la ecuación por Δt y llevando al límite cuando Δt→0:
𝑑𝑑𝑑𝑑 −𝑑𝑑𝑑𝑑
= ∙ 𝑌𝑌𝑝𝑝𝑝𝑝
𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑑𝑑𝑑𝑑
Si se había definido previamente:
𝑑𝑑𝑑𝑑 𝜇𝜇 ∙ 𝑋𝑋
− =
La ecuación queda:
𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑌𝑌𝑝𝑝𝑝𝑝
= ∙ 𝜇𝜇 ∙ 𝑋𝑋
Definiendo:
𝑌𝑌𝑝𝑝𝑝𝑝 ∆𝑃𝑃�∆𝑆𝑆 ∆𝑃𝑃

= = 𝑌𝑌𝑝𝑝𝑝𝑝 =
𝑌𝑌𝑥𝑥𝑥𝑥 ∆𝑋𝑋� ∆𝑋𝑋
∆𝑆𝑆
La ecuación puede ser escrita como:
𝑑𝑑𝑑𝑑
= 𝑌𝑌𝑝𝑝𝑝𝑝 ∙ 𝜇𝜇 ∙ 𝑋𝑋
𝑑𝑑𝑑𝑑
Lo que significa que la variación de producto en el tiempo es proporcional a la cantidad de

biomasa y a la velocidad especifica de crecimiento; esto considerando que es un metabolito
asociado al crecimiento.
Dividiendo la ecuación anterior por la concentración de biomasa, para obtener la variación

específica en el tiempo, se llega a:
30
𝟏𝟏 𝒅𝒅𝒅𝒅
Página
∙ = 𝒀𝒀𝒑𝒑𝒑𝒑 ∙ 𝝁𝝁 = 𝒒𝒒𝒑𝒑
𝑿𝑿 𝒅𝒅𝒅𝒅
Para evaluar un proceso industrial, además de los rendimientos se requiere considerar el aspecto
cinético, ya que no es lo mismo obtener una cierta conversión de sustrato a producto en un corto
tiempo que en un lapso prolongado. También es importante obtener una alta concentración de
producto que reduzca los costos de recuperación. Un parámetro que considera lo anterior es la
productividad volumétrica, referida a un metabolito o a biomasa, empleándose las notaciones QP y
QX.
𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎 𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐𝒐
𝑷𝑷𝑷𝑷𝑷𝑷𝑷𝑷𝑷𝑷𝑷𝑷𝑷𝑷𝑷𝑷𝑷𝑷𝑷𝑷𝒅𝒅𝒅𝒅𝒅𝒅 𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗 =
𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕𝒕 ∙ 𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗𝒗
Por lo tanto:
𝑑𝑑𝑑𝑑
𝑄𝑄𝑥𝑥 =
𝑑𝑑𝑑𝑑
𝑑𝑑𝑑𝑑
𝑄𝑄𝑃𝑃 =
𝑑𝑑𝑑𝑑
Para evaluar globalmente un cultivo, es válida la aproximación:
∆𝑋𝑋
𝑄𝑄𝑥𝑥 =
∆𝑡𝑡
∆𝑃𝑃
𝑄𝑄𝑃𝑃 =
∆𝑡𝑡
En procesos por lote es necesario calcular la productividad para todo el tiempo del proceso, el cual
incluye no solo el tiempo de cultivo:
∆𝒕𝒕 = 𝒕𝒕𝑻𝑻 = 𝒕𝒕𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄𝒄 + 𝒕𝒕𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍𝒍 + 𝒕𝒕𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎𝒎
1 𝑋𝑋𝑓𝑓
∆𝑡𝑡 = ∙ ln � � + 𝑡𝑡𝑙𝑙 + 𝑡𝑡𝑚𝑚
𝜇𝜇𝜇𝜇 𝑋𝑋0
Analíticamente se puede calcular QX como:
𝑿𝑿𝒇𝒇 − 𝑿𝑿𝟎𝟎
𝑸𝑸𝑿𝑿 =
𝟏𝟏 𝑿𝑿𝒇𝒇
∙ 𝐥𝐥𝐥𝐥 �
𝝁𝝁 𝑿𝑿𝟎𝟎 � + 𝒕𝒕𝒍𝒍 + 𝒕𝒕𝒎𝒎
31
De esta ecuación es posible determinar el efecto de los cambios del proceso en la productividad.
Página
De esta manera se tendrá una productividad específica, que permite establecer parámetros de
escalamiento, ya que corresponde a una propiedad intrínseca de la biomasa asociada a
parámetros cinéticos; y una productividad volumétrica, la cual es una característica del sistema, de
cada cultivo en particular, por este motivo se puede evaluar la eficiencia del sistema y realizar
comparaciones sobre la misma base del sistema de cultivo.
La relación cinética entre el crecimiento y la formación de producto, depende del rol que tenga
este producto en el metabolismo celular. Las dos cinéticas más comunes son en las que el
producto es sintetizado durante el crecimiento y una vez que este ha terminado. Un patrón menos
común es el caso en el que el crecimiento comienza sin la formación de producto, pero luego de
cierto periodo de tiempo, el producto comienza a aparecer mientras en crecimiento continua
(figura 13).
Figura 13: relación de la síntesis de un producto con el crecimiento: a) asociado al crecimiento; b)

parcialmente asociado al crecimiento; c) no asociado al crecimiento.
Para modelos mixtos Ludeking y Piret (1959), propusieron la siguiente ecuación:
= 𝛼𝛼 ∙ + 𝛽𝛽 ∙ 𝑋𝑋
Al dividir por la concentración de biomasa se llega a:
1 𝑑𝑑𝑑𝑑 1 𝑑𝑑𝑑𝑑
∙ = 𝛼𝛼 ∙ ∙ + 𝛽𝛽
𝑋𝑋 𝑑𝑑𝑑𝑑 𝑋𝑋 𝑑𝑑𝑑𝑑
32
O
Página
𝒒𝒒𝒑𝒑 = 𝜶𝜶 ∙ 𝝁𝝁 + 𝜷𝜷
Dónde:
α=0 si el producto no es asociado al crecimiento

β=0 si el producto es asociado al crecimiento
α y β ≠ 0 si el modelo es mixto
33
Página

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Apuntes de ciné tica

Crecimiento celular en un cultivo por lotes

El comportamiento cinético de una población está determinado por un conjunto de factores

Figura 2: Curva característica del crecimiento de un cultivo celular por lotes

La curva presenta varias zonas o fases:

estacionaria. En algunos microorganismos es posible la acumulación de oligosacáridos, si

el nutriente limitante no es carbono.

Modelación de crecimiento celular

Según la ecuación de Malhtus se tiene el siguiente comportamiento en una población si se tiene

Por lo tanto la ecuación de velocidad de variación de biomasa queda como:

𝐥𝐥𝐥𝐥( 𝒙𝒙) = 𝐥𝐥𝐥𝐥( 𝒙𝒙𝟎𝟎 ) + 𝝁𝝁 ∙ 𝒕𝒕

Figura 3: determinación grafica de la velocidad especifica de crecimiento.

El parámetro μ es de especial relevancia en el estudio de la cinética de cultivos celulares. Su

Por lo tanto el td, queda finalmente como:

En forma referencial se pueden tomar los siguientes tiempos de duplicación:

Tiempos de duplicación (horas)

Efecto de la concentración de sustrato en el crecimiento celular

El efecto cuantitativo de la fuente de carbono y energía sobre la velocidad específica de

Figura 4: relación entre la velocidad específica de crecimiento y la concentración de sustrato limitante en un

De la grafica se puede evaluar las siguientes situaciones:

Figura 5: Grafica de doble reciproca de 1/μ frente a 1/S

La aplicación de la ecuación planteada por Monod, se ha extendido a las fuentes de otros

nutrientes, además de la fuente de carbono y energía.

Tabla 1: valores referenciales de Ks para diferentes géneros de microorganismos.

Cuando Ks es menor que S, al integrar y despejar, la ecuación queda:

𝐾𝐾𝑠𝑠 ∙ 𝑌𝑌 + 𝑆𝑆0 + 𝑋𝑋0

𝐾𝐾𝑠𝑠 ∙ 𝑌𝑌 + 𝑆𝑆0 + 𝑋𝑋0

Efectos de inhibición sobre la velocidad especifica de crecimiento

El modelo de Monod no siempre logra representar adecuadamente los datos experimentales, en

Cuando el tiempo es pequeño, el denominador se hace despreciable.

Si corresponde a una inhibición por alta concentración de sustrato se obtiene

Por otro lado, si la inhibición es por producto la ecuación queda:

c) Inhibición generalizada (anticompetitiva), con n>m>0

d) Inhibición generalizada (anticompetitiva), con m>n>0

f) Caso general, con n>0 y m<0

Figura 6: Representación de Lineweaver-Burke para distintas formas de inhibición por el producto, de

Efecto de la temperatura sobre la cinética del cultivo celular

Figura 7: Influencia de la temperatura sobre la velocidad especifica de crecimiento.

Los microorganismos pueden dividirse básicamente en 3 tipos dependiendo de la temperatura

Figura 8: Intervalos de temperatura para el crecimiento de: 1 psicrófilos; 2 mesófilos; 3 termófilos.

El efecto de la temperatura sigue un comportamiento del tipo Arrhenius:

• A y A’ corresponden a la constante de Arrhenius.

Efecto del pH, Eh y aw sobre el crecimiento celular

El pH es un parámetro que afecta tanto al crecimiento como a la formación de producto. La

Células eucariotas 6,5-7,5

Tabla 2: rangos típicos de pH para diferentes microorganismos

Figura 9: Curva de crecimiento celular en presencia de glucosa y lactosa.

Estequiometria del Crecimiento Microbiano

El proceso de reproducción celular aparece representado esquemáticamente en la Figura 10.

La información para la construcción de la nueva célula está contenida en el cromosoma y es

Figura 10. Reproducción celular: a) Formación de nuevas células. b) Requerimientos cuantitativos.

Desde un punto de vista cuantitativo, las cantidades necesarias de nutrientes pueden

Ejemplo: Sacharomyces cerevisiae en glucosa en condiciones aerobias:

Para poder calcular los coeficientes estequeométricos es necesario conocer la composición

𝑪𝑪𝑯𝑯𝟏𝟏.𝟕𝟕𝟕𝟕𝟕𝟕 𝑶𝑶𝟎𝟎.𝟒𝟒𝟒𝟒𝟒𝟒 𝑵𝑵𝟎𝟎.𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏𝟏

Los elementos cuantitativamente más importantes son C, H, O y N, l0 que justifica la aproximación

Tabla 3: Composición química de células microbianas

Se disponen de 4 ecuaciones para determinar 5 incógnitas, por lo tanto se define el coeficiente

Si el producto principal se produce como consecuencia del metabolismo primario, se puede

En el caso que el producto se obtenga indirectamente como consecuencia del metabolismo

En la Tabla 4 se entrega un listado parcial de componentes de medios complejos industriales y en

Tabla 4: Medios de cultivos con fines industriales